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IV 1-MICROBIOLOGA y BIOTECNOLOGA

1. CONCEPTO DE MICROORGANISMO

Los microorganismos o microbios son organismos de pequeo tamao, observables nicamente con la ayuda del microscopio. La Microbiologa es la rama de la Biologa que se encarga del estudio de los microorganismos.
TIPOS DE MICROORGANISMOS Y CLASIFICACIN

Los microorganismos se clasifican en:

CLASES DE MICROORGANISMOS

a) Microorganismos con organizacin celular

- Poseen membrana celular - Tienen como cidos nucleicos tanto ADN como ARN).

Procariotas

Arqueobacterias Eubacterias

Eucariotas

Protozoos Algas microscpicas Hongos microscpicos Virus Viroides Priones

b) Microorganismos sin organizacin celular

- No poseen membranas - Nunca estn presentes los dos cidos nucleicos juntos (ADN o ARN). - Son parsitos estrictos de los que tienen organizacin celular, pues carecen de metabolismo.

Fig. 1 1) Procariota (bacteria); 2, 3, 4 y 5) Protozoos; 6) Alga microscpica; 7) Hongo microscpico (levadura); 8 y 9) Virus. Cada organismo est a un aumento diferente.

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2. LAS BACTERIAS

CLASIFICACIN, MORFOLOGA, FISIOLOGA Y ECOLOGA BACTERIANAS 1) ARQUEOBACTERIAS: Bacterias consideradas "fsiles vivientes" pues viven en hbitats que parecen corresponder con los que existieron en la Tierra primitiva, por ejemplo, se encuentran en ambientes termales donde se alcanzan temperaturas por encima del punto de ebullicin del agua, en fumarolas, etc. Un ejemplo es el de Pyrococcus furiosus que tiene su ptimo de crecimiento a 104 1C. Tambin pueden vivir en medios halfilos (muy salados), por ejemplo: Halobacterium, que son halfilos estrictos. 2) EUBACTERIAS: Son las bacterias tpi cas. Por ejemplo Escherichia coli. Se trata de microorganismos unicelulares procariotas, cuyo tamao oscila entre 1 y 10 micras (como son muy pequeas no necesitan citoesqueleto), adaptados a vivir en cualquier ambiente, terrestre o acutico, pues en las diferentes estirpes bacterianas pueden observarse todas las formas de nutricin conocidas. Las hay auttrofas: fotosintticas y quimiosintticas, y hetertrofas: saprfitas, simbiticas y parasitarias. Esta notable diversidad de funciones convierte a las bacterias en organismos indispensables para el mantenimiento del equilibrio ecolgico, ya que, como se ver ms adelante, contribuyen al mantenimiento de los ciclos biogeoqumicos que permiten el reciclaje de la materia en la biosfera.

Fig. 2 Ejemplo de organismo procaritico (bacteria) muy aumentada.

Fig. 3 1) Cocos. 2) Bacilos. 3) Vibrios. 4) Espirilos.

Fig. 4 Bacilos (x2000).

La mayor parte de las bacterias adoptan formas caractersticas, aunque en ocasiones la configuracin puede verse influida por las condiciones del medio de cultivo. Son unicelulares, pero tambin aparecen agrupadas cuando se mantienen unidas tras la biparticin. Entre las formas ms comunes destacan las siguientes:
Fig. 5 Bacilos (muy aumentados) .

* Cocos, de aspecto redondeado, que aparecen aislados o en grupos de dos: diplococos, otras veces forman cadenas arrosariadas: estreptococos, grupos arracimados: estafilococos, o masas cbicas: sarcinas. Esta diversidad

