ENCUESTA 58

CEPA ENVIADA: Citrobacter freundii

El gnero Citrobacter,originalmente comprenda dos especies: Citrobacter freundii y Citrobacter
koseri (tambin llamado Citrobacter diversus durante algn tiempo). Con el avance de la
Biologa Molecular qued integrado por 11 especies. Estas especies no slo pueden separarse
por diferencias en su material gentico sino que tambin pueden utilizarse algunas pruebas
bioqumicas para identificarlas (Fig 1).







Fig 1. Diagrama dicotmico para llegar a especie en el gnero Citrobacter.

Para asegurar la identificacin es necesario utilizar la tabla completa y, sobre todo, focalizar los
estudios de las siguientes pruebas:
C. freundii: melibiosa +
C.youngae: melibiosa -
C.murliniae: melibiosa -
C.werkmannii: melibiosa , citrato +, acetato +, arginina +
ORNITINA
-
MALONATO
+
INDOL
-
DULCITOL
+
MALONATO
+
MELIBIOSA
-
CITRATO
-
MALONATO
+
UREA
-
C. freundii
+
INDOL

-
C. gillenii
+
C.werkmannii
-
C. youngae
+
C. murliniae
+
Citrobacter sp 9
-
C. braakii
+
C. sedlakii
-
C. koseri
+
C. amalonaticus
-
C. farmeri
C. gillenii: melibiosa +/-, citrato -/+, acetato , arginina -/+
C. braakii : malonato , citrato +, melibiosa +, movilidad +
Citrobacter sp 9 : malonato +, citrato -, melibiosa - , movilidad -
C. amalonaticus: melibiosa , citrato +
C. farmeri: melbiosa + , citrato
C. sedlakii: sacarosa
C. koseri: sacarosa +/-, arginina +, movilidad +, citrato +
Todas las especies de Citrobacter se han aislado de muestras ambientales (agua, suelo, etc.),
alimentos y del tracto gastrointestinal de hombres y animales. Algunas de ellas son patgenas
oportunistas en el hospital y en menor medida en la comunidad. Producen infecciones
urinarias, infecciones del tracto respiratorio e infecciones de heridas principalmente en adultos
mayores de 65 aos. Entre el 50 y el 60% de estas infecciones son polimicrobianas y se
asocian a altas tasas de mortalidad (18 50%) o internaciones prolongadas. La meningitis est
casi exclusivamente asociada a Citrobacter koseri y se da en nios menores de dos meses
(media 7 das de edad) con complicaciones graves (abscesos cerebrales) y frecuentes
secuelas neurolgicas. La diseminacin en estos casos se da por transmisin persona-persona
por parte de personal del hospital y menos frecuentemente por contaminacin de madre a hijo.
Los muestreos ambientales son generalmente negativos.
Las especies nuevas C. gillenii (previamente genomoespecie 10) y C. murliniae (previamente
genomoespecie 11) se han encontrado en muestras clnicas, alimentos, animales y muestras
ambientales.
En Citrobacter del grupo C. freundii (Citrobacter freundii, Citrobacter youngae, Citrobacter
murliniae, Citrobacter braakii y Citrobacter werkmannii) la resistencia natural a beta-lactmicos
est dada por la presencia de cefalosporinasas inducibles de clase C. De esta manera, estas
bacterias (como la enviada en el control de calidad) normalmente presentan resistencia a
ampicilina y cefalosporinas de primera generacin (corte del halo de cefalosporinas de tecera
generacin en la proximidad de un disco de cefoxitina). Desde el punto de vista epidemiolgico
es importante llegar a conocer la especie (en este caso C. freundii) aunque a los efectos
clnicos, como puede deducirse de lo anterior, alcanza con conocer el grupo al que pertenece
(en este caso grupo C. freundii). De este modo, aunque las pruebas de sensibilidad a
ampicilina y cefalotina den resultados de sensibilidad por punto de corte, deben ser informadas
como resistentes a estos antibiticos. Respecto de las cefalosporinas de tercera generacin, si
no se trata de una mutante desreprimida, se informa la sensibilidad como tal, pero efectuando
una aclaracin de que si se emplea en el tratamiento, puede fallar por seleccin de mutantes,
que para esta especie rondan en 1 en 10
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1 en 10
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. La utilizacin de tratamiento combinado
con aminoglucsidos, si bien es recomendable si se decide el uso de estas cefalosporinas,
tambin puede fallar.
La importancia de llegar a conocer el grupo, reside en que todo esto no es vlido para C.koseri,
que tiene una penicilinasa natural slo activa sobre ampicilina (CKO-1), de expresin
constitutiva (1, 2).
C. amalonaticus y C. sedlakii presentan sendas cefalosporinasas inducible CdiA y SED-1. Esta
ltima fue encontrada tambin en C. farmeri y C rodentium. Por ello sus patrones de
sensibilidad se acercan ms al de C. freundii que al de C. koseri (3,4,5).
.Para llegar a grupo C. freundii hay dos pruebas escenciales: ornitina e indol.
Para definir C. koseri, adems de estas dos se requiere al menos utilizar las pruebas de
malonato y melibiosa.
De esta manera tambin quedan agrupados C. sedlakii, por un lado y C. farmeri y C.
amalonaticus por otro, que presentan beta-lactamasas naturales diferentes como ya se dijera
anteriormente.
La prueba de SH
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a partir del TSI es slo orientadora porque hay cepas dentro del grupo C.
freundii que son negativas (C.freundii 11 %, C. braakii 50%, C. gillenii 22%, C. murliniae 27%,
C. werkmanii 5% y C. youngae 28%) y otras de C. amalonaticus (12%) que son positivas (6).

