1. Introduccin Recursos fitogenticos.

Desde la aparicin de la vida en la Tierra, el proceso evolutivo ha originado una enorme diversidad de especies e individuos que mediante los procesos de seleccin permanente se han adaptado a las diferentes condiciones del globo. Esta variabilidad gentica acumulada resulta esencial para el equilibrio del sistema. Los recursos genticos vegetales son la suma de todas las combinaciones de genes producidos durante el proceso de evolucin de las plantas y se denominan recursos porque implican que el material tiene o puede tener valor econmico o utilitario actual o futuro. Bajo esta definicin se incluyen normalmente las categoras siguientes: variedades de especies cultivadas, tanto tradicionales como comerciales; especies silvestres o asilvestradas afines a las cultivadas o con un valor actual o potencial, y materiales obtenidos en trabajos de mejora gentica (Esquinas Alczar 1993). Los recursos fitogenticos constituyen un patrimonio de la humanidad de valor incalculable y su prdida es un proceso irreversible que supone una grave amenaza para la estabilidad de los ecosistemas, el desarrollo agrcola y la seguridad alimentaria del mundo: Los recursos genticos vegetales de los que depende la seguridad de la alimentacin estn desapareciendo a un ritmo alarmante (FAO, 1996) Con la aparicin de la agricultura, el hombre empieza a intervenir de forma decisiva en la evolucin natural de las plantas que cultiva. Las poblaciones de plantas cultivadas empiezan a sufrir fuertes presiones selectivas debido a las prcticas agrcolas, siendo el resultado la aparicin de caractersticas morfolgicas y fisiolgicas peculiares como pueden ser el gigantismo en los frutos, el aumento de la produccin, la reduccin de la dehiscencia de las semillas, la germinacin rpida y uniforme o la prdida de capacidad de competir con la vegetacin natural. Los cultivos primitivos se fueron extendiendo desde sus lugares de origen, transportados por migraciones primero y rutas comerciales despus, encontrndose condiciones diversas de clima, suelo, vegetacin y otros factores ambientales. De esta forma, las poblaciones de plantas cultivadas evolucionaron de forma diferente segn las caractersticas de las nuevas zonas y las distintas prcticas agrcolas utilizadas y, en numerosos casos, se produjeron intercambios de genes o formacin de hbridos con las especies silvestres de las nuevas localidades. El resultado de la accin del hombre y la seleccin natural a lo largo de miles de aos sobre las miles de especies utilizadas a lo largo de la historia de la humanidad, ha sido el establecimiento de una diversidad vegetal constituida por un enorme nmero de variedades y genotipos locales, caracterizados por su adaptacin a las necesidades humanas y al medio ambiente. Erosin gentica. Desde hace 200 aos, como consecuencia del desarrollo agrcola e industrial y la progresiva unificacin de hbitos culturales y alimenticios, el nmero de cultivos y la heterogeneidad dentro de los mismos han ido descendiendo progresivamente y, en la actualidad, el 90% de la alimentacin mundial est basada en slo unas 30 especies vegetales y unas docenas de variedades. La prdida de diversidad se acentu entre los aos 194050 cuando el desarrollo de la mejora gentica dio lugar a la introduccin de variedades comerciales, uniformes y mucho ms adaptadas a las tcnicas modernas 1

de cultivo y a los nuevos sistemas de comercializacin, siendo incuestionable el beneficio obtenido de ello por una poblacin mundial creciente y subalimentada. Sin embargo, como contrapartida, las variedades modernas, con una base gentica muy reducida, han ido desplazando a innumerables variedades tradicionales, heterogneas y menos productivas, pero altamente adaptadas a su ambiente local y poseedoras de una gran diversidad gentica. La prdida de variabilidad gentica supone una limitacin de la capacidad de responder a nuevas necesidades y un incremento de la vulnerabilidad de nuestros cultivos frente a cambios ambientales o aparicin de nuevas plagas o enfermedades. La hambruna que en el siglo XIX produjo la muerte y emigracin de millones de irlandeses es probablemente el ejemplo ms dramtico constatado del peligro de la uniformidad gentica. La estrecha base gentica de las patatas cultivadas en ese momento en Europa hizo que un ataque de tizn (Phytophtora infestans) arrasase unas cosechas que constituan la base de la alimentacin de Irlanda en esa poca. Otro desastre agrcola causado por la uniformidad de los cultivos tuvo lugar en Estados Unidos en 1970, donde un ataque de taladro (Helminthosporium maydis) destruy ms del 50% de los maizales del Sur, siendo este hecho el detonante para que este pas iniciase una poltica de conservacin de recursos fitogenticos. Muchos casos similares se han multiplicado recientemente, poniendo en peligro la estabilidad econmica y social de algunos pases. El reconocimiento de la erosin gentica como un problema grave tiene lugar en los aos 50, cuando el desarrollo agrcola empieza a alcanzar a las regiones del planeta con mayor diversidad gentica, siendo en este momento cuando se empiezan a poner en marcha medidas globales para preservar los recursos fitogenticos. Acciones que derivaron en la situacin actual de los recursos naturales y las causantes de la erosin gentica vegetal. Se podran destacar las modificaciones producidas en el sector agrario: en un principio se produce el paso de una agricultura tradicional a otra moderna, para satisfacer la demanda alimentaria de la poblacin urbana, se necesita un aumento de las producciones agrcolas. Se producen procesos de concentracin de las explotaciones agrcolas dando lugar a una cada del nmero de estas y de la poblacin activa dedicada a la agricultura; debido al xodo rural y al abandono de las tierras marginales. La agricultura comienza una relacin ms estrecha con el conjunto del sistema econmico, apareciendo la imagen del empresario agrcola e industria agrcola. Esto est ligado a un proceso de modernizacin, derivado de un avance tecnolgico importante que origina grandes modificaciones en las condiciones de produccin agrcola; tanto en el material vegetal como en el cultivo. Adems el fenmeno de internacionalizacin y el marketing, provocan un cambio en los gustos y preferencias de la poblacin, estandarizndolos criterios de calidad de los productos agrcolas en los pases desarrollados. Se imponen los productos perfectos, no perecederos, con ms apariencia que sabor, debido tanto a la produccin fuera de estacin como al propio material vegetal. Luego, los cambios en la densidad de poblacin, el aumento en el nivel de vida de la poblacin desarrollada y el hecho evidente de que ese tipo de agricultura es insostenible y produce problemas severos inmediatos y futuros; hacen que se vuelva a plantear un nuevo cambio en el sector agrario y en las polticas agrarias. Un paso de esa agricultura moderna a otra de carcter sostenible, en la que se mantengan los niveles de produccin para satisfacer las aspiraciones de la poblacin mundial, siendo econmicamente viable, pero sin degradar el medio ambiente y conservando los recursos naturales. El consumidor de esta nueva etapa, empieza a buscar en los productos alimentarios algo ms que apariencia, exige productos de mayor calidad y libres de contaminantes, as como tambin empieza a buscar soluciones a 2