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depende de que la divisin de las clulas se d a lo largo de uno, dos o tres ejes. Las bacterias con forma de cocos tienen una relacin superficie/volumen mnima, son bacterias con poca relacin con el exterior, muy resistentes y se transmiten por el aire. Son pequeas y exigentes con el medio de cultivo. Suelen ser patgenas: Streptococcus, Staphylococcus, etc. * Bacilos, alargados y cilndricos, en forma de bastn; a veces se presentan en cadenas lineales o ramificadas. Presentan mayor relacin superficie/volumen que los cocos y obtienen nutrientes con mucha mayor efectividad, por lo que pueden vivir en lugares pobres en nutrientes (vas urinarias, agua ....). Por el contrario, son menos resistentes, susceptibles a los cambios ambientales y no pueden transmitirse por el aire, slo lo hacen por lquidos o superficies hmedas. Los ms grandes (Baccillus y Clostridium) desarrollan endosporas para resistir los perodos de condiciones precarias. * Espirilos, con forma de hlice o espiral; las espiroquetas tienen un aspecto similar, pero con la espiral ms acusada. Las formas espirales se mueven en medios viscosos avanzando en tornillo. Su dimetro es muy pequeo, lo hace que puedan atravesar las mucosas; por ejemplo: Treponema pallidum, causante de la sfilis. Son ms sensibles a las condiciones ambientales que los bacilos, por eso cuando son patgenas se transmiten por contacto directo (va sexual) o mediante vectores, normalmente artrpodos hematfagos. * Vibrios, que son muy cortos y curvados, en forma de coma. Ejemplo: Vibrio cholerae.
Fig. 6 Asociaciones de cocos (bacterias esfricas).

Informacin: El estudio de las bacterias se realiza mediante cultivos, que consisten en esencia, en extractos nutritivos estriles, ya sean lquidos o slidos. Los lqui dos, preparados en tubos de ensayo debidamente tapados con algodn graso y esterilizados, suelen ser caldo de carne, suero sangu neo y sangre, enriquecidos con ciertas sustancias sin las cuales no pueden reproducirse (aminocidos, peptona, etc.). Los slidos se obtienen a partir de los lquidos mediante adicin de agar-agar o gelatina en caliente, luego se vierte sobre tubos de ensayo inclinados o sobre cajas de Petri; posteriormente se esterilizan, se siembran utilizando el asa de platino y se colocan en la estufa de cultivo a la temperatura adecuada que favorezca su multiplicacin.

Fig. 7 Cultivos de bacterias en cpsula de Petri y en tubo de ensayo.

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ESTRUCTURA DE UNA BACTERIA TIPO

1

3 4

La ultraestructura y la actividad fisiolgica de las bacterias solo se puede apreciar con el microscopio electrnico en conjuncin con las tcnicas bioqumicas y citolgicas adecuadas, como la ultracentrifugacin, tcnicas isotpicas de marcaje, utilizacin de medios de cultivo diferenciales, etc. Los componentes estructurales bsicos de las bacterias son: * Pared bacteriana: Estructura presente en todas las bacterias. Es una envoltura rgida exterior a la membrana. Da forma a la bacteria y sobre todo soporta las fuertes presiones osmticas de su interior.

Fig. 8 1) Cpsula; 2) pared; 3) membrana; 4) mesosomas; 5) ribosomas; 6) flagelo; 7) ADN, cromosoma o genoma; 8) plsmidos.

Polisacridos

Pptido glucano

Los componentes fundamentales de la pared son los peptidoglucanos o murenas, formados por anillos de polisacridos complejos enlazados con oligopptidos. Adems contiene otros elementos diferentes segn pertenezca al grupo de las Gram negativas o al de las Gram positivas: En las Gram negativas hay una sola capa de pptidoglucanos sobre la que se dispone una membrana externa constituida por una capa de fosfol pidos y otra de glicolpi dos asociados, estos ltimos, a polisacridos que se proyectan hacia el exterior. En las bacterias Gram positivas la red de peptidoglucanos origina varias capas superpuestas, es gruesa y homognea y no hay membrana externa. * Cpsula bacteriana. En numerosas bacterias se forma en la parte externa de la pared una cpsula viscosa compuesta por sustancias glucdi cas. Esta envoltura, que se presenta en casi todas las bacterias patgenas, las protege de la desecacin y de la fagocitosis por los leucocitos del hospedador, as como del ataque

Membrana plasmtica

Membrana externa

1) Glicolpidos. 2) Fosfolpidos y otros lpidos

Fig. 9 Estructura de la pared de una bacteria Gram negativa.