Referencias bibliogrficas
1. Petrella, S., M. Renard, N. Ziental-Gelus, D. Clermont, V. Jarlier, and W.Sougakoff. 2006.
Characterization of the chromosomal class A beta-lactamase CKO from Citrobacter koseri. FEMS Microbiol.
Lett. 254:285292.
2. Underwood, S., and M. B. Avison. 2004. Citrobacter koseri and Citrobacter amalonaticus isolates carry
highly divergent beta-lactamase genes despite having high levels of biochemical similarity and 16S rRNA
sequence homology. J. Antimicrob. Chemother. 53:10761080.
3. Oliva, B., M. C. Marinucci, G. Amicosante, A. Oratore, and P. M. Bennett.1987. Citrobacter diversus
ULA27 produces two forms of a chromosomal -lactamase. J. Antimicrob. Chemother. 20:2335.
4. Perilli, M., N. Franceschini, B. Segatore, G. Amicosante, A. Oratore, C. Duez, B. Joris, and J. M. Frere.
1991. Cloning and nucleotide sequencing of the gene encoding the -lactamase from Citrobacter diversus.
FEMS Microbiol.Lett. 67:7984.
5. Petrella, S., D. Clermont, I. Casin, V. Jarlier, and W. Sougakoff. 2001. Novel class A -lactamase Sed-1
from Citrobacter sedlakii: genetic diversity of -lactamases within the Citrobacter genus. Antimicrob. Agents
Chemother. 45:22872298.
6. Brenner DJ, OHara CM, Grimont PAD, Janda JM, Falsen E, Aldova E, Ageron E, Schindler J, Abbott
SL, Steigerwalt AG. Biochemical Identification of Citrobacter species defined by DNA hybridization and
description of Citrobacter gillenii sp. nov. (formerly Citrobacter genomospecies 10) and Citrobacter murliniae
sp. nov. (formerly Citrobacter genomospecies 11). J Clin Microbiol. 1999; 37: 26192624.










Fig 2. Dendrograma de homologa gentica entre especies de Citrobacter y otras especies
relacionadas de enterobacterias. Agrupacin segn las beta-lactamasas naturales.