UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO

Fecha: Abril de 2011 Cdigo: GRL-006 Versin: 4.0

INFORMACIN BSICA NOMBRE DE LA PRCTICA: PRCTICA No.:

DETERMINACIN DE DBO ASIGNATURA: QUMICA AMBIENTAL Y LABORATORIO TEMA DE LA PRCTICA: DETERMINACIN DE LA DEMANDA BIOLGICA DE OXGENO EN AGUA RESIDUAL LABORATORIO A UTILIZAR: LABORATORIO DE QUIMICA, BIOQUIMICA Y FARMACOLOGIA (B 111)
CONTENIDO DE LA GUA (Para elaborar por el Docente)

OBJETIVOS 1.1 Objetivo general Determinar experimentalmente la demanda biolgica de oxgeno en una muestra de agua.

1.2 Objetivos especficos Relacionar los conceptos bsicos de Qumica Ambiental con el diagnstico de la calidad del agua residual. Familiarizar al estudiante con los principales anlisis para la caracterizacin de aguas residuales.
INTRODUCCIN.

Al finalizar la prctica No 5, los estudiantes de Ingeniera Ambiental manejarn los conceptos relacionados con la determinacin de la demanda biolgica de oxgeno en una muestra de agua residual. El manejo por parte de los futuros Ingenieros de esta tcnica y de los conceptos relacionados con sta, son importantes ya que constituye un mtodo de anlisis para caracterizar el agua residual y tomar decisiones sobre su tratamiento.
MARCO TEORICO La demanda biolgica de oxigeno (sus siglas en espaol DBO, en ingls BOD) es un indicador indirecto de la carga orgnica que contiene un vertimiento, un rio, un lago etc. Se define como indicador indirecto, ya que lo que se mide durante la practica es el oxigeno que ha sido consumido por los microorganismos presentes en la muestra. El oxigeno consumido es proporcional a la cantidad de materia orgnica que los microorganismos deben degradar. Este indicador permite calcular los efectos que tendr realizar un vertimiento sobre la calidad del agua del cuerpo receptor. Durante la ejecucin de la prctica es importante mantener una temperatura estable de 20C para garantizar la poblacin de microorganismos en la muestra. Como la prueba de DBO consiste en

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una incubacin durante 5 das, es necesario proporcionar los oligoelementos esenciales y nutrientes a la muestra de anlisis, para garantizar el crecimiento de la poblacin microbiana. De igual forma el anlisis debe realizar en condiciones de ausencia de luz, para evitar que, en el caso de presencia de algas, estas realicen su proceso de fotosntesis, alterando la demanda biolgica de oxigeno de la muestra (Cardenas) (Instituto de Hidrologa, 2002). Existen dos tcnicas para la determinacin de la DBO, en referencia a la disponibilidad de microorganismos. En los casos para los cuales la DBO esperada es baja, por ejemplo, fuentes de agua no contaminadas como ros, lagos o lagunas, se recomienda utilizar un inoculo. El inoculo consiste en un microorganismo previamente cultivado que aade ala muestra o en el agua de dilucin, para garantizar la poblacin microbiana de la muestra. Tambin, suele aadirse (en vez del inoculo) una muestra de un agua residual o vertimiento para el cual se conoce su alta actividad microbiolgica. Para estos casos no se recomienda realizar la dilucin de la muestra con agua de dilucin (Instituto de Hidrologa, 2002). En el caso de aguas provenientes de vertimientos o las cuales se caractericen por su alta carga microbiolgica, no es necesario utilizar la tcnica de inoculacin. Para estos casos, si es recomendado realizar la dilucin de la muestra. Los factores de dilucin dependen de la DBO esperada, por ejemplo en el caso de DBO altas es recomendado diluir pequeas porciones de la muestra. En el caso de DBO bajas, se necesita diluir porciones muyo mayores. Otro factor que influye en los factores de dilucin, es la altura a la cual se realiza la determinacin de la DBO (ver Figura 1). La mxima cantidad de oxigeno que puede disolverse en una muestra de agua, se obtiene a nivel del mar y es de aproximadamente 9.2 mg/L. A medida que la altura aumenta, el oxigeno que puede disolverse en una muestra de agua disminuir (es decir ser menor a 9.2 mg/L) (HACH-COMPANY, 2000).
Valor de saturacin de oxigeno (a 20C) Nivel del mar 9.2 mg/L 304.8 m (1000 pies) 8.9 mg/L 609.6 m (2000 pies) 8.6 mg/L 914.4 m (3000 pies) 8.2 mg/L 1219.2 m (4000 pies) 7.9 mg/L 1524 m (5000 pies) 7.6 mg/L 1828.8 (6000 pies) 7.4 mg/L