Pptidoglucano

Anillo de polisacrido

Oligopptido

Membrana plasmtica

Fig. 10 Estructura de la pared de una bacteria Gram positiva.

Polisacrido Oligopptido

Fig. 11 Los pptidoglucanos de la pared bacteriana estn formados por anillos de un polisacrido complejo enlazados por un oligopptido.

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de los anticuerpos, lo que aumenta la virulencia de las bacterias encapsuladas. La presencia de la cpsula no es, sin embargo, un carcter diferenciador, pues determinadas bacterias pueden o no formarla en funcin de los medios de cultivo.
Informacin: Algunos antibiticos actan sobre los componentes moleculares de la pared; por ejemplo, la lisozima (presente en las lgrimas, moco nasal y en la mayora de los tejidos y secreciones) que acta rompiendo los enlaces glucos dicos de los pptidoglucanos, lo que provoca la lisis por smosis de la bacteria; otros, como la penicilina, son antibiticos bacteriostti cos porque inhiben la sntesis de los pptidoglucanos y, por ello, interrumpen el crecimiento bacteriano.

INFORMACIN Observacin de microorganismos. Tincin de Gram: Fundamento INTRODUCCIN

* Membrana. Es una envoltura que rodea al citoplasma. Est constituida por una membrana de tipo unitario de 75 de espesor. Su estructura es idntica a la de las clulas eucariotas, variando slo en algunas de las molculas que la componen; por ejemplo, en la membrana bacteriana no hay esteroides. Una particularidad que presenta la membrana bacteriana es la existencia de unos repliegues internos que reciben el nombre de mesosomas. Las funciones de la membrana plasmtica bacteriana son las mismas que en la clula eucariota, es decir, limitan la bacteria y regulan el paso de sustancias nutritivas. Los mesosomas incrementan la superficie de la membrana plasmtica y adems tienen gran importancia en la fisiologa bacteriana, puesto que en ellos hay gran cantidad de enzimas responsables de importantes funciones celulares, entre las que destacan las siguientes: - Transporte de los electrones, mediante el conjunto de transportado-

El tamao de la mayora de las clulas bacterianas es tal que resultan difciles de ver con el microscopio ptico. La principal dificultad es la falta de contraste entre la clula y el medio que la rodea. El modo ms simple de aumentar el contraste es la utilizacin de colorantes. Si se desea simplemente aumentar el contraste de las clulas para la microscopa, son suficientes los procedimientos que usan un solo colorante llamados de tincin simple. Sin embargo, a menudo se utilizan mtodos que no tienen de igual modo todas las clulas, es el proceso denominado tincin diferencial. Uno muy usado en microbiologa es la tincin Gram. Basndose en su reaccin a la tincin Gram, las bacterias pueden dividirse en dos grupos: grampositivas y gramnegativas. Esta tincin tiene gran importancia en taxonoma bacteriana ya que indica diferencias fundamentales de la pared celular de las distintas bacterias. Para explicar el mecanismo de la tincin de gram se han propuesto varias hiptesis fundadas en la naturaleza qumica de las paredes celulares de los microorganismos.
TINCIN DE GRAM. Mtodo. Extensin: En un porta bien limpio (con alcohol, papel de filtro y flameado) se coloca una gota de agua destilada a la que, con el asa de siembra, previamente esterilizada a la llama, se lleva una pequea cantidad de suspensin de bacterias o, en su caso, de una colonia. Con el asa se extiende la gota y las bacterias sobre el porta y se fija la extensin por el calor, calentando suavemente a la llama del mechero hasta que se seque. Coloracin: a) 1 minuto en cristal violeta de Hucker (colorante inicial) b) se lava con agua destilada c) 1 minuto en lugol (mordiente) d) se decolora con alcohol de 951 (decolorante) e) se lava con agua destilada f) 1 minuto en fucsina (colorante de contraste) g) se lava con agua corriente h) se seca suavemente y sin frotar con papel de filtro Una vez que la preparacin est totalmente seca, poner una gota muy pequea de aceite de cedro y observar al microscopio con el objetivo de inmersin. Observacin: Las bacterias que aparecen coloreadas de violeta son Gram+ y las que aparecen coloreadas de rojo ms o menos intenso, son Gram-.

