UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CHIAPAS FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS CAMPUS IV
PRUEBA DE COOMBS PRUEBA DE COOMBS La prueba de Coombs fue descrita por primera vez por los cientficos Rob Race, Arthur Morant, y Robin Coombs (por quien la prueba era llamada) en 1945. La prueba de Coombs (tambin conocida como prueba de antiglobulina) es un examen de sangre que se usa eninmunologa y hematologa. Este anlisis puede detectar la presencia de anticuerpos en suero que reaccionan con antgenos en la superficie de los glbulos rojos. Hay dos tipos distintos de la prueba de Coombs: el directo y el indirecto. La prueba de Coombs directa detecta anticuerpos ya unidos a la superficie de los glbulos rojos, y laprueba de Coombs indirecta detecta anticuerpos libres que pueden reaccionar in vitro con glbulos rojos que tienen antgenos especficos. El Coombs directo se realiza a pacientes en los primeros momentos de una reaccin hemoltica y en el diagnstico de anemias hemolticas auto inmunes, hemlisis inducidas por drogas, y enfermedad hemoltica del recin nacido. -El Coombs indirecto se realiza a pacientes politransfundidos, embarazadas, multparas. El Coombs cruzado es una variante del Coombs indirecto y se realiza a pacientes politransfundidos, pacientes con antecedentes de reaccin post transfusional hemoltica y a multparas para escoger sangre compatible.
MECANISMO Ambas pruebas de Coombs emplean un antisuero llamado reactivo de Coombs, que contiene anticuerpos de animales inmunizados dirigidos contra IgG, IgM, y/o complemento humano. Estos anticuerpos se unen a los antgenos que estn en la superficie de los glbulos rojos, causando aglutinacin de las clulas. Esta aglutinacin observada corresponde a un resultado positivo, y la ausencia de aglutinacin es un resultado negativo. PRUEBA DE COOMBS: Directa Indirecta UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CHIAPAS FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS CAMPUS IV
PRUEBA DE COOMBS La prueba de Coombs directa se utiliza para detectar anticuerpos que ya se han fijado a la superficie de los glbulos rojos. Muchas enfermedades y frmacos (como quinidina, metildopa y procainamida) pueden causar esto. Estos anticuerpos algunas veces destruyen los glbulos rojos y provocan anemia. El mdico puede ordenar este examen si usted tiene signos o sntomas de anemia o ictericia. La prueba de Coombs indirecta busca anticuerpos que fluyen libremente contra determinados glbulos rojos. Casi siempre se hace para determinar si usted puede tener una reaccin a una transfusin de sangre. Se detectan anticuerpos especficos de ciertos antgenos que no necesariamente estn presentados en los glbulos rojos del paciente, pero puede estar en glbulos rojos de otras personas. Si se mezcla suero tomado de un paciente que contiene estos anticuerpos con glbulos rojos que s muestran estos antgenos especficos, los glbulos rojos se van a cubrir con anticuerpo. Una vez cubiertas, las clulas se van a aglutinar despus de una exposicin al reactivo de Coombs. Por ejemplo, en el diagnstico de eritroblastosis fetal, el suero tomado de la madre Rh- no reacciona con su propia sangre, sino con la de su feto Rh+. El suero de la madre, que contiene anticuerpos especficos del factor Rh, se mezcla con glbulos rojos Rh+. Los anticuerpos del suero se unen a las clulas. Luego, se agregan anticuerpos antihumanos para aglutinar los glbulos rojos. Se puede diluir el suero y hacer la prueba repetidas veces, para cuantificar los anticuerpos en el suero. PROCEDIMIENTO
COOMBS DIRECTO Lave tres veces los hemates del paciente con solucin salina fisiolgica. Haga una suspensin de hemates lavados al 2-5 %. Aada en un tubo debidamente rotulado dos gotas de la suspensin. Aada dos gotas de Suero de Coombs poliespecfico. Centrifugue un minuto a 1000 rpm. Lea desprendiendo suavemente el botn sobre la lmpara aglutinoscopio.
