CULTIVOS MICROBIANOS Un medio de cultivo es una mezcla de compuestos que sirven de alimento a los microorganismos para favorecer su crecimiento

y multiplicacin. Segn su finalidad podemos clasificar los medios en: -Medios generales: aportan nutrientes para cualquier tipo de microorganismos. -Medios especiales: contienen algn compuesto que favorece la multiplicacin de un tipo de microorganismo concreto (enriquecidos, selectivos o diferenciales. Los mtodos de cultivos tienen dos objetivos: Aislar el mayor nmero de organismos que haya en un lugar, es importante en ecologa. Aislar organismos especficos, como por ejemplo en una infeccin intestinal un determinado organismo patgeno. Para el primer caso se utiliza una amplia variedad de medios y condiciones de cultivos. Y para el segundo caso, un medio de cultivo donde solo crezca el organismo que nos interesa o se pueda distinguir ste de los dems. En los cultivos microbianos hay que tener en cuenta. Medios de cultivo adecuado. Los mtodos de cultivos tienen dos objetivos: Aislar el mayor nmero de organismos que haya en un lugar, es importante en ecologa. Aislar organismos especficos, como por ejemplo en una infeccin intestinal un determinado organismo patgeno. Para el primer caso se utiliza una amplia variedad de medios y condiciones de cultivos. Y para el segundo caso, un medio de cultivo donde solo crezca el organismo que nos interesa o se pueda distinguir ste de los dems. * Los medios de cultivos pueden ser slidos o lquidos, los medios slidos se utilizan para poder aislar de modo independientes diferentes organismos porque cada uno de ellos dar lugar a una colonia que se origina de una nica clula. Los medios lquidos se utilizan para trabajar con un microorganismo que ya se ha aislado y por tanto es un cultivo puro. Los medios slidos contienen agar-agar, polisacrido derivado de un alga y que hay pocos microorganismos que pueden degradar, dando un soporte estable. * Para poder aislar los microorganismos que nos interesan los medios de cultivos pueden contener fuentes de carbono y de nitrgenos especficas que

permitan el crecimiento de unos organismos y no de otros; pueden contener un compuesto txico al cual el organismo que queremos aislar sea resistente (por ejemplo un fungicida si queremos permitir el crecimiento de bacterias y no de hongos) y tambin se puede aadir un compuesto que cambia de color cuando se degrada permitiendo de ese modo identificar el organismo que lo degrada. * Adems de estas condiciones nutricionales, hay que tener en cuenta la concentracin de oxgeno (nos permite distinguir entre aerobios y anaerobios) y la temperatura de crecimiento (30 o 37 C) a la que se hace el cultivo. Mtodos de siembra y aislamiento Siembra por agotamiento. Se utiliza un asa de siembra se comienza haciendo una estra en una esquina de la placa, sobre una esquina de esta estra se vuelve hacer otra estra y as varias veces terminando una siembra en zigzag de modo que al final se tienen colonias aisladas. Siembra por dilucin. Se hacen diluciones seriadas de la muestra y luego se siembran y se utilizan las placas en las que haya colonias aisladas.

Mtodos de identificacin. Se basa en la fisiologa de los microorganismos. La distincin entre bacterias y hongos se hace esencialmente en base al uso de medios de cultivo especficos. Dentro de los hongos un criterio muy importante es la estructura del micelio que forma. En bacterias, hay dos grandes grupos, que se pueden distinguir por la tincin de Gram. Para identificar la especie se determina que sustratos puede utilizar y otras pruebas como por ejemplos si son mviles o no en un medio semislido. Adems de estas pruebas hay pruebas rpidas para organismos de crecimiento lentos como por ejemplo Mycobacterium tuberculosis que estn basadas en tinciones especficas y observaciones en el microscopio. En la actualidad se utilizan mtodos de identificacin basados en zonas especficas del ADN de los microorganismos. Mtodos de esterilizacin. La esterilizacin es necesaria para eliminar todos los posibles microorganismos que contaminan el medio (previo a la siembra). Una vez conseguida se dice que el medio es estril. Tambin es importante en la preservacin de compuestos orgnicos, incluyendo alimentos, que pueden ser degradados por microorganismos o colonizados por patgenos (por ejemplo la pasteurizacin de la leche).

1. Esterilizacin por calor: Seco (horno) o hmedo (autoclave). La esterilizacin por calor seco normalmente se usa para esterilizar instrumental de laboratorio, quirrgico, etc. Se hace habitualmente a temperaturas altas, como 180 C. La esterilizacin por autoclave, se hace en un recipiente cerrado, semejante a una olla a presin, a temperaturas por encima de 100 C y presiones superiores a la atmosfrica.

2. Esterilizacin por filtracin: Se utilizan membranas, previamente esterilizadas por calor, con un tamao controlado de poro inferior al tamao de los microorganismos. Sirven para filtrar lquidos y retener posibles microorganismos. Este mtodo se utiliza con muestras lquidas delicadas que contengan enzimas, vitaminas, etc., susceptibles de estropearse con el calor. 3. Esterilizacin por radiacin: Las radiaciones gamma matan los microorganismos. Su utilizacin es cara y necesita sistemas de proteccin cuando se est realizando la esterilizacin (slo la usan la industria alimentaria y farmacutica). 4. Utilizacin de antispticos: Matan rpidamente los microorganismos presentes en el medio o lugar que se trata. A diferencia de los otros mtodos, el antisptico permanece en el lugar en el que se ha aplicado hasta que se degrada. Un antisptico clsico es el hipoclorito, que se encuentra en la leja y es muy txico. Ms recientemente, se han desarrollado otros antispticos como el triclosan (ver la composicin de la pasta de dientes) que no son txicos. 5. Pasteurizacin: Eliminacin de las formas vegetativas de los microorganismos por choque trmico (calor hmedo a presin atmosfrica). Puede ser rpida (70C 15) o lenta (62,5C 30+ enfriamiento, varias veces). Se utiliza sobre todo en la preservacin de alimentos porque las condiciones organolpticas (sabor, olor, etc) de los mismos son mejores que si se utilizara un autoclave.