los grandes problemas medio ambientales con nuevos cultivos industriales que produzcan materias primas no alimentarias menos contaminantes. Pero para que esto sea posible, la biodiversidad de las plantas nativas o introducidas resulta fundamental. Biodiversidad agrcola. Dentro del conjunto de la diversidad biolgica es quiz la diversidad agrcola la que tiene un inters ms claro e inmediato para el hombre. Se entiende por biodiversidad agrcola a la totalidad de especies animales, vegetales y de microorganismos y todas las variedades o razas de los mismos, producidas por la accin conjunta y recproca del medio ambiente, los recursos genticos y la gestin y prcticas humanas. Las acciones del hombre a lo largo de la historia de la agricultura son, quiz las que determinan en mayor medida la biodiversidad agrcola de la que disponemos. Los primeros agricultores se limitaban a dispersar en las cercanas de sus viviendas las semillas de frutos que haban recolectado de plantas silvestres. Desde ese momento la variabilidad gentica de las plantas que son sembradas comienza a disminuir, ya que se escogen unas y se rechazan otras. Este proceso transportado a un periodo de miles de aos da como resultado una prdida constante de genes en las poblaciones cultivadas. Es por esta razn que al hablar de biodiversidad son igual de importantes todas las especies cultivadas, todas las variedades de un mismo cultivo, las especies acompaantes de los cultivos, las malas hierbas y las especies silvestres de las que provienen los cultivos. Esta importancia se centra en la existencia de caracteres, en definitiva genes, que pueden estar presentes en unas variedades y en otras no. Muy a menudo cuando se obtienen variedades productivas y apetecibles, ha aparecido otro tipo de problemas, como la sensibilidad a factores ambientales o a enfermedades y plagas, que han tenido que ser solucionados con la ayuda de variedades ms rsticas o de especies silvestres relacionadas. En Espaa debido a la diversidad de climas y condiciones ambientales locales existentes, as como a la influencia de muchas y diferentes culturas a lo largo de siglos, se ha desarrollado una enorme diversidad de productos agrcolas que suponen la base de una alimentacin sana, rica y equilibrada, y que adems aportan productos o materiales de utilidad. La conservacin de los recursos vegetales supone el mantenimiento de las poblaciones, bien sea in situ (en el lugar de sonde provienen) o ex situ (en bancos de colecciones de germoplasma), al considerar que estos materiales son tiles o potencialmente tiles para su uso y manejo actual y futuro. La importancia de la conservacin radica en la potenciabilidad de uso de los recursos a conservar. Es decir, actualmente se utilizan una serie de especies determinadas y determinadas variedades dentro de cada especie. Esto es algo que cambia con el tiempo, en funcin de las demandas de los consumidores, de los problemas que pueden surgir en el cultivo, etc. Antiguamente cada agricultor tena en su huerto unas variedades diferentes a las del vecino, que hoy da conocemos como variedades tradicionales. En la actualidad existe una tendencia muy acentuada hacia el monocultivo, existiendo grandes extensiones de terrenos en las que se cultiva una nica variedad de una misma especie. Esto, que es muy beneficioso a nivel comercial por la homogeneidad de la produccin, es enormemente peligroso a nivel gentico, ya que se produce un importante empobrecimiento de la variabilidad. Esto quiere decir que cuando surge un problema como una enfermedad o una plaga, al igual que ocurri en EEUU, esta afecta a esa gran superficie de cultivo por igual, cosa que no suceda del mismo modo cuando el campo tena varios cultivos y variedades. Con el sistema de cultivos que existe actualmente en nuestros campos la conservacin de la biodiversidad agrcola no es una tarea sencilla. En principio se necesita recolectar el material a conservar, cosa que cada vez es ms difcil por la creciente desaparicin de variedades tradicionales. Tambin es necesario un conocimiento previo de lo que se quiere conservar y cmo debe realizarse el manejo de esos materiales. Hay que conocer cada cultivo y saber en que estado se encuentran sus recursos, qu es lo que ms peligro de desaparicin corre 3

y tener un profundo conocimiento de sus ciclos y requerimientos para poder manejarlo adecuadamente, as como del tipo y condiciones de conservacin ms apropiados, ya que la conservacin no es ms que un paso previo para la posterior utilizacin de los materiales vegetales conservados. Utilidad de la conservacin de los recursos vegetales. La utilizacin y aprovechamiento del material vegetal conservado depende del conocimiento que se tenga de sus caractersticas y utilidad de mantenerlo viable y disponible. El material vegetal conservado se puede utilizar de manera directa o indirecta. La utilizacin directa consiste en introducir los recursos en determinadas zonas en funcin de sus caractersticas. Esto implica la utilizacin con fines productivos, o bien la reintroduccin de especies o variedades en zonas en que se han perdido o dejado de cultivar, o bien la restauracin de hbitats o paisajes, as como aplicaciones industriales directas. La utilizacin indirecta consiste en mejorar las variedades disponibles mediante la introduccin en las mismas de genes de inters provenientes de especies silvestres o variedades tradicionales. Este tipo de utilizacin es lo que conocemos como mejora gentica vegetal y su objetivo es incrementar la produccin o mejorar la calidad o introducir resistencias en los cultivos. Para obtener variedades mejor adaptadas y con rendimientos ms elevados, los mejoradores deben contar con recursos genticos adecuados y suficientes. Los recursos genticos en general, incluyendo cultivares primitivos, malas hierbas y especies silvestres relacionadas son la base para el desarrollo de nuevas variedades. 2. Semillas ortodoxas y recalcitrantes Tiene un gran inters, en cuanto a lo que la conservacin se refiere, la distincin de semillas ortodoxas y recalcitrantes. Las semillas ortodoxas son aquellas que pueden conservarse en condiciones de baja humedad y baja temperatura. Son de este tipo las semillas de leguminosas y cereales de climas templados (trigo, cebada, garbanzo, habas, etc.). Las recalcitrantes son las que no pueden desecarse sin prdida de viabilidad ni mantenidas a baja temperatura sin sufrir daos graves. En este grupo se encuentran entre otras, las de caa de azcar, cocotero, t, caucho, castao y ctricos. Slo se pueden conservar en bancos de semillas las ortodoxas; las especies con semillas recalcitrantes han de conservarse por cualquier otro procedimiento, en particular mediante colecciones de plantas vivas y, en funcin de que sea posible, de cultivo de tejidos in vitro. Se estima que se han colectado y conservan en aproximadamente 1300 bancos de germoplasma unos seis millones de muestras. Pero no todos los bancos ni todas las muestras se encuentran en condiciones ptimas. Una tercera categora de comportamiento de las semillas en almacenamiento ha sido demostrada recientemente con semillas de caf, palma aceitera, papaya y neem; son las denominadas semillas intermedias. La principal caracterstica de este comportamiento es cierta sensibilidad a la desecacin hasta un nivel de humedad relativamente bajo de 7 a 10% (en equilibrio con una humedad relativa ambiental de 3050%). Sin embargo, la longevidad de las semillas secas de origen tropical se reduce en temperaturas bajas (por debajo de 5C) y temperaturas bajo cero. Por esto, las condiciones ideales para el almacenamiento a largo plazo de semillas ortodoxas (5% de contenido de humedad, 18C) son potencialmente dainas para las semillas intermedias y no deben usarse ya que les provoca la muerte en pocos meses. A pesar de esto, es posible almacenar las semillas "intermedias" por periodos de alrededor de 10 aos, desecndolas hasta un 710% de contenido de humedad, y mantenindolas a la temperatura de un laboratorio.