Figura 1 Cantidad de oxigeno disuelto en agua segun altitud

Tomado de (HACH-COMPANY, 2000)

Tipo de muestra
Fuertes desechos comerciales Desechos cloacales sin tratar y sedimentados

mg/L de DBO estimada

600 300 200 150 120 100 75 60

mL muestra
1 2 3 4 5 6 8 10 12 15 20 30 60 100 200 300

Desechos oxidados

50 40 30 20 10

Aguas fluviales contaminadas

6 4 2

Figura 2 Dilucin muestras para DBO

Tomado de (HACH-COMPANY, 2000)

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Preservacin de las muestras Las muestras estriles de DBO altos con valores de pH extremos y provenientes de fuentes a altas temperaturas pueden almacenarse durante 8 das. En el caso de muestras no estriles las

muestras deben preservarse en refrigeracin sin exceder 48 horas de almacenamiento. Es importante utilizar material limpio, en lo posible esterilizado, para la toma de la muestra y almacenamiento de la misma (Cardenas). Interferencias en las pruebas de DBO Presencia de algas en la muestra Presencia de sus sustancias toxicas que puede inhibir el crecimiento de los microorganismos. Alto contenido de cloro residual en el momento de realizar la muestra (Cardenas).

CONSULTA PREVIA Tipos de inculos que se utilizan para DBO Cul es la diferencia entre la DBOC5 y la DBO5? Que es la inhibicin de la nitrificacin?

METODOLOGIA Mtodo para muestras de agua provenientes de fuentes superficiales, ros o lagos 1. Tomar una muestra de 300 mL. 2. Si su muestra contiene material particulado grueso, realizar una filtracin utilizando gasa. 3. Enriquecer la muestra con oxigeno, mediante agitacin durante media hora. 4. Enjuagar la botella Winkler con una solucin de sulfito de sodio y dejarla escurrir. 5. Poner la muestra dentro de una botella Winkler 6. Medir el OD de la muestra utilizando el electrodo especfico del oximetro. 7. Adicionar 1 mL de inoculo. 8. Agregar 1 mL de las siguientes soluciones: buffer de fosfatos, solucin de sulfato de magnesio, cloruro de calcio, cloruro frrico, solucin glucosa y acido glutmico. 9. Agregar 0.65 mL de cloruro de amonio. 10. Ajustar pH a 7. 11. Adicionar 0.16 gramos por cada botella de Inhibidor de nitrificacin (2-cloro-6(triclorometil) piridina). El inhibidor puede permanecer en la superficie insoluble por

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unos instantes. 12. Adicionar agua destilada hasta el borde de la botella, de tal forma, que al ubicar el tapn se derrame un poco de la muestra. Se debe prestar atencin de no atrapar ninguna burbuja aire. 13. Realizar el mezclado de las soluciones agregadas a la muestra, realizando inversin de la botella en repetidas ocasiones. Apretar el tapn y sujetarlo mientras se realiza esta operacin. 14. Realizar un sello de agua en el tapn de la botella utilizando agua destilada. 15. Colocar las botellas en una incubadora a 201 C durante 5 das. Mtodo para muestras de aguas residuales, vertimientos 1. Enjuagar la botella Winkler con una solucin de sulfito de sodio y dejarla escurrir. 2. Medir 10 mL de la muestra de agua. 3. Medir 290 mL de agua de dilucin, que ya contiene los respectivos nutrientes y se encuentra debidamente aireada. 4. Poner la muestra dentro de una botella Winkler 5. Medir el OD de la muestra utilizando el electrodo especfico del oximetro 6. Ajustar pH a 7. 7. Adicionar agua destilada hasta el borde de la botella, de tal forma, que al ubicar el tapn se derrame un poco de la muestra. Se debe prestar atencin de no atrapar ninguna burbuja aire. 8. Realizar el mezclado de las soluciones agregadas a la muestra, realizando inversin de la botella en repetidas ocasiones. Apretar el tapn y sujetarlo mientras se realiza esta operacin. 9. Realizar un sello de agua en el tapn de la botella utilizando agua destilada. 10. Colocar las botellas en una incubadora a 201 C durante 5 das. 11. Despus de 5 das hacer medicin del oxigeno disuelto con el oximetro. Clculos: 1. Para el caso en el que la muestra ha sido analizada sin ser inoculada utilizar la siguiente ecuacin:

En donde D1 es el oxigeno disuelto de la muestra diluida inmediatamente despus de la preparacin de la muestra (mg/L)

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D2 es el oxigeno disuelto de la muestra diluida despus de 5 das (mg/L) P fraccin volumtrica decimal de la muestra empleada

2. Para el caso en que la muestra ha sido inoculada:

En donde D1 es el oxigeno disuelto de la muestra diluida inmediatamente despus de la preparacin de la muestra (mg/L) D2 es el oxigeno disuelto de la muestra diluida despus de 5 das (mg/L) P fraccin volumtrica decimal de la muestra empleada B1 oxigeno disuelto del control de la cepa antes de la incubacin (mg/L) B2 oxigeno disuelto del control de la cepa despus de la incubacin (mg/L) f proporcin de muestra de la cepa en la muestra diluida a la cepa en el control de la cepa (%/%)

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS A UTILIZAR (Indicar las cantidades)

Materiales y Equipos
Oximetro Incubadora (20 1C) Pipeta graduada 1 mL Botellas Winkler Plancha agitacin Agitador magntico Gasa Embudo de vidrio Erlenmeyer 250 mL Triangulo de porcelana Probetas 500 mL Erlenmeyer 400 mL

Reactivos
Buffer de fosfatos pH 7.2 Cloruro de calcio (27.5 en 1L) Cloruro frrico (0.25g en 1 L)

Materiales Estudiante Muestra de agua para

Solucin sulfato de magnesio (22.5g analisis en 1 L)

Solucin control de glucosa y acido glutmico Alcohol antisptico Acido sulfurico1N Hidrxido de sodio 1N Cloruro de amonio 0.71N (pH 7.2 ajustar con NaOH)*

Aro metlico con nuez para triangulo de porcelana

Solucin de sulfito de sodio:

PRECAUCIONES Y MANEJO DE MATERIALES Y EQUIPOS. CONSULTA DE EQUIPO ESPECIALIZADO.

Para esta prctica, se deben emplear guantes de nitrilo y gafas de seguridad. Todos los

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reactivos qumicos deben trabajarse en la cabina extractora de gases y vapores.

BIBLIOGRAFA RECOMENDADA.

Bibliography Cardenas, J. A. (s.f.). Calidad de aguas para estudiantes de ciencias ambientales. Bogota: Facultad de Medio Ambiente y R.N. Universidad Francisco Jose de Caldas. HACH-COMPANY. (2000). MANUAL DE ANALISIS DE AGUA. Loveland, Colorado, EE.UU. Instituto de Hidrologa, M. y. (02 de 10 de 2002). METODOS ANALITICOS PARA DEMANDA BIOQUIMICA DE OXIGENO (DBO) Y SLIDOS SUSPENDIDOS TOTALES (SST). Colombia. There are no sources in the current document.

ELABOR (Personas que elaboraron la gua)

REVIS (Director de Programa o rea)

APROB (Laboratorios)

Firma Nombre : Diana Figueroa Murcia

Firma Carolina Nombre : Fecha:

Firma Nombre : Fecha:

Fecha: Noviembre 2012

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INFORME DE LABORATORIO (Para elaborar por el Estudiante) ESTUDIANTES:

GRUPO:

NOTA:

CARRERA:

Formule tres objetivos que desee cumplir con la Prctica de Laboratorio El estudiante formular desde su conocimiento los objetivos para la realizacin de la prctica

Elabore un Mapa conceptual del tema a tratar en la Prctica de Laboratorio.

RESULTADOS Incluir tablas, diagramas en la que los estudiantes puedan ir consignando los datos y observaciones obtenidos en la prctica

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CUESTIONARIO Cmo son los valores de oxigeno disuelto antes y despus de la la incubacin? Cmo podra calcularse la materia orgnica presente partiendo de los datos de oxigeno disuelto?

CAUSAS DE ERROR Y ACCIONES PARA OBTENER MEJORES RESULTADOS: El estudiante formulara las posibles causas de error comparando sus resultados experimentales con los tericos

CONCLUSIONES El estudiante realizara una serie enunciados que respondan a los objetivos que el mismo formul, basados en el desarrollo de la prctica. APLICACIN PROFESIONAL DE LA PRCTICA REALIZADA

BIBLIOGRAFIA UTILIZADA