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res de la cadena respiratoria, y fosforilacin oxidativa. - Sntesis de diversos componentes de la membrana, la pared y la cpsula. - Contienen los pigmentos fotosintticos y dems componentes de los fotosistemas. - La ADN polimerasa de los mesosomas regula el proceso de duplicacin del ADN. * Ribosomas. Son corpsculos similares a los de las clulas eucariticas, aunque de menor tamao (su velocidad de sedimentacin es de 70 S), compuestos por una subunidad pequea de (30 S) y otra mayor de (50 S). Se encuentran dispersos en el protoplasma bacteriano, aislados o asociados en cadenas de ARNm (polirribosomas), y se encargan de la snte sis de protenas. * Cromosoma bacteriano. El ADN de la bacteria est constituido por una sola molcula en doble hlice (esta molcula es muy grande en comparacin con el tamao de la bacteria), circular, superenrollada y asociada a protenas no histonas. Suele estar unida a los mesosomas. En las clulas bacterianas puede haber tambin una o varias molculas de ADN circular extracromosmico de menor masa molecular que el cromosoma denominadas plsmidos. Estos plsmidos, en algunas bacterias, pueden tener genes que las protegen de los antibiticos o tambin genes que intervienen en los procesos de reproduccin (plsmido F). * Inclusiones. En el protoplasma bacteriano se encuentra una gran variedad de granulaciones, que cumplen, generalmente, la funcin de depsitos de sustancias de reserva. * Flagelos. Son apndices filiformes de mayor longitud que la bacteria que permiten su locomocin. Se presentan en nmero y disposicin variable y estn formados por fibrillas proteicas compuestas de una prote na llamada flagelina. * Fimbrias o pili. Son filamentos huecos, delgados y rectos, situados en la superficie de determinadas bacterias y cuya funcin no est relacionada con la locomocin, sino con la adherencia a los substratos y el intercambio de fragmentos de ADN durante la conjugacin.
Flagelo

Fig. 12 Estructura del motor flagelar de una bacteria.

Fig. 13 Fimbrias o pili en una bacteria.

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FUNCIONES DE NUTRICIN EN LAS BACTERIAS

La mayor parte de las bacterias son hetertrofas y deben tomar el alimento orgnico sintetizado por otros organismos. La obtencin del alimento la hacen por diversos caminos: * Las bacterias de vida libre suelen ser saprfitas, viven sobre materia orgnica muerta. * Muchas viven en relacin estrecha con otros organismos. De ellas, la mayora son comensales y no causan daos ni aportan beneficios a su husped; algunas son parsitas (producen enfermedades) y otras son simbiontes (establecen relaciones con otros organimos con beneficio mutuo). Otras bacterias son auttrofas y utilizan compuestos inorgnicos para su nutricin: * Las auttrofas fotosintticas, como las bacterias sulfurosas verdes y purpreas. No utilizan agua como dador de electrones en la fotosntesis, sino otros compuestos, como el sulfuro de hidrgeno, y por lo tanto no producen oxgeno. Al poseer pigmentos que absorben luz casi infrarroja, pueden realizar la fotosntesis prcticamente sin luz visible. * Las auttrofas quimiosintticas, a diferencia de las fotosintticas, utilizan la energa que desprenden ciertos compuestos inorgnicos al oxidarse. Independientemente del tipo de nutricin, las bacterias pueden necesitar el oxgeno atmosfrico (bacterias aerobias) o no (bacterias anaerobias). Para algunas bacterias anaerobias el oxgeno es un gas venenoso (anaerobias estrictas), otras lo utilizan cuando est presente, aunque pueden vivir sin l (anaerobias facultativas).