Pruebas sencillas para definir si una semilla es ortodoxa o recalcitrante: A pesar de que es posible hacer presunciones acerca del comportamiento de una especie de semilla en almacenamiento basndose en su tamao, apariencia, historia de vida y filogenia, es necesario hacer pruebas para saber con precisin el comportamiento de cada especie en particular. La prueba se inicia dividiendo una porcin de semillas en dos partes iguales. Se prueba la viabilidad de una de las fracciones de semillas frescas y la otra mitad se somete a una desecacin gradual y cuidadosa antes de probar su viabilidad. Para completar, una prueba adicional que se realiza antes y despus de someter las semillas a congelacin, indicar si las semillas que toleran la desecacin son ortodoxas verdaderas o intermedias.

Nmero de individuos de los cuales deben recolectarse las semillas: Las semillas deben recolectarse a partir del mayor nmero posible de plantas individuales. El mnimo de individuos aceptable para conservar algo de la variabilidad que se encuentra en la poblacin de una localidad es de 30 o ms, siempre y cuando dichos individuos sean producto de reproduccin sexual y no clonal, lo cual no siempre es fcil de percibir. Un nmero mayor de individuos y reas de recoleccin ms amplias permiten una mejor representacin de tal variabilidad. Las semillas de cada genotipo materno deben mantenerse separadas si se desea mejorar la variacin gentica durante la multiplicacin. Cuando se recogen semillas de plantas anuales o perennes de corta vida no debe recolectarse ms de 20% de la cosecha local total, ya que de otra manera podra resultar afectada su posibilidad futura de sobrevivencia. Esto es particularmente importante para las especies de plantas raras, con potencial reproductivo reducido o en plantas en vas de extincin. 3. Anlisis de la semilla La semilla de buena calidad tiene las caractersticas siguientes: reproduce con fidelidad las caractersticas genticas de la especie o cultivar, tiene capacidad para una germinacin elevada, est libre de enfermedades e insectos y est exenta de mezclas con otras semillas de cultivos, semillas de malezas y de material extrao e inerte. La capacidad de germinacin y la pureza de las semillas pueden determinarse haciendo un anlisis de 5

una pequea muestra representativa del lote en cuestin. Dicho anlisis proporciona informacin para cumplir las normal legales, determina la calidad de la misma y permite establecer la densidad de siembra necesaria para tener cierta poblacin de plntulas. Cuando la semilla se ha almacenado por un tiempo largo, es conveniente volver a analizarla. Muestreo El primer paso para llevar a cabo un anlisis de semillas es conseguir una muestra uniforme que represente el lote que se est considerando. Para ello se toman porciones iguales de semillas en partes del lote uniformemente distribudas. Las muestras as tomadas se mezclan y luego se dividen en lotes ms pequeos para tener la muestra de trabajo. La cantidad de semilla requerida para la muestra de trabajo vara segn las clases de semillas. Anlisis de pureza Se entiende por pureza el porcentaje en peso de semilla pura presente en la muestra. Por semilla pura se entiende a la especie, variedad o tipo, que define en forma principal la semilla presente en el lote. Despus de haber pesado la muestra de trabajo, se divide visualmente en: La semilla pura de la clase que se est considerando. Semillas de otras plantas de cultivo. Semillas de maleza. Materia inerte. Al hacer el anlisis de pureza se puede calcular el nmero de semillas puras por kilogramo. Este dato es necesario como gua para ajustar la densidad de siembra. Prueba de viabilidad El porcentaje de germinacin es el nmero relativo de plntulas normales producidas por la semilla pura. Existen distintas pruebas de viabilidad: Prueba de germinacin: se coloca a las semillas en sus condiciones ambientales ptimas de luz y temperatura. Prueba con embriones separados: se separa el embrin de la semilla y se hace germinar l solo, el embrin viable germinar. Esta prueba se usa para determinar la germinacin de semillas de arbustos y rboles cuyos embriones exigen largos perodos de postmaduracin para germinar. Prueba con tetrazolio: es un mtodo bioqumico en el cual se demuestra la viabilidad no por la germinacin, sino por el color rojo que aparece cuando se remojan las semillas en una solucin de TTC (cloruro de 2,3,5 trifeniltetrazolio). El tejido no viviente queda sin teirse. Esta prueba distingue entre los tejidos vivos y no vivos, de una semilla individual, y puede indicar debilidad antes de que la germinacin sea afectada. Anlisis con Rayos X: es posible emplear radiografas de las semillas para detectar en ellas disturbios mecnicos, infestacin de insectos, semillas vanas, nmero de embriones por semilla, el desarrollo del embrin y del endospermo, as como grietas y fisuras debido a daos por condiciones del tiempo. Para lograrlas se pueden emplear agentes de contraste, tales como soluciones de sales o metales pesados. Estos entran en las semillas daadas y penetran en las clulas muertas, pero no en las vivas, debido a su semipermeabilidad. Los rayos X penetran con ms facilidad a travs de las clulas vivas y producen una exposicin en la pelcula. Tratamientos de semillas

Los tratamientos de semillas para controlar enfermedades son de tres tipos: desinfestacin, desinfeccin y proteccin. Los desinfestantes eliminan al organismo presente en la superficie de la semilla. Dentro de este grupo podemos destacar el hipoclorito de calcio, el agua de bromo y el bicloruro de mercurio. Los desinfectantes eliminan los organismos que estn dentro de la semilla. Entre los tratamientos de este tipo se encuentran el agua caliente, el formaldehdo y el vapor aireado. Los protectores son materiales que se aplican a la semilla y que la protegen de los hongos del suelo. Entre los materiales ms antiguos se encuentran ciertos fungicidas de zinc y de cobre. 4. Mtodos de conservacin de recursos fitogenticos En teora, la conservacin puede aplicarse a tres niveles de organizacin: Gnica De organismo Ecolgica Los mtodos de recursos fitogenticos pueden clasificarse en dos grandes categoras: Mtodos de conservacin in situ: Consisten en preservar las variedades o poblaciones vegetales en sus hbitats originales. Mtodos de conservacin ex situ: Consisten en la conservacin en los llamados bancos de germoplasma. 4.1 Conservacin ex situ El objetivo de los bancos de germoplasma es el de conservar al mximo posible la biodiversidad existente para garantizar la posibilidad de usarla en el presente o futuro. Esto surge como respuesta de emergencia ante el grave problema de prdida de biodiversidad (erosin gentica) detectado en la ltima mitad del siglo XX, debido al abandono del cultivo de las variedades locales, sustituidas por variedades comerciales mejoradas mucho ms uniformes. Esta prdida de biodiversidad es un verdadero riesgo para la humanidad, dado que nuestra alimentacin se basa en el aprovechamiento de los recursos genticos vegetales. Para conseguir conservar esta diversidad gentica, se emplean diversos mtodos que permiten distinguir distintos tipos de Bancos de Germoplasma. El ms empleado (por su facilidad) es la conservacin de semillas en condiciones de baja humedad y temperatura. La gran ventaja es que permiten preservar una gran diversidad gentica en un espacio relativamente pequeo, con un coste modesto y durante grandes perodos de tiempo (hasta cientos de aos). El mayor inconveniente, aparte del riesgo de prdidas catastrficas del material conservado, es que las variedades conservadas se separan de su medio natural, lo que supone una necesidad de multiplicarlas y regenerarlas en un ambiente que no es el suyo (alto riesgo de erosin gentica). Otros grandes problemas encontrados al recurrir al material conservado en los bancos de germoplasma, y que son inherentes a los mismos, son: El material proporcionado puede no corresponder exactamente con la variedad que se pretenda obtener debido a la gran variabilidad de nombres locales, posibles mezclas en los procesos de multiplicacin, errores de documentacin,... El material conservado en los bancos no siempre est disponible. Dadas las limitaciones de los bancos de germoplasma, las muestras que se pueden proporcionar de 7

cada entrada son pequeas (del orden de 100 o 200 semillas) La informacin (datos de pasaporte y caracterizacin) que los bancos de germoplasma pueden proporcionar del material que conservan, muchas veces es insuficiente para llegar a conocer como eran las variedades tradicionales de una comarca, ya que con frecuencia no se dispone de datos agronmicos. Por tanto, este tipo de conservacin no debe entenderse como una alternativa de la conservacin in situ (o en finca), sino un complemento de esta. NOTA: A modo de ejemplo del funcionamiento de un banco de germoplasma (en este caso un banco de semillas), ilustramos un protocolo de conservacin empleado en el Centro de Recursos Filogenticos (CRF). 4.2 Conservacin de semillas ortodoxas El proceso a seguir para la conservacin a largo plazo de este tipo de semillas es el que se ilustra a continuacin: 4.2.1. Tcnicas de desecacin El primer paso para asegurar la correcta conservacin de las semillas ortodoxas, una vez recolectadas (en el momento de madurez fisiolgica) y limpias (procurando eliminar al mximo en la limpieza los parsitos que puedan presentar) es su desecacin. Este proceso es de suma importancia para maximizar la longevidad posterior de las semillas, ya que una desecacin incompleta tendra unos resultados catastrficos cuando sometamos a las semillas a bajas temperaturas, en tanto que una desecacin demasiado rpida podra llegar a daar a los embriones. El objetivo del proceso de desecacin es reducir el contenido de humedad de la semilla hasta un valor que permita reducir al mximo su actividad metablica, y evitar daos por congelacin cuando se someta a esta a bajas temperaturas. El valor ptimo depende de las especies, pero sealamos como referencia las Normas Internacionales para Bancos de Germoplasma (FAO/IPGRI 1994), las cuales establecen un contenido de humedad ptimo entre el 3% y el 7%, dependiendo de las especies. Lo primero que se debe hacer es intentar medir el grado de humedad de cada semilla antes de proceder al secado de las mismas. El contenido de humedad de las semillas se puede determinar cuantificando directa o indirectamente el agua que contienen. Las determinaciones directas se pueden hacer mediante mtodos gravimtricos, de cromatografa y de espectrofotometra, y las indirectas mediante mtodos higromtricos, de espectroscopia infrarroja, resonancia magntica nuclear y reacciones qumicas de las semillas. En la actualidad existen en el mercado analizadores electrnicos (humidmetros) que permiten cuantificar con rapidez y exactitud el contenido de humedad de la semilla. Si no se dispone de esa tecnologa, se puede recurrir a los mtodos mencionados en el prrafo anterior, descritos en el manual sobre tecnologa de semillas para bancos de germoplasma y en el protocolo para determinar el comportamiento de las semillas en almacenamiento. Para conseguirla desecacin de las semillas se pueden aplicar distintos mtodos agrupables en: a) Desecacin por medios fsicos: manteniendo las semillas en condiciones de baja humedad ambiental y T controlada. A modo de ejemplo, en el CRF se mantienen las semillas a 20C y 20% de HR durante aproximadamente 12 meses. Para una conservacin a corto plazo, se pueden desecar las semillas al sol (siempre y cuando la t de exposicin no sea excesiva). b) Aadiendo un desecante (el ms usado es el Gel de Slice o Silica Gel) a las muestras de semillas, manteniendo el conjunto de semillasdesecante en un recipiente hermtico. Cuando el gel haya absorbido 8

