Tablas de Validaciones

VALIDACIN DE LOS MTODOS ANALITICOS DQO, pH, GRASAS Y
ACEITES EN LAS MATRICES DE AGUA RESIDUAL DOMESTICA, RESIDUAL

INDUSTRIAL Y SUPERFICIAL, COMO REQUISITO AL PROCESO DE
ACREDITACION INTERNACIONAL EN LA NORMA ISO/IEC 17025:2005 EN EL
LABORATORIO AMBIENTAL DE ASINAL LTDA

VIVIANA PEREZ QUICENO

UNIVERSIDAD DEL QUINDIO
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS Y TECNOLOGIAS
PROGRAMA DE QUIMICA
ARMENIA
NOVIEMBRE DE 2006

VALIDACIN DE LOS MTODOS ANALITICOS DQO, pH, GRASAS Y
ACEITES EN LAS MATRICES DE AGUA RESIDUAL DOMESTICA, RESIDUAL
INDUSTRIAL Y SUPERFICIAL, COMO REQUISITO AL PROCESO DE
ACREDITACION INTERNACIONAL EN LA NORMA ISO/IEC 17025:2005 EN EL
LABORATORIO AMBIENTAL DE ASINAL LTDA

VIVIANA PEREZ QUICENO
Trabajo de grado para optar el titulo de Qumico

Director
Dr. Belisario Acevedo Daz
Ph.D. En Ciencia Tcnicas CONSERVACIN DE ALIMENTOS

Codirectores
Dra. Margarita Pavlova
Qumica, Ing Agrnoma

UNIVERSIDAD DEL QUINDIO
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS Y TECNOLOGICAS
PROGRAMA DE QUIMICA
ARMENIA NOVIEMBRE DE 2006

A mi Madre Lucero Quiceno
Por su dedicacin y Entrega
A mi Padre William Prez , Hermana, Paulo
Por su constante apoyo y
confianza

4

AGRADECIMIENTOS

Es una obligacin personal iniciar este documento, agradeciendo a:

Dr. Belisario Acevedo Daz, Gerente

Qumica, Ing Agrnoma Margarita Pavlova

ASINAL LTDA

As como a todas aquellas y aquellos que de alguna forma participaron y
colaboraron desde el inicio, por la cual sin la ayuda, apoyo, comprensin y crticas
no hubiese sido posible terminar este Proyecto. Nuevamente gracias a todos
especialmente por el tiempo ocupado, las alegras y satisfacciones compartidas.

5

TABLA DE CONTENIDO

RESUMEN ............................................................................................................................ 8
INTRODUCCION ............................................................................................................. 11
1. OBJETIVOS ........................................................................................................... 14
1.1 OBJETIVO GENERAL ...................................................................................................................... 14
1.2 OBJETIVOS ESPECFICOS ............................................................................................................. 14
2. VALIDACION DE TECNICAS ANALITICAS ................................................. 16
2.1 ETAPA PRELIMINAR ...................................................................................................................... 16
2.1.1 ETAPA EJECUTORA IN SITU ......................................................................................................... 17
2.1.2 ETAPA ANALISIS E INTERPRETACIN DE DATOS.................................................................. 19
2.1.3 ASPECTOS CRITICOS CONSIDERADOS DURANTE EL DESARROLLO DE LA
METODOLOGIA ............................................................................................................................... 20
2.1.4 ENSAYOS REPETIDOS .................................................................................................................... 20
2.1.5 CLCULOS ESTADSTICOS........................................................................................................... 22
2.1.6 EXPRESIN DE LOS RESULTADOS ............................................................................................. 23
2.1.7 ANLISIS DE RESULTADOS ......................................................................................................... 23
2.1.8 PROCEDIMIENTO PARA LA APROBACIN DEL DOCUMENTO ............................................ 23
2.2 VALIDACIN GRASAS Y ACEITES - METODO GRAVIMETRICO ......................................... 24
2.2.1 OBJETIVOS ....................................................................................................................................... 24
2.2.2 FUNDAMENTO DEL METODO ...................................................................................................... 24
2.2.3 METODOLOGIA ............................................................................................................................... 25
2.2.4 REACTIVOS Y MUESTRAS INVOLUCRADAS EN LA VALIDACION .................................... 26
2.2.5 INFORMACIN DE SEGURIDAD Y TOXICIDAD DE LOS REACTIVOS
INVOLUCRADOS EN LA TECNICA .............................................................................................. 27
2.2.6 MATERIALES y EQUIPOS .............................................................................................................. 29
2.2.7 VERIFICACIONES A REALIZAR ANTES DE COMENZAR EL TRABAJO ............................... 29
2.2.8 LIMITACIONES E INTERFERENCIAS .......................................................................................... 30
2.2.9 DESCRIPCION DE CADENA DE CUSTODIA. IDENTIFICACIN, MANIPULACIN,
TRANSPORTE, ALMACENAMIENTO Y PREPARACIN DE MUESTRAS .............................. 30
2.2.10 REVISION FUNCIONAMIENTO DE LOS EQUIPOS (VERIFICACION Y AJUSTE) ................. 31
2.2.11 PRECAUCION DEL METODO ........................................................................................................ 31
2.2.12 MEDIDAS DE ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD ................................................................. 31
2.2.13 CALCULOS ....................................................................................................................................... 32

6
2.2.14 RESULTADOS .................................................................................................................................. 32
2.2.15 ANALISIS DE RESULTADOS ......................................................................................................... 36
2.3 VALIDACION DEMANDA QUIMICA DE OXIGENO - METODO REFLUJO CERRADO
TITRIMETRICO ................................................................................................................................ 39
2.3.1 OBJETIVOS ....................................................................................................................................... 39
2.3.2 FUNDAMENTO DEL METODO ...................................................................................................... 39
2.3.3 REACCIONES INVOLUCRADAS ................................................................................................... 40
2.3.4 METODOLOGIA ............................................................................................................................... 41
2.3.5 REACTIVOS Y MUESTRAS INVOLUCRADAS EN LA VALIDACION .................................... 42
INVOLUCRADOS EN LA TECNICA .............................................................................................. 44
2.3.7 EQUIPO Y MATERIAL ................................................................................................................... 47
2.3.8 VERIFICACIONES A REALIZAR ANTES DE COMENZAR EL TRABAJO ............................... 47
2.3.9 LIMITACIONES E INTERFERENCIAS .......................................................................................... 48
TRANSPORTE, ALMACENAMIENTO Y PREPARACIN DE MUESTRAS .............................. 49
2.3.11 REVISION FUNCIONAMIENTO DE LOS EQUIPOS (VERIFICACIN Y AJUSTE). ................ 50
2.3.12 MEDIDAS DE SEGURIDAD A OBSERVAR .................................................................................. 50
2.3.13 MEDIDAS DE ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD ................................................................. 50
2.3.14 CALCULOS Y RESULTADOS ......................................................................................................... 51
GRAFICO 1.Curva Limite de deteccion DQO ................................................................................... 59
2.3.15 ANALISIS DE RESULTADOS ....................................................................................................... 104
2.4 VALIDACIN pH - METODO POTENCIOMETRICO ................................................................ 108
2.4.1 OBJETIVOS ..................................................................................................................................... 108
2.4.2 FUNDAMENTO DEL METODO .................................................................................................... 108
GRAFICO 2. Valor del pH con el del pOH. ..................................................................................... 110
2.4.3 METODOLOGIA ............................................................................................................................. 111
2.4.4 REACTIVOS Y MUESTRAS INVOLUCRADAS EN LA VALIDACION .................................. 112
INVOLUCRADOS EN LA TECNICA ............................................................................................ 112
2.4.6 EQUIPOS Y MATERIALES........................................................................................................... 114
2.4.7 VERIFICACIONES ANTES DE COMENZAR EL TRABAJO ...................................................... 114
2.4.8 LIMITACIONES E INTERFERENCIAS ........................................................................................ 115
TRANSPORTE, ALMACENAMIENTO Y PREPARACIN DE MUESTRAS ............................ 116

7
2.4.10 VERIFICACIN DEL FUNCIONAMIENTO DE LOS EQUIPOS (VERIFICACIN Y AJUSTE)
.......................................................................................................................................................... 116
2.4.11 PRECAUCION DEL MTODO ...................................................................................................... 116
2.4.12 MEDIDAS DE ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD ............................................................... 117
2.4.13 CALCULOS ..................................................................................................................................... 117
2.4.14 RESULTADOS ................................................................................................................................ 117
2.4.15 ANALISIS DE RESULTADOS ....................................................................................................... 120
3. CARTAS DE CONTROL.................................................................................... 121
3.1 CARTAS X ....................................................................................................................................... 121
3.2 CARTA R ......................................................................................................................................... 122
3.3 BASE ESTADSTICA DE LAS CARTAS DE CONTROL ............................................................ 122
3.4 USO DE LAS CARTAS DE CONTROL ......................................................................................... 123
3.4.1 LIMITE DE ADVERTENCIA ......................................................................................................... 123
3.4.2 LIMITE DE RECHAZO O DE ACCIN ........................................................................................ 124
3.5 SELECCIN DEL MATERIAL DE REFERENCIA ...................................................................... 124
3.6 MTODOS Y PROCEDIMIENTOS ................................................................................................ 125
Grafico 3. Carta de control X Grasas y Aceite 2mg/L ..................................................................... 129
Grafico 4. Carta de control R Grasa y Aceites 2mg/L ...................................................................... 130
Grafico 5. Carta de control Grasas y Aceites 10mg/L .................................................................... 131
Grafico 6. Carta de control R Grasas y Aceites 10mg/L .................................................................. 132
Grafico 8. Carta de control R Grasas y Aceites 50mg/L .................................................................. 134
Grafico 9. Carta de control X DQO 2mg/L ...................................................................................... 135
Grafico 10. Carta de control R DQO 2mg/L .................................................................................... 136
Grafico 11. Carta de control X DQO 20mg/L ................................................................................... 137
Grafico12. Carta de control R DQO 20mg/L ................................................................................... 138
Grafico 13. Carta de control X DQO 100mg/L ................................................................................. 139
Grafico 14. Carta de control R DQO 100mg/L ................................................................................. 140
Grafico 15. Carta de control X DQO 800mg/L ................................................................................. 141
Grafico 16. Carta de control R DQO 800mg/L ................................................................................. 142
Grafico 17 . Carta de control X pH 4.00 ........................................................................................... 143
Grafico 18. Carta de control R Buffer 4,0 ........................................................................................ 144
Grafico 19. Carta de control X Buffer 7,00 ...................................................................................... 145
Grafico 20. Carta de control R Buffer 7,00 ....................................................................................... 146
4. FORMATOS DE CAPTURA DE INFORMACIN ........................................ 147
5. CONCLUSIONES ................................................................................................ 149
6. BIBLIOGRAFA .................................................................................................. 150
ANEXO No.1 FOTOS GRASAS Y ACEITES - METODO GRAVIMETRICO ............................ 152
ANEXO No.2 FOTOS DEMANDA QUIMICA DE OXIGENO - METODO REFLUJO CERRADO
TITRIMETRICO .............................................................................................................................. 153
ANEXO No.3 FOTOS pH - METODO POTENCIOMETRICO ................................................. 154
ANEXO No.4 PARMETROS QUIMIOMETRICOS UTILIZADOS EN LAS VALIDACIONES
.......................................................................................................................................................... 155

8
RESUMEN

ASINAL LTDA es un empresa de carcter privado prestadora de servicios de
control de calidad y asesoras en el campo industrial y ambiental a nivel nacional e
internacional, fue establecida en el pas desde el ao 1980 y acta bajo los
lineamientos y supervisin de las entidades ambientales y de salud, contribuyendo
de forma directa o indirecta a la seguridad alimentara y al cumplimiento de las
polticas gubernamentales. Cuenta con gran trayectoria en el mercado gracias a
su gran infraestructura, equipos de ltima tecnologa, recurso humano
competente, altos reconocimientos nacionales y en el exterior como se observa a
continuacin,

- PREMIO NACIONAL DE EXPORTADORES 2006. Modalidad Cooperacin
Exportadora. Entregado por el Presidente de la Repblica.

- NOMINACION A THE BRITISH & COLOMBIAN CHAMBER OF
COMMERCE 2006 como Laboratorio Lder en Colombia.

- PRESELECCIONADOS PREMIOS PORTAFOLIO 2006. Modalidades: Lder
empresarial e Innovacin.

- PREMIO INNOVA 2005. Otorgado mediante Decreto Presidencial por el
Ministerio de Comercio, Industria y Turismo de Colombia.

- CERTIFICADO IQNet ISO 9001:2000, 2004 Certificado ICONTEC ISO
9001:2000- NTC-ISO 9001:2000, 2004

9
Posee en su estructura dos laboratorios el de Microbiologa y el de Qumica
(subdividido en tres reas: Qumica de alimentos, Qumica Ambiental y
Cromatografa) los cuales dependen de la Gerencia y la Direccin Tcnica. En el
rea de Microbiologa se realizan anlisis de alimentos para consumo humano y
animal, productos cosmticos, agua potable y entre otros; en el rea de Qumica
de alimentos se realizan anlisis proximales y control de calidad de diferentes
parmetros alimenticios, en el rea de cromatografa se realizan anlisis
especficos (pesticidas rganoclorados y rgano fosforados (diclorvos), perfil
lipdico (colesterol, CIS-TRANS, FAMES).

Dentro de las actividades en el rea de Qumica Ambiental se encuentra la
prestacin de servicios de anlisis bajos las normas del DAMA y del IDEAM en
diferentes matrices entre ellas residual domestica, residual industrial y superficial
donde se constituye en una de las principales herramientas de apoyo para el
cliente. Un campo de mucha experiencia es el monitoreo de los vertimientos
lquidos y slidos de las exploraciones petroqumicas y exploraciones petroleras,
anlisis de TPH, PAH, VOC, contaminantes qumicos, txicos, metales pesados y
pesticidas.

En la actualidad, los logros alcanzados por el laboratorio son fruto de la confianza
depositada por los clientes, de la visin y empuje de su Fundador, de la dedicacin
de sus socios quienes de tiempo completo supervisan los procesos de la
Organizacin y del excelente grupo de profesionales y colaboradores que en
forma permanente demuestran lealtad, honestidad y tica en las labores
encomendadas.

Actualmente el principal servicio es:

Muestreo y anlisis en matrices ambientales y de alimentos

10
Para el desarrollo de sus actividades ASINAL LTDA., cuenta con la infraestructura,
recursos tcnicos y el apoyo de un equipo humano idneo y competente que le
permite dar respuesta a las exigencias de cada uno de los clientes que requieren
de los datos de anlisis.

A continuacin se especifican algunos datos de la empresa:

- Tipo de sociedad: limitada
- Fecha de constitucin: 6 de marzo de 1984
- Razn social: ASINAL LTDA
- Instalaciones permanentes - Sede Central: Carrera 44 No 10 11 Sur, interior 7
Bogot

Esta informacin relacionada con ASINAL despert mi inters por ser participe en
esta importante organizacin y as lograr obtener mi titulo como Qumico de la
Universidad del Quindo mediante mis aportes en conocimientos y habilidades en
el campo ambiental aplicables en su proceso de acreditacin de algunos
parmetros de aguas residuales y superficiales requeridos dentro de su proceso
de mejora continua del SGC, cumplimiento de las expectativas de los clientes.

11

INTRODUCCION

La Acreditacin de los servicios de un laboratorio que realiza ensayos y/o
calibraciones es un reconocimiento oficial, internacional para un laboratorio que
posee un sistema de gestin y aseguramiento de calidad. Por lo tanto es
competente, idneo y capaz para realizar los anlisis y ensayos especificados por
el laboratorio e incluidos en el alcance de la acreditacin. Dicha competencia se
establece mediante la evaluacin del cumplimiento del laboratorio en los requisitos
de la norma ISO/IEC 17025:2005 por el ente acreditador avalado
internacionalmente, la SIC (Decreto 2269 de noviembre de 1993) o el IDEAM
(Resolucin 0176 de 2003) que tiene a su cargo la calidad y confiabilidad de los
resultados ambientales.

Los laboratorios ambientales de Colombia que deseen acreditarse ante el IDEAM,
deben implementar su Sistema de Calidad, as como elaborar su manual de
calidad, bajo los lineamientos de la norma ISO/IEC 17025:2005, ya que aunque
son varias las equivalencias de esta norma con la ISO 9000 y las dos se conciben
bajo una misma filosofa, existen aspectos especficos que solo contempla la
ISO/IEC 17025:2005 y no se ven reflejados en un sistema de calidad ISO
9000:2000. Una certificacin de un laboratorio en esta norma, garantiza la calidad
del servicio o producto al cliente, mas en el caso de los laboratorios de ensayo y
calibracin no garantiza la idoneidad tcnica y desempeo del mtodo de
calibracin o ensayo.

Un laboratorio analtico debe tener como propsito producir resultados de alta
calidad y confiabilidad, garantizar que el proceso de medicin es exacto, confiable
y adecuado para el propsito para el cual es aplicado.

12

Este propsito puede lograrse a travs de un proceso documentado en el cual se
planea una serie de actividades a controlar, detectar, minimizar, trazar, garantizar
y asegurar que todos los procesos y las mediciones del laboratorio se estn
ejecutando dentro de las especificaciones definidas para producir el resultado; lo
anterior puede lograrse de una manera efectiva bajo un sistema de actividades de
calidad planeadas y documentadas, denominado Sistema de Gestin de Calidad,
el cual es diseado bajo los requisitos generales de competencia de laboratorios
de ensayo y calibracin norma tcnica internacional ISO/IEC 17025.

