MTODO: 8003 INDICADOR BIOLGICO DE: La exposicin al plomo y compuestos de plomo.

TOMA DE MUESTRAS BIOLGICAS MUESTRA: sangre total, orina, al final del turno CONTENEDOR: tubos sin plomo por 10-mL (sangre); frascos de polietileno (orina) de 125 ml. ANICOAGULANTE: (sangre) de heparina. CONSERVANTE: (orina) 0,2 ml de HNO3 concentrado. EMBALAJE: cargadores de polietileno ESTABILIDAD DE LA MUESTRA: la sangre estable 3 das a 4 C; indefinidamente si se snico y se congelaron en tubos de plstico; orina estable indefinidamente si se mantiene acidifica con HNO3. CONTROLES: orina y plomo en la sangre en muestras de control comercial, adems de orina reunida y sangre de poblaciones no expuestas. TECNICA DE MEDICIN: ABSORCIN ATMICA, LLAMA ANALITO: complejo Pb (II)-APDC. EXTRACCIN: APDC-MIBK. CALIBRACIN: soluciones de metil isobutil cetona y complejo Pb (II)-APDC. CONTROL DE CALIDAD: Los controles comerciales; orina combinados o sangre, orina corregida para la creatinina. RANGO: 5 a 150 mcg/100 g de sangre; 5 a 150 mcg/100 ml de orina ESTIMADO LOD: 0,05 mcg Pb/g de sangre u orina mL. RECUPERACIN: 0,99 PRECISION: 0,05 PRECISIN: 10,8%

APLICABILIDAD: Este procedimiento cuantifica Pb 2 + en la sangre o en orina para evaluar la carga corporal, y la lesin al sistema hematopoytico, y cumplir con las regulaciones federales. Plomo en la sangre es el indicador preferido biolgico de absorcin de plomo. El funcionamiento ptimo intervalo es de 0,1 a 1,5 g. Pb por sangre o por ml de orina. INTERFERENCIAS: el fosfato, el EDTA, y el oxalato pueden secuestrar y causar lecturas bajas de plomo.

OTROS MTODOS: Este mtodo combina y sustituye a P & CAM 208 [1] y 262 [3]. Mtodos de P & CAM 102 (ditizona), 195(ASV), 200 (ASV) y 214 (horno de grafito AAS) [4] no han sido revisados. Voltametra andica (ASV) es un procedimiento alternativo si el equipo especializado est disponible [5]. REACTIVOS: 1. Amonio ditiocarbamato de pirrolidina(APDC). Estable 6 meses. 2. El tensioactivo no inico, octil fenoxi polietoxi etanol (Triton X-100 o equivalente). 3. APDC-surfactante solucin (APDC-Tx). Disolver 4 g APDC y 5 no inico ml tensioactivo en 40 ml de agua desionizada. Diluir a 200 ml. Compruebe cada lote para la extraccin eficiencia. Estable al menos dos meses. 4. Plomo Pb nitrato (NO 3) 2. calentar 4 horas a 120 C. Dejar enfriar y guardar en el desecador. 5. cido ntrico, cido sulfrico a concentracin de 70% (peso / peso), bidestilado. 6. Metil-isobutil-cetona (MIBK), saturado de agua. Aadir 100 ml de agua y 900 ml de MIBK. Agitar y dejar reposar 1 hora. 7. Calibracin de solucin madre (1000 ug / ml). Disolver 1,598 g de Pb (NO 3) 2 en 2% (w / v) de HNO3 y diluir a 1 L. Almacenar en un polietileno botella. Estable 1 ao. 8. Aire a 40 psi, filtrado para eliminar el aceite y el agua. 9. Acetileno, grado recomendado por fabricantes AAS.

EQUIPAMIENTO: 1. Tubos heparinizados tapa azul, especialmente preparado para recogida de muestras de sangre para determinacin de plomo en la sangre. 2. Agujas Vacutainer (calibre 21) y el soporte. 3. Torniquete y torundas con alcohol. 4. Botellas de polietileno (boca), 125-mL. 5. Tubos de Cultura, 16 x 100 mm, con PTFE-revestido ytapones de rosca *. 6. Centrifuga. 7. Mezclador de vibracin giratoria (Vortex) o equivalente. 8. Espectrofotmetro de absorcin atmica (AAS) con ctodo hueco de plomo o sin electrodos lmpara de descarga. 9. Balanza analtica. 10. Desecador.

11. Pipetas, matraces volumtricos y otros vidrio o recipientes de plstico adecuado para pesar, almacenamiento y dispensacin de reactivos y muestras. * * El material de vidrio y plstico deben estar lavado en detergente, luego enjuagar con agua del grifo y agua desionizada, empapado 4 horas en solucin 1:1 de HNO3: H2O y finalmente enjuagar con agua desionizada.

PRECAUCIONES ESPECIALES: Las muestras de sangre y orina recogida de los seres humanos representan un riesgo real para la salud para los trabajadores de laboratorio que recolectan y manejan estas muestras. Estos riesgos se deben principalmente ponerse en contacto con muestras biolgicas infecciosas y puede tener consecuencias graves para la salud, tales como hepatitis infecciosa, y otras enfermedades. Hay tambin algn riesgo qumico por el contenido de las muestras, pero esto es mucho menor. Los que manejan las muestras de sangre y orina deben usar guantes de proteccin, y evitar la generacin de aerosoles de las muestras. El Pipeteo con la boca, por supuesto, debe ser evitado. MUESTREO: 1. Recoger muestras de sangre en tubos heparinizados para recogida de sangre. Mezclar inmediatamente. Embalar a 4 C y mantener a esta temperatura antes de su anlisis. 2. Recoger la orina al final de un turno de trabajo en frascos de polietileno de 125-ml que contienen 0,2 ml de HNO3 concentrado y mezclar. Enviar una alcuota de 25 ml para el anlisis de plomo y otra alcuota de 25 ml para la determinacin de creatinina en orina.

PREPARACIN DE LA MUESTRA: 3. Filtrar las muestras de orina antes del anlisis. Analizar una alcuota de 25-ml para la creatinina mediante procedimientos estndar. 4. Colocar 2,0 ml filtr la orina o la sangre 2,0 g entero en un tubo de 16 x cultivo de 150-mm. Iniciar un reactivo en blanco en este punto con 2 ml de agua desionizada. 5. Aadir 0,8 ml de solucin APDC-tensioactivo. Tapar y mezclar en un mezclador de vibracin rotatoria durante 10 s. 6. Aadir 2,00 ml de agua saturada de MIBK. Se tapa y girar en un mezclador de vibracin rotatoria durante 2 min. Centrifugar a 2000 rpm durante 10 min. Analizar la solucin Pb-APDC en MIBK dentro de 2 h de extraccin.

NOTA: Si el paciente est recibiendo tratamiento con EDTA o si las muestras de sangre se recogen en tubos que contiene Na 2 EDTA como anticoagulante, se aaden 50 l 1,5 M CaCl2 inmediatamente antes de aadir la MIBK. CALIBRACIN Y CONTROL DE CALIDAD: 7. Preparar 6 patrones de trabajo en agua desionizada en el intervalo de 10 a 150 mg/100 ml Pb por dilucin de calibracin de solucin madre con 2% (w / v) de HNO 3. Preparar diariamente. Ejemplo: 0,4 ml de calibracin solucin madre diluida a 1 L = 40 g por 100 ml.

8. Analizar las normas de trabajo (pasos 4, 5, 6, 12 y 13). 9. Preparar una curva de calibracin. Concentracin Solar (mg/100 ml) vs absorbancia del estndar de trabajo, corregido para el blanco del reactivo. 10. Mantener la normalizacin mediante el anlisis de un estndar despus de cada 5 muestras. 11. Ejecutar un control de pinchos o grupo de muestras de trabajadores expuestos o control comercial cada 10 muestras o al menos 3 por estudio. NOTA: la sangre o en la orina los niveles de base de plomo debe determinarse antes de los controles de pas son preparado. MEDICIN: 12. Ajuste el espectrofotmetro de absorcin atmica y de las condiciones de la lmpara segn lo recomendado por el fabricante y como se indica en la pgina 8003-1. Aspirar agua saturada de MIBK y reducir flujo de acetileno hasta una llama estequiomtrica con el fondo mnimo se obtiene (<0,01 absorbancia). Registro de esta lectura. 13. Aspirar cada muestra y blanco. Grabar absorbancias mximas. NOTA: Las muestras con valores de absorbancia superiores a 0,35 se debe diluir con MIBK y volver a analizar. Aplicar el factor de dilucin apropiado en los clculos. CLCULOS: 14. Calcular la absorbancia neta (diferencia entre el mximo de absorbancia de MIBK y la absorbancia de la muestra o blanco). 15. Uso de los metales, el anlisis de sangre y de orina los niveles de plomo en las muestras (W s) y reactivo promedio espacios en blanco (B) de la curva de calibracin. 16. Para las muestras de orina, informe mg Pb/g de creatinina. Para muestras de sangre, informe g Pb/g de sangre entera. GUAS DE INTERPRETACIN: Las concentraciones de plomo en sangre de habitantes de los suburbios de adultos sanos es de 7 a 22 mg/100 g de sangre entera [2]. La orina tiene una gama ms amplia de 4 a 270 microgramos / g de creatinina, para la misma poblacin, sin embargo, los valores ms normales debera ser cerca de 16 a 60 mg / g de creatinina [4]. Valores de plomo en sangre son comnmente utilizados para el control biolgico. Un valor de plomo en la sangre superiores a 40 mg/100 g es indicativo de la exposicin excesiva y una por encima de 60 g/100 g requiere la eliminacin de la exposicin [8]. EVALUACIN DEL MTODO: Cuarenta y dos muestras de sangre se aadieron a niveles de 25 a 200 mg/100 ml. Las recuperaciones fueron de 94 a 106%, un promedio de 100% [7]. Para la orina, 25 muestras fueron inoculadas en concentraciones de 10 a 100 microgramos / ml. La recuperacin promedio 100% (intervalo de 95 a 106%) [7].

Fuente: NIOSH Manual.