FUNCIONES DE RELACIN EN LAS BACTERIAS

Las bacterias responden a un nmero elevado de estmulos ambientales diversos mediante modificaciones de su actividad metablica o de su comportamiento. Ciertas clases, ante los estmulos adversos del ambiente, provocan la formacin de esporas de resistencia, que, al ser intracelulares, se denominan endosporas. Las endosporas bacterianas son estructuras destinadas a proteger el ADN y el resto del contenido protoplasmtico, cuya actividad metablica se reduce al estado de vida latente; pueden resistir temperaturas de hasta 801C y soportan la accin de diversos agentes fsicos y qumicos. En condiciones favorables germinan y dan lugar a una nueva bacteria (forma vegetativa). Pero la respuesta ms generalizada consiste en movimientos de acercamiento o distanciamiento respecto a la fuente de los estmulos (taxias) que pueden ser de varios tipos: flagelar, de reptacin o flexuosos (parecido al de las serpientes, pero en espiral).

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FUNCIONES DE REPRODUCCIN Y GENTICA BACTERIANA

* Reproduccin por biparticin: Generalmente las bacterias se multiplican por biparticin o divisin binaria; tras la replicacin del ADN, que est dirigida por la ADN polimerasa de los mesosomas, la pared bacteriana crece hasta formar un tabique transversal separador de las dos nuevas bacterias. Ahora bien, adems de este tipo de reproduccin asexual, las bacterias poseen tambin un conjunto de mecanismos, definidos como parasexuales, mediante los cuales se intercambian fragmentos de ADN; esta transferencia de informacin gentica de una bacteria a otra puede realizarse por conjugacin, transformacin o transduccin: * Conjugacin. Es un mecanismo mediante el cual una bacteria donadora (bacteria F+ por tener un plsmido llamado plsmido F) transmite a travs de las fimbrias o pili el plsmido F o tambin un fragmento de su ADN a otra bacteria receptora (a la que llamaremos Fpor no tener el plsmido F). La bacteria F- se convertir as en F+ al tener el plsmido F e incluso podr adquirir genes de la bacteria F+ que hayan pasado junto con el plsmido F. * Transformacin. Consiste en el intercambio gentico producido cuando una bacteria es capaz de captar fragmentos de ADN de otra bacteria que se encuentran dispersos en el medio donde vive. Slo algunas bacterias pueden ser transformadas. Las que pueden serlo se dice que son competentes. * Transduccin.. En este caso la transferencia de material gentico de una bacteria a otra, se realiza a travs de un virus bacterifago que por azar lleva un trozo de ADN bacteriano y se comporta como un vector intermediario entre las dos bacterias (ver ciclo ltico de un fago). El virus, al infectar a otra bacteria, le puede transmitir parte del genoma de la bacteria anteriormente infectada.

cromosoma

mesosoma Replicacin

divisin

Fig. 14 Ciclo de reproduccin asexual por biparticin de un bacteria.

Informacin: La transformacin bacteriana fue descrita en primer lugar por Griffith (1920) y ms tarde por Avery, McLeod y McCarty en 1944, y es responsable, por ejemplo, en el caso de Streptococcus pneumoniae, de la transformacin de cepas bacterianas no virulentas (cepas R) en virulentas (cepas S), cuando se cultivan en medios que contienen fragmentos bacterianos procedentes de la cepa S destruida previamente por el calor.

plsmido F

cromosoma

plsmido F

cromosoma

F+ pili

F+

Fcromosoma plsmido F

F+

Fig. 15 Conjugacin entre una bacteria F+ y otra F-. El factor F (crculos pequeos) pasa a travs de un pili.

Fig. 16 Transduccin: 1) Fijacin del fago a la bacteria; 2) Respuesta ltica; 3) Transduccin del fragmento de ADN a otra bacteria; 4) Integracin del ADN en el genoma.

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Mecanismos parasexuales de reproduccin bacteriana

Informacin: Las bacterias donadoras son las que poseen, adems del cromosoma bacteriano, pequeas cadenas de ADN de doble hlice y circulares, denominadas episomas o factores F. Estas bacterias se denominan F+ cuando el factor F est separado del cromosoma; pero, en ocasiones, este factor puede integrarse en el cromosoma, que se abre y se transforma en una cadena lineal, con lo que la bacteria F+ queda convertida en Hfr (alta frecuencia de recombinacin). Las bacterias receptoras carecen de episomas y se denominan F- .