La implementacin de este Sistema de Gestin de Calidad es un conjunto de
principios de funcionamiento que son establecidos por el laboratorio en
conformidad con la ISO/IEC 17025:2005, y si se cumplen estrictamente a lo largo
de la toma y el anlisis de muestra, generaran datos de alta calidad reconocida y
defendible. En consecuencia, podr declararse con un alto grado de confianza la
exactitud del resultado analtico.

ASINAL LTDA en busca del proceso de mejoramiento contino esta desarrollando
un sistema de aseguramiento de la calidad, validaciones de algunos mtodos
ejecutados por el grupo de analistas donde hice parte como pasante de la
Universidad de Quindo en el rea Ambiental. Dentro de este proceso fue pilar
fundamental la validacin de las tcnicas analticas que aseguran que los
resultados obtenidos son cientficamente validos bajo las condiciones en la cuales
se realizan los anlisis. La aplicacin de variables quimiomtricas permiti
determinar el estado de los resultados a travs de todo el proceso, ayudo a
corregir errores demostrando que las prcticas analticas realizadas bajo el
sistema de calidad aplicado en el laboratorio son eficaces.

13
Con el fin de cumplir con la reglamentacin exigida por el Instituto de Hidrologa,
Meteorologa y Estudios Ambientales IDEAM para el proceso de Acreditacin del
Laboratorio Ambiental de ASINAL forme parte de las actividades de validacin
de las tcnicas analticas: Grasas y Aceites por gravimetra, Demanda Qumica de
Oxigeno (DQO) por el mtodo reflujo cerrado titrimtrico y pH por el mtodo
potenciomtrico.

Como parte de este proceso fue necesario la elaboracin y ajuste de
procedimientos de manejo de muestras, material, equipos, marchas analticas,
formatos para la captura de informacin de acuerdo con los requerimientos
tcnicos establecidos, teniendo en cuenta las observaciones de los profesionales
del rea y asesora especializada tomando como base los resultados de la
validacin y as lograr la mejora del Sistema de Calidad existente.

14
1. OBJETIVOS

1.1 OBJETIVO GENERAL

En un intervalo de concentraciones y bajo las condiciones del laboratorio
ambiental de ASINAL, establecer la validacin de parmetros con referencia
a la norma correspondiente del Standard Methods for the Examination of
Water and Wastewater 1998. Ed. 20 y verificar la exactitud de la
determinacin de las pruebas ambientales de Grasas y Aceites por el mtodo
gravmetrico, Demanda Qumica de Oxigeno (DQO) por el mtodo de reflujo
cerrado (Titrimtrico) y pH por el mtodo potenciomtrico, mediante el
desarrollo de una metodologa fundamentada en diversas referencias como
materiales de referencia, mtodos internacionales de referencia, ejercicios
intra e interlaboratorio.

1.2 OBJETIVOS ESPECFICOS

- Realizar estudios de recuperacin utilizando muestras adicionadas de los
parmetros ambientales de Grasas y Aceites, Demanda Qumica de
Oxigeno (DQO) y pH con el fin de verificar la exactitud de cada uno de los
mtodos con el Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater 1998. Ed. 20

15
- Estimar la incertidumbre global de los parmetros ambientales de Grasas y
Aceites, Demanda Qumica de Oxigeno (DQO) y pH aprovechando la
informacin generada de la validacin.

- Elaborar los informes de validacin de los parmetros ambientales de
Grasas y Aceites, Demanda Qumica de Oxigeno (DQO) y pH necesarios
para la acreditacin del laboratorio Ambiental.

- Elaborar cartas de control de los mtodos que permitan establecer el
esquema de aseguramiento de la calidad analtica que garantice la
trazabilidad, exactitud y confiabilidad de los datos generados por el
laboratorio.

- Elaborar los formatos de captura de informacin para el trabajo rutinario de
las tcnicas validadas.

16
2. VALIDACION DE TECNICAS ANALITICAS

La validacin es un proceso netamente experimental, efectuado mediante estudios
de laboratorio, que permite evaluar o determinar la conveniencia o capacidad de
un esquema analtico particular, cuyas caractersticas de diseo cumplen con los
requerimientos metodolgicos y de resultados para la aplicacin analtica
propuesta; que involucra el desarrollo de un protocolo, que incluye la estimacin
de las medidas de precisin y exactitud aplicables a cualquier mtodo analtico,
ajustndose a las exigencias de la norma ISO /IEC 17025
12
.

El laboratorio debe validar los mtodos no estandarizados, mtodos diseados o
desarrollados internamente, mtodos estandarizados usados fuera del alcance
propuesto y las ampliaciones o modificaciones de mtodos estandarizados para
confirmar que estos se ajustan al uso propuesto. La validacin debe ser tan
exhaustiva como sea necesario para responder a las necesidades de la aplicacin
en cuestin. El laboratorio debe registrar los resultados obtenidos, el
procedimiento usado para la validacin, anlisis de los resultados obtenidos y las
modificaciones que sean requeridas.

2.1 ETAPA PRELIMINAR

- Seleccin de parmetros ambientales a validar

En esta etapa se realizo una evaluacin y se selecciono los parmetros
ambientales a validar, revisando el alcance de la acreditacin en la norma
ISO/IEC 17025:2005 ante el IDEAM, la demanda actual de servicios analticos en

1
12 www.Saludcapital.gov.co/secsalud/navleft/investigaciones/articulos/resumen.

17
matrices ambientales, disponibilidad de recursos, intervalo de aplicacin e
interferencias.

- Fundamentacin de la tcnica de estimacin de los parmetros
ambientales a acreditar

Conocimiento del fundamento terico y tcnico de los parmetros ambientales
Grasas y Aceites, Demanda Qumica de Oxigeno (DQO) y pH en protocolos de
tcnicas analticas, guas de apoyo al proceso de acreditacin elaboradas por el
IDEAM, Standard Methods edicin 20 y en comits tcnicos realizados por el
laboratorio ambiental.

Se evaluaron los protocolos existentes para los mtodos a validar de acuerdo con
el Standard Methods edicin 20 y las condiciones de ASINAL LTDA.
Posteriormente se ajustaron los manuales de procedimientos tcnicos
adaptndolos a la situacin especfica del laboratorio.

- Se estudio sobre las metodologas de validacin de mtodos analticos,
requerimientos relacionados en la norma ISO/IEC 17025;2005 y las BPL
Good Practices Laboratory.

2.1.1 ETAPA EJECUTORA IN SITU

- Evaluacin de la conformidad del mtodo actualmente desarrollado en el
laboratorio con el mtodo establecido en el Standard Methods Ed 20

Se verifico si la documentacin y prctica existente en el laboratorio es correcta, y
consistentemente ajustada al Standard Methods.

18
Se hizo nfasis en el conocimiento y aplicacin de los procedimientos tcnicos, el
manejo de equipos y la formulacin de los requisitos que se deben establecer
para el cumplimiento de los objetivos propuestos.

- Se realizo de Auditoria Tcnica para establecer la eficacia de
implementacin del mtodo conforme el Procedimiento Operativo Tcnico
establecido en el Laboratorio

- Se estableci criterios de validacin y diseo experimental para la
determinacin de las diferentes medidas de exactitud asociadas a cada
mtodo analtico

- Se Estableci un Plan Operativo para llevar a cabo el ejercicio de validacin
de cada mtodo

- Definicin del intervalo de aplicacin del mtodo: Teniendo como criterios la
informacin terica documentada en los protocolos del laboratorio, Standard
Methods, el inters especifico (ambiental), los ensayos preliminares en el
laboratorio (pruebas de rutina, prevalidaciones), se defini el limite de
deteccin y el rango de trabajo que comprende desde la mnima cantidad
detectable, hasta la concentracin que se podra leer con la mxima dilucin.

- Inventario: Se realizo los inventarios de reactivos necesarios, para toda la
estandarizacin (identificacin, precauciones, calidad, cantidad, grado de
pureza, conservacin del reactivo puro y en solucin); Inventario de vidriera y
otros materiales necesarios, en cada caso se sealaron las cantidades
necesarias para cada da y los requerimientos para su limpieza atendiendo el
procedimiento para el lavado de material del laboratorio ambiental; igualmente

19
se verifico el material a utilizar a fin de conocer la incertidumbre asociada a la
medicin.

- Documentacin: Para todo documento generado en el proceso se crearon
archivos fsicos y/o digitales, carpetas identificadas el cual se conservaran en
el archivo tcnico para su consulta permanente.

- Limpieza de material: Se sigui los procedimientos especficos para cada
tcnica sobre descontaminacin, limpieza del material y disposicin de los
desechos, descritos en el procedimiento interno del Laboratorio.

- Diseo del plan, procedimiento y captura de informacin: Se diseo un plan y
un procedimiento detallado para la preparacin y anlisis de reactivos,
estndares, recoleccin de muestras y muestras adicionadas de acuerdo con
el tiempo de vida til de cada uno y la estabilidad del analito.

Igualmente se preparo un archivo (formato de captura de datos), que se adapto
a los requerimientos especficos de la metodologa y donde se recolecta toda
la informacin y datos generados en la validacin.

- Ejecucin de validacin del mtodo

2.1.2 ETAPA ANALISIS E INTERPRETACIN DE DATOS

- Evaluacin de datos de validacin
- Estimacin de incertidumbre global.

20
- Plan de acciones conforme los resultados obtenidos en la validacin de los
mtodos.
- Definicin de esquema de aseguramiento de la calidad para cada uno de
los mtodos validados

2.1.3 ASPECTOS CRITICOS CONSIDERADOS DURANTE EL DESARROLLO
DE LA METODOLOGIA

La preparacin de los reactivos y estndares de las diferentes concentraciones
requeridos en el desarrollo de la metodologa, se realizaron siguiendo los
procedimientos de control y almacenamiento establecidos por el sistema de
calidad de ASINAL.

Las muestras naturales se recolectaron de diferentes fuentes hdricas, teniendo en
cuenta el rango de concentracin de trabajo requeridos para la validacin. En
cada uno de los casos se realizo un muestreo puntual; se prepararon el conjunto
de muestras naturales, adicionadas, patrones, blancos de reactivos con el fin de
obtener la informacin completa sobre el desarrollo de la tcnica bajo las
condiciones establecidas. Las muestras fueron preparadas, preservadas y
almacenadas de acuerdo a lineamientos establecidos para dicho fin.

2.1.4 ENSAYOS REPETIDOS

Una vez cuantificadas las variables anteriores se determinaron los siguientes
parmetros:

- Precisin
- Exactitud

21
- Limite de deteccin
- Limite de confianza
- Recuperacin

Para la determinacin de dichas variables se realizaron ensayos por repetido.

- Blanco de reactivos
- Estndares preparados en el laboratorio de concentraciones conocidas
- Muestra natural de baja concentracin
- Muestra natural de concentracin media
- Muestra natural de concentracin alta
- Muestra natural con adicin de estndar de baja concentracin
- Muestra natural con adicin de estndar de mediana concentracin
- Muestra natural con adicin de estndar de alta concertacin

En el anlisis del grupo de muestras se tuvo en cuenta las siguientes condiciones:

- Se Analizaron cada grupo de muestras el mismo da.

- Todo el material fue lavado de acuerdo con el procedimiento establecido para
cada uso.

- El procedimiento siempre fue efectuado por el mismo analista.

- La determinacin de las concentraciones, volmenes o pesos finales (de
acuerdo a la tcnica utilizada) fueron obtenida mediante mediciones al azar de
las muestras, con el fin de evitar sesgos por parte del analista en la medicin.

22
- Los datos obtenidos se consignaron en el formato o libreta de resultados,
siguiendo los procedimientos de diligenciamiento de datos analticos
establecidos por el sistema de calidad del laboratorio.

2.1.5 CLCULOS ESTADSTICOS

En la validacin de cada una de las tcnicas de anlisis se obtuvieron 14 datos
por cada muestra analizada, se hallaron las variables necesarias (promedio
estadstico y desviacin estndar.) para luego aplicarle a cada grupo de muestras
el criterio de rechazo o criterio T, para ello se utilizo la tabla de valores critico T
para rechazo de datos (Test de GRUBBS o prueba T ver Anexo 4. Se realizaron
los siguientes anlisis estadsticos.

Anlisis de Varianza: Este mtodo fue aplicado a las validaciones de Grasas y
Aceites por gravimetra, Demanda Qumica de Oxigeno (DQO) por el mtodo de
relujo cerrado Titrimtrico.

Determinaciones Quimiomtricas: A los datos obtenidos en las validaciones de
las tcnicas Demanda Qumica de Oxigeno (DQO) por el mtodo de reflujo
cerrado (Titrimtrico), pH por el mtodo potenciomtrico, Grasas y Aceites por
gravimetra se les determinaron los siguientes parmetros quimiomtricos (ver
Anexo 4)

- Promedio
- Desviacin Estndar
- Coeficiente de variacin
- Porcentaje de error y exactitud
- Porcentaje de recuperacin delirio
- Limite de confianza (95%)

23

2.1.6 EXPRESIN DE LOS RESULTADOS

Se empleo el Sistema Internacional de Unidades (SI) y los resultados se
expresaron : Demanda Qumica de Oxigeno (DQO) mg/l O
2
, Grasas y Aceites
mg/l y pH se registra nicamente por unidades y las cifras significativas.

2.1.7 ANLISIS DE RESULTADOS

El anlisis de los resultados y la aprobacin de los valores obtenidos en las
diferentes validaciones obedecieron a las metas de calidad adoptadas por el
laboratorio Ambiental de ASINAL LTDA y a los parmetros de aceptacin
establecidos por el IDEAM para la validacin de tcnicas.

2.1.8 PROCEDIMIENTO PARA LA APROBACIN DEL DOCUMENTO

Una vez se han cumplido las etapas mencionadas anteriormente para la validacin
de cada una de las tcnicas, se elaboraron los informes finales los cuales se
encuentran descritos en los numerales: 2.2 Grasas y Aceites por Gravimetra, 2.3,
Demanda Qumica de Oxigeno (DQO) por el mtodo de reflujo cerrado Titrimtrico
2.4 pH por el mtodo potenciomtrico.

A continuacin se presentan los reportes de validacin de cuatro de los
parmetros bsicos acreditados:

24

2.2 VALIDACIN GRASAS Y ACEITES - METODO GRAVIMETRICO

2.2.1 OBJETIVOS

- Determinar los parmetros analticos que se deben considerar en el desarrollo
de la tcnica Grasas y Aceites, por el mtodo gravmetrico.

- Determinar de manera experimental y para las condiciones del laboratorio
Ambiental de ASINAL los valores de los parmetros que servirn como
criterios de confianza para la determinacin de Grasas y Aceites por el mtodo
gravmetrico. Estos parmetros son , precisin, exactitud, sensibilidad, limite
de deteccin y porcentaje de recuperacin

2.2.2 FUNDAMENTO DEL METODO

El anlisis gravmetrico se basa en la medicin de las variables de peso, que se
utilizan para calcular la cantidad de la sustancia analizada. Las grasas y aceites
son compuestos orgnicos constituidos principalmente por cidos grasos de
origen animal y vegetal, as como los hidrocarburos del petrleo. Algunas de sus
caractersticas mas representativas son baja densidad, poca solubilidad en agua,
baja biodegrabilidad por ello si no son controladas se acumulan en el agua
formando natas en la superficie del liquido. Su efecto en los sistemas de
tratamiento de aguas residuales o en las aguas naturales se deben a que
interfieren con el cambio de gases entre el agua y la atmsfera no permiten el libre
paso del oxigeno al agua ni la salida de CO2 del agua hacia la atmsfera.

25

En casos extremos puede llegar a producir la acidificacin del agua junto con
bajos niveles de oxigeno disuelto adems de interferir con la penetracin de la luz
solar. Las principales fuentes aportadas de grasas y aceites son los usos
domsticos, talleres automotrices y de motores de lanchas y barcos, industria de
petrleo, procesadoras de carnes y embutidos e industria cosmtica. La
determinacin analtica de grasas y aceites no mide una sustancia especfica si no
un grupo de sustancias susceptibles disueltas en hexano, incluyendo cidos
grasos, ceras, hidrocarburos, aceites y cualquier otra sustancia extractable con
hexano.

2.2.3 METODOLOGIA

Se sigui el procedimiento descrito en el protocolo para anlisis, para el mtodo
de reflujo cerrado el cual est basado en el Standard Methods for the Examination
of Water and Wastewater 1998. Ed. 20 .

Tratamiento de las muestras

- Pesar el baln de 100 mL (peso inicial) y registrar datos en la planilla.

- Medir el volumen total de la muestra en una probeta de 500 mL. Si la
muestra no fue acidificada en el momento del muestreo, adicionar 5 mL de
HCl o H
2
SO
4
(1:1). Mezclar la muestra y asegurar el pH < 2.

- Transferir la muestra a un embudo de separacin de 500 mL.

- Adicionar 30 mL de Hexano al frasco que contena la muestra para
enjuagar las paredes del mismo. Transferir el disolvente al embudo de
separacin.

26

- Agitar vigorosamente el embudo, dejar en reposo para permitir la
separacin de las fases.

- Filtrar la fase orgnica a travs de un embudo de filtracin que contenga
papel filtro y sulfato de sodio anhidro a un baln de fondo plano de 100mL.

- El equilibrio en una emulsin que tarda en separarse, puede romperse
agregando alrededor de 1 g de sulfato de sodio anhidro en el embudo con
el papel filtro y drenando lentamente la emulsin a travs del sulfato de
sodio.

- Repetir dos veces ms con porciones de 30 mL de Hexano, combinando los
tres extractos orgnicos dentro del mismo matraz volumtrico.

- Enjuagar el papel filtro, el embudo y el extremo del embudo de separacin
con un total de 5 mL a 10 mL de Hexano.

- Llevar a rota evaporador hasta secado y colocar en el desecador hasta
conseguir peso constante.

