III.

Inhibicin enzimtica Inhibidor:

Efector que hace disminuir la actividad enzimtica, a travs de interacciones con el centro activo u otros centros especficos .

Inhibidores
Inhibidores Reversibles: establece un equilibrio con la enzima libre, con el complejo enzima-substrato o con ambos Competitivo Mixtos (caso particular: No competitivo) Acompetitivo Inhibidores Irreversibles: modifica qumicamente a la enzima

El inhibidor se fija al centro activo de la enzima libre, impidiendo la fijacin del substrato: Inhibicin Competitiva

Inhibicin competitiva: Ks= K2 = [E] [S] K1 [ES] KI = [E] [I] [EI] Si vo=k3 [ES]

[ES ] = [E][S]/Ks

[EI ] = [I][E]/KI Vo = ____k3 [ES]_____ [E]t [E]+ [ES] + [EI] Vo = Vmax [ES] [E]+ [ES] Vo = Vmax [S]/Ks 1 + [S]/Ks+ [I]/KI

Si k3 [E]t = Vmax

Vo = Vmax

[E][S]/Ks [E]+ [E][S]/Ks + [I][E]/KI

Inhibicin Competitiva
Se define una constante de equilibrio de disociacin del inhibidor:

Ki =

[E] [I] [EI]

Caractersticas: - Las fijaciones de substrato e inhibidor son mutuamente exclusivas

- A muy altas concentraciones de substrato desaparece la inhibicin - Por lo general, el inhibidor competitivo es un anlogo qumico del sustrato. - El inhibidor es tan especfico como el substrato

En condiciones de estado estacionario, llamando y a la concentracin del complejo EI, para la inhibicin competitiva obtenemos el sistema de ecuaciones

Vmx s v= i Km 1 + + s Ki

Grfico de Lineweaber - Burk para al inhibicin competitiva

Por tanto, en la inhibicin competitiva,

1. El efecto cintico del inhibidor es el aumento aparente de la Km, que aparece multiplicada por el factor (1 + i/Ki) 2. La Vmax no aparece modificada; para concentraciones muy altas del substrato, v = Vmax, igual que en ausencia de inhibidor 3. Cuanto ms pequeo sea el valor de Ki mayor ser la potencia del inhibidor competitivo.

Inhibidor competitivo Sustrato

BACTERIA PATHWAY
E*

PABA
H2N-COOH
O HN H2NN N N HN-

Folic Acid
O -C-NH-CH-COOCH2 CH2 COO-

S = PABA
NH2

Icomp
NH2
SULFA DRUGS

C=O | OH

O=S=O | NH2

El inhibidor de tipo mixto se fija a la enzima independientemente de que lo haga o no el substrato; el inhibidor, por tanto, no impide la fijacin del substrato a la enzima, pero s impide la accin cataltica

El inhibidor acompetitivo se fija nicamente al complejo enzima-substrato una vez formado, impidiendo la accin cataltica

Plot de Lineweaber-Burk para inhibicin acompetitiva

Inhibicin Irreversible
- Los inhibidores irreversibles reaccionan con un grupo qumico de la enzima, modificndola covalentemente - Su accin no se describe por una constante de equilibrio Ki, sino por una constante de velocidad ki:

E+I

- Los inhibidores irreversibles son, por lo general, altamente txicos.

Algunos tipos de inhibidores irreversibles

1. Reactivos de grupos -SH 2. Organofosfricos 3. Ligandos de metales 4. Metales pesados

Ligandos de coordinacin de metales

Es el caso del ion cianuro, CNSe fija con gran afinidad a la sexta posicin de coordinacin del Fe hemnico, impidiendo toda modificacin posterior. Por ello acta sobre sistemas de Fe hemnico con la sexta posicin de coordinacin libre, como la citocromo oxidasa, de lo que deriva su elevadsima toxicidad

Inactivadores suicidas
(Inhibidores activados enzimticamente) - Se trata de molculas que se unen al centro activo de manera especfica, igual que el substrato o los inhibidores competitivos - Una vez unidos al centro activo, la enzima transforma la molcula en una especie qumica muy reactiva que modifica covalentemente a la enzima, inactivndola - Tienen por tanto (a) la especificidad del inhibidor competitivo y (b) la potencia de los inhibidores irreversibles

Un paso ms all en el desarrollo de inhibidores potentes es el concepto de Anlogo de Estado de Transicin (AET)

- El inhibidor no es estrictamente anlogo del substrato, sino del Estado de Transicin de la reaccin. - La afinidad de las enzimas por los AET es enorme, del orden nM o pM, con lo que la fijacin es tan fuerte que puede considerarse irreversible

Importancia del conocimiento de la inhibicin enzimtica en el diseo de drogas

antibiticos inhibidores para ell tratamiento contra el cncer Inhibidores de La ciclooxigenasa (COX) es inhibida por Antiinflamatorios No Esteroidales (AINES) Inhibidores de las proteasas del HIV