Durante la conjugacin uno de los factores F de una bacteria F+ pasa a travs de las fimbrias a una bacteria F- , que se cambia en F+ y adquiere la capacidad de formar estos pili sexuales, mientras que la bacteria F+, como posee varias copias del episoma no pierde su condicin de donadora. Las bacterias Hfr, sin embargo, pueden transferir la totalidad o parte de su ADN cromosmico a travs de las fimbrias a una bacteria F- . Para ello, previamente, deben duplicar su ADN cromosmico, junto con el episoma que lleva integrado, y una de las copias del cromosoma puede trasladarse a una bacteria F- (generalmente slo pasan fragmentos cromosmicos debido a la fragilidad de las fimbrias). El factor F suele permanecer en la bacteria Hfr, ya que se encuentra inserto en la regin terminal del cromosoma que casi nunca circula a travs de las fimbrias, porque stas se destruyen antes de que les de tiempo a pasar. Los genes que han logrado atravesar el pili se integran en el cromosoma de la bacteria F-, que de esta forma adquiere caracteres de la Hfr (se producen fenmenos de sobrecruzamiento y recombinacin gnica entre el cromosoma y los fragmentos).

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3. MICROORGANISMOS SIN ORGANIZACIN CELULAR: LOS VIRUS LOS VIRUS: CONCEPTO

Los virus son organismos dotados de extraordinaria simplicidad, pertenecen a un nivel de organizacin subcelular, y marcan la barrera entre lo vivo y lo inerte. No se nutren, no se relacionan, carecen de metabolismo propio y para reproducirse utilizan la maquinaria metablica de la clula a la que parasitan; su simplicidad estructural y funcional los convierte en parsitos intracelulares obligados, tanto de bacterias (bacterifagos o fagos), como de las clulas animales y vegetales. Las partculas vricas, llamadas tambin viriones, estn constituidas por una molcula de ADN o ARN, nunca los dos en un mismo virus, contenida en el interior de una cpsula proteica y, en ocasiones, una envoltura membranosa.

Informacin: En realidad, los virus pueden considerarse como fragmentos independizados del genoma celular que han adquirido los genes necesarios para rodearse de una envoltura protectora y poseen la capacidad de desplazarse de una clula a otra. Mientras que los transposones son genes que se desplazan de un sitio a otro del cromosoma de una clula , los virus representaran a otro grupo de genes similares, pero que por haber adquirido la cpsula protectora se aventuraron a dar "saltos" mayores.

La destruccin celular es la consecuencia de la infeccin provocada por el virus, y las repercusiones para el organismo dependen de la importancia del tejido lesionado; as, mientras el virus de la gripe causa la destruccin de clulas de la mucosa respiratoria y " no reviste gravedad", el virus de la rabia, sin embargo, destruye neuronas y puede ser mortal si alcanza los centros vitales del encfalo; otros, como el virus del SIDA, destruyen el sistema inmunitario, y el organismo queda expuesto a todo tipo de infecciones oportunistas que terminan por causar la muerte.

ESTRUCTURA Y CARACTERSTICAS DE LOS VIRUS

Como ya se ha dicho, todo virus est formado por una envuelta proteica: la cpsida y por un cido nucleico; adems, algunos virus ms complejos pueden tener una envoltura membranosa de lpidos y protenas. Los virus son muy pequeos y slo son visibles mediante microscopa electrnica. Su tamao oscila desde los 10 nm, en los pequeos virus de la poliomielitis, hasta los 300 nm en el virus de la viruela, el mosaico del tabaco -TMV- y otros. Se diferencian entre ellos, adems de por el tamao, por las caractersticas estructurales de la cubierta (la cpsida), por la naturaleza de su cido nucleico, el modo de penetracin en la clula hospedadora y el mecanismo de replicacin.
3.1) Constitucin y morfologa de la cpsida

Todos los virus presentan, sin excepcin, una envoltura proteica, denominada, cpsida, compuesta por el ensamblaje de una o varias subunidades proteicas llamadas capsmeros, dispuestas a menudo en varias capas concntricas. La geometra de la cpsida es uno de los criterios que permite clasificar los virus en cuatro grupos: icosadricos, helicoidales, complejos y con envoltura.