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PRUEBA DE COOMBS
COOMBS INDIRECTO Y CRUZADO Centrifugue la muestra de sangre 10 min a 3 000 rpm para obtener el suero y decntelo en un tubo debidamente identificado. Prepare una suspensin al 2-5 % con la mezcla de hemates O y en el caso del Coombs cruzado utilice una muestra de la sangre a transfundir para preparar la suspensin. En un tubo debidamente rotulado aada dos gotas del suero y dos gotas de la suspensin y mezcle bien. UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CHIAPAS FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS CAMPUS IV
PRUEBA DE COOMBS Prepare un tubo control rotulado C+ (control positivo) y aada en l dos gotas de la suspensin de hemates O y dos de suero hemoclasificador anti-D y mezcle bien Incube ambos tubos en un Bao de Mara a 37C por 30 minutos Lave tres veces con solucin salina escurriendo totalmente el sobrenadante del ltimo lavado. Aada dos gotas de suero de Coombs poliespecfico a cada tubo. Centrifugue 1minuto a 1000 rpm. Lea desprendiendo suavemente el botn en la lmpara aglutinoscopio. VALORES NORMALES Un resultado normal significa que no hay agrupacin (aglutinacin) de clulas, indicando que usted no tiene anticuerpos para los glbulos. Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios. Algunos laboratorios utilizan diferentes mediciones o analizan muestras diferentes. Hable con el mdico acerca del significado de los resultados especficos de su examen. SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES Una prueba de Coombs directa anormal (positiva) significa que usted tiene anticuerpos que actan contra sus glbulos rojos, lo cual puede deberse a: Anemia hemoltica autoinmunitaria Leucemia linfoctica crnica u otro trastorno similar Anemia hemoltica inducida por frmacos Eritroblastosis fetal (enfermedad hemoltica del recin nacido) Mononucleosis infecciosa Infeccin por micoplasma Sfilis Lupus eritematoso sistmico u otra afeccin reumatolgica Reaccin a transfusin como la ocasionada por unidades de sangre cotejadas de manera impropia Esta prueba tambin puede ser anormal sin una causa clara, especialmente entre los ancianos. UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CHIAPAS FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS CAMPUS IV
PRUEBA DE COOMBS Una prueba de Coombs indirecta anormal (positiva) significa que usted tiene anticuerpos que actuarn contra los glbulos rojos que el cuerpo asume como extraos. Esto puede sugerir la presencia de: Anemia hemoltica autoinmunitaria o inducida por frmacos Eritroblastosis fetal (enfermedad hemoltica) Incompatibilidad sangunea (cuando se utiliza en bancos de sangre) RIESGOS Las venas y las arterias varan en tamao de un paciente a otro y de un lado del cuerpo a otro; por esta razn, puede ser ms difcil obtener una muestra de sangre de algunas personas que de otras. Otros riesgos asociados con la extraccin de sangre son leves, pero pueden ser: Sangrado excesivo Desmayo o sensacin de mareo Hematoma (acumulacin de sangre debajo de la piel) Infeccin (un riesgo leve cada vez que se presenta ruptura de la piel) BIBLIOGRAFIA Powers A, Silberstein LE. Autoimmune hemolytic anemia. In: Hoffman R, Benz EJ Jr., Shattil SS, et al., eds.Hematology: Basic Principles and Practice. 5th ed. Philadelphia, Pa: Churchill Livingston Elsevier; 2008: chap 47. Schrier SL, Price EA. Extrinsic nonimmune hemolytic anemias. In: Hoffman R, Benz EJ Jr., Shattil SS, et al., eds. Hematology: Basic Principles and Practice. 5th ed. Philadelphia, Pa: Churchill Livingston Elsevier; 2008: chap 48. Schwartz RS. Autoimmune and intravascular hemolytic anemias In: Goldman L, Schafer AI, eds.Cecil Medicine. 24th ed. Philadelphia, Pa: Saunders Elsevier; 2011:chap 163.