- Pesar el baln de 100mL mas la muestra (peso final) y registrar datos en la
planilla.

2.2.4 REACTIVOS Y MUESTRAS INVOLUCRADAS EN LA VALIDACION

El siguiente fue el grupo bsico de muestras que se determin.

- Blanco de reactivos (agua de dilucin)
- Muestra natural de baja concentracin
- Muestra natural de concentracin media
- Muestra natural de concentracin alta

27
- Muestra natural con adicin de estndar.
- Patrn Aceite Gourmet densidad 0.9435
- Acido clorhdrico o sulfrico 1:1
- n-Hexano (C
6
H
14
), punto de ebullicin 69oC
- Sulfato de sodio anhidro (Na
2
SO
4
)

2.2.5 INFORMACIN DE SEGURIDAD Y TOXICIDAD DE LOS
REACTIVOS INVOLUCRADOS EN LA TECNICA

El laboratorio de ambiental de ASINAL clasifica los reactivos de acuerdo al
siguiente esquema.

Cdigo numrico de peligrosidad: Las sustancias o reactivos son medidas as,
0 ninguno nada*
1 leve ligero
2 mediano moderado
3 severo intenso
4 Extremo

* No es un dato cientfico en el estndar de referencias sugerido para sustancias peligrosas

En cada una de las cuatro categoras de riesgo se clasifican de acuerdo a

SALUD: peligro o toxicidad de una sustancia si es inhalada, ingerida o absorbida,
incluyendo el efecto humano/animal en procesos reproductivos.
INFLAMABILIDAD: tendencia de una sustancia a incendiarse.

REACTIVIDAD: potencial de una sustancia a explotar o reaccionar violentamente
con aire, agua u otras sustancias.
CONTACTO: peligro de una sustancia expuesta a contacto con la piel, ojos y
membranas mucosas.

28
Cdigo Almacenamiento por colores

AMARILLO: riesgo de reactividad, almacenar separado y lejos de materiales
inflamables o combustibles.
AZUL: riesgo de salud, almacenar en un rea segura de venenos.
BLANCO: riesgo de contacto, almacenar en un rea a prueba de corrosin.
ROJO: riesgo de inflamabilidad, almacenar en el rea de lquidos inflamables.
NARANJA: sustancias no clasificadas en alguna de las categoras de riesgo,
almacenar en el rea qumica.

Las etiquetas de reactivos que adems de algn color vienen rayadas son
sustancias incompatibles con cualquier color que tenga etiqueta rayada. Estos
productos (aproximadamente 40) podran almacenarse con sustancias de
cualquier color; pero lo mejor es almacenarlas aparte.
Tabla 1. Informacin de seguridad y toxicidad de reactivos Grasas y Aceites

REACTIVOS

FS

NFPA Color
H
F
R
C
Hexano

Si 1 3 0 Rojo
Acido Sulfrico

Si 3 0 3 4 Blanco
Sulfato de sodio Anhidro

No 0 0 0 1 Naranja
NOTA : FS: Ficha de seguridad H: Salud F: Inflamabilidad R: Reactividad C: Contacto

29
2.2.6 MATERIALES y EQUIPOS

Los materiales utilizados fueron

- Papel de filtro cualitativo dimetro 110 mm
- Embudos de separacin de 500 mL
- Soporte en madera
- Balones de 100 mL
- Probeta graduada 500 mL
- Embudo plstico para filtracin

Equipo requerido

- Balanza analtica
- Conductimetro
- Rotaevaporador
- Desecador
- Pipetas graduadas

2.2.7 VERIFICACIONES A REALIZAR ANTES DE COMENZAR EL TRABAJO

Agua destilada para preparacin de estndar y soluciones de trabajo con una
conductividad elctrica menor a 2 s/cm y con un pH mayor a 5.6 e inferior a 7.3,
libre de slidos disueltos (reporte de control de calidad)

30
2.2.8 LIMITACIONES E INTERFERENCIAS

Los solventes orgnicos con algunas muestras forman una emulsin haciendo
dificultosa la determinacin.

Los slidos suspendidos pueden interferir contribuyendo a la formacin de
emulsiones.

Se debe asegurar la acidificacin de la muestra pH < 2, debido a que a pH
mayores puede presentarse una degradacin del analito de inters, adems que
se hidrolizan los compuestos inherentes como jabones metlicos, dispersantes
polimricos, antiespumantes y aminas neutras.

2.2.9 DESCRIPCION DE CADENA DE CUSTODIA. IDENTIFICACIN,
MANIPULACIN, TRANSPORTE, ALMACENAMIENTO Y
PREPARACIN DE MUESTRAS

Tomar un volumen de aproximadamente 500 mL de muestra en un frasco de vidrio
de boca ancha. No se debe tomar una muestra compuesta. En caso de existir la
presencia de aceites emulsionados en el agua a muestrear, la muestra se toma de
20 cm a 30 cm de profundidad, cuando no haya mucha turbulencia para asegurar
una mayor representatividad.

La muestra debe ser preservada por la adicin de Acido clorhdrico o Acido
Sulfrico (1:1) hasta llevar a sta a un valor de pH < 2 y refrigerar a 4C. El tiempo
mximo de almacenamiento recomendado es de 28 das.

31
2.2.10 REVISION FUNCIONAMIENTO DE LOS EQUIPOS (VERIFICACION Y
AJUSTE)

Verificar balanza y registrar los datos en su carta de control.

Verificar pHmetro y registrar los datos en su carta de control.

Verificar Conductimetro registrar los datos en su carta de control.

2.2.11 PRECAUCION DEL METODO

Utilizar Guantes y Gafas.

2.2.12 MEDIDAS DE ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD

Patrones de control interno: Consiste en realizar el anlisis a una muestra de
aceite vegetal cada semana.

Calidad de reactivos: Se utilizan reactivos tipo analtico, los reactivos deben tener
certificado de calidad o certificado de anlisis expedido por el fabricante. Los
certificados de los reactivos adquiridos son archivados por la Coordinacin de
Calidad.

Calidad del agua para preparacin de estndares y soluciones de trabajo: La
calidad del agua empleada en el laboratorio se controla mediante mediciones de
conductividad y pH en el momento de trabajo; el valor de conductividad debe ser <
2 S/cm y pH de 5.6 a 7.5. Las mediciones se registran en la planilla REG-REA-041
Control de Calidad del Agua Destilada.

Control de equipos: El control rutinario del funcionamiento de los equipos se
realiza tal como se describe en el procedimiento Aseguramiento Metrolgico.

32
2.2.13 CALCULOS

El clculo del contenido de grasa y aceite, expresada como mg/Lit, se bas en la
expresin matemtica reportada en el protocolo para anlisis de aguas del
laboratorio y el Standard methods
2
:

mg grasa y Aceites /L = W
F
Wi X 1000 X 1000
V mL
Donde,

W
F
Peso final del baln + muestra
W
i
Peso inicial del baln
1000 Conversin de g a mg
1000 Conversin de mL a L
V mL Volumen en mililitro de la muestra

2.2.14 RESULTADOS

Se obtuvieron los siguientes resultados descritos en las tablas 2, 3, 4, 5
respectivamente.

2
Arnold E. Greenberg, Lenore S Clescert. Andrew D Eaton. Standar Methos For The Examination of Water and
Waster. 18 th edicin.1992, pag 5-13,5-20

33
Tabla 2. Descripcin de las soluciones para la evaluacin de grasas y
aceites.

DETERMINACION DE GRASAS Y ACEITES

MUESTRAS DESCRIPCIN
BK Blanco
Stb * Estndar bajo 2mg/L
Stm* Estndar medio 10mg/L
Sta* Estndar alto 50mg/L
ARES-DOM Agua domestica
ARES-IND Agua industrial
ARES-DOM + Sta Muestra adicin baja
ARES-IND +Stm Muestra adicin media
* La densidad del estndar (aceite Gourmet es 0.92348g/mL)
Tabla 3. Resultados en mg/L Grasas y Aceites
Resultados en mg/L Media
Solucin da 1 da 2 dia3 da 4 dia 5 dia 6 da 7
Bk
0,00 0,04 0,00 0,00 0,01 0,00 0,04

0,00 0,00 0,00 0,01 0,00 0,04 0,00 0,01
Stb (2mg/l)
1,77 1,84 1,68 1,72 1,80 1,83 1,77

1,76 1,83 1,68 1,72 1,79 1,83 1,77 1,77
Stm (10mg/L)
8,99 8,99 8,99 8,99 8,99 8,99 9,10

9,00 9,10 8,99 8,99 8,99 8,99 9,10 9,01
Sta (50mg/L)
43,09 45,85 45,85 45,85 45,85 45,50 45,85

43,09 45,85 45,85 43,09 45,85 45,50 45,85 45,21
ARES-DOM
895 899 855 895 899 901 895

895 901 853 896 899 901 895 891,36
ARES-DOM sta
971 943 891 931 943 964 931

971 943 891 931 943 964 931 939,14
ARES-IND
283 255 206 255 255 283 287

287
257 207 257 255 287 283 261,21
ARES-IND + stm
300
266 218 264 266 296 296

300
266 218 264 264 296 300 272,43

34
TABLA 4. Anlisis de Varianza

Determinacin de desviacin Estndar

CALCULO DE LAS DESVIACIONES ESTANDAR

Blanco STB STM STA ARES-DOM ARES-IND
ARES-
DOM+sta
ARES-IND
+Stm
Cuadrado medio entre
grupos (5.) M1 0,000183333 0,00654785 0,003687 2,2548286 555,11905 1594,6429 1370,95238 1699,9048
Cuadrado medio dentro de
los grupos (5.) Mo 0,000357143 2,1135E-05 0,000869 0,5441143 0,6428571 4,0714286 0 1,4285714
M1 > Mo ?
SI NO No Si Si Si Si Si Si Si
F = M1/Mo F = Mo/M1 F 1,948 309,81 4,24 4,14 863,52 391,67 65535,00 1189,93
F(6,7)(0.01)
= 7,1
F(6,7)(0.05)
= 3.87 Si Si No No Si Si Si Si
F >
F(O.O1)? F < F(0.05)?

35
TABLA 5. PARMETROS ESTADSTICOS DE LA EVALUACION DE LA
MUESTRA NATURAL, PATRON Y ADICIONADOS (GRASAS Y ACEITES)

MUESTRA MUESTRA + STANDAR ESTANDAR
Da ARES-IND ARES-DOM
ARES-IND +
ST10
ARES-DOM
ST50
BK 2ppm 10 ppm 50ppm
1
283,00 895,00 300,00 971,00 0,00 1,77 8,99 43,09
287,00 895,00 300,00 971,00 0,00 1,76 9,00 43,09
2
255,00 899,00 266,00 943,00 0,01 1,83 8,99 45,85
257,00 901,00 266,00 943,00 0,00 1,84 9,11 45,85
3
206,00 855,00 218,00 891,00 0,00 1,68 8,99 46,85
207,00 853,00 218,00 891,00 0,01 1,48 8,99 45,85
4
255,00 895,00 264,00 931,00 0,00 1,72 8,99 45,85
257,00 896,00 264,00 931,00 0,01 1,72 9,00 43,09
5
255,00 899,00 266,00 943,00 0,01 1,79 8,99 45,85
255,00 899,00 264,00 943,00 0,00 1,80 8,99 46,05
6
283,00 901,00 296,00 964,00 0,00 1,83 8,99 45,50
287,00 901,00 296,00 964,00 0,00 2,04 8,99 45,51
7
287,00 895,00 296,00 931,00 0,00 1,77 9,10 44,85
283,00 895,00 300,00 931,00 0,00 1,77 9,10 45,85
PARAMETROS
ESTADISTICOS

PROMEDIO (mg/l) 261,21 891,36 272,43 939,14 0,00 1,77 9,02 45,22
DESV. EST,(mg/l) 27,17 16,02 28,02 25,15 0,00 0,12 0,05 1,23
COEF. DE VAR.(%) 10,40 1,80 10,29 2,68 164,08 6,76 0,52 2,72
% RECUPERACION * * 112,19 95,57 * 2,00 10,00 50,00
PORC. DE ERROR * * 0,53 0,20 * 11,45 9,84 9,56
VALOR ESPERADO * * 271,00 941,00 * 88,55 90,16 90,44
INTERVALO 81,00 14,00 82,00 80,00 0,01 0,56 0,12 3,76
CRITERIO T
VALOR T BAJO 2,03 2,39 1,94 1,91 2,46 2,46 2,46 2,46
VALOR T ALTO 0,95 0,60 0,98 1,27 0,29 0,52 0,22 0,57
T TEORICO 95% 2,46 2,46 2,46 2,46 0,71 0,48 0,78 0,43
LIMITE DE CONF.(LC)
t terico 95% 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16
LC 95% 15,68 9,25 16,18 14,52 0,00 0,00 0,00 0,00
Lim Inf 245,53 882,11 256,25 924,62 0,00 1,77 9,02 45,22
Lim Sup 276,89 900,61 288,61 953,66 0,00 1,77 9,02 45,22
L Deteccion 319,90 925,96 332,96 993,48 0,01 2,03 9,12 47,88
L Cuantificacion 532,91 1051,56 552,67 1190,69 0,05 2,97 9,49 57,52
Incertidumbre
Combinada
7,26 4,28 7,49 6,72 * 0,05 0,04 0,33

36
2.2.15 ANALISIS DE RESULTADOS

- Los valores obtenidos (Tabla 4) para la varianza entre lotes (M1), de Estndar
(bajo, medio, alto) , Muestras Naturales y muestras mas adicin de estndar
fueron mayores que los obtenidos para la varianza entre duplicados (Mo) para
estas mismas muestras, lo que significa que no se presenta ningn sesgo que
evidencie alteracin significativa en el parmetro analizado Grasas y Aceites ,
es decir la varianza entre lotes fue mayor que entre duplicados por ya que se
controlo la manipulacin de material.

- El valor Obtenido del Blanco (tabla 4) en la varianza entre lotes (M1) es menor
que el obtenido para varianza entre duplicados (Mo) esto no rechaza que en el
material se este evidenciando causas externas en la variacin de los
resultados.

- Se realizo el test de GRUBBS o prueba T para el rechazo de dato
dudosos (tabla 5). El valor T Terico para el tamao de la muestra en todos los
niveles de concentracin fue 2.46, como se puede observar ningn valor de T
calculado para los valores altos y bajos de los estndares, muestra natural,
muestra natural adicionada y blancos, sobrepaso el valor terico por lo que no
fue necesario descartar ninguno de los datos.

EXACTITUD

- Definida en trminos de porcentaje de error y aplicado a los diferentes niveles
de concentracin del estndar (Tabla 5) se aprecia una buena exactitud para
las concentraciones de Grasas y Aceites en Estndar de (10 mg/l), Estndar
(50mg/L), Muestras adicionadas ya que estos valores no exceden el 10%.
Para el Estndar de 2(mg/L) el porcentaje de error es mayor al 10% (11.45 %)

37
debido a el alcance del mtodo respecto a las bajas concentraciones. (Alcance
de deteccin)

REPETIBILIDAD

- Definindola en trminos de coeficiente de variacin o grado de concordancia
entre los datos obtenidos entre replicas de una misma muestra, para los
niveles de concentracin de estndar (2mg/L), (10mg/L), (50mg/L), ARES-DOM
y Muestras adicionadas (Tabla 5) fue buena ya que sus porcentajes estn por
debajo del 10%.

PORCENTAJE DE RECUPERACIN:

- Se observa que para la muestra Agua Industrial adicionada (tabla 5) el
porcentaje de recuperacin es de 112.19 % el cual se encuentra por encima
del intervalo esperado (95-105 %), con una desviacin estndar de 28.02 esto
nos indica que durante el procedimiento de anlisis de Grasas y Aceites para la
media concentracin resulta complicado obtener una muestra homognea.
- Para el Agua Domestica de concentracin alta adicionada el porcentaje de
recuperacin es de 95.75% se encuentra en el intervalo (95-105%) con una
desviacin estndar de 25.15 indicndonos un nivel de recuperacin
satisfactorio.

38
CONCLUSIONES

- Para las condiciones de trabajo establecidas en el proceso de validacin
para la determinacin de Grasas y Aceites expresada en mg/L por el
mtodo Gravmetrico en el laboratorio Ambiental de ASINAL se
establecieron los siguientes parmetros estadsticos en cuanto a exactitud y
precisin se refiere.
PARAMETROS
ESTADISTICOS
Estndar Muestras Muestras + st
2ppm 10 ppm 50ppm ARES-IND
ARES-
DOM
ARES-IND
+ Stm
ARES-
DOM+Sta
Promedio 1,77 9,01 45,22 261,21 891,36 272,43 939,14
%CV 6,76 0,52 2,72 10,4 1,8 10,29 2,68
%Error 11,45 9,84 9,56 * * 0,53 0,2
% Recuperacin 88,55 90,16 90,44 * * 112,19 95,57
I Tipo A 0,03 0,01 0,03 7,26 4,28 7,49 6,72
Linf 1,7 8,99 44,51 245,53 882,11 256,25 924,62
Lsup 1,84 9,04 45,93 276,89 900,61 288,61 953,66
L Deteccin 2,03 9,12 47,88 319,9 925,96 332,96 993,48
L Cuantificacin 2,97 9,49 57,52 532,91 1051,56 552,67 1190,69
Inc. Combinada 0,049 0,05 0,33 7,26 4,28 7,49 6,72

- El promedio de los porcentajes de recuperacin en la muestra adicionada
demuestran que este coeficiente es aceptable.
- La densidad utilizada en el patrn de grasa y Aceites es de 0.92348g/mL
- Los datos de Grasas y Aceites pueden ser expresados como mg/l y con un
grado de incertidumbre de +/- 0.05 para concentraciones menores de 2 mg/l.
grado de incertidumbre de +/- 0.05 para concentraciones de 10 mg/l.
grado de incertidumbre de +/- 0.33 para concentraciones de 50 mg/l.

39
2.3 VALIDACION DEMANDA QUIMICA DE OXIGENO - METODO REFLUJO
CERRADO TITRIMETRICO

2.3.1 OBJETIVOS

de la tcnica de DQO por el mtodo de reflujo cerrado titrimtrico.

- Determinar de manera experimental y para las condiciones de ASINAL los
parmetros precisin, exactitud, sensibilidad, limite de deteccin y porcentaje
de recuperacin que servirn como criterios de confianza para la determinacin
de la DQO por el mtodo de reflujo cerrado


La demanda qumica de oxgeno (DQO) determina la cantidad de oxgeno
requerido para oxidar la materia orgnica en una muestra de agua residual, bajo
condiciones especficas de agente oxidante, temperatura y tiempo.
La determinacin de la DQO involucra las sustancias orgnicas e inorgnicas
oxidables presentes en la muestra, por tal razn los valores de DQO son siempre
mayores a los de DBO, hacindose aun mas grande esta diferencia en muestras
que presenten cantidades significativas de materia orgnica resistente, como
sucede por ejemplo con efluentes residuales de la industria del papel cuyo
contenido de lignina es bastante alto.

Diferentes agentes qumicos de naturaleza oxidante han sido utilizados desde
hace bastante tiempo para cuantificar la DQO de los cuerpos de agua poluidos y
las aguas residuales actualmente se ha establecido que el dicromato de potasio
es el mas aconsejable por su capacidad de oxidar una gran variedad de

40
compuestos orgnicos, casi totalmente hasta anhdrido carbnico y agua; dicha
oxidacin ocurre mediante reflujo en solucin fuertemente cida (H
2
SO
4
) con un
exceso conocido de dicromato de potasio (K
2
Cr
2
O
7
) en presencia de sulfato de
plata (AgSO
4
) que acta como agente catalizador, y de sulfato mercrico (HgSO
4
)
adicionado para remover la interferencia de los cloruros. Despus de la digestin,
el oxgeno consumido se determina mediante titulacin con Sulfato ferroso
amonico (FAS), Fe (NH
4
)
2
(SO
4
)
2.
6 H
2
O.

La materia orgnica oxidable se calcula en trminos de oxgeno equivalente. Para
muestras de un origen especfico, la DQO se puede relacionar empricamente con
la DBO, el carbono orgnico o la materia orgnica; la prueba se usa para controlar
y monitorear despus que se ha establecido la correlacin.
El oxigeno se encuentra en aguas naturales y residuales ya que este es
ligeramente soluble en ella y su cantidad real presente depende de factores tales
como temperatura, pureza del agua, presin, entre otros.
Los constituyentes orgnicos e inorgnicos estn sujetos a oxidacin; sin embargo
el componente orgnico predomina y es el de mayor inters. Por lo tanto el
oxigeno es necesario para determinar la cantidad requerida de este para oxidar La
material orgnica presente descomponindola en CO
2
y agua.

2.3.3 REACCIONES INVOLUCRADAS

Reaccin qumica en la Digestin:

El Dicromato de potasio acta como oxidante en presencia de acido sulfrico de la
siguiente manera

2 K
2
Cr
2
O
7
+ 8H
2
SO4 2Cr
2
(SO
4
)
3
+ 8 H
2
O + 3 O
2
+ 2K
2
SO
4

41

El oxigeno liberado en la reaccin oxida el carbono de la material orgnica.
C + O
2
= CO
2

2.3.4 METODOLOGIA

de reflujo cerrado el cual est basado en el Standard Methods for the Examination
of Water and Wastewater 1998. Ed. 20 .

TRATAMIENTO DE MUESTRAS CON DQO

Rango bajo (0 -40 ppm), Rango medio (40 -400 ppm) y alto (400 -1000 ppm).

Adicionar volmenes adecuados de muestra y reactivos, conforme a la siguiente
tabla,

Tabla 6. Cantidades de muestra y reactivos

Tubo de
digestin
Muestra
Solucin de
digestin
Solucin
catalizadora
Volumen total
final
Ml mL mL mL

Tubos ( 10mL)

3

2

5

10

- Agregar cuidadosamente solucin catalizadora por la pared del tubo de tal
manera que se forme una capa de cido debajo de la mezcla de muestra y
solucin digestota.

42
- Tapar hermticamente los tubos e invertirlos varias veces para mezclar
completamente el contenido.
- Colocar los tubos en el bloque de calentamiento precalentado a 150C, y dejar
en reflujo durante 2 horas. Enfriar a temperatura ambiente.
- Concluida la digestin, retirar los tubos del digestor y colocarlos en una gradilla
hasta que se alcance la temperatura ambiente.
- Medicin de la reduccin del dicromato: Invertir varias veces los tubos fros
desalojando los slidos que se adhieren a las paredes mediante golpes ligeros
y decantacin. Valorar el exceso de K
2
Cr
2
O
7
con FAS en presencia de 3
gotas de indicador de ferrona; usar el mismo volumen para todas las
titulaciones. Tomar como punto final de la titulacin el primer cambio ntido de
color azul-verdoso a caf-rojizo; el color azul-verdoso puede reaparecer.



- Blanco de reactivos

- Muestras Naturales ( ARES-IND , ARES SUP, ARES-DOM)

- Solucin de digestin 1 N: Adicionar a 500 mL aproximadamente de agua
destilada agregar 49,03 g de Dicromato de potasio (K
2
Cr
2
O
7
), grado estndar
primario, previamente secado a 150C durante 2 horas, 167 mL de H
2
SO
4

concentrado, y 33,3 g de sulfato de mercurio (HgSO
4
). Disolver, enfriar a
temperatura ambiente y diluir a 1000 mL. Guardar en recipiente mbar y
refrigerar. Debe ser utilizada esta solucin para rango medio (40 -400 ppm) y
alto (400 -1000 ppm).

43

- Solucin de digestin 0.1N: A partir de la solucin de digestin 1N se llevan
100 mL a un volumen de 1000 mL. Se utiliza esta solucin para rangos bajos
(0 -40 ppm).

- Solucin de catlisis. Aadir 10,1 g de sulfato de plata (Ag
2
SO
4
) a un litro de
acido sulfrico concentrado H
2
SO
4
, densidad 1,84 (en proporcin de 5,5 g de
Ag
2
SO
4
/kg H
2
SO
4
(aproximadamente 545 mL de cido). Antes de emplearse,
dejar reposar durante 1 o 2 das para lograr la disolucin. Guardar en frasco
mbar.

- Solucin indicadora de ferroina Adquirir comercialmente preparada o hacerla
disolviendo 1,485 g de 1,10-fenantrolina (C
5
H
3
NCH:CHC) , PM 198.21 y 0.695
g sulfato de hierro heptahidratado (FeSO
4
.7H
2
O) en agua destilada y diluir a
100 mL.

- La solucin indicadora de trabajo Corresponde a tomar 1 ml de la solucin
indicadora de ferrona mas 4 ml de agua destilada.

- Eliminador para interferencia de nitritos: Acido sulfamico. Se agrega a cada
muestra 10 mg de acido sulfamico por cada mg de NO
2
-N presente.

- FAS 0,1N. Disolver 39 g de Sulfato ferroso amonico Fe(NH
4
)
2
(SO
4
)
2
.6H
2
O en
500 mL de agua destilada que contenga 20 mL de H
2
SO
4
concentrado,
transfiera esta solucin a un baln volumtrico de 1 L y completar a volumen
con agua destilada. Estandarizar antes de uso con la solucin de digestin
utilizada para titulacin de concentraciones medias y altas.

44
- FAS 0,01N. Realice una dilucin 1:10 de la solucin 0,1N, completando a
volumen con agua destilada a la cual se ha adicionado H
2
SO
4
concentrado en
proporcin de 20 mL /L, utilizada para bajas concentraciones.

Valoracin del reactivo FAS

Tomar 2 mL de solucin de dicromato de potasio (1N o 0.1N), mas 5mL de acido
Sulfrico concentrado. Despus de que la solucin este fra, adicione 3 gotas de
ferrona y titule con sulfato ferroso amnico (FAS) (0.1N o 0.01N) hasta coloracin
caf.
N
FAS
= V
K2Cr2O7
x N
K2Cr2O7
V
FAS

- Solucin estndar KHP: (KC
6
H
5
O
4
) Biftalato acido de potasio (1000mg/L
DQO). Disolver con agua destilada 0,851 g de Biftalato de potasio (KC
6
H
5
O
4
)
grado patrn primario (previamente triturado y seco a 110
o
C hasta peso
constante) llevar a un litro y guardar como mximo un mes en botella mbar y
refrigerado.


El laboratorio de ambiental de ASINAL clasifica los reactivos de acuerdo al
siguiente esquema:

45
Cdigo numrico de peligrosidad

Las sustancias o reactivos son medidas as:
0. ninguno nada*
1. leve ligero
2. mediano moderado
3. severo intenso
4. extremo

* No es un dato cientfico en el estndar de referencias sugerido para
sustancias peligrosas

En cada una de las cuatro categoras de riesgo se clasifican de acuerdo a :

INFLAMABILIDAD: tendencia de una sustancia a incendiarse
membranas mucosas.

CODIGO DE ALMACENAMIENTO POR COLORES

inflamables o combustibles
AZUL: riesgo de salud, almacenar en un rea segura de venenos

46

Tabla 7. Informacin de seguridad y Toxicidad DQO

REACTIVOS

FS

NFPA Color
H
F
R
C

SOLUCIN DE DIGESTIN

cido sulfrico concentrado Si 3 0 3 4 Blanco
Sulfato de mercurio Si 4 0 1 3 Azul
Dicromato de potasio Si 4 0 3 3 Amarillo
SOLUCIN DE CATLISIS
Sulfato de plata Si 2 0 0 1 Naranja
cido sulfrico concentrado Si 3 0 3 4 Blanco
SOLUCION INDICADORA DE FERROINA
1,10-Fenantrolina monohidratada Si

2 1 1 2 Naranja
Sulfato ferroso heptahidratado

Si 1 0 0 0 Naranja
SOLUCION ESTANDAR DE SULFATO
FERROSO AMONICO (FAS).

Sulfato ferroso amonico hexahidrato Si 1 0 0 1 Naranja
SOLUCIN ESTNDAR BIFTALATO ACIDO
DE POTASIO KHP

Hidrgeno Biftalato de potasio

0 0 1 1
NOTA : FS: Ficha de seguridad H:salud F: inflamabilidad R: reactividad C: contacto

47
2.3.7 EQUIPO Y MATERIAL

Los materiales utilizados fueron

- Material volumtrico clase A (baln de 1000 ml +-0.4; baln de 100 ml +-0.1;
baln de 500 ml +-0.25; pipeta de 10 ml +- 0.02; pipeta de 5 ml +-0.015).
- Tubos de digestin, preferiblemente de borosilicato de 10 mL de capacidad.
- Pipetas aforadas 2 mL, 3 mL, 4 mL, 5 mL,10 mL,20 mL,50 mL .
- Balones aforados de 50 mL, 100 mL, 500 mL y 1000 mL

Equipo requerido:

- Aparato de reflujo cerrado (DigiPREP CUBE) para operar a 150 2C .

- Bureta, para titulacin (verificada e identificada)

2.3.8 VERIFICACIONES A REALIZAR ANTES DE COMENZAR EL TRABAJO

Agua destilada tipo 2 para preparacin de estndar y soluciones de trabajo con
una conductividad elctrica menor a 2 uS/cm a 25oC y con un pH mayor a 5.6 e
inferior a 7.3 (reporte de control de calidad)
Solicitar al proveedor el certificado de calidad del Biftalato de potasio.
Tener en cuenta el origen de las muestras, ya que si proceden de quebradas, ros,
aguas naturales y pozos profundos tienen generalmente DQO baja. Si las
muestras son provenientes de curtiembres, pozos spticos, empresas dedicadas a
la produccin de grasas (mantecas, margarinas, etc.) y aceites (de palma, coco,
etc.), tienen DQO elevada y se deben hacer diluciones.

48
Inhibicin de
la actividad
cataltica de
la plata
AgCl
Cl
- -
Ag
+
+
Inhibicin de
la actividad
cataltica de
la plata
AgCl
Cl
- -
Ag
+
+
Cl
- -
Ag
+
+

- Haluros

.

Br
-
, I
-
y similares limitan la accin oxidante del ion dicromato

Si [Cl
-
] > 2.00 mg/L se emplea sulfato de mercurio (HgSO
4
) para formar un
complejo antes del reflujo e inhibir la interferencia. Si bien se especifica 1 g de
HgSO
4
para 50 mL de muestra, se puede usar una menor cantidad cuando la
concentracin de cloruro sea menor de 2000 mg/L, mientras se mantenga una
relacin HgSO
4
:Cl
de 10:1. La tcnica no se debe usar para muestras que

contengan ms de 2000 mg de Cl
/L; existen otros procedimientos diseados para

determinar la DQO en aguas salinas.

Otras interferencias son producidas por compuestos alifticos de cadena lineal,
hidrocarburos aromticos y piridina. Los compuestos de cadena lineal son
oxidados ms efectivamente cuando se adiciona sulfato de plata como catalizador,
aunque ste reacciona con bromuros, cloruros y yoduros produciendo precipitados
slo parcialmente oxidados.

49
- Interferencia por nitritos

El nitrito (NO
2)
tiene una DQO de 1,1 mg de O2/mg de NO
2-
N, y como las
concentraciones de NO
2
en aguas rara vez son mayores de 1 o 2 mg NO
2-
N/L,
esta interferencia es considerada insignificante y usualmente se ignora.
Para evitar una interferencia significante debida al NO
2
, agregar 10 mg de cido
sulfmico por cada mg de NO
2
-N presente; agregar la misma cantidad de cido
sulfmico al blanco de agua destilada.


Gua para muestras ambientales.

Tomar un volumen de aproximadamente 100 mL de muestra en un frasco de vidrio
o utilice botellas plsticas slo si sabe que estn libres de contaminacin orgnica.
Para obtener resultados ptimos en este ensayo, la muestra debe estar
preservada con H
2
SO
4
hasta un valor de pH < 2 y refrigerar a 4C. El tiempo
mximo de almacenamiento recomendado es de 28 das. Tome en cuenta si es
necesario este dato para hacer correcciones por volumen a sus lecturas finales.
Analice a la brevedad posible las muestras biolgicamente activas.
La muestra debe estar muy bien agitada; en el caso de que contenga slidos
sedimentables en gran cantidad o slidos suspendidos gruesos, es necesario
mezclar vigorosamente en agitador magntico antes de medir la alcuota de
anlisis, para obtener una muestra homognea y representativa.

50
2.3.11 REVISION FUNCIONAMIENTO DE LOS EQUIPOS (VERIFICACIN Y
AJUSTE).

Verificar balanza y registrar los datos en su carta de control.

2.3.12 MEDIDAS DE SEGURIDAD A OBSERVAR

Usar protector para la cara y guantes de nitrilo.

Mezclar cuidadosamente antes de aplicar calor, para prevenir el calentamiento
local en el fondo del tubo y evitar posibles quemadura.


Patrones de control interno: Consiste en una solucin de concentracin conocida
del analito examinado, la cual se analiza conjuntamente con las muestras. Este
patrn tiene como finalidad verificar el correcto desempeo de la metodologa de
ensayo. El valor de concentracin obtenido para el patrn es ubicado en la carta
de control correspondiente e interpretado de acuerdo con las indicaciones que se
dan ms adelante. Simultneamente con cada lote de muestras, se analizan dos
blancos con agua destilada y un estndar segn el tipo de muestra (el blanco es la
mxima titulacin).

Calidad.


51
2 S/cm y pH de 5.6 a 7.5. Las mediciones se registran en la planilla Control de
Calidad del Agua Destilada.

2.3.14 CALCULOS Y RESULTADOS

Para el anlisis fsico qumico se tuvo en cuenta un grupo bsico de muestras
que se leyeron por duplicado cada da de los que consta el proceso de validacin.
El calculo de la concentracin de la Demanda Qumica de Oxigeno (DQO),
expresada como mgO
2
/Lit, se bas en la siguiente expresin matemtica
reportada en el protocolo para anlisis de aguas del laboratorio y el Standard
methodos
3
:

(A-B) x N
FAS
x 8000
DQO mgO
2
/Lit = --------------------------
mL de muestra

Donde:

A mL FAS, volumen de sulfato ferroso de amonio (FAS) gastado en la
titulacin del blanco.
B mL FAS volumen de sulfato ferroso de amonio (FAS) gastado en la
titulacin de las muestras.
N FAS Concentracin del sulfato ferroso de amonio.
8000 Mili equivalente de oxigeno por 1000mL/L

3
Arnold E. Greenberg, Lenore S Clescert. Andrew D Eaton. Standar Methos For The Examination of Water and
Waster. 18 th edicin.1992, pag 5-13,5-20

52
mL muestra Cantidad de muestra tomada para la determinacin (3mL)

De acuerdo con la metodologa descrita se obtuvo los siguientes resultados que
son descritos en las tablas 9, 10, 11 y 12 respectivamente.

Tabla 8. Descripcin de las Soluciones para la Evaluacin de Grasas y
Aceites.

DETERMINACION DE DQO

MUESTRAS DESCRIPCIN
BK Blanco
Stb Estndar bajo 20mg/L
Stm Estndar medio 100 mg/L
Sta Estndar alto 800 mg/L
ARES-DOM Agua Domestica
ARES-IND Agua industrial
ASUP Agua Superficial

Tabla 9. Resultados Estadsticos de Evaluacin de la Muestras Naturales y
Patrones.