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* Icosadricos: son los virus de aspecto esfrico, cuya cpsida adopta la estructura de un icosaedro (poliedro de 20 caras triangulares, 30 aristas y 12 vrtices); por ejemplo: los adenovirus, el virus de la polio y los picornavirus. * Helicoidales o cilndricos: estn representados por el virus del mosaico del tabaco y el virus de la rabia; presentan un aspecto alargado, que en realidad corresponde a un cilindro hueco, donde los capsmeros se ensamblan siguiendo un ordenamiento helicoidal, similar a los peldaos de una escalera de caracol. * Complejos, como bacterifagos (virus parsitos de bacterias) que parecen adoptar las dos estructuras anteriores. Al igual que los icosadricos poseen una regin icosadrica llamada cabeza donde se aloja el ADN y una cola formada por una banda de simetra helicoidal en cuyo interior se encuentra un eje tubular. La cola est terminada en un conjunto de fibras y espinas caudales que constituyen el sistema de anclaje del virus a la bacteria a la que infecta. * Virus con envoltura membranosa: La mayora de los virus animales, como los de la gripe, la viruela, la hepatitis, el virus del SIDA, etc. poseen, adems de la cpsida, una envoltura membranosa que no es mas que un fragmento de la membrana plasmtica de la clula hospedadora que el virus arrastra al abandonarla mediante un proceso de gemacin. La bicapa lipdica que forma esta envoltura posee un conjunto de glucoprote nas codificadas por el virus y dispuestas hacia el exterior, a modo de espculas, que constituyen su sistema de anclaje en los receptores de membrana de las clulas hospedadoras y, por tanto, median en el mecanismo de penetracin por endocitosis o por fusin de membranas. La envoltura membranosa es muy importante desde el punto de vista inmunolgico

Fig. 17 Virus. 1 y 2) Virus icosadricos; 3) Virus complejo; 4) Virus helicoidal; 5) Virus con envoltura.

Fig. 18 Virus helicoidal. Virus del mosaico del tabaco. 1) ARN viral; 2) cpsida;

Fig. 19 Virus helicoidal. Virus del mosaico del tabaco.

cabeza genoma cola fibras

placa basal

Fig. 20 Virus con cpsida compleja: Bacterifago.

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3.2) El cido nucleico

Es el componente esencial del virus y puede ser ADN monocatenario, por ejemplo, en el fago O-X-174, o ADN bicatenario, como el fago T4 y los adenovirus; pero tambin existen virus con ARN bicatenario (los reovirus) y otros portadores de ARN monocatenario, como es el caso de los virulentos retrovirus, entre los que se encuentran el de la gripe, el sarampin, la rabia, el SIDA y determinados virus oncgenos causantes de ciertos tipos de cncer (sarcoma de Rous, determinadas leucemias, etc.). Este ltimo grupo contiene, adems de los otros componentes mencionados, un enzima particular llamado retrotranscriptasa o transcriptasa inversa, que le va a permitir transcribir su ARN en un ADN dentro de la clula infectada.
El material gentico viral

Tipo de Virus
Virus vegetales

cido nucleico
ARN monocatenario

Cpsida

Envoltura

Ejemplo

Helicoidal

No

Mosaico del tabaco

Bacterifagos

ADN bicatenario De todos los tipos

Compleja

No

Bacterifago T4 Gripe, SIDA, etc.

Virus animales

Icosadricos

Frecuente

MECANISMOS DE REPLICACIN: CICLO VITAL DE LOS VIRUS

Aunque el genoma de un virus contiene escaso nmero de genes, es suficiente para inhibir la expresin gnica de la clula hospedadora y obligarla a transcribir y traducir su breve mensaje. El modo de penetracin , los mecanismos y los compartimentos celulares utilizados para la replicacin, son diferentes en los distintos tipos de virus. De todos ellos, se pondrn como ejemplo el de los retrovirus y los bacterifagos.
a) Ciclo vital de un retrovirus: El VIH causante del SIDA.

Los retrovirus son un grupo especial de virus animales cuyo cido nucleico es ARN, poseen envoltura y la enzima transcriptasa inversa. EL VIH es un retrovirus relativamente complejo. Est constituido por una membrana lipdica con glucoprotenas dispuestas hacia el exterior a modo de espnas. En el interior encontramos una cpsida proteica que encierra el material gentico, formado por dos molculas de ARN monocatenario y se encuentran ligadas, cada una de ellas, a una molcula de una enzima, la transcriptasa inversa.

Fig. 21 Virus del S.I.D.A.: a) envoltura membranosa; b) cpsida ; c) cido nucleico (ARN); d) espculas proticas.

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Ciclo vital del virus del SIDA

1 2

6a

6b 3

Informacin: El VIH ataca preferentemente a los linfocitos T4. Las fases de este proceso son:

10) Contacto entre las espculas de su envoltura membranosa y los receptores de la clula hospedadora. Estas permiten la fusin de membranas, introduciendo en su interior la cpside con el material gentico. 20) Una vez en el interior, el virus se despoja de su cpsida protica y quedan libres las hebras de ARN y la enzima retrotranscriptasa que transporta. 30) La retrotranscriptasa, tambin llamada transcriptasa inversa, primero hace una copia en ADN de la cadena de ARN, es decir, invierte el proceso normal de transcripcin de ADN a ARN, originando una hlice hbrida ARN-ADN. 40) La hlice hbrida ARN-ADN es utilizada por la misma enzima para generar una doble hlice de ADN (previa degradacin del ARN). 50) Las dobles cadenas de ADN vricas entran en el ncleo y se insertan en el cromosoma celular, donde puede permanecer en estado latente en forma de provirus durante un tiempo ms o menos prolongado. 60) Finalmente se transcriben y se traducen utilizando la maquinaria metablica de la clula y origina nuevas copias de ARN vrico, protenas de la cpsida y de la envoltura y enzimas retrotranscriptasas. 70) Estos componentes se ensamblan, y... 80) los virus abandonan la clula mediante un proceso de gemacin que les permite adquirir de nuevo su recubrimiento membranoso. Todos estos procesos pueden ser lentos, originando tan slo un descenso de la actividad metablica del hospedador, o rpidos, con lo que la salida masiva de virus termina con la lisis de la clula.

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b) Ciclo vital del fago T4.

El bacterifago T4 es un virus complejo con una cabeza icosadrica y una cola en la que hay una placa basal y fibras de fijacin. El genoma se compone de una molcula de ADN bicatenaria que se encuentra profusamente empaquetada dentro de la cabeza. El fago se fija en la pared bacteriana, en las regiones denominadas puntos de adherencia, a travs de los cuales inyecta su ADN mediante la contraccin de la vaina de la cola. Una vez en el protoplasma bacteriano, el ADN puede seguir dos caminos: multiplicarse y originar nuevos virus (va ltica ), con lo que se produce la destruccin de la bacteria, o integrarse en el cromosoma bacteriano y adoptar la forma de profago (va lisognica).
cabeza genoma cola fibras

placa basal

Fig. 22 Fago T4 (bacteriofago).

i) Ciclo ltico.

1) Fijacin y entrada

2) Multiplicacin

3) Lisis y liberacin

1) Fijacin y entrada: El bacterifago fija su cola a receptores espec ficos de la pared de la bacteria, donde una enzima localizada en la cola del virus debilita los enlaces de las mol culas de la pared. A continuacin, el fago contrae la vaina helicoidal, lo que provoca la inyeccin del contenido de la cabeza a travs del eje tubular de la cola del fago: el cido nucleico del virus penetra en la clula. 2) Multiplicacin: Una vez dentro, el ADN del virus, utilizando nucletidos y la enzima ARNpolimerasa de la bacteria, dirige la sntesis de gran cantidad de ARNm viral. Este ARNm viral sirve de base para la snte sis de protenas del virus (capsmeros, endonucleasas, endolisinas). El ADN vrico, utilizando los complejos enzimticos de la bacteria, se replica muchas veces. Tanto los cidos nucleicos replicados como el resto de los componentes vricos que se han sintetizado se ensamblan, dando lugar a nuevos virