Universidad Nacional Autnoma de Honduras

Facultad de Qumica y Farmacia Departamento de Qumica

Laboratorio de Qumica Analtica Cuantitativa QQ-225 Dr. Cesar Urbizo

Investigacin ltimas tcnicas en qumica analtica

Presentado por Nathaly Gabriela Aguilar Banegas 20112002246 Vibian Maria Bonilla Castro 20111005681 Juan Carlos Gamez Garcia 20121002426 Luis Antonio Suazo Palma 20111006108 Jorge Maynor Vargas Zuniga 20111005253 Mario Roberto Montalvan 20111011100

Fecha de Entrega 20 de Noviembre del 2013

INTRODUCCIN

El siguiente informe presenta la investigacin llevada a cabo acerca de las tcnicas en la qumica analtica moderna. En la actualidad existen procesos ms avanzados que los que se practicaban hace algunos siglos, sin embargo estos nuevos procesos tienen sus cimientos en aquellos que ya no se utilizan. El hecho de que estas prcticas ya no se utilizan no significa que estas sean inservibles sino que han sido actualizadas o mejoradas. Tambin existen las tcnicas que son una innovacin completa ya que nunca se haban aplicado. En este informe incluye resmenes de tcnicas como la electroforesis capilar, espectrometra de masas, cromatografa liquida de alta resolucin (HPLC). Tambin se podr observar informacin acerca de las instituciones que utilizan mtodos modernos as como los reglamentos que sirven de gua en la qumica analtica moderna.

BUENAS PRCTICAS DE LABORATORIO (BPL) Definicin. "Es un conjunto de reglas, de procedimientos operacionales y prcticas establecidas y promulgadas por determinados organismos como la (Organization for Economic Cooperation and Development (OCDE), Food and Drug Administration (FDA), etc.), que se consideran de obligado cumplimiento para asegurar la calidad e integridad de los datos producidos en determinados tipos de investigaciones o estudios". Principales principios que abarcan las BPL: 1. Facilidades Adecuadas. Desde el punto de vista del trabajo, para que ste pueda ser realizado por los trabajadores en forma segura y apropiada. Se debe contar con suficientes salas, para que el personal trabaje sin limitaciones de espacio. El propsito y el tipo de producto a analizar deben ser considerados en el diseo de un laboratorio. 2. Personal Cualificado. Es importante contar con personal cualificado. Esto es una decisin de manejo basada en trabajo de calidad. 3. Equipamientos Mantenidos y Calibrados. Emplear equipos mantenidos y calibrados de manera apropiada. Adems disponer de los registros de los mantenimientos. 4. Procedimientos Estndares de Operacin (SOPs). Procedimientos operacionales estndares escritos. Ellos aseguran que cada uno obedezca al nico procedimiento al mismo tiempo, porque no es lo mismo dar las indicaciones en forma oral, o decir que se sigan las indicaciones que aparecen en alguna literatura, donde muchas veces la traduccin no es la ms adecuada, que s estn establecidas por escrito. Es importante esta prctica, tanto para las operaciones de muestreo como en las del procedimiento analtico, porque es una manera de asegurar que la muestra, est en condiciones para el anlisis. Se debe considerar que: slo lo que est escrito existe. Algunos procedimientos estndares de operaciones: Anotar los datos y observaciones en un cuaderno, no en papeles sueltos. Asegurar que muestras, estndares y reactivos han sido etiquetados. Siempre usar material de vidrio limpio. Nunca calentar el material calibrado de vidrio. Usar reactivos para anlisis, a menos que se estipule lo contrario. Y que todos los reactivos contengan garanta de sus lmites mximos de impurezas. Tener cuidado de no contaminar estndares, muestras y reactivos. Hacer muestras en duplicado. Como anlisis, cuando sea posible. Evaluar crticamente todas las mediciones y reacciones si algo est sospechoso. Usar los mtodos estndares para evaluar datos cuantificados. Garanta de calidad, conceptos y operaciones. El chequeo rutinario debe ser realizado por una persona cualificada e independiente. Es uno de los conceptos ms importantes en las BPLs.

La unidad de aseguramiento de calidad tiene la doble responsabilidad de comprobar los procedimientos y resultados. Y de asegurar que el manejo del trabajo est siendo conducido apropiadamente. Para decidir, que haya un alto grado de aseguramiento y que los resultados obtenidos son fiables. Protocolo e Informe Cada estudio tiene que usar su propio protocolo. Pero el formato de ste debe ser establecido bajo una norma. Este protocolo debe ser conservado y cambiar slo unas pocas palabras para aludir a la tcnica empleada, y ser registrado con un nmero de procedimiento estndar. La Implementacin exitosa de las Buenas Prcticas de Laboratorio: requiere regulacin y reconocimiento del rol del elemento humano, en todos los niveles de personal, en el diseo, implementacin y evaluacin de un Programa de Aseguramiento de Calidad. Muchas veces el qumico es el primer responsable del proceso analtico, en el cual se aplican las Buenas Prcticas de Laboratorio. Pero a menudo no es mirado ni considerado en el desarrollo e implementacin de un Programa de Aseguramiento de Calidad. Por lo tanto es deseable disear el programa en el que tenga una participacin decisiva. La importancia de la comunicacin El personal de aseguramiento de la calidad, la direccin y el personal de trabajo del laboratorio, deben trabajar en conjuntos para resolver los problemas y tomar decisiones correctivas de comn acuerdo. La resolucin de un problema de Aseguramiento de Calidad sigue estas interacciones bsicas: definir exactamente el problema, generar las posibles soluciones, evaluacin de stas, decisin mutua de aceptarlas e implementarlas y finalmente evaluacin de la solucin. El resolver el problema aproxima a reconocer la importancia de la interaccin de todos los miembros de la organizacin. Implementacin La fase de implementacin es la ms larga y de alguna manera la ms difcil. Durante la cual el laboratorio empieza a operar bajo las nuevas reglas, es un perodo de adaptacin y de modificacin, donde cada persona debe colocar todo su esfuerzo en el trabajo.

ELECTROFORESIS CAPILAR La electroforesis es una tcnica de separacin e identificacin de sustancias qumicas que se basa en el movimiento o migracin de las macromolculas disueltas en un determinado medio (solucin tampn), como resultado de la accin de un campo elctrico.

Electroforesis Capilar es una versin de la tcnica de Electroforesis en la que la separacin se lleva a cabo dentro de un capilar muy delgado y presenta mejoras sustanciales respecto a la electroforesis convencional en gel, principalmente en cuanto a los pequeos volmenes de sustancia necesaria para el estudio y la rapidez con que se obtienen los resultados del anlisis. La EC ha sido un mtodo muy til para la separacin de protenas (enzimas, hormonas) y cidos nucleicos (DNA y RNA) con gran resolucin y se usa frecuentemente en complemento con otras tcnicas de separacin tales como Cromatografa Lquida de Alta Resolucin (HPLC) y espectrometra de masas.

TIPOS DE ELECTROFORESIS CAPILAR: La electroforesis Capilar en Gel: combina la tcnica de electroforesis con la cromatografa de reparto. Permite la separacin en funcin de la migracin electrofortica y tambin en funcin del peso molecular de las muestras. Se lleva a cabo en una matriz polimrica con estructura de gel poroso, cuyos poros contienen una mezcla tampn donde ocurre la separacin. Estos geles estn contenidos en un tubo capilar. Los geles utilizados son tambin de agarosa y poliacrilamida. Cromatografa Lquida de Alta Resolucin (HPLC) y espectrometra de masas. La Electroforesis Capilar en Zonas: est basada en la separacin de los analitos segn la relacin carga/tamao. En esta tcnica la composicin del tampn es constante manteniendo su fuerza inica y pH en todo el capilar y durante todo el tiempo que dura la separacin. El potencial aplicado hace que los diferentes componentes inicos de la mezcla migren cada uno segn su propia movilidad y se separen en zonas que puedan estar completamente resueltas o parcialmente traslapadas. Entre las zonas completamente resueltas hay huecos ocupados por el tampn. La inyeccin de la muestra al capilar se puede llevar a cabo por gradiente de voltaje (electrocintica) o gradiente de presin (hidrodinmica o hidrosttica) entre los dos extremos del capilar. La deteccin se realiza, por lo general, directamente sobre el capilar (celda de deteccin). El tipo de detector escogido depende de los analitos a determinar, y se escoge aquel que proporcione una sensibilidad elevada para todos los compuestos. La deteccin directa e indirecta ultravioleta-visible (UV-Vis) es uno de los ms usados en EC, aunque tambin es utilizado el mtodo de Fluorescencia, el cual es ms selectivo y sensible. Este mtodo generalmente se combina con el uso de un Lser (fluorescencia inducida por LASER) para la deteccin de sustancias trazas. Se utiliza un lser de moderada intensidad, junto con la capacidad de enfocar un pequeo punto de luz en el interior del capilar. En este procedimiento se realiza una preparacin previa de la muestra para marcar las sustancias a medir con una sustancia fluorescente. La principal dificultad es la alineacin de los componentes pticos de manera tal que la excitacin emisin sean ptimas. En el sistema colineal, la misma lnea ptica es utilizada para enfocar el haz del Lser y para colectar la fluorescencia emitida.

ESPECTROMETRA DE MASAS La espectrometra de masas, es una tcnica de anlisis cualitativo, de amplia utilizacin para la determinacin de estructuras orgnicas, por si sola o en combinacin con otras tcnicas de espectrofotometra. Esta tcnica est basada en la obtencin de iones a partir de molculas orgnicas en fase gaseosa; una vez obtenidos estos iones, se separan de acuerdo con su masa y su carga y finalmente se detectan por medio de un dispositivo adecuado. Un espectro de masa ser, en consecuencia, una informacin bidimensional que representa un parmetro relacionado con la abundancia de los diferentes tipos de iones en funcin de la relacin masa/carga de cada uno de ellos. El principal factor limitante en la espectrometra de masas, es la posibilidad de vaporizacin de la muestra. Como norma general, se puede decir que la condicin necesaria para que se pueda obtener el espectro de un compuesto, es que su presin de vapor sea igual o superior a mm de Hg, a una temperatura tal que la muestra no pirolice (se descomponga); para poder realizar el espectro, no es necesario vaporizar toda la muestra, sino nicamente la cantidad necesaria para alcanzar la presin indicada. La medicin de la relacin masa/carga nos permite tambin saber el peso molecular exacto de la molcula. Es de gran ayuda para industrias como farmacutica, cosmetolgica y de alimentos.

CROMATOGRAFA LIQUIDA DE ALTA RESOLUCIN (HPLC) La Cromatografa lquida de alta presin o Cromatografa Lquida de Alta Resolucin (High pressure liquid chromatography) (HPLC), Tambin se la denomina a veces Cromatografa lquida de alta eficacia o High performance liquid chromatography (HPLC) es un tipo de cromatografa en columna utilizada frecuentemente en bioqumica y qumica analtica; para separar los componentes de una mezcla basndose en diferentes tipos de interacciones qumicas entre las sustancias analizadas y la columna cromatogrfica. En la HPLC isocrtica el compuesto pasa por la columna cromatogrfica a travs de la fase estacionaria (normalmente, un cilindro con pequeas partculas redondeadas con ciertas caractersticas qumicas en su superficie) mediante el bombeo de lquido (fase mvil) a alta presin a travs de la columna. La muestra a analizar es introducida en pequeas cantidades y sus componentes se retrasan diferencialmente dependiendo de las interacciones qumicas o fsicas con la fase estacionaria a medida que adelantan por la columna. El grado de retencin de los componentes de la muestra depende de la naturaleza del compuesto, de la composicin de la fase estacionaria y de la fase mvil.

El tiempo que tarda un compuesto a ser eluido de la columna se denomina tiempo de retencin y se considera una propiedad identificativa caracterstica de un compuesto en una determinada fase mvil y estacionaria. La utilizacin de presin en este tipo de cromatografas incrementa la velocidad lineal de los compuestos dentro de la columna y reduce as su difusin dentro de la columna mejorando la resolucin de la cromatografa. Los disolventes ms utilizados son el agua, el metanol y elacetonitrilo. El agua puede contener tampones, sales, o compuestos como el cido trifluoroactico, que ayudan a la separacin de los compuestos. Una mejora introducida a la tcnica de HPLC descrita es la variacin en la composicin de la fase mvil durante el anlisis, conocida como elucin en gradiente. Un gradiente normal en una cromatografa de fase reversa puede empezar a un 5% de acetonitrilo y progresar de forma lineal hasta un 50% en 25 minutos. El gradiente utilizado vara en funcin de la hidrofobicidad del compuesto. El gradiente separa los componentes de la muestra como una funcin de la afinidad del compuesto por la fase mvil utilizada respecto a la afinidad por la fase estacionaria. TIPOS DE HPLC Cromatografa de fase normal

La cromatografa de fase normal o "Normal phase HPLC" (NP-HPLC) fue el primer tipo de sistema HPLC utilizado en el campo de la qumica, y se caracteriza por separar los compuestos en base a su polaridad. Esta tcnica utiliza una fase estacionaria polar y una fase mvil apolar, y se utiliza cuando el compuesto de inters es bastante polar. El compuesto polar se asocia y es retenido por la fase estacionaria. La fuerza de absorcin aumenta a medida que aumenta la polaridad del compuesto y la interaccin entre el compuesto polar y la fase estacionaria polar (en comparacin a la fase mvil) aumenta el tiempo de retencin. Cromatografa de fase reversa

La HPLC de fase reversa (RP-HPLC) consiste en una fase estacionaria apolar y una fase mvil de polaridad moderada. Una de las fases estacionarias ms comunes de este tipo de cromatografa es la silica tratada con RMe2SiCl, dnde la R es una cadena alquil tal como C18H37 o C8H17. El tiempo de retencin es mayor para las molculas de naturaleza apolar, mientras que las molculas de carcter polar eluyen ms rpidamente. El tiempo de retencin aumenta con la adicin de disolvente polar a la fase mvil y disminuye con la introduccin de disolventes ms hidrofobicos. La cromatografa de fase reversa es tan utilizada que a menudo se lo denomina HPLC sin ninguna especificacin adicional. La cromatografa de fase reversa se basa en el principio de las interacciones hidrofbicas que resultan de las fuerzas de repulsin entre un disolvente relativamente polar, un compuesto relativamente apolar, y una fase estacionaria apolar. Cromatografa de exclusin molecular

La cromatografa de exclusin molecular, tambin conocida como cromatografa por filtracin en gel, separa las partculas de la muestra en funcin de su tamao. Generalmente se trata de una cromatografa de baja resolucin de forma que se suele utilizar en los pasos finales del proceso de purificacin. Tambin es muy til para la determinacin de la estructura terciaria y la estructura cuaternaria de las protenas purificadas. La cromatografa de filtracin molecular es un mtodo de cromatografa en columna por el cual las molculas se separan en solucin segn su peso molecular, o ms precisamente, segn su radio de Stokes. En esta cromatografa, la fase estacionaria consiste en largos polmeros entrecruzados que forman una red tridimensional porosa. A los fines prcticos, las columnas se empaquetan con pequeas partculas esferoidales formadas por esos polmeros entrecruzados. Cromatografa de intercambio inico

En la cromatografa de intercambio inico, la retencin se basa en la atraccin electrosttica entre los iones en solucin y las cargas inmovilizadas a la fase estacionaria. Los iones de la misma carga son excluidos mientras que los de carga opuesta son retenidos por la columna. Algunos tipos de intercambiadores inicos son: i) Resinas de poliestireno, ii) intercambiadores inicos de celulosa y dextranos (geles) y iii) Silica porosa o vidrio de tamao de poro controlado. En general los intercambiadores inicos favorecen la unin de iones elevada carga y radio pequeo. Un incremento en la concentracin del contrain (respecto a los grupos funcionales de la resina) reduce el tiempo de retencin. Un incremento en el pH reduce el tiempo de retencin en las cromatografas de intercambio catinico mientras que una disminucin del pH reduce el tiempo de retencin en las cromatografas de intercambio aninico. Cromatografa basada en bioafinidad

Este tipo de cromatografa se basa en la capacidad de las sustancias biolgicamente activas de formar complejos estables, especficos y reversibles. La formacin de estos complejos implica la participacin de fuerzas moleculares como las interacciones de Van der Waals, interacciones electrostticas, interacciones dipolo-dipolo, interacciones hidrofbicas y puentes de hidrgeno entre las partculas de la muestra y la fase estacionaria. Cromatografa lquida de alta eficacia en condiciones desnaturalizantes (DHPLC) Se trata de un mtodo que se emplea para el rastreo de mutaciones (ya casi totalmente en desuso debido al auge de la secuenciacin), que permite detectar la presencia de variaciones en el ADN aunque no se determinan especficamente cules. En este caso, se utiliza la tcnica cromatogrfica para la deteccin de heterodplex de ADN, en lugar de utilizar un gel para correr las molculas de cidos nucleicos.

DEFOMIN (Direccin Ejecutiva De Fomento a la Minera). Misin Promocin y fomento de todas las actividades mineras tendientes a conseguir un mejor aprovechamiento de nuestros recursos minerales, su beneficio y comercializacin, de manera ecolgicamente sostenible, econmicamente rentable y socialmente beneficiosa. Visin Establecer una Poltica Minera Nacional, capaz de hacer de este sector un rubro importante en el desarrollo econmico y social del pas, con el fin primario de promover el desarrollo y la sustentabilidad en las comunidades donde est afincado cada proyecto minero. Tambin, hacer que esta industria opere utilizando las mejores tecnologas modernas, haciendo a la vez compatible la operacin con el menor impacto que se pueda causar al ambiente. Organizacin y Funcionamiento La Direccin de Fomento a la Minera se identifica con las siglas (DEFOMIN), es una entidad desconcentrada de la Secretaria de Estado en los Despachos de Recursos Naturales y Ambiente, que funcionara con absoluta independencia tcnica, administrativa, presupuestaria y de gestin. La Direccin Ejecutiva de Fomento a la Minera (DEFOMIN), constituye la autoridad minera con jurisdiccin nacional para conocer y agotar en va administrativa todos los asuntos que se sealan en la presente Ley. Son atribuciones especficas de la Direccin Ejecutiva de Fomento a la Minera (DEFOMIN), las siguientes: Dirigir, coordinar, supervisar y ejecutar la Poltica Minera Nacional. Otorgar, modificar y extinguir concesiones mineras y de beneficio y otros derechos obligaciones mineras de conformidad a esta Ley; Consolidar en un sistema de cuadriculas el rea cubierta por las concesiones mineras, permisos generales de explotacin y permisos especiales de explotacin de canteras otorgadas bajo el rgimen del Decreto No. 143 de fecha 26 de octubre de 1968; Fiscalizar, en coordinacin con los Organismos competentes de la Secretaria de Estado en los Despachos de Trabajo y Seguridad Social; y, Salud, el cumplimiento de las normas de higiene y seguridad de las empresas que realicen actividades mineras; Fiscalizar, en coordinacin con los Organismos competentes de la Secretaria de Estado en los Despachos de Recursos Naturales y Ambiente, el cumplimiento de las normas de proteccin, restauracin y manejo sostenible del ambiente, por las empresas minerometalrgicas;

Consolidar, sistematizar, divulgar y mantener disponible en un Banco de Datos permanente y actualizado, informacin sobre los recursos minerales del pas, a travs de un plan de publicaciones, biblioteca abierta y disponibilidad de archivos magnticos; Elaborar y Ejecutar el Manual de Poltica Ambiental Minera. Las dems que le confiere la Ley y su Reglamento. NUEVA LEY DE MINERIA (INHGEOMIN). La nueva Ley General de Minera cre el Instituto Hondureo de Geologa y Minas (INHGEOMIN), que sustituir a la Direccin de Fomento a la Minera (DEFOMIN) y actuar como un ente desconcentrado del Estado, dependiente de la Presidencia de la Repblica.Tendr exclusividad en la competencia que determine la ley, la que ejercer con independencia tcnica, administrativa y presupuestaria. Estar dotado de la capacidad legal necesaria para emitir los actos, celebrar contratos y comparecer ante los tribunales de la Repblica, todo ello en el ejercicio de su competencia. Actuar como ejecutor de la poltica nacional del sector minero en general, con facultad de desarrollar programas, proyectos y planes y de crear las unidades administrativas, tcnicas y operativas necesarias, para cumplir con los fines y objetivos de esta ley. Para su funcionamiento, el INHGEOMIN contar con un Registro Minero y Catastral, y unidades de investigacin y laboratorios, minas y geologa, fiscalizacin minera, ambiente y seguridad, y desarrollo social. En el Reglamento de esta Ley, se desarrollarn las funciones de cada una de las unidades operativas. Atribuciones Las atribuciones del Instituto Hondureo de Geologa y Minas sern proponer, dirigir, ejecutar y supervisar la poltica minera, as como otorgar, modificar y extinguir derechos mineros y otras obligaciones mineras de conformidad a la ley. Adems, fiscalizar, en coordinacin con los organismos competentes de las Secretaras de y Seguridad Social, y de Salud y las Unidades Municipales Ambientales (UMA), el cumplimiento de las normas de seguridad e higiene de las empresas que realicen actividades mineras. Tambin fiscalizar en coordinacin con los organismos competentes de Recursos Naturales y Ambiente (SERNA), el cumplimiento de las normas de proteccin, restauracin y manejo sostenible del ambiente, por las empresas titulares de derechos mineros. Igualmente, adquirir, potenciar y difundir el conocimiento cientfico y tecnolgico relacionado con las actividades del Instituto, mediante la gestin y apoyo a planes, programas y proyectos de investigacin, formacin y desarrollo, proponiendo la correspondiente poltica de Investigacin Cientfica, Desarrollo e Innovacin Tecnolgica, en las materias de competencia del Instituto, en consonancia con el Plan de Nacin y Visin de Pas

BIBLIOGRAFIA

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