53
(ESTANDARES Muestras
FAS 0,017 0,105 0,105 0,01094 0,095 0,095
Dia BK. 20ppm BK. 100ppm BK 800ppm BK. C baja BK. C media BK C Alta
1
19,00 20,40 1,85 98,00 20,25 798,00 18,80 105,02 19,90 608,00 19,90 11400,00
19,00 20,40 1,85 98,00 20,25 798,00 18,80 105,02 19,90 608,00 19,90 10133,33
2
19,00 22,67 1,85 98,00 20,25 798,00 18,80 105,02 19,90 608,00 19,90 10133,33
19,00 22,67 1,85 98,00 20,25 798,00 18,80 105,02 19,90 608,00 19,90 10133,33
3
19,00 20,40 1,85 98,00 20,25 826,00 18,80 107,94 19,90 633,33 19,90 11400,00
19,00 18,13 1,85 98,00 20,25 826,00 18,80 107,94 19,90 633,33 19,90 11400,00
4
19,00 20,40 1,85 112,00 20,25 798,00 18,80 107,94 19,90 633,33 19,90 11400,00
19,00 20,40 1,85 112,00 20,25 826,00 18,80 107,94 19,90 658,67 19,90 11400,00
5
19,00 18,13 1,85 98,00 20,25 798,00 18,80 102,11 19,90 633,33 19,90 10133,33
19,00 18,13 1,85 112,00 20,25 826,00 18,80 102,11 19,90 608,00 19,90 10133,33
6
19,00 20,40 1,85 98,00 20,30 784,00 18,80 102,11 19,90 608,00 19,90 10133,33
19,00 20,40 1,85 112,00 20,30 784,00 18,80 99,19 19,90 608,00 19,90 11400,00
7
19,00 20,40 1,85 98,00 20,25 798,00 18,80 99,19 19,90 608,00 19,90 11400,00
19,00 20,40 1,85 98,00 20,25 798,00 18,80 99,19 19,90 608,00 19,90 11400,00
PARAMETROS
ESTADISTICOS

PROMEDIO (mg/l) 19,00 20,24 1,85 102,00 20,26 804,00 18,80 103,98 19,90 618,86 19,90 10857,14
DESV. EST,(mg/l) 0,00 1,40 0,00 6,56 0,02 15,25 0,00 3,36 0,00 16,37 0,00 650,50
COEF. DE VAR.(%) 0,00 6,90 0,00 6,43 0,09 1,90 0,00 3,23 0,00 2,65 0,00 5,99
Valor Esperado * 20,00 * 100,00 * 800,00 * * * * * *
% ERROR * 1,19 * 2,00 * 0,50 * 2,75 * 2,26 * 5,71
% RECUPERACION * 94,44 * 102,00 * 100,50 * * * * * *
INTERVALO 0,00 4,53 0,00 14,00 0,05 42,00 0,00 8,75 0,00 50,67 0,00 1266,67
CRITERIO T
T TEORICO 95% 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46
T bajo 0,00 0,46 0,00 0,29 0,14 0,48 0,00 0,55 0,00 0,21 0,00 0,57
T alto 0,00 0,54 0,00 0,71 0,86 0,52 0,00 0,45 0,00 0,79 0,00 0,43
LIMITE DE Co.(LC)
T TEORICO 95% 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16
LC 95% 0,00 1,12 0,00 5,28 0,01 12,28 0,00 1,94 0,00 9,45 0,00 375,59
LIMITE INFERIOR 19,00 19,11 1,85 96,72 20,24 791,72 18,80 102,04 19,90 609,41 19,90 10481,56
LIMITE SUPERIOR 19,00 21,36 1,85 107,28 20,27 816,28 18,80 105,92 19,90 628,31 19,90 11232,73
L Deteccion * 24,44 * 121,77 * 849,94 * 111,23 * 654,22 * 12262,46
L Cuantificacion * 34,19 * 167,63 * 956,52 * 137,55 * 782,56 * 17362,14
Incertidumbre
Combinada
0,37 1,75 4,08 * 0,90 * 4,38 * 173,85

54
Tabla 10. Resultados Estadsticos de Evaluacin de Patrones para la
Determinacin del Lmite de Deteccin.

ESTANDAR
FAS 0,0112 0,01
Dia BK. 5ppm BK. 2ppm
1
18,80 5,97 14,00 1,33
18,80 5,97 14,00 2,67
2
18,80 5,97 14,00 2,67
18,80 5,97 14,00 2,67
3
18,80 5,97 14,00 1,33
18,80 5,97 14,00 1,33
4
18,80 5,97 14,00 1,33
18,80 5,97 14,00 1,33
5
18,80 5,97 14,00 2,67
18,80 5,97 14,00 2,67
6
18,80 5,97 14,00 1,33
18,80 5,97 14,00 2,67
7
18,80 5,97 14,00 1,33
18,80 5,97 14,00 2,67
PARAMETROS ESTADISTICOS

PROMEDIO (mg/l) 18,80 5,97 14,00 2,00
DESV. EST,(mg/l) 0,00 0,00 0,00 0,69
COEF. DE VAR.(%) 0,00 0,00 0,00 34,59
VALOR ESPERADO * 5,00 * 2,00
% ERROR * 19,47 * 0,00
% RECUPERACION * 119,47 * 100,00
INTERVALO 0,00 0,00 0,00 1,33
CRITERIO T
T TEORICO 95% 2,46 2,46 2,46 2,46
T bajo 0,00 0,00 0,00 0,50
T alto 0,00 0,00 0,00 0,50
LIMITE DE Co.(LC)
T TEORICO 95% 2,16 2,16 2,16 2,16
LC 95% 0,00 0,00 0,00 0,40
LIMITE INFERIOR 18,80 5,97 14,00 1,60
LIMITE SUPERIOR 18,80 5,97 14,00 2,40
L Deteccion * 5,97 * 4,08
L Cuantificacion * 5,97 * 8,92
Incertidumbre Combinada * 0,03 * 0,19

55

Tabla 11. Resultados Estadsticos de Evaluacin de Patrones de las
Muestras Adicionadas (Estndar 20 ppm)
ESTANDAR 20ppm
FAS 0,0109 0,095
Dia BK.
ASUP
Natural
ASUP +St BK. ARES-DOM Natural ARES-DOM +St
1
18,80 104,64 120,96 19,90 608,00 633,33
18,80 104,64 122,45 19,90 608,00 633,33
2
18,80 104,64 122,45 19,90 658,67 684,00
18,80 104,64 120,96 19,90 608,00 633,33
3
18,80 107,55 120,96 19,90 658,67 684,00
18,80 107,55 122,45 19,90 658,67 684,00
4
18,80 107,55 120,96 19,90 608,00 633,33
18,80 107,55 122,45 19,90 658,67 684,00
5
18,80 101,73 120,96 19,90 608,00 633,33
18,80 101,73 120,96 19,90 658,67 684,00
6
18,80 101,73 120,96 19,90 608,00 633,33
18,80 98,83 120,96 19,90 608,00 658,67
7
18,80 98,83 122,45 19,90 608,00 633,33
18,80 98,83 122,45 19,90 608,00 633,33
PARAMETROS ESTADISTICOS

PROMEDIO (mg/l) 18,80 103,60 121,60 19,90 626,10 653,24
DESV. EST,(mg/l) 0,00 3,34 0,77 0,00 25,19 24,70
COEF. DE VAR.(%) 0,00 3,23 0,63 0,00 4,02 3,78
Valor Esperado * * 123,60 * * 646,10
% ERROR * * 1,62 * * 1,11
% RECUPERACION * * 89,99 * * 135,71
INTERVALO 0,00 8,72 1,49 0,00 50,67 50,67
CRITERIO T
T TEORICO 95% 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46
T bajo 0,00 0,55 0,43 0,00 0,36 0,39
T alto 0,00 0,45 0,57 0,00 0,64 0,61
LIMITE DE Co.(LC)
T TEORICO 95% 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16
LC 95% 0,00 1,93 0,44 0,00 14,55 14,26
LIMITE INFERIOR 18,80 101,67 121,16 19,90 611,55 638,98
LIMITE SUPERIOR 18,80 105,53 122,04 19,90 640,64 667,50
L Deteccin * * 123,26 * * 706,60
L Cuantificacin * * 129,27 * * 900,23
Incertidumbre
0,21 6,60
Combinada

56
Tabla 12 Resultados Estadsticos de Evaluacin de Patrones de las
Muestras Adicionadas (Estndar de 100 mgO2/L y 200 mg/LO2).
ESTANDAR 100ppm ESTANDAR 200ppm
FAS 0,1023 0,0112 0,095 0,1023
Da BK.
ARES
DOM
ARES
DOM +St
BK. ASUP Natural BK ASUP+ST BK.
ARES-
IND
Natural
ARES-
IND +St
1
20,30 709,28 818,40 18,60 294,19 19,80 494,00 20,30 463,76 682,00
20,30 763,84 845,68 18,60 294,19 19,80 494,00 20,30 463,76 682,00
2
20,30 763,84 818,40 18,60 294,19 19,80 494,00 20,30 450,12 682,00
20,30 709,28 818,40 18,60 294,19 19,80 494,00 20,30 450,12 695,64
3
20,30 709,28 818,40 18,60 294,19 19,80 494,00 20,30 463,76 695,64
20,30 709,28 818,40 18,60 294,19 19,80 494,00 20,30 463,76 695,64
4
20,30 709,28 818,40 18,60 292,69 19,80 494,00 20,30 436,48 682,00
20,30 763,84 845,68 18,60 292,69 19,80 506,67 20,30 436,48 682,00
5
20,30 763,84 845,68 18,60 292,69 19,80 506,67 20,30 436,48 682,00
20,30 763,84 845,68 18,60 292,69 19,80 494,00 20,30 450,12 695,64
6
20,30 763,84 845,68 18,60 294,19 19,80 494,00 20,30 450,12 695,64
20,30 763,84 845,68 18,60 294,19 19,80 494,00 20,30 463,76 695,64
7
20,30 763,84 818,40 18,60 292,69 19,80 494,00 20,30 463,76 695,64
20,30 763,84 818,40 18,60 292,69 19,80 494,00 20,30 463,76 695,64
PARAMETROS
ESTADISTICOS

PROMEDIO (mg/l) 20,30 744,35 830,09 18,60 293,55 19,80 495,81 20,30 454,02 689,79
DESV. EST,(mg/l) 0,00 27,13 14,01 0,00 0,77 0,00 4,60 0,00 11,26 7,00
COEF. DE
VAR.(%)
0,00 3,64 1,69 0,00 0,26 0,00 0,93 0,00 2,48 1,02
Valor Esperado * * 844,35 * * * 493,55 * 654,02
% ERROR * 3,37 1,69 * 0,25 * 0,46 * 2,15 5,47
%
RECUPERACION
* * 85,74 * * * 101,13 * 117,89
INTERVALO 0,00 54,56 27,28 0,00 1,49 0,00 12,67 0,00 27,28 13,64
CRITERIO T
T TEORICO 95% 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46
T bajo 0,00 0,64 0,43 0,00 0,57 0,00 0,14 0,00 0,00 0,00
T alto 0,00 0,36 0,57 0,00 0,43 0,00 0,86 0,00 0,00 0,00
LIMITE DE
Co.(LC)

T TEORICO 95% 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16
LC 95% 20,30 728,69 822,00 0,00 0,44 0,00 2,66 0,00 6,50 4,04
LIMITE INFERIOR 20,30 760,02 838,18 18,60 293,10 19,80 493,15 20,30 447,52 685,75
LIMITE
SUPERIOR
0,00 15,66 8,09 18,60 293,99 19,80 498,47 20,30 460,52 693,84
L Deteccion 20,30 802,96 860,36 18,60 295,20 19,80 505,75 20,30 478,34 704,93
L Cuantificacion 20,30 1015,65 970,19 18,60 301,22 19,80 541,81 20,30 566,60 759,84
Incertidumbre
Combinada
7,25 3,74 * 0,21 * 1,23 * 3,01 1,87

57
Tabla 13. Resultados Estadisticos de Evaluacin de Patrones de las
Muestras Adicionadas (Estandar de 300 mg/ L O2, 400 mg/LO2, 500 mg/L)
ESTANDAR 300ppm ESTANDAR 400ppm ESTANDAR 500ppm
FAS 0,1023 0,1023 0,0112 0,095
Dia BK. ARESDOM
ARES
DOM +St
BK.
ARES
IND
Natural
ARES-IND
+St
BK.
ASUP
Natural
BK. ASUP +St
1
20,30 709,28 982,08 20,30 682,00 872,96 18,60 294,19 19,75 772,67
20,30 763,84 982,08 20,30 695,64 872,96 18,60 294,19 19,75 798,00
2
20,30 763,84 982,08 20,30 695,64 872,96 18,60 294,19 19,75 798,00
20,30 709,28 982,08 20,30 695,64 872,96 18,60 294,19 19,75 772,67
3
20,30 709,28 1009,36 20,30 695,64 872,96 18,60 294,19 19,75 798,00
20,30 709,28 982,08 20,30 695,64 859,32 18,60 294,19 19,75 798,00
4
20,30 709,28 1009,36 20,30 682,00 859,32 18,60 292,69 19,75 772,67
20,30 763,84 1009,36 20,30 682,00 859,32 18,60 292,69 19,75 772,67
5
20,30 763,84 1009,36 20,30 682,00 859,32 18,60 292,69 19,75 772,67
20,30 763,84 1009,36 20,30 682,00 859,32 18,60 292,69 19,75 798,00
6
20,30 763,84 1009,36 20,30 682,00 859,32 18,60 294,19 19,75 798,00
20,30 763,84 982,08 20,30 682,00 872,96 18,60 294,19 19,75 772,67
7
20,30 763,84 982,08 20,30 695,64 872,96 18,60 292,69 19,75 798,00
20,30 763,84 1009,36 20,30 695,64 872,96 18,60 292,69 19,75 798,00
PARAMETROS
ESTADISTICOS

PROMEDIO (mg/l) 20,30 744,35 995,72 20,30 688,82 867,11 18,60 293,55 19,75 787,14
DESV. EST,(mg/l) 0,00 27,13 14,15 0,00 7,08 7,00 0,00 0,77 0,00 13,01
COEF. DE VAR.(%) 0,00 3,64 1,42 0,00 1,03 0,81 0,00 0,26 0,00 1,65
Valor Esperado * * 1044,35 * * 1088,82 * * * 793,55
% ERROR * 3,37 4,66 * 0,99 20,36 * 0,25 * 0,81
% RECUPERACION * * 83,79 * * 44,57 * * * 98,72
INTERVALO 0,00 54,56 27,28 0,00 13,64 13,64 0,00 1,49 0,00 25,33
CRITERIO T
T TEORICO 95% 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46 2,46
T bajo 0,00 0,64 0,50 0,00 0,50 0,57 0,00 0,57 0,00 0,57
T alto 0,00 0,36 0,50 0,00 0,50 0,43 0,00 0,43 0,00 0,43
LIMITE DE Co.(LC)
T TEORICO 95% 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16 2,16
LC 95% 0,00 15,66 8,17 0,00 4,09 4,04 0,00 0,44 0,00 7,51
LIMITE INFERIOR 20,30 728,69 987,55 20,30 684,73 863,07 18,60 293,10 19,75 779,63
LIMITE SUPERIOR 20,30 760,02 1003,89 20,30 692,91 871,16 18,60 293,99 19,75 794,65
L Deteccion 20,30 802,96 1026,30 20,30 704,11 882,25 18,60 295,20 19,75 815,25
L Cuantificacion 20,30 1015,65 1137,27 20,30 759,59 937,16 18,60 301,22 19,75 917,24
Incertidumbre
Combinada
7,25 3,78 1,90 1,88 0,21 3,48

58
TABLA 14. Anlisis de Varianza DQO

Determinacin de desviacin estndar.

CALCULO DE LAS DESVIACIONES ESTANDAR

STB STM STA ARES-DOM ARES-IND ASUP
Cuadrado medio entre grupos (5.) M1 2,904761905 60,66666667 522,6666667 470,3095238 649759,8333 50,78571429
Cuadrado medio dentro de los grupos (5.) Mo 0,214285714 28 112 92,92857143 229327 0,642857143
M1 > Mo ?
SI NO Si Si Si Si Si Si
F = M1/Mo F = Mo/M1 F 13,556 2,167 4,667 5,061 2,833 79,000
F(6,7)(0.01) = 7,1 F(6,7)(0.05) = 3.87 Si No No No No Si
F > F(O.O1)? F < F(0.05)?

59
TABLA 15. Curva del Lmite de Deteccin

GRAFICO1. Curva Limite de deteccion DQO

Modelo
y = m + bx y: DQO calculado
x: DQO estndar
Coeficientes
intercepto ( m ) 0,63
pendiente ( b ) 1,00
CME 53,50
Coeficiente de determinacin 99,95
CV 3,91
Mtodo Valor Ordenada
L deteccin 1,89
L Cuantificacin 6,32
Mtodo Anlisis Repetido de Menor Concentracin
DV concentracin baja 0,69
L deteccin 2,07
L cuantificacin 6,89
Mejora de la precisin
Por duplicado 0,71
L mtodo 1 1,34
L mtodo 2 1,46

104

- Se realizo el test de GRUBBS o prueba T para el rechazo de datos
dudosos. El valor T Terico para el tamao de la muestra en los niveles de
concentracin y ensayos realizados fue 2.46, como se puede observar en las
(tabla 12). Para la evaluacin de muestras naturales y lmite de deteccin
ningn valor de T calculado para las concentraciones altas y bajas de las
diferentes muestras sobrepaso el valor terico por lo que no fue necesario
decir que en las muestras se presentan datos dudosos.

- Los valores obtenidos (Tabla 14) para la varianza entre lotes (M1), muestras
estndar de 20 mgO
2
/l , 100 mgO
2
/l y 800 mgO
2
/l y Muestras Naturales fueron
mayores que los obtenidos para la varianza entre duplicados (Mo) para estas
mismas muestras, lo que significa que no se presenta ningn sesgo que
evidencie alteracin significativa en el parmetro analizado DQO, es decir la
varianza entre lotes fue mayor que entre duplicados por tanto los estndares
escogidos para esta prueba son los adecuados para mantener homogeneidad
en las unidades escogidas para cada lote.

- EXACTITUD

Definida en trminos de porcentaje de error y aplicado a los diferentes niveles
de concentracin del estndar (patrn preparado en el laboratorio, (Tabla 9) se
aprecia una buena exactitud para las concentraciones de DQO en estndar
20mgO
2
/L, 100 mgO
2
/l , 800mgO
2
/L por lo que el porcentaje del error no
supera el 10% en ninguna de ellas. En las muestras adicionadas (tabla 11,
12,13) estn por debajo del 10% exceptuando el agua Residual Industrial

105
adicin estndar de 400mgO
2
/L (tabla13) que lo supera particularmente porque
el porcentaje de recuperacin es a penas del 44.57%.

- REPETIBILIDAD

Definindola en trminos de coeficiente de variacin o grado de concordancia
entre los datos obtenidos entre replicas de una misma muestra, para los
niveles de concentracin de estndar 20mgO
2
/L, 100 mgO
2
/l, 800mgO
2
/L
Muestra natural y Muestra natural adicionada (ver tablas) fue buena ya que
sus porcentajes estn por debajo del 10%. Con excepcin del estndar de
2mgO2/L (tabla 10) el cual fue mayor 34.59 superando el 10% lo cual indica
que hay bastante dificultad para tomar medidas homogneas en esta
concentracin.

- PORCENTAJE DE RECUPERACIN :

Se observa que para el Agua superficial (tabla 11 ,12, 13) el porcentaje de
recuperacin para los diferentes estndares 20mgO2/L el %R: 89.99 ,
200mgO
2
/L el %R 101.13 , 500mgO
2
/L el %R 98.72 esto nos indica que
durante el procedimiento de anlisis de DQO porcentaje de recuperacin es
satisfactorio.

106
CONCLUSIONES

- Para las condiciones de trabajo establecidas en el proceso de validacin
para la determinacin de demanda qumica de oxigeno expresada en mg/L
de O
2
por el mtodo de reflujo abierto en el laboratorio de Ambiental de
ASINAL se establecieron los parmetros estadsticos en cuanto a exactitud
y precisin se refiere.

Parmetros
Estadsticos
Estndar Estndar Muestras
2 mgO2/l 5 mgO2/l 20 ppm 100ppm 800 ppm C baja C media C alta
Promedio 2,00 5,97 20,24 102,00 804,00 103,98 618,86 10857,14
%CV 34,59 0,00 6,90 6,43 1,90 3,23 2,65 5,99
%Error 0,00 19,47 1,19 2,00 0,50 2,75 2,26 5,71
% Recuperacion 100 119,47 94,44 102 100,5 * * *
I Tipo A 0,18 0,00 0,37 1,75 4,08 0,90 4,38 173,85
Linf 1,60 5,97 19,11 96,72 791,72 102,04 609,41 10481,56
Lsup 2,40 5,97 21,36 107,28 816,28 105,92 628,31 11232,73
L deteccion 4,08 5,97 24,44 121,77 849,94 111,23 654,22 12262,46
L Cuantificacion 8,92 5,97 34,19 167,63 956,52 137,55 782,56 17362,14
Incertidumbre
Combinada
0,19 0,03 0,37 1,75 4,08 0,90 4,38 173,85

Parmetros
Estadsticos
Estndar 200 ppm Estndar 500 ppm
ASUP ASUP+St ARES Dom ARES+St ASUP ASUP+St
Promedio 293,55 495,80 454,02 689.79 293,55 787,14
%CV 0,26 0,93 2,48 1.02 0,26 1,65
%Error 0,25 0,46 2,15 5,47 0,25 0,81
% Recuperacin * 101,131 * 117,89 * 98,72
I Tipo A 0,20 1,23 3,01 1,87 0,20 3,48
Linf 295,20 505,75 478,34 704,93 293,10 779,63
Lsup 301,22 541,81 566,60 759,84 293,99 794,65
L deteccin 295,20 505,75 478,34 704,93 295,20 815,25
L Cuantificacin 301,22 541,81 566,60 759,84 301,22 917,24
Incertidumbre
Combinada 0,21 1,23 3,01 1,872 0,21 3,48

107
- El porcentaje de recuperacin en la muestra adicionada es aceptable.

- Los datos de Demanda Qumica de Oxigeno pueden ser expresados como
mg/l y con un grado de incertidumbre de +/- 0.37 para concentraciones
menores de 20 mg/l.

mg/l y con un grado de incertidumbre de +/- 1.75 para concentraciones de 100
mg/l.

mg/l y con un grado de incertidumbre de +/- 4.08 para concentraciones de 800
mg/l.

- Cuando se analicen muestras de concentracin alta debe diluirse.

- Para concentraciones media y alta el FAS utilizado es de 0.1N, y para
concentraciones bajas el FAS utilizado es 0.01N

- La solucin de digestin para rangos medios y altos es 1N , para Rangos bajos
es de 0.1N.

108
2.4 VALIDACIN pH - METODO POTENCIOMETRICO

2.4.1 OBJETIVOS

de la tcnica pH, por el mtodo Potenciomtrico.

- Determinar de manera experimental y para las condiciones del laboratorio
Ambiental de ASINAL los valores de los parmetros que servirn como criterios
de confianza para la determinacin de pH por el mtodo potenciomtrico. Estos
parmetros son : precisin, exactitud, sensibilidad, limite de deteccin y porcentaje
de recuperacin


Para efectos de este mtodo se aplica las siguientes definiciones:
Acidez activa: corresponde a los iones hidrogeno en agua y solucin.
pH logaritmo negativo de la actividad de iones H+ en el agua o soluciones. Este
valor expresa la acidez activa y se representa matemticamente de la siguiente
manera:

pH = -log (aH
+
); donde aH
+
= actividades de iones de hidrogeno.

El pH es la medida de la concentracin de los iones de hidrogeno (H
+
) o en su
defecto de los iones hidroxilos (OH
-
) en el agua. Cuando proliferan los iones de
hidrogeno el valor de pH se ubica entre 0 y 7 y se dice que es acida.

109
Por otra parte cuando los iones hidroxilo son los que abundan el valor se sita
entre 7-14 se dice que el agua es bsica o alcalina.

En disoluciones diluidas en lugar de utilizar la actividad del ion hidrgeno, se le
puede aproximar utilizando la concentracin molar del ion hidrgeno.
Por ejemplo, una concentracin de [H
+
] = 1 10
7
M (0,0000001) es simplemente
un pH de 7 ya que: pH = log[10
7]
= 7
Se considera que p es un operador logartmico sobre la concentracin de una
solucin: p = log[...] . Tambin se define el pOH, que mide la concentracin de
iones OH-.

Puesto que el agua est disociada en una pequea extensin en iones OH

y H
+
,
tenemos que:
Kw = [H
+
][OH
]=10
14

en donde [H
+
] es la concentracin de iones de hidrgeno, [OH
-
] la de iones
hidrxido, y Kw es una constante conocida como producto inico del agua.
Por lo tanto,
Log Kw = log [H
+
] + log [OH
]
14 = log [H
+
] + log [OH
]
14 = log [H
+
] log [OH
]
pH + pOH = 14
Por lo que se puede relacionar directamente el valor del pH con el del pOH.

110
GRAFICO 2. Valor del pH con el del pOH.

En disoluciones no acuosas, o fuera de condiciones normales de presin y
temperatura, un pH de 7 puede no ser el neutro. El pH al cual la disolucin es
neutra estar relacionado con la constante de disociacin del disolvente en el que
se trabaje.

Las aguas acidas puede corroer las metales y degradar sustancias no metlicas
tales como el concreto, por su parte las aguas alcalinas puede tender a formar
incrustaciones en las tuberas o provocar la precipitacin de los metales.

Los procesos biolgicos se llevan a cabo principalmente en un rango 6.5 a 8.5.En
la mayora de los microorganismos encuentran gran dificultad para desarrollarse
fuera de este rango sin embargo hay algunas bacterias, hongos y algas que se
pueden desarrollar en intervalos distintos.

El valor de pH es un parmetro regulado por lmites mximos permisibles en
descargas de aguas residuales de aguas de alcantarillado y a cuerpos receptores,

111
tambin es considerado como un parmetro de calidad de agua para uso y
actividades agrcolas, contenido primario y el consumo humano.

2.4.3 METODOLOGIA

de pH el cual est basado en el STANDARD METHODOS. Ed. 20 , Ao 1998

Calibracin instrumental

En cada caso se deben seguir las instrucciones del fabricante para el manejo del
pH metro y para el almacenamiento y preparacin de los electrodos para su uso.
Las soluciones recomendadas para perodos cortos de almacenamiento de los
electrodos varan con el tipo de electrodo y el fabricante, pero generalmente tienen
una conductividad mayor de 4000 mhos/cm. Para un electrodo combinado es
preferible una solucin de KCl 3M. Mantener los electrodos hmedos
retornndolos a la solucin de almacenamiento mientras que el instrumento no
est en uso. Antes de usarlos, retirar el electrodo de la solucin de
almacenamiento, enjuagarlo, colocarlo en la solucin tampn inicial, y ajustar el
punto isopotencial. Seleccionar un segundo tampn que est en un rango de 2
unidades del pH de la muestra y llevar el tampn y la muestra a la misma
temperatura, la cual puede ser la temperatura ambiente, una temperatura fija tal
como 25C, o la temperatura de una muestra fresca. Retirar los electrodos del
primer tampn, enjuagarlos abundantemente con agua destilada, secarlo y
sumergirlo en el segundo tampn. Registrar la temperatura de medicin y ajustar
el indicador de temperatura en el pH-metro hasta que el equipo indique el valor de
pH del tampn a la temperatura de anlisis (esto es el ajuste de pendiente).

112
El propsito de la estandarizacin es ajustar la respuesta del electrodo de vidrio al
instrumento. Cuando se hacen mediciones de pH slo ocasionalmente, se debe
verificar el instrumento antes de cada medicin. Cuando se hacen mediciones
frecuentes y el instrumento es estable, la verificacin y el ajuste se pueden hacer
con menor frecuencia.

En este proceso se utilizaron soluciones buffer de 4,00 Unid., pH 7,00 Unid. para
calibracin de potencimetros, certificadas.



Los reactivos utilizados son:

Solucin de KCl 3 M: Disolver 223.65 g de KCl en 1000mL de agua destilada
tipo 2

Buffer pH de 4.0: Disolver la ampolla en 500mL de agua destilada tipo 2

Buffer pH de 7.0: Disolver la ampolla en 500mL de agua destilada tipo 2


ASINAL clasifica los reactivos de acuerdo al siguiente esquema:

Cdigo numrico de peligrosidad

Las sustancias o reactivos son medidas as:

113

0: ninguno nada
1: leve ligero
2: mediano moderado
3: severo intenso
4: extremo

En cada una de las cuatro categoras de riesgo se clasifican de acuerdo a :

INFLAMABILIDAD: tendencia de una sustancia a incendiarse
membranas mucosas.

Cdigo Almacenamiento por colores

AZUL: riesgo de salud, almacenar en un rea segura de venenos
inflamables o combustibles


114

Tabla 15 Informacin de seguridad y toxicidad de reactivos pH

# CAS

REACTIVOS

FS

NFPA
Color
H
F

R
C
Cloruro de potasio 0 0 0 1 Naranja
NOTA : FS: Ficha de seguridad H:salud F: inflamabilidad R: reactividad C: contact

2.4.6 EQUIPOS Y MATERIALES

Los materiales utilizados son:

- Beaker de 250 mL
- Frasco lavador
- Baln Volumtrico de 1000 mL
- Frasco plstico

Equipo requerido:
- pHmetro
- Electrodo combinado de vidrio

2.4.7 VERIFICACIONES ANTES DE COMENZAR EL TRABAJO

- Realizar una inspeccin visual a todo el equipo (pHmetro).
- Asegurar calidad del agua destilada conductividad < 2 y pH 5.6 a 7.5.

115


- El electrodo de vidrio est libre de interferencias debidas a color, turbidez,
material coloidal, oxidantes, reductores o alta salinidad, excepto para
interferencias del ion sodio en soluciones de pH mayor de 10; este error se
reduce con la utilizacin de electrodos especiales (error bajo de sodio) .
- Las capas de materiales aceitosos presentes en algunos tipos de aguas
pueden disminuir la respuesta del electrodo. Se limpian suavemente con un
pao o mediante lavado con detergente y enjuague con agua destilada. Puede
ser necesario un tratamiento adicional con HCl 1:9 para remover la pelcula
remanente.
- Las mediciones de pH varan con la temperatura en dos formas: por efectos
mecnicos causados por cambios en las propiedades de los electrodos y por
efectos qumicos producidos por alteracin de las constantes de equilibrio. En
el primer caso, se incrementa la pendiente de la ecuacin de Nernst con el
aumento de temperatura y los electrodos requieren de un mayor tiempo para
lograr el equilibrio trmico. Este efecto provoca cambios significativos en el pH.
Debido a que los equilibrios qumicos afectan el pH, los estndares para
preparar las soluciones tampn tienen pH especfico a la temperatura indicada.
- Reportar siempre la temperatura a la cual se mide el pH. La mayora de los
instrumentos de medida del pH estn equipados con compensadores de
temperatura que corrigen los errores del primer tipo, pero la medicin slo
puede mostrar el pH a la temperatura de la medida (25C)

116

Gua para muestras ambientales

El volumen mnimo de la muestra debe ser de 50 mL y se debe utilizar botellas de
vidrio o plsticas slo si sabe que estn libres de contaminacin orgnica.
Medir el pH in Situ o analizar a la mayor brevedad posible.

2.4.10 VERIFICACIN DEL FUNCIONAMIENTO DE LOS EQUIPOS
(VERIFICACIN Y AJUSTE)

Todo electrodo de pH antes de utilizarlo hay que verificarlo con dos soluciones de
pH conocido, y de valores comprendidos en el entorno de pH que se va a medir.
En la prctica, la verificacin y el ajuste se realizar previamente con soluciones
tampn de pH 4,0 y 7,0, respectivamente.
La vida media de un electrodo depende del trato que se le d y el tiempo de
duracin por parte del fabricante. Despus de cada medicin hay que lavarlo con
abundante agua destilada. Nunca se debe secar con papel. Se debe de recoger la
ltima gota sobre la pared de un vaso de precipitados.
2.4.11 PRECAUCION DEL MTODO

- La muestra no requiere algn tratamiento especial para la determinacin.
- El electrodo combinado, mientras no se use, se debe de almacenar en una
solucin de KCl 3 M.
- Para este mtodo no es necesario elementos de proteccin personal.

117


Patrones de control interno: Consiste en realizar el anlisis de un estndar de
concentracin conocida y que se encuentre dentro del rango de la curva de
calibracin de cada vez que se procesen muestras.

Calidad.

2 S/cm y pH de 5.6 a 7.5 . Las mediciones se registran en la planilla Control de
Calidad del Agua Destilada.


2.4.13 CALCULOS

Lectura directa, Unidades de pH

2.4.14 RESULTADOS

De acuerdo con la metodologa descrita se obtuvo los siguientes resultados

118

Tabla 17. Precisin

Medicin pH 4,0 pH 7,0
1 4,06 7,03
2 4,05 7,03
3 4,04 7,02
4 4,04 7,02
5 4,05 7,02
6 4,04 7,02
7 4,04 7,01
Promedio 4,05 7,02
Desviacin estndar 0,008 0,007
Coeficiente de variacin 0,19 0,10

PARMETRO
CRITERIO DE ACEPTACIN
APROBADO
Valor Mximo Tolerado Valor Obtenido
% CV 1,3 0.19 / 0.10 S
Error 0.05 4.05 / 7.02 S

Tabla 18. Exactitud y veracidad
Rplica No.
pH 4.00 pH 7.00
Valor
Obtenido
%
Recuperacin
Valor
Obtenido
%
Recuperacin
1 4,00 100,00 6,98 99,71
2 4,00 100,00 6,99 99,86
3 4,00 100,00 7,00 100,00
4 4,00 100,00 7,01 100,14
5 4,00 100,00 6,90 98,57
6 3,99 99,75 7,00 100,00
7 4,00 100,00 6,99 99,86
Promedio 4,00 100,0 6,98 99,7
Desviacin
estndar
0,004 0,094 0,037 0,531
Coeficiente de
variacin
0,09 0,09 0,53 0,53

119

PARMETRO
CRITERIO DE ACEPTACIN
APROBADO
Valor Mximo
Tolerado
Valor
Obtenido
% CV 1,3 0.09/0.53 S
Error
0.05 4.00/6.98 S
% de Recuperacin 90 -107 % 100.0/99.7
S

Tabla 19.Determinacin de la incertidumbre analtica

PARMETRO: pH
COMPONENTE: VARIABILIDAD DEL MTODO

Desviacin estndar del ensayo de precisin intermedia

Concentracin 7,00 Unidades
Desviacin Estndar 0,0092 Unidades
Nmero de datos 20 -
Incertidumbre absoluta 0,00206 Unidades

Incertidumbre por equipo

Resolucin de lectura 0,01 Unidades
del equipo 0,0041 Unidades

Buffer certificado

Incertidumbre expandida 0,01 Unidades
Incertidumbre combinada 0,005 Unidades

PARMETRO: pH
CONCENTRACIN
MUESTRA: 7,00 Unidades

Componente Valor Unidad Incertidumbre

120
Variabilidad del Mtodo
(Precisin intermedia)
0,0021 mg/L 0,0021

Equipo de medicin - mL 0,0041
Patrn Certificado de pH 7,00 g 0,0050

Incertidumbre en el pH de la muestra

Tipo de Incertidumbre Var
rel
(Equipo)
rel
(Patrn)

combinada
Incertidumbre combinada 0,0021 0,0041 0,0050 0,007
Incertidumbre Expandida
(k=2) 0,014
RESULTADO 7,00 0,01 Unidades


No se rechaza que las condiciones bajo las cuales se tomaron las medidas
respecto al pHmetro sean las adecuadas, se encuentra que el equipo cumple con
el aseguramiento metrolgico y que la tcnica es precisa.

Se acepta que las medidas tienen poca variabilidad y el coeficiente de
recuperacin se mantiene en los valores permitidos.
No se considera necesario el estudio de este parmetro ya que fue evaluado en su
etapa de estandarizacin y a la vez la operacin tiene un alto grado de
automatizacin. Eventualmente podran efectuarse ensayos referidos al tiempo de
homogeneizacin de la muestra.

121
3. CARTAS DE CONTROL

Las cartas de control en los laboratorios son reconocidas como la mas valiosa
herramienta para el monitoreo continuo de la tcnica analtica, con ellas se verifica
en forma continua que siempre se esta cumpliendo con las metas trazadas,
tomando como base muestras de control cuyas precisiones son conocidas, las que
se deben analizar con cada lote de muestras naturales a intervalos regulares. Las
cartas de control no solo indica problemas serios con el sistema, si no que puede
indicar tendencia hacia un problema antes de que se presente.
3.1 CARTAS X

Son cuadros de control en los cuales la lnea central representa el valor real de una
muestra estndar, o un valor real aproximado, estimando como promedio aritmtico
(X), a travs de anlisis repetidos durante un tiempo con una muestra
estandarizada o con muestras naturales estables; dos lneas correspondientes a
los limites de confianza de +/- 2, llamada limite de advertencia superior e inferior(
LAS y LAI), dos lneas correspondientes de confianza de +/- 3 , llamadas limite
de control superior e inferior (LCS y LCI) y una lnea quebrada que representa los
estados del proceso.

Una vez la carta de control es construida se debe continuar indefinidamente,
graficando nuevos puntos tan pronto como ellos sean generados en el laboratorio,
peridicamente deben recalcularse y evaluarse la media de la desviacin
estndar.

LSC = X + 3 * 1/\ n * S LSC = X +3S
LIC= X - 3 * 1/\ n * S LIC = X - 3S

122
Donde:

X = Valor real o valor aproximado (promedio aritmtico)

X Media = Valor promedio de los duplicados
n = Numero de muestra analizadas para la determinacin de S
S = Desviacin estndar

Con frecuencia se trazan los lmites de advertencia (LSA y LIA), dichos limites se
presentan como:

X +/- 2 1/\ n *S X 2S
X = Valor promedio de los duplicados
3.2 CARTA R

Las cartas R son cuadros de control en los cuales la lnea central es el valor
promedio de la diferencia entre los duplicados de los estndares, el lmite de
control inferior es 0 y el lmite superior de control (LSC) se estima:

LSC = 3.27 * R

Las cartas R, hacen posible el control de los errores aleatorios y cuando se
analizan los blancos o testigos, se puede controlar el lmite de deteccin.

3.3 BASE ESTADSTICA DE LAS CARTAS DE CONTROL

El intervalo dentro del cual se encuentra el valor verdadero, se conoce como
intervalo de confianza y los valoras extremos de dicho intervalo se llaman lmites
de confianza. El termino confianza implica que podemos afirmar con un grado de

123
confianza dado, es decir, con cierta probabilidad que el intervalo de confianza si
incluye el valor verdadero.
Sin importar la distribucin de la caracterstica de calidad, es prctica estndar
determinar los lmites de confianza como mltiplo de la desviacin estndar de la
estadstica representada en la grafica. Se escoge en general utilizar los lmites de
2 y 3 en las cartas de control.

3.4 USO DE LAS CARTAS DE CONTROL

Cuando los resultados de los anlisis de las muestras de control se encuentran
dentro de los lmites, no es necesario tomar una determinacin o decisin, ya que
el anlisis se encuentra bajo control y la precisin es satisfactoria. En caso de que
se sobrepase estos lmites hay que tener en cuenta las siguientes
recomendaciones:
3.4.1 LIMITE DE ADVERTENCIA

De acuerdo al procedimiento estadstico usado para definir los limites de
advertencia, aproximadamente el 5% de todos los resultados se pueden
encontrar fuera de estos limites. El hecho de que un resultado caiga fuera de los
lmites no amerita que se tome alguna accin, a menos que el prximo resultado
nuevamente sobrepase estos lmites si esto ocurre con frecuencia, puede ser
indicio de:

- Una tendencia sistemtica a que los resultados sean mayores o menores a los
limites superior e inferior, respectivamente.

- El error aleatorio ha aumentado (Siempre que ambos lmites de advertencia se
hallan cruzado al azar).

124

3.4.2 LIMITE DE RECHAZO O DE ACCIN

De acuerdo con el procedimiento estadstico usado para definir los lmites de
accin, se espera que solo cerca de 0.3 % de los resultados sobrepase estos
valores, en este sentido si un resultado esta fuera de los lmites de accin, se dice
que el anlisis est fuera de control, y se toman acciones intermedias para
determinar cual es la causa. Los resultados de los anlisis de muestras
desconocidas, obtenidas en el mismo da en que se obtuvo el resultado errneo
de las muestras de control, deben ser considerados como poco confiables
(rechazados) y se deben volver a realizar despus de que se haya tomado la
accin correctiva y se considere que el promedio este bajo control.

3.5 SELECCIN DEL MATERIAL DE REFERENCIA

Las cartas de control se emplean con anlisis repetido para los siguientes tipos de
muestras:

1. Muestras sintticas
2. Muestras naturales estables
3. Blanco o testigo de reactivos

Para la seleccin del material de referencia o estndar de chequeo que se empleo
se tuvieron en cuenta las siguientes caractersticas
- Disponibilidad del material de referencia.
- Material de referencia estable, para que la concentracin del analito no cambie
con el tiempo.

125
- El material de referencia como la muestra desconocida fueron sometidas a
todos los pasos del procedimiento analtico y procesado simultneamente por
la misma persona.

Las soluciones utilizadas para llevar las cartas de control de Muestras sintticas o
estndares de chequeo son las siguientes:

Nombre de la Tcnica Muestra sinttica o Estndar

Grasas y Aceites Aceite Gourmet densidad 0.92348g/ mL
DQO Ptalato cido de Potasio
pH Buffer 4.0 y 7.0

3.6 MTODOS Y PROCEDIMIENTOS

Una vez se realizaron satisfactoriamente todos los pasos a seguir dentro del
proceso de validacin de mtodos analticos, es necesario realizar un control
continuo de la exactitud para determinar y remediar cualquier deterioro con el
tiempo.

Las cartas de control son las cartas X y las Cartas R se realizaron con los
resultados obtenidos de los estndares de control en los mtodos validados
(Grasas y Aceites, Demanda Qumica de Oxigeno, pH).

Para la aplicacin del procedimiento de elaboracin de cartas en el laboratorio de
aguas de ASINAL se basa en lo siguiente

126
Carta X :

- Analizar 20 estndares por duplicado de una concentracin del analito
determinado previamente (ver informacin registrada en la tabla anterior).

- Calcular el promedio de cada duplicado.

- Calcular la desviacin estndar (S) de los promedias de los 20 datos.

- Calcular la media aritmtica (X ) de los promedios de cada duplicado.

- Calcular LSC, LIC, LSA y LIA.

Para hacer el seguimiento una vez elaborada la carta de control con los 20 datos
iniciales se verificar los resultado correspondientes con cada lote de muestras,
comprobando que el valor promedio de los estndares no se salga de los limites
ya establecidos.

- Evaluar los datos teniendo en cuenta los siguientes criterios:

- Si una medida excede los lmites de control significa que hay un problema en
el anlisis, debe buscarse su origen y solucin antes de continuar con los
anlisis de rutina y los datos que se hayan obtenido en esas condiciones no se
deben reportar.

- Si un punto se ubica entre los lmites de advertencia y de control es
considerado como evidencia de posibles problemas en el mtodo analtico. Si
esta situacin es repetitiva interrumpir los anlisis, buscar las causas, corregir
el problema y repetir los anlisis.

127

- Se recomienda que los datos se ubiquen alternativamente por encima y por
debajo de la lnea central (X ).

- Cuando se superan lo limites de control y de advertencia se debe informar al
coordinador de calidad de tal manera que esta pueda supervisar, toma de
decisiones y aplicar las acciones correctivas adecuadas al caso.

- Cuando se obtengan otros 20 datos se elabora una nueva carta de control,
calculando el promedio y los limites respectivos.

Carta R:

Para elaborar las cartas R se parte de los datos obtenidos para la carta X,
aplicando el siguiente procedimiento:

- Para cada duplicado de estndares calcular el rango R, sea su diferencia:
R = X
1
- X
2

- Al tener 20 valores de R para un determinado parmetro calcular el rango
promedio (R ) y el LSC.

- Revisar los datos iniciales. Si se encuentran valoras de R mayores que el valor
del LSC se deben descartar y recalcular a partir de los restantes valores.
- Una vez elaborada la carta R, se revisan los valores obtenidos en cada tanda
de anlisis y si el R da mayor que el LSC, se considera el mtodo fuera de
control, los anlisis se deben detener hasta resolver el problema y los datos
obtenidos en esta tanda no podrn ser reportados.

128
- Cuando se obtengan otros 20 datos se elabora una nueva carta de control,
calculando el promedio y los limites respectivos.

- En el caso de que los datos estn por fuera de los lmites de control tanto en la
carta X como en la R es necesario evaluar el problema, corregirlo y repetir los
anlisis correspondientes a ese lote.

Cuando se disponga de valores tericos para promedio y desviacin estndar de
muestras de control, estos datos se utilizaran para construir las cartas.
Las cartas de control que continuacin presentare, corresponden a los valores
obtenidos con patrones utilizados en las validaciones de las tcnicas Grasas y
Aceites por el mtodo Gravmetrico, Demanda Qumica de Oxigeno (DQO) por el
mtodo Reflujo cerrado titrimtrico y pH por el mtodo potenciomtrico.
Parmetros necesarios para la acreditacin del laboratorio.

129
CARTA DE CONTROL X PARA EL METODO
GRASAS Y ACEITES CONCENTRACIN ( 2 mg/L)

Tabla 20. Parmetros estadsticos para construir la carta X Estndar 2(mg/L)
Grasas y Aceites
No. SERIE X1 X2 X MEDIA
1 1,77 1,76 1,765
2 1,83 1,84 1,835
3 1,68 1,68 1,68
4 1,72 1,72 1,72
5 1,79 1,80 1,795
6 1,83 1,83 1,83
7 1,77 1,77 1,77
Promedio 1,77
S 0,06
LSC 1,94
LIC 1,60
LAS 1,88
LAI 1,66

Grafico 3. Carta de control X Grasas y Aceite 2mg/L

CARTA DE CONTROL X PARA GRASAS Y ACEITES ESTANDAR 2mg/L
Resultados validacion
1,50
1,60
1,70
1,80
1,90
2,00
1 2 3 4 5 6 7
Dia
G
r
a
s
a
s

y

A
c
e
i
t
e
s

(
m
g
/
L
)
X Media LSC LIC LAS LAI Promedio

130

CARTA DE CONTROL R PARA GRASAS Y ACEITES RANGO DE
CONCENTRACIN 2 mg/l RESULTADOS VALIDACION DEL METODO.

Tabla 21. Parmetros estadsticos para construir la carta R Estndar 2(mg/L)
Grasas y Aceites

No. SERIE X1 X2 RANGO
1 1,77 1,76 0,01
2 1,83 1,84 0,01
3 1,68 1,68 0,00
4 1,72 1,72 0,00
5 1,79 1,80 0,01
6 1,83 1,83 0,00
7 1,77 1,77 0,00
PROMEDIO 0,004
LSC* 0,014
Grafico 4. Carta de control R Grasa y Aceites 2mg/L

CARTA DE CONTROL R PARA GRASAS Y ACEITES ESTANDAR 2mg/
Resultados de Validacion
0,000
0,004
0,008
0,012
0,016
1 2 3 4 5 6 7
DIA
G
r
a
s
a
s

y

A
c
e
i
t
e
s

(
m
g
/
L
)
Promedio LSC* Rango

131
CARTA DE CONTROL PARA GRASAS Y ACEITES ESTANDAR 10mg/L
Resultados de validacion
8,80
8,90
9,00
9,10
9,20
1 2 3 4 5 6 7
DIA
G
r
a
s
a
s

y

A
c
e
i
t
e
s

(
m
g
/
L
)
LSC LAS Promedio LAI LIC X Media

GRASAS Y ACEITES RANGO DE CONCENTRACIN 10 mg/l .

Grasas y Aceites

1 8,99 9,00 9,00
2 8,99 9,10 9,05
3 8,99 8,99 8,99
4 8,99 8,99 8,99
5 8,99 8,99 8,99
6 8,99 8,99 8,99
7 9,10 9,10 9,1
Promedio 9,01
S 0,04
LSC 9,14
LIC 8,89
LAS 9,10
LAI 8,93

Grafico 5. Carta de control Grasas y Aceites 10mg/L

132

CARTA DE CONTROL R PARA EL METODO
GRASAS Y ACEITES RANGO DE CONCENTRACIN 10 mg/l

Grasas y Aceites

1 8,99 9,00 0,01
2 8,99 9,10 0,11
3 8,99 8,99 0,00
4 8,99 8,99 0,00
5 8,99 8,99 0,01
6 8,99 8,99 0,00
7 9,10 9,10 0,00
PROMEDIO 0,019
LSC* 0,061
Grafico 6. Carta de control R Grasas y Aceites 10mg/L

CARTA R PARA GRASAS Y ACEITES ESTANDAR 10(mg/L)
Resultados de validacion
0,000
0,040
0,080
0,120
1 2 3 4 5 6 7
DIA
G
r
a
s
a
s

y

A
c
e
i
t
e
s

(
m
g
/
l
)
Promedio LSC* Rango

133
CARTA DE CONTROL X PARA EL METODO DE
GRASAS Y ACEITES RANGO DE CONCENTRACIN 50 mg/l

Grasas y Aceites

1 43,09 43,09 43,09
2 45,85 45,85 45,85
3 45,85 45,85 45,85
4 45,85 43,09 44,47
5 45,85 45,85 45,85
6 45,50 45,50 45,50
7 45,85 45,85 45,85
Promedio 45,21
S 1,06
LSC 48,39
LIC 42,02
LAS 47,33
LAI 43,08

Grafico 7. Carta de control X Grasas y Aceites 50 mg/L

CARTA DE CONTROL X PARA GRASAS Y ACEITES (50 mg/L)
Resultados Validacion
38,00
41,00
44,00
47,00
50,00
1 2 3 4 5 6 7
DIA
G
r
a
s
a
s

y

A
c
e
i
t
e
s

(
m
g
/
L
)
Promedio LSC LIC LAS LAI X Media

134
CARTA DE CONTROL R PARA EL METODO GRASAS Y ACEITES
RANGO DE CONCENTRACIN 50 mg/l .

Grasas y Aceites

1 43,09 43,09 0,00
2 45,85 45,85 0,00
3 45,85 45,85 0,00
4 45,85 43,09 0,00
5 45,85 45,85 0,01
6 45,50 45,50 0,00
7 45,85 45,85 0,00
PROMEDIO 0,001
LSC* 0,005

Grafico 8. Carta de control R Grasas y Aceites 50mg/L
CARTA DE CONTROL R PARA GRASAS Y ACEITES 50 mg/L
Resultados Ambiental
0,000
0,003
0,006
0,009
0,012
1 2 3 4 5 6 7
DIA
G
R
A
S
A
S

Y

A
C
E
I
T
E
S

(
m
g
/
L
)
Promedio LSC* Rango

135
DQO RANGO DE CONCENTRACIN 2 mgO
2
/L

Tabla 26. Parmetros estadsticos para construir la carta X Estndar 2mgO2/L

1 1,33 2,66 2,00
2 2,66 2,66 2,66
3 1,33 1,33 1,33
4 1,33 1,33 1,33
5 2,66 2,66 2,66
6 1,33 2,66 2,00
7 1,33 2,66 2,00
Promedio 2,00
S 0,54
LSC 3,62
LIC 0,37
LAS 3,08
LAI 0,91

Grafico 9. Carta de control X DQO 2mg/L
CARTA DE CONTROL X PARA DQO ESTANDAR 2 mg O2/L
Resultados de Validacion
0,00
0,80
1,60
2,40
3,20
4,00
1 2 3 4 5 6 7
DIA
D
Q
O

(
m
g
O
2
/
L
)

136
CARTA DE CONTROL R PARA EL METODO DQO RANGO DE
CONCENTRACIN 2 mgO
2
/L

Tabla 27. Parmetros estadsticos para construir la carta R Estndar 2mgO2/L

1 1,33 2,66 1,33
2 2,66 2,66 0,00
3 1,33 1,33 0,00
4 1,33 1,33 0,00
5 2,66 2,66 0,00
6 1,33 2,66 0,00
7 1,33 2,66 0,00

PROMEDIO 0,190
LSC* 0,621
Grafico 10. Carta de control R DQO 2mg/L

CARTA DE CONTROL R PARA DQO (mgO2/L)
Resultado Validacion
0,000
0,300
0,600
0,900
1,200
1,500
1 2 3 4 5 6 7
DIA
D
Q
O

(
m
g
O
2
/
L
)
Promedio LSC* Rango

137
CARTA DE CONTROL X PARA EL METODO DQO RANGO DE
CONCENTRACIN 20mgO
2
/L

Tabla 28. Parmetros estadsticos para construir la carta X Estndar 20 mgO2/L
1 20,00 21,00 20,50
2 23,00 23,00 23,00
3 20,00 19,00 19,50
4 20,00 20,00 20,00
5 19,50 19,50 19,50
6 20,00 21,00 20,50
7 20,00 20,00 20,00
Promedio 20,43
S 1,21
LSC 24,04
LIC 16,81
LAS 22,84
LAI 18,02


CARTA DE CONTROL X PARA DQO ESTANDAR 20 mg O2/L
15,00
20,00
25,00
1 2 3 4 5 6 7
DIA
D
Q
O

(
m
g
O
2
/
L
)

138
CONCENTRACIN 20mgO
2
/L

Tabla 29. Parmetros estadsticos para construir la carta R Estndar 20 mgO2/L

1 20,00 21,00 1,00
2 23,00 23,00 0,00
3 20,00 19,00 1,00
4 20,00 20,00 0,00
5 19,50 19,50 0,00
6 20,00 21,00 1,00
7 20,00 20,00 0,00

PROMEDIO 0,429
LSC* 1,401

Grafico12. Carta de control R DQO 20mg/L
CARTA DE CONTROL R PARA DQO ESTANDAR 20 mg O2/L
0,000
0,400
0,800
1,200
1,600
1 2 3 4 5 6 7
DIA
D
Q
O

(
m
g

O
2
/
L
)
Promedio LSC* Rango

139
CONCENTRACIN 100mgO
2
/L

Tabla 30. Parmetros estadsticos para construir la carta R Estndar100 mgO2/L

1 98,00 98,00 98,00
2 98,00 98,00 98,00
3 98,00 98,00 98,00
4 112,00 112,00 112,00
5 98,00 112,00 105,00
6 98,00 112,00 105,00
7 98,00 98,00 98,00
Promedio 102,00
S 5,51
LSC 118,52
LIC 85,48
LAS 113,02
LAI 90,98


CARTA DE CONTROL X PARA DQO ESTANDAR 100 mgO2/L
80,00
88,00
96,00
104,00
112,00
120,00
128,00
1 2 3 4 5 6 7
DIA
D
Q
O

(
m
g

O
2
/
L
)

140
CONCENTRACIN 100mgO
2
/L


1 98,000 98,000 0,000
2 98,000 98,000 0,000
3 98,000 98,000 0,000
4 112,000 112,000 0,000
5 98,000 112,000 14,000
6 98,000 112,000 14,000
7 98,000 98,000 0,000

PROMEDIO 4,000
LSC* 13,080


CARTA DE CONTROL R PARA DQO ESTANDAR 100 mgO
2
/L
0,000
3,000
6,000
9,000
12,000
15,000
1 2 3 4 5 6 7
DIA
D
Q
O

(
m
g

O
2
/
L
)
Promedio LSC* Rango

141
CONCENTRACIN 800mgO
2
/L

Tabla 32. Parmetros estadsticos para construir la carta X Estndar 800 mgO2/L

1 798,00 798,00 798,00
2 798,00 798,00 798,00
3 826,00 826,00 826,00
4 798,00 826,00 812,00
5 798,00 826,00 812,00
6 840,00 840,00 840,00
7 798,00 798,00 798,00
Promedio 812,00
S 16,17
LSC 860,50
LIC 763,50
LAS 844,33
LAI 779,67

CARTA DE CONTROL X PARA DQO ESTANDAR 800 mg O
2
/L
750,00
770,00
790,00
810,00
830,00
850,00
870,00
1 2 3 4 5 6 7
DIA
D
Q
O

(
m
g

O
2
/
L
)

142
CONCENTRACIN 800mgO
2
/L


1 798,00 798,00 0,000
2 798,00 798,00 0,000
3 826,00 826,00 0,000
4 798,00 826,00 28,000
5 798,00 826,00 28,000
6 840,00 840,00 0,000
7 798,00 798,00 0,000
PROMEDIO 8,000
LSC* 26,160


CARTA DE CONTROL R PARA DQO ESTANDAR 800 mgO2/L
0,00
6,00
12,00
18,00
24,00
30,00
1 2 3 4 5 6 7
DIA
D
Q
O

(
m
g

O
2
/
L
)
Promedio LSC* Rango

143
CARTA DE CONTROL X PARA EL METODO BUFFER 4.00 UNIDAD

Tabla 34. Parmetros estadsticos para construir la carta X Buffer 4.00

1 4,05 4,04 4,05
2 4,04 4,04 4,04
3 4,05 4,03 4,04
4 4,06 4,06 4,06
5 4,07 4,05 4,06
6 4,06 4,04 4,05
7 4,06 4,05 4,06
Promedio 4,05
S 0,01
LSC 4,08
LIC 4,02
LAS 4,07
LAI 4,03

Grafico 17 . Carta de control X pH 4.00

CARTA DE CONTROL X PARA pH 4,00
4,00
4,02
4,04
4,06
4,08
4,10
1 2 3 4 5 6 7
DIA
p
H

U
n
i
d
a
d

144
CARTA DE CONTROL R PARA EL METODO BUFFER 4.00 unidad
RESULTADOS VALIDACION DEL METODO.

Tabla 35. Parmetros estadsticos para construir la carta R Buffer 4.00

1 4,05 4,04 0,010
2 4,04 4,04 0,000
3 4,05 4,03 0,020
4 4,06 4,06 0,000
5 4,07 4,05 0,020
6 4,06 4,04 0,020
7 4,06 4,05 0,010
PROMEDIO 0,011
LSC* 0,037

Grafico 18. Carta de control R Buffer 4,0

CARTA DE CONTROL R PARA Buffer 4,0
Resultado de Validacion
0,000
0,010
0,020
0,030
0,040
1 2 3 4 5 6 7
DIA
p
H

U
n
i
d
a
d
Promedio LSC* Rango

145

CARTA DE CONTROL X PARA EL METODO BUFFER 7.00 UNIDAD

Tabla 36. Parmetros estadsticos para construir la carta X Buffer 7.00

1 7,02 7,01 7,02
2 7,01 7,00 7,01
3 6,99 7,01 7,00
4 7,04 7,02 7,03
5 7,03 7,02 7,03
6 7,03 7,02 7,03
7 7,03 7,03 7,03
Promedio 7,02
S 0,01
LSC 7,06
LIC 6,98
LAS 7,04
LAI 6,99

Grafico 19. Carta de control X Buffer 7,00
CARTA DE CONTROL X PARA BUFFER 7,00
6,95
6,97
6,99
7,01
7,03
7,05
7,07
1 2 3 4 5 6 7
Dia
p
H

u
n
i
d
a
d

146
CARTA DE CONTROL R PARA EL METODO BUFFER 7.00 UNIDAD

Tabla 37. Parmetros estadsticos para construir la carta R Buffer 7.00

1 7,02 7,01 0,010
2 7,01 7,00 0,010
3 6,99 7,01 0,020
4 7,04 7,02 0,020
5 7,03 7,02 0,010
6 7,03 7,02 0,010
7 7,03 7,03 0,000
PROMEDIO 0,011
LSC* 0,037

Grafico 20. Carta de control R Buffer 7,00

CARTA DE CONTRL R PARA BUFFER 7,00
0,000
0,010
0,020
0,030
0,040
1 2 3 4 5 6 7
Dia
p
H

U
n
i
d
a
d
Promedio LSC* Rango

147

4. FORMATOS DE CAPTURA DE INFORMACIN

Los formatos de captura de informacin son registros en los que se consignan los
datos originales derivados de los procedimientos de anlisis y en los que se
indican las especificaciones de calidad de los parmetros evaluados.

Estos registros tienen como objetivo facilitar al analista la consignacin de datos
generados en los anlisis de rutina, organizar y estandarizar la informacin
primaria generada en el laboratorio de tal manera que se tenga acceso de forma
rpida a los valores, clculos aplicados en muestras y estndares evaluados,
controlar y verificar que las operaciones realizadas durante el desarrollo de los
diferentes mtodos de anlisis cumplen con los requisitos del sistema de calidad.

Para la elaboracin de los registros de las tcnicas Grasas y Aceites, Demanda
Qumica de oxigeno; se tomo como punto de partida los requerimientos exigidos
por la norma ISO/IEC 17025 -2005. Que fueron adaptados a las condiciones de
trabajo del laboratorio Ambiental de ASINAL .

Estos formatos incluyen la siguiente informacin:

- Identificacin clara del nombre del mtodo al cual se refiere.
- Descripcin de los equipos involucrados en el anlisis de acuerdo al cdigo de
equipos manejado por el laboratorio Ambiental.
- Tcnica a la cual pertenece el anlisis.
- Unidades en las que mide el equipo o se reporta el valor obtenido en el
anlisis.

148
- Nombre del analista responsable de la ejecucin de la tcnica y fecha en que
inicia el anlisis.
- Cdigo de identificacin interno de la muestra en el laboratorio
- Registro del valor obtenido durante el anlisis de la muestra natural y de
parmetros que influyan en el calculo final tales como: temperatura,
concentracin de reactivo, volumen utilizado, pesos iniciales y finales.
- Resultado del anlisis de la muestra natural y estndar de control obtenido
despus de realizar los clculos correspondientes.
- Registros de control de calidad y monitoreo de la tcnica: tipo de material de
referencia usado (patrones), concentracin, blancos de reactivos, y otros
parmetros que influyan en l calculo final (temperatura, tiempo, peso).
- Observaciones : registro de detalles que el analista considere relevantes
durante el anlisis, caractersticas de la muestra que influyan en el anlisis,
notas aclaratorias o para recordar en tcnicas en que el resultado no se genera
el mismo da,

149

5. CONCLUSIONES

El laboratorio Ambiental de ASINAL cuenta con el personal, equipos e
infraestructura que permitir acreditar en auditoria ante el IDEAM los parmetros
Grasas y Aceites, DQO, pH.

La implementacin de la norma ISO 17025 en el laboratorio Ambiental de ASINAL
y el aporte realizado donde hice parte, abarco la seccin de esta en cuanto
validacin de tcnicas analticas, cartas de control y formatos de captura de
informacin . Lo que contribuir a la acreditacin del laboratorio en los parmetros
Grasas y Aceites , DQO, pH..

La validacin de los parmetros analticos Grasas y Aceites, DQO y pH permiti
verificar que estos anlisis cumplen con los requisitos particulares para el uso
especfico de la metodologa.

Para el monitoreo continuo de las parmetros analticos validados se hace
riguroso la elaboracin de cartas de control X para el anlisis de medias y las
cartas R o de rangos, son una herramienta primordial tanto para corregir los
errores como para prevenirlos.

Se tiene la necesidad de mantener el sistema de calidad en el laboratorio
mediante procesos bien documentados.

150
6. BIBLIOGRAFA

1. Standard Methods For the examination of Water and Waswater works
Association, Water Control Federation, Apha-Awwa-Wef 1998 Edicin 20.

2. INSTITUTO DE METROLOGIA DE ESTUDIOS AMBIENTALES, Adaptacin de la
GUA ISO/IEC 17025 para el proceso de Acreditacin de Laboratorios Ambientales.
Santa fe de Bogot, junio 24 de 2000.

3. INSTITUTO DE HIDROLOGIA, METEOROLOGIA Y ESTUDIOS AMBIENTALES
(IDEAM).Gua para el Aseguramiento de la Calidad Analtica en laboratorios de
Qumica Ambienta.

4. INSTITUTO DE HIDROLOGIA, METEOROLOGIA Y ESTUDIOS AMBIENTALES
(IDEAM).Protocolo Estandarizacin de Mtodos Analticos.

5. LABORATORIO AMBIENTAL DE ASINAL. Procedimiento para limpieza del material
de laboratorio.

6. OFFICIAL METHODS OF ANALYSIS OF THE ASSOCIATION OF OFFICIAL
ANALYTICAL CHEMISTS, Editado por Kenneth Herlich. Ed 15. 1990. Pg.
680-683.

7. Norma Tcnica Colombiana NTC-ISO/IEC 17025:2005-10-26, Requisitos
Generales para la competencia de ensayo y calibracin.

8. Norma Tcnica colombiana NTC-ISO 9000, Diciembre 15 de 2000

9. Norma Tcnica colombiana 2454, material de vidrio para laboratorio, material
volumtrico de vidrio, mtodos de uso y medicin de la capacidad, 1988-10-05.

10. Norma tcnica Colombiana NTC/ISO 9001, Sistema de gestin de la calidad,
2002-12-15.

151
11. LABORATORIO DE AMBIENTAL DE ASINAL. Manual de Protocolos
Analticos.

12. Programa Estadstico R versin 2.5.0 (2007-04-23) Copyright (C) 2007 The R
Foundation for Statistical Computing

13. SBN 3-900051-07-0

Paginas de Internet:

1. LABORATORIO DE SALUD PUBLICA, Estandarizacin de metodologas
analticas, Bogota,j junio del 2002.
www.Saludcapital.gov.co/secsalud/navleft/investigaciones/articulos/resumen.

152
ANEXO No.1 FOTOS GRASAS Y ACEITES - METODO GRAVIMETRICO

1
2
3
4
5

153
ANEXO No.2 FOTOS DEMANDA QUIMICA DE OXIGENO - METODO REFLUJO
CERRADO TITRIMETRICO

1 2 3
4 5 6
7 8
9 10

154
ANEXO No.3 FOTOS pH - METODO POTENCIOMETRICO

155
ANEXO No.4 PARMETROS QUIMIOMETRICOS UTILIZADOS EN LAS
VALIDACIONES

RECHAZO DE DATOS DUDOSOS EN CADA NIVEL DE CONCENTRACIN

La serie de valores obtenidos para cada muestra se les realizo rechazo de datos,
aplicando la prueba estadstica T, utilizando la siguiente formula:

T= ( X
prom
X
bajo
)/s Para un valor bajo
T= ( X
alto
X
prom
)/ s Para un valor alto

X
prom =
Media de los datos
S = Desviacin Estndar de los datos
X
Alto
, X
Bajo=
= valor dudoso

Es importante aclarar que esta prueba de significacin se utilizo con un nivel de
significacin de 95%, para n mediciones, permitiendo rechazar hasta dos valores,
si excede este limite, el ensayo deber ser repetido.

CALCULO DE LA PRECISIN:

Expresada en trminos de desviacin estndar

S = \ E(Xi X)
n

Xi = i- esima medicione de X
X = medas de los datos

156
CLCULO DEL COEFICIENTE DE VARIACIN:

s
CV = ----------- * 100
---
x

CLCULO DEL PORCENTAJE DE ERROR Y LA EXACTITUD:

Xexp-Xreal
% Error=------------------ * 100
Xreal

PORCENTAJE DE RECUPERACIN:

Para Estndares: C
x
- C
Bk

%R = ------------- * 100
C
A
Donde:
C
x
= Concentracin promedio de las determinaciones
C
Bk
= Concentracin del Blanco (son 14 datos)
C
A
= Concentracin real adicionada

Para Muestras Reales: C
MA
- C
M

%R
M
= ------------- * 100
C
A
Donde:
C
M
= Concentracin promedio de la muestra no adicionada
C
MA
= Medida de la concentracin en la muestra adicionada
C
A
= Concentracin conocida adicionada a la muestra

157
LIMITE DE CONFIANZA (95%)

LC 95% = t student x S

\ n
Donde:
t Student = Valor dado en las tablas
S = desviacin estndar
n = Numero de datos que conforman la muestra

ESTIMACION DE INCERTIDUMBRES

La Incertidumbre es un parmetro asociado al resultado de una medicin y que
caracteriza la dispersin de los valores que pueden ser atribuidos razonablemente
a mensurando (sujeto a diversos factores ambientales, instrumentales, del
analista, durante el proceso de medicin).Se expresa como un intervalo de valores
alrededor del valor medio dentro del cual se espera encontrar el valor verdadero
de la magnitud, con una probabilidad determinada; la amplitud de dicho intervalo
es el resultado del efecto de todas las posible fuentes de variacin que
intervienen en la medicin.

Para Grasas y Aceites

( ) ( ) ( )
2
o instrument
2
Balanza
2
2
|
|
.
|
\
|
+ + +
|
|
.
|
\
|
+ =
l
U
inal
f
finall
inicial
inicial
A
Combinada

Para LA DQO

( ) ( ) ( )
2 2
Equipo
2
nstrumento
i A
combinada U + + =

Para pH

( ) ( ) ( )
2 2
Equipo
2
patron A
combinada + + =

158
Donde;

A
: Incertidumbre estndar Tipo A y es igual S/ n donde s es la desviacin
estndar de las mediciones realizadas y n es el numero de mediciones.

Equipo
: E
lectura
/ 6 donde E
lectura es la exactitud
o la reproducibilidad de lectura. Ver
manual del equipo

3
c
o instrument
s
= Donde
c
s es la incertidumbre del instrumento defecto de fabrica
empleado para hacer los mtodos.

inicial
inicial
: Donde
n
s
p
inicial
= es la incertidumbre de los pesos de los balones vacos
calculada a partir de un numero de repeticiones n; y
inicial
se estima con el
promedio de los pesos de los balones vacos.

inal
f
finall
: Donde
n
s
p
ifinal
= es la incertidumbre de los pesos de los balones con
grasa a partir de un nmero de repeticiones n: y
final
se estima a partir del
promedio de los pesos de los balones con grasa.

Balanza
Es la incertidumbre de la balanza de fbrica con una correccin geomtrica
es decir
3
b
s
.

159

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