Control de los Microorganismos Los microorganismos ofrecen diversos beneficios a la sociedad en diferentes formas.

En otro aspecto son tambin los microorganismos un vehculo para la produccin de enfermedades, por la produccin de toxinas propiamente dichas o metabolitos txicos. Adems de daos en cultivos, descomposicin de alimentos y enfermedades en animales. Es por esto que el ser humano ha buscado los procedimientos necesarios para destruir o controlar el crecimiento de los microorganismos perjudiciales. DEFINICIONES IMPORTANTES: - Muerte microbiana: Prdida irreversible de la capacidad de reproducirse. - Esterilizacin: Proveniente del latn sterilis incapaz de reproducirse. Proceso por el cual las clulas vivas, esporas viables, virus y viroides destruidos o eliminados de un objeto o hbitat. - Desinfeccin: Destruccin, eliminacin o inhibicin de los microorganismos que pueden producir enfermedad de una superficie u objeto. Se mantienen viables las esporas. - Germicida: Terminacin _cida del latn que significa destruir. Es un agente que puede destruir microorganismos patgenos y muchos no patgenos pero no necesariamente esporas. (Bactericida, fungicida, viricida) - Terminacin _statico: proveniente del griego statikos que causa detencin, agente con capacidad de inhibir el crecimiento microbiano, pero sin matarlos. (Bacteriosttico, fungisttico) Procedimientos para el control microbiano: - Mtodos fsicos - Mtodos qumicos - Agentes Antimicrobianos MTODOS FSICOS: Los mtodos fsicos se utilizan a menudo para lograr la descontaminacin, la desinfeccin y la esterilizacin microbiana. CALOR: La exposicin al agua en ebullicin durante 10 minutos es suficiente para destruir clulas vegetativas, pero no es suficiente para destruir endosporas. No esteriliza. La eficacia del calor como agente antimicrobiano, se puede expresar como el Tiempo de muerte trmico (TMT), que se define como el tiempo ms corto necesario para destruir los microorganismos en una suspensin, a una temperatura especfica y en condiciones definidas. Sin embargo como la destruccin es logartmica no es posible eliminar completamente los microorganismos de una muestra. Existen diversos mtodos de control de microorganismos por medio del calor: a. Esterilizacin por vapor (calor hmedo o autoclave): El agua es llevada a punto de ebullicin de manera que el vapor llena la cmara, desplazando el aire fro. Cuando todo el aire es expulsado, se cierran las vlvulas de seguridad y el vapor satura toda la cmara, por lo que incrementa la presin, hasta que se alcanzan los valores deseados (121C y 15 lb presin).

En estas condiciones se destruyen todas las clulas vegetativas y endosporas en un tiempo que por lo general es de 15 minutos. Se piensa que el calor hmedo degrada los cidos nucleicos, desnaturaliza protenas y adems alterar las membranas celulares. Si no se cumplen las condiciones adecuadas, no hay esterilizacin. Para controlar el buen funcionamiento del equipo, se pueden incluir con la esterilizacin un control biolgico o un indicador qumico. El indicador biolgico consiste en una ampolla estril con un medio y un papel cubierto con esporas de Bacillus stearothermophilus o Clostridium. Luego de la esterilizacin se rompe la ampolla y se incuba por unos das. El indicador qumico consiste en una cinta especial con letras o lneas que cambian de color despus del tratamiento suficiente con calor. b. Pasteurizacin: Se utiliza para sustancias o medios que no pueden ser calentadas a ms de su temperatura de ebullicin. Un calentamiento breve a 55 o 60C destruir los microorganismos patgenos y disminuye los causantes de la descomposicin de la sustancia. NO esteriliza. Existen variaciones que son utilizadas en la industria de la leche: la pasteurizacin rpida (HTST high temperature short-term) que consiste en calentar a 72C por 15 segundos. Y la pasteurizacin a temperatura ultra elevada (UTH ultrahigh temperature) que calienta a 140-150C por 1 a 3 segundos. c. Tindalizacin o esterilizacin fraccionada al vapor: se utiliza para qumicos o material biolgico que no puede llevarse a ms de 100C. Se calienta a una temperatura de 90C a 100C durante 30 minutos por tres das consecutivos y se incuba a 37C entra cada calentamiento. El primer calentamiento destruye clulas vegetativas pero no esporas, por lo que germinan a 37C y luego son eliminadas con el siguiente calentamiento. d. Calor seco: Se utilizan hornos o estufas a una temperatura de 160-170C por 2 o 3 horas. Es menos efectivo que el calor hmedo, pero no corroe utensilios metlicos. Es lenta y no se puede utilizar para material termo sensible. e. Incineracin: Destruye por completo los microorganismos. (calentar las asas en los mecheros). f. Temperaturas bajas: Refrigeracin y congelacin, son nicamente bacteriostticos. En general, el metabolismo de las bacterias est inhibido a temperaturas por debajo de 0 C. Sin embargo estas temperaturas no matan a los microorganismos sino que pueden conservarlos durante largos perodos de tiempo. Esta circunstancia es aprovechada tambin por los microbilogos para conservar los microorganismos indefinidamente. Los cultivos de microorganismos se conservan congelados a -70 C o incluso mejor en tanques de nitrgeno lquido a -196 C. g. Desecacin: Es de efecto bacteriosttico y las esporas permanecen viables. FILTRACIN: es utilizada para materiales termosensibles.

a. Filtros de profundidad: Se utilizan materiales fibrosos o granulados que forman una capa gruesa con canales de dimetro muy pequeo. La solucin es aspirada al vaco y los microorganismos quedan retenidos o son adsorbidos por el material. Se utilizan diatomeas, porcelana no vidriada, asbestos. b. Filtros de membrana: Son circulares con un grosor de 0.1 mm y con poros muy pequeos, de unos 2 m por lo que los microorganismos no pueden atravesarlo. Se fabrican de acetato de celulosa, policarbonato, fluoruro de polivinilo u otros materiales sintticos. RADIACIN a. Ultravioleta: Es letal para todas las clases de microorganismos por su longitud de onda corta y su alta energa. Es letal a 260 nm ya que es la longitud de onda que es ms efectivamente absorbida por el ADN. El mecanismo primario del dao al ADN es la formacin de dmeros de timina lo que inhibe su funcin y replicacin. Son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies. b. Ionizante: Niveles bajos pueden producir mutaciones e indirectamente resultar en la muerte, niveles altos son letales. Especficamente causan una serie de cambios en las clulas: ruptura de puentes de hidrgeno, oxidacin de dobles enlaces, destruccin de anillos, polimerizacin de algunas molculas, generacin de radicales libres. La mayor causa de muerte es la destruccin del ADN. Es excelente esterilizante y con penetracin profunda en distintos materiales, por lo que se utilizan para esterilizar materiales termolbiles (termosensibles) como jeringas desechables, sondas, etc. No se utilizan para medios de cultivo o soluciones proteicas porque producen alteraciones de los componentes. MTODOS QUMICOS Condiciones ideales para un agente antimicrobiano qumico: - No txico para el ser humano, animales ni medio ambiente - Actividad antimicrobiana - No debe de reaccionar con la materia orgnica o corroer - Estable y homogneo Modo de accin: - Bacteriostticos: Inhibidores de sntesis proteica por unin al ribosoma, que es reversible, pues se disocia de este cuando disminuye en concentracin. - Bactericidas: Causa la muerte celular pero no la lisis. No se eliminan por dilucin. - Bacteriolticos: Inducen la lisis celular al inhibir la sntesis de la pared celular o daan la membrana citoplasmtica. Agentes antimicrobianos qumicos

a. Fenoles: El primer desinfectante y antisptico utilizado, en 1867 Joseph Lister los emple para reducir el riesgo de infeccin en las cirugas. Hasta ahora los fenoles y sus derivados (cresol, xilenol) son utilizados como desinfectantes en laboratorios y hospitales. Elimina micobacterias, eficaz an en presencia de materia orgnica y permanece activo en la superficie despus de mucho tiempo de su aplicacin. Desnaturaliza protenas y altera la membrana. Tiene olor desagradable y puede producir irritaciones cutneas. b. Alcoholes: No elimina esporas pero son bactericidas y fungicidas y algunas veces viricida (virus que contienen lpidos), son comnmente utilizados principalmente el etanol y el isopropanol en concentraciones de 70-80%. Tienen el mismo modo de accin de los fenoles. c. Metales pesados: mercurio, arsnico, plata, zinc y cobre. Son bacteriostticos ya que el metal se combina con los grupos sulfihidrilos de las protenas inactivndolas o precipitndolas. Son txicos. Ejemplos: sulfato de cobre (alguicida) y nitrato de plata (gonorrea oftlmica en nios) d. Halgenos: - Yodo: antisptico cutneo. Oxida componentes celulares y forma complejos con las protenas. En altas concentraciones puede destruir algunas esporas. Puede lesionar la piel, dejar manchas y desarrollar alergias. - Cloro: oxida componentes celulares, requiere un tiempo de exposicin de unos 30 minutos.El producto clorado ms utilizado en desinfeccin es el hipoclorito de sodio, que es activo sobre todas las bacterias, incluyendo esporas, y adems es efectivo en un amplio rango de temperaturas. La actividad bactericida del hipoclorito de sodio se debe al cido hipocloroso (HClO) y al Cl2 que se forman cuando el hipoclorito es diluido en agua. La actividad germicida del in hipocloroso es muy reducida debido a que por su carga no puede penetrar fcilmente en la clula a travs de la membrana citoplasmtica. En cambio, el cido hipocloroso es neutro y penetra fcilmente en la clula, mientras que el Cl2 ingresa como gas. Su actividad est influida por la presencia de materia orgnica, pues puede haber en el medio sustancias capaces de reaccionar con los compuestos clorados que disminuyan la concentracin efectiva de stos. e. Compuestos cuaternarios de amonio (detergentes): Molculas orgnicas emulsificantes porque contienen extremos polares y no polares, solubilizan residuos insolubles y son agentes limpiadores eficaces. Solo los catinicos son desinfectantes, alteran membrana y pueden desnaturalizar protenas. No destruyen micobacterias ni esporas. Se inactivan con el agua dura y el jabn. f. Aldehdos: Formaldehdo y glutaraldehdo, se combinan con las protenas y las inactivan. Eliminan esporas (tras 12 horas de exposicin) y pueden usarse como agentes esterilizantes. g. Gases esterilizantes: Esterilizacin de objetos termosensibles. - Oxido de etileno: microbicida y esporicida, se combina con las protenas celulares. Alto poder penetrante. En concentraciones de 10-20% mezclado con CO2 o diclorodifluorometano. Se debe de airear ampliamente los materiales esterilizados para eliminar el gas residual porque es muy txico. AGENTES ANTIMICROBIANOS La medicina moderna depende de los agentes quimioterapeuticos para el tratamiento de enfermedades. Estos agentes destruyen a los microorganismos patgenos o inhiben su crecimiento para evitar un dao significativo al hospedador.

La mayora de estos agentes son antibiticos derivados de productos microbianos o sus derivados. Existen tambin antibiticos sintticos. Caractersticas de los agentes antimicrobianos: - Toxicidad selectiva: debe de eliminar o inhibir exclusivamente el microorganismo patgeno que est daando al hospedador. - No causar efectos adversos: No deben de causar efectos indeseables para el hospedador. (respuestas alrgicas, dao renal, dao gastrointestinal, nauseas, deplecin de la mdula sea) - Espectro de accin: Algunos agentes tienen un espectro de accin estrecho por lo que su efecto es contra una limitada variedad de microorganismos. Otros tienen un espectro de accin amplio, y pueden atacar diferentes clases de patgenos. Para tener una idea de la efectividad de un agente antimicrobiano puede obtenerse: - Concentracin Mnima Inhibitoria (CMI), que es la mnima concentracin del agente antimicrobiano que puede inhibir el crecimiento de un patgeno en particular. - Concentracin Letal Mnima (CLM), es la mnima concentracin de un agente antimicrobiano que mata a un patgeno.