toda la humedad que pueden retener (se detecta por su cambio de color, de azul intenso a rosa plido) se reemplaza por nuevo gel seco, hasta que ya no vira de color. en ese momento, el contenido de humedad de la muestra ser prximo al 3%. Decir que la desecacin por medios fsicos es mucho ms lenta que la llevada a cabo por el gel, y normalmente no se alcanzan valores tan bajos de humedad. Por este motivo, la desecacin por medios fsicos puede ser ms adecuada para semillas que no admitan una desecacin excesiva o demasiado rpida, tal como parece ser el caso de algunas leguminosas de semilla grande (p.e. judas, habas,...) Desde el punto de vista prctico, la desecacin por medios fsicos se adapta mejor para el manejo de semillas grandes, o grandes cantidades de semillas, en tanto que la desecacin en gel de slice es el mtodo ms cmodo cuando manejamos semillas pequeas, como pueden ser la mayora de las hortcolas. El gel de slice, adems tiene la ventaja de que se puede aadir a los recipientes en los que se conserva la semilla, sirviendo como indicador para detectar si en alguno de ellos ha entrado humedad durante el almacenamiento. En ocasiones puede resultar interesante combinar ambos procedimientos de secado de las semillas, desecndolas primero hasta un 57% de humedad mediante medios fsicos y luego completando el secado hasta un 3% mediante el gel de slice. 4.2.2. Envasado de semillas Una vez que hemos desecado las semillas, y antes de pasarlas a la cmara donde se vayan a conservar, es necesario envasarlas. Existe una amplia gama de recipientes para empacar semillas, de variadas formas y materiales, desde sobres de papel y de aluminio hasta frascos de vidrio y latas de diferentes metales. Ms que la forma o el material, lo que importa del envase es la hermeticidad, es decir, que asle el germoplasma para evitar que absorba humedad y/o se contamine. La eleccin el envase depender de las caractersticas de las semillas y del trmino al cual se espera conservarlas. En la prctica tambin est determinada por los recursos del banco, puesto que as como los envases varan en forma y materiales, tambin varan en costos. Los envases hermticos, por ejemplo, son ptimos pero costosos. La inversin depender de lo que se desee hacer con el material. En resumen, los tipos de envases, juntos con sus ventajas e inconvenientes, son: Envases de vidrio: Son los mejores recipientes para la conservacin a cortomedio plazo, sobre todo con un buen cierre, tipo tarro de mermelada (mejor si van provisto de una junta de goma). Estos tienen como ventaja que se pueden acceder a las semillas de su interior sin necesidad de desecharlos, teniendo que cuidar que siempre queden bien cerrados y manipular en un ambiente bien seco. adems, al ser transparentes, permiten aadir en su interior una pequea cantidad de gel de slice que nos servir de testigo para comprobar si en algn bote ha entrado humedad. Envases de plstico: Estos no son recomendables para conservar las semillas a medio o largo plazo, puestos que los plsticos no son totalmente hermticos al vapor de agua Envases metlicos con cierre hermtico (tipo lata de conserva, no con rosca): son muy adecuados para la conserva de semillas a largo plazo, por su resistencia y hermeticidad, pero tienen el inconveniente de que cada vez que se accede al material hay que desechar la lata, por lo que resultan poco apropiados para la conservacin a corto y medio plazo. Sobres de aluminio trifoliado: Pueden no ser totalmente hermticos (depende del material y del sistema empelado para sellarlos), por lo que convendra comprobarlos antes de utilizarlos. En cualquier caso, por su facilidad de manejo son muy tiles para conservacin a corto o medio plazo, y tambin para distribuir las semillas. 9

4.2.3. Condiciones de almacenamiento Las condiciones en que se mantienen las semillas, una vez desecadas y envasadas, depende del plazo de tiempo para el que se pretendan conservar, as como los medios disponibles. Si la conservacin se realiza a mediolargo plazo (ms de 10 aos), puede ser conveniente sacar peridicamente muestras de semillas para hacerles un ensayo de germinacin que nos permita determinar si las condiciones de conservacin estn siendo las correctas. Segn el plazo que queramos tener almacenadas las semillas, se les aplicar un tratamiento u otro: A corto o medio plazo (p.e. durante 15 aos): No es necesario mantenerlas a temperaturas muy bajas, siempre y cuando hayan sido correctamente envasadas y desecadas. Una temperaturas de unos 4C, que es la que puede proporcionar una nevera domstica, puede ser suficiente para conservar la mayora de las semillas durante muchos aos, siempre que las mantengamos secas durante todo ese tiempo. Es necesario que la temperatura se mantenga lo ms estable posible durante todo el periodo de conservacin. A largo plazo: Para este tipo de almacenaje si es conveniente mantener las semillas a una temperatura ms baja. As, por ejemplo, en las cmaras de conservacin en las cmaras de conservacin del CRF , la coleccin activa (disponible para los usuarios) se mantiene a 4C, envasada en botes de vidrio, en tanto que la coleccin base (destinada a la conservacin a largo plazo) se mantienen en latas metlicas y a 18C. En desecacin a 20C y 20% de HR para semillas grandes (cereales, leguminosas, calabazas,...) y mediante gel de slice cuando se trata de semillas pequeas (la mayora de las hortcolas, forrajeras y armaticasmedicinales). Otros factores ambientales distintos de la temperatura y la humedad parecen tener poca influencia en la conservacin de las semillas. As, por ejemplo, las pruebas realizadas por diversos autores sobre la influencia de la composicin de la atmsfera en contacto con las semillas no han llegado a nada concluyente. Aunque s parece que a muy largo plazo los gases producidos por el metabolismo embrionario acabaran envenenando a las propias semillas, en esas condiciones de baja humedad y temperatura este metabolismo es tan lento que no debera afectar incluso durante largos periodos de conservacin. Lo que s resulta conveniente es que las cmaras de conservacin se mantengan a oscuras (si se utilizan recipientes transparentes para las semillas), excepto, claro est, cuando se tenga que acceder a su interior. 4.2.4. Otros tipos de conservacin En este apartado, queremos detallar brevemente otros dos tipos de conservacin de semillas no tan extendidos como los ya comentados antes: 4.2.4.1. Crioconservacin La crioconservacin consiste en colocar los explantes en nitrgeno lquido (196C) para detener su crecimiento pero conservando la viabilidad y la estabilidad gentica y fisiolgica. Es una tcnica reciente y con buenas perspectivas, pues permite almacenar por perodos indefinidos cualquier especie que tolere y sobreviva al congelamiento. Por esta razn, resulta particularmente til para conservar especies de semilla no ortodoxa o de reproduccin vegetativa, difciles de conservar en cmaras o en campo (Ashmore 1997; Benson 1999; Engelmann 2000). La crioconservacin consiste en a) cultivar el explante in vitro (precrecimiento), b) desecarlo al mnimo permisible segn la especie, c) tratarlo con crioprotectores (glicerol, sacarosa, manitol, prolina, polietilenglicol) para evitar la cristalizacin de lquidos intracelulares, d) congelarlo en nitrgeno lquido, e) almacenarlo, f) descongelarlo y g) tratarlo para recuperar plantas viables (Wang et al. 1993; Rao y Riley 10

1994; PrezRuz 1997). El xito de la crioconservacin depende de la reaccin de la especie al congelamiento por lo que requiere protocolos especficos. Existen diversas tcnicas como la deshidratacinencapsulacin, la vitrificacin, la encapsulacinvitrificacin, la desecacin, el precrecimiento, el precrecimientodesecacin y el goteocongelamiento (Ashmore 1997) pero las investigaciones en este campo, como las que realiza el CIP (Per) con papas tolerantes al congelamiento y el CIAT con yuca, todava se basan en el ensayo y el error (Rao y Riley 1994). La metodologa tiene limitantes siendo las principales la dificultad y el tiempo requeridos para regenerar plantas completas a partir de las estructuras conservadas. 4.2.4.2. Conservacin in vitro El cultivo in vitro cobra cada vez mayor importancia como herramienta de conservacin e intercambio de germoplasma porque permite mantener un amplio rango de especies, en diversidad de muestras sanas y en poco espacio, e intercambiarlas fcilmente. Sin embargo, requiere tecnologa y conocimientos an en desarrollo, protocolos para cada especie y recursos considerables por lo que conviene evaluar la alternativa de conservar germoplasma in vitro frente a otras opciones de conservacin, y aplicarla principalmente en aquellas especies difciles de conservar como semilla o en campo. 4.2.4.3. Ozonoterapia A ttulo anecdtico, pudimos encontrar en internet una empresa que se dedica a aplicar un tratamiento con ozono, no slo para la conservacin de las semillas y granos almacenados (sobre todo los cereales), sino para la prevencin de plagas que se alimentan de estos cuando se encuentran almacenados. Adems, aporta otras ventajas: Eliminacin de fuentes generadoras de calor para el secado, no produce contaminacin por el "no" uso de combustibles. Reduccin del consumo energtico a valores mnimos. La energa elctrica que utiliza se reduce a 50 Kw/h total para el secado de 100 tns. Su sistema integral de tratamiento del aire / oxigeno utilizado no permite el ingreso de polvo gases externos microbios hongos contenidos en la humedad ambiente virus y bacterias. La principal materia prima utilizada para el tratamiento es el aire de costo cero. En el mismo procedimiento de secado se realiza el tratamiento fitosanitariodescontaminacin, otorgndole al cereal mxima calidad y pureza, y conservar as todas sus propiedades. No genera ningn tipo de riesgos a la salud para el operador y personal en general de la planta. Conservacin in situ Idealmente, la forma ms apropiada de conservar una entidad biolgica es dentro del ecosistema del que naturalmente forma parte. En la conservacin in situ no slo se preservan cada uno de los componentes del ecosistema sino tambin todas sus relaciones recprocas y se permite la continuacin de los procesos evolutivos de las plantas. La conservacin in situ resulta especialmente adecuada en las especies silvestres y presenta menos problemas que en las plantas cultivadas debido a que sus hbitats son ecosistemas naturales en los que no interviene la accin humana. La conservacin in situ de las especies silvestres implica la adecuada proteccin y gestin de los ecosistemas en los que habitan y, para ello, existen un gran nmero de figuras de salvaguardia de espacios naturales (parque natural, parque nacional, reservas, etc.). Los costes de este tipo de conservacin disminuyen cuando en la zona protegida estn concentradas diferentes especies. Contrariamente, cuando las reas de distribucin 11

de las plantas son demasiado extensas el establecimiento de medidas de proteccin se dificulta por su coste y su interferencia con otras actividades humanas. En Espaa, el nmero de reas protegidas ha crecido espectacularmente en los ltimos aos, existiendo actualmente ms de 500. Segn el estudio hecho por GmezCampo (1997) estas zonas incluyen un alto porcentaje de especies endmicas o amenazadas, aproximadamente el 95% en Canarias, el 80% en Andaluca y el 100% en Baleares. La conservacin in situ de variedades locales, denominada actualmente conservacin en finca implicara en un sentido estricto el cultivo de estos materiales en sus zonas de origen y con las tcnicas tradicionales. En general, este tipo de conservacin ha sido considerada problemtica por su complejidad y coste ya que, en principio, precisara de constante supervisin y de incentivos a los agricultores para compensar los menores rendimientos de las variedades tradicionales. Sin embargo, en los ltimos aos, ha creado gran expectacin en el mbito internacional, ha visto incrementado el nmero de proyectos e iniciativas para respaldar y fomentar la ordenacin, conservacin y mejora de los recursos fitogenticos en explotaciones agrcolas. Desde una perspectiva real, la conservacin en finca de variedades locales parece poco viable si no se realiza con un enfoque de utilizacin. En este sentido, el desarrollo de sistemas agrcolas sin grandes insumos (mano de obra, materia prima, energa, parte del equipo, capital amortizado, etc.), ms respetuosos con el medio ambiente y ms diversificados; en resumen, ms sostenibles ofrece buenas expectativas para revalorizar y preservar la diversidad gentica contenida en los cultivares tradicionales, especialmente adaptados a este tipo de agricultura. Adems, las variedades locales pueden ofrecer unas caractersticas de calidad organolptica en cuanto a diversidad de sabores, aromas, aspecto, etc., que son valoradas cada vez ms positivamente, al menos en un sector de la poblacin dentro del mundo desarrollado, como ya se coment anteriormente en la introduccin de este trabajo. En la recuperacin del cultivo de variedades tradicionales es de destacar la labor reciente que desde hace unos aos realizan muchos grupos de agricultores biolgicos y organizaciones de tipo no gubernamental o similares, muchas de las cuales poseen la ventaja de aportar una fuerte concienciacin y un espritu altruista en mayor o menor grado. PRINCIPALES PROBLEMAS En la mayora de los pases existe la infraestructura mnima adecuada para la conservacin ex situ de los recursos filogenticos, es decir, bancos de germoplasma de semilla, y en algunos la infraestructura para el mantenimiento de colecciones in vitro. Sin embargo, el problema comn es la falta de recursos para desarrollar actividades propias de mantenimiento de las colecciones, situacin que conduce a que muchas veces los bancos de germoplasma sean solamente depsitos de semillas. &Las facilidades disponibles de conservacin ex situ de cada pas no son utilizadas de forma coordinada por las distintas instituciones, incrementndose innecesariamente los costos de infraestructura y mantenimiento. &Se carece de listas de especies o grupos de especies prioritarias para la conservacin ex situ, conservndose especies no prioritarias, dejando en muchos casos de lado las ms importantes para el mejoramiento o por su susceptibilidad a sufrir erosin gentica. &Las muestras genticas (diversidad entre y dentro de poblaciones) y los tamaos de las entradas no son en muchos casos los ms recomendados, dndose en muchas especies un efecto fundacional importante, debido a que la variabilidad ingresada a los bancos de germoplasma no es representativa de las frecuencias de 12

genotipos originales. &Se constata una alta proporcin de entradas conservadas en bancos de germoplasma de la regin que no cuentan con datos suficientes, faltando inclusive los datos de pasaporte. detectan importantes problemas de erosin gentica, muchas veces porque las muestras no son suficientemente grandes, o porque existen problemas metodolgicos en la multiplicacin y/o regeneracin. muchas especies no existen los conocimientos biolgicos necesarios para la conservacin ex situ, particularmente en especies silvestres de las que no se dispone de protocolos previamente desarrollados. monitoreo de las colecciones no es realizado con la frecuencia y mtodos adecuados. No existen o son insuficientes las facilidades para la regeneracin de las especies conservadas, siendo particularmente grave en las especies algamas. &El nmero y capacitacin del personal tcnico es en general , escaso, situacin que afecta al conjunto de actividades en torno a la conservacin ex situ. En definitiva, la carencia de infraestructura y/o la falta de recursos para el mantenimiento, as como el nmero limitado de tcnicos especializados, han llevado a que ciertos pases no cuenten con posibilidades de conservar el patrimonio fitogentico de sus pases, los cuales, en muchos casos, estn siendo colectados y conservados en bancos de germoplasma de pases desarrollados, quienes ven en muchos de stos, un producto estratgico potencial. ESTRATEGIAS PROPUESTAS A continuacin se sealan los principales puntos para la resolucin de los problemas planteados para la conservacin ex situ de los recursos fitogenticos: Realizar un mejor aprovechamiento de las facilidades disponibles de conservacin ex situ en los pases, las cuales podrn canalizarse a travs de un Sistema Nacional de Recursos Genticos en el que participen todas las instituciones involucradas en la conservacin ex situ e in situ. Establecer listas en cada pas con las especies o grupos de especies prioritarias que requieran conservacin ex situ. Apoyar la consolidacin de la infraestructura de conservacin ex situ en los pases menos desarrollados, incluyendo facilidades para la regeneracin o multiplicacin de las entradas conservadas, contemplando en particular el caso de las algamas. Incluir actividades rutinarias de monitoreo, multiplicacin y regeneracin antes de que los niveles de viabilidad lleguen a lmites que causen erosin gentica irreversible. % Promover la investigacin cientfica en nuevos mtodos y tcnicas de conservacin ex situ, as como en aquellas especies en que no existe protocolos mnimos. Se deben generar lneas de investigacin que aseguren los conocimientos necesarios para que las especies conservadas sean adecuadamente multiplicadas o regeneradas, manteniendo la representatividad de la variabilidad existente en las poblaciones naturales. % Apoyar actividades y proyectos de investigacin que fomenten la complementariedad entre mtodos in situ y ex situ de conservacin. % Facilitar el uso de germoplasma vegetal a travs de la documentacin adecuada de la informacin 13

disponible en las colecciones nacionales, haciendo espectacular nfasis en la informacin inicial que acompaa la entrada. Integrar dicha informacin a una base de datos nacional disponible en internet; analizar efectivamente la informacin con el propsito de proponer colecciones nucleares; y finalmente, estandarizar la informacin a nivel de la regin ( por ejemplo, informacin de pasaportes y firmas de colectas unificadas). % Procurar los mecanismos necesarios para el intercambio de conocimientos ligados a la conservacin ex situ de recursos fitogenticos en los pases menos desarrollados. Esta iniciativa debera propiciar la coordinacin y complementacin en el uso de tecnologas, espacios de formacin y capacitacin, ejecucin de talleres internacionales, cursos y pasantas. % Capacitar personal responsable de las diferentes etapas en el manejo de los bancos de germoplasma, especialmente a nivel semitcnico. % Promover un protocolo comn entre los pases menos desarrollados de acceso al germoplasma conservado en los bancos activos, as como un cdigo de conducta que regule al recoleccin y/o intercambio de muestras de especies y recursos genticos por parte de los investigadores. % Concienciar a los niveles tcnicopolticos sobre el papel de la conservacin ex situ para la efectiva utilizacin de los recursos fitogenticos, desterrando el concepto de servicio o depsito de entrada. 5. Manipulacin gentica de semillas LA TECNOLOGA TERMINATOR: La tecnologa Terminator es la aplicacin de una patente genrica para el control dela expresin de los genes de las plantas. Bsicamente, es un mecanismo suicida que puede ser activado por un estmulo exterior especfico ( choque trmico, osmtico, composicin qumica especfica) y como resultado las semillas de la siguiente generacin se autoenvenenan y se destruyen. El estmulo especfico desencadenante es el antibitico tetraciclina que se aplica a las semillas antes de su venta. Cmo funciona la tecnologa Terminator? La versin principal de Terminator es un conjunto de 3 genes que se insertan en una planta G1, G2 y G3. ( otras versiones reparten estos genes entre dos plantas que se cruzan por polinizacin) El resultado final es siempre el mismo: la siguiente generacin de planats produce semillas muertas. G1: Promotor: promotor LEA abundante en la embriognesis tarda Espaciador: fragmento de DNA con ambas secuencias de reconocimiento LOX. El espaciador acta como un elemento de seguridad ya que no deja que el gen de la toxina se active. Gen de la toxina: gen RIP ( protena inhibidora del ribosoma) G2: Gen promotor: un promotor que se puede suprimir. Gen de la recombinasa: CRE/LOX: sistema de un virus bacterifago. G3: 14

Sistema reprimible con tetraciclina. Promotor Gen del represor. Cuando el estmulo escogido en este caso la tetraciclina se aplica a las semillas antes de venderse se consigue bloquear el represor producido por G3 y en consecuencia el gen de la recombinasa G2 se transcribe. El enzima fabricado acta entonces como unas tijeras moleculares que corta el gen espaciador G1 por sus extremos. La eliminacin de estos fragmentos hace posible la sntesis de la toxina. Puesto que esto sucede en las ltimas etapas de la maduracin de la semillas provoca la muerte de sta. El mercado de semillas transgnicas esta dominado por Monsanto, empresa multinacional que posee casi exclusivamente el monopolio de bancos de semillas transgnicas. 6. Visita al centro de Conservacin de la Biodiversidad Agrcola de Tenerife. Este centro lleva abierto aproximadamente 1 ao y medio. Se encuentra ubicado en el municipio de Tacoronte y al l llegan numerosas variedades distintas de semillas con el fin de conservar la biodiversidad agrcola de nuestra isla. Una vez que llegan a este centro dichas semillas se las somete a una serie de procesos para su almacenamiento y posteriormente devueltas al agricultor cuando las condiciones sean las adecuadas para su cultivo y finalmente su germinacin. Ahora pasaremos a detallar los pasos desde que llegan las semillas al centro: Recepcin En este primer paso, las semillas llegan y son depositadas en bolsas de embalar debidamente etiquetadas con el nombre de la especie al que corresponda o con unas siglas de identificacin. 2. Limpieza Este paso es muy importante. Tras la llegada de las semillas, de un determinado tipo, hay que separarlas. Hay que tener cuidado ya que aunque tengamos una bolsa etiquetada que indica que su contenido es de un determinado tipo de semillas, tenemos que comprobarlo y para esto existe este paso de limpieza el cual se realizar a mano. Se irn seleccionando las semillas y verificando el tipo de una a una. Si vemos que alguna no coincide con el tipo de semillas que nos dieron se retirar del resto para no mezclarlas. Las semillas a medida que vamos observando una a una, las vamos introduciendo en un bote de cristal etiquetado. Aquellas semillas enfermas se sacarn del resto de semillas para estudiar su patologa : hongos, virus,.... Tambin la limpieza y separacin de semillas se podra realizar mediante tamizado con varias mallas de poro variado. 3. Secado Para correcta conservacin, las semillas deben ser desecadas y eliminar la humedad que puedan tener. Esto se consigue gracias a que se introducen en los botes de cristal unas pocas piedritas de gel de slice. El gel de slice absorber la humedad de las semillas. El color inicial de estas bolitas de gel de slice es anaranjado que indicar que las bolas estn secas y por lo tanto captarn bien la humedad de las semillas. En cambio, estas bolitas se tornarn a color ms oscuro cuando estn hmedas por lo que ya no serviran y habra que 15

reciclarlas. Cuando bolitas estn oscuras se las mete en estufa para que pierdan la humedad y as puedan ser de nuevo utilizadas. 4. Refrigeracin Ahora el ltimo paso en la una correcta conservacin de semillas es introducirlas en una nevera. La temperatura de la misma depender de si estamos trabajando con semillas de corto medio o largo plazo. Por ejemplo: para semillas de corto plazo se conservaran a 5C y las de largo plazo a unos 20C. Dependiendo ya del tipo de semilla, podr ser conservada ms o menos tiempo hasta que lleguen las condiciones adecuadas de germinacin para ser entregados, dichas colecciones de semillas, a los agricultores para su posterior siembra. Aqu trabajan con semillas de avena, trigo, cebada, judas, millo,... A parte de este tema de conservacin de semillas, actualmente este centro est estudiando distintas variedades de castaas que se encuentran en Tenerife. Hasta el momento ya han sido descritas 15 variedades distintas. 8. Conclusiones La conservacin in situ y ex situ, en sus diversas modalidades, deben considerarse como mtodos complementarios y no excluyentes para lograr el objetivo comn de preservar los recursos fitogenticos, siendo necesaria la colaboracin y coordinacin entre los distintos sectores implicados instituciones, bancos de germoplasma, agricultores, grupos sociales, etc para conseguir una integracin armnica y equilibrada de ambas estrategias. 9. Bibliografa Artculos: Mayor, P. , Escudero, M. C., Catal, M. S. Y Costa, J. Conservacin de Recursos Fitogenticos Agrcolas (I). En Agrcola Vergel, mayo 2002 Centros de Recursos Fitogenticos en Espaa. Desire Afonso Morales. Cabildo Insular de Tenerife. Centro de Conservacin de la Biodiversidad Agrcola de la isla de Tenerife. Curso de: La conservacin de los recursos fitogenticos agrcolas: Teora y Prctica. 15/01/04 al 26/01/04. Facultad de Farmacia Pginas webs: http://www.biodiv.org/

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Programa Cooperativo Europeo para Recursos Genticos: http://www.cgiar.org/ecpgr Convenio sobre Diversidad Biolgica: http://www.biodiv.org INIA (Instituto Nacional de Investigacin y Tecnologa Agraria y Alimentaria): http://www.inia.es http://www.formarse.com.ar/ozonoterapia/tratamiento%20semillas%20cereales.htm http://www.fao.org/montes/foda/wforcong/publi/v2/t8s/15.HTM http://www.uaaan.mx/DirInv/texthtml/ccdts.htm http://www.aldearural.com/subcategorias/documentacion/reunionreddesemillas.htm http://www.iespana.es/naturaeduca/agro_reprod_semillas.htm http://www.iespana.es/sabores/Conservando_nuestras_semillas.htm http://www.infoagro.com/semillas_viveros/semillas/control_semillas.asp http://www.ecologistasenaccion.org/article.php3?id_article=26 http://www.unesco.org/courier/1999_06/sp/ethique/txt1.htm http://canales.laverdad.es/cienciaysalud/4_3_17.html www.seednews.com www.uchile.cl Conservacin en el mbito mundial: The Convention on Biological Diversity (CBD) http://www.biodiv.org/ The global Plan of Action for the Conservation and Sustainable Use of Plant Genetic Resources for Food and Agriculture http://www.fao.org/inicio.htm The World Heritage Convention http://www.unesco.org/ The Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Flora and Fauna (CITES) http://www.cites.org/ The Convention on Wetlands of International Importance http://www.ramsar.org/ UNESCO Man and the Biosphere programme (MAB) http://www.unesco.org//mab/ Conservacin en el mbito europeo:

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The convention on the conservation of European Wildlife and Natural Habitats (Bern Convention) http://www.ecnc.nl/doc/europe/legislat/bernconv.html Directiva de habitats y especies 92/43/CEE http://europa.eu.int/comm/environment/nature/habdires.htm The PanEuropean Biodiversity and Landscape Diversity Strategy http://www.strategyguide.org/ The European Community Biodiversity Strategy http://biodiversitychm.eea.eu.int/> Conservacin en el mbito nacional: Ministerio de Medio Ambiente http://www.mma.es/conserv_nat/biodiv/especies/index.htm Real Decreto 1997/1995 http://www.mediterranea.org/cae/real_decreto_19971995_biodiversidad.htm Conservacin en el mbito de la comunidad autnoma: Conselleria de Medi Ambient http://www.cma.gva.es/ Conservacin de hbitats prioritarios en la Comunidad Valenciana http://www.microhabitats.org/Life/ Conservaci i gesti d'espais forestals a les muntanyes valencianes http://www.uv.es/~ramos/gan/marzo.html Otros Microreserves capture Valencia's special flora http://www.planttalk.org/Pages/14micros.html Boletn de la Comisin de Flora del Comit Espaol de la UICN http://www.uam.es/otros/consveg/ OBTENCIN DE MUESTRA EXPEDICIONES DONACIONES DUPLICADOS BANCOS RECEPCIN Y LIMPIEZA DESECACIN (<7% de humedad) CONTROL DE VIABILIDAD CONSERVACIN EN CMARAS FRAS COLECCIN BASE COLECCIN ACTIVA 18 C 4 C 18

CARACTERIZACIN Y EVALUACIN INTERCAMBIO DATOS DE PASAPORTE DATOS DE GESTIN DATOS DE CARACTERIZACIN PROTOCOLO DE CONSERVACIN DE SEMILLAS DEL CENTRO DE RECURSOS FITOGENTICOS MULTIPLICACIN RECOLECCIN LIMPIEZA DESECACIN ENVASADO HERMTICO CONSERVACIN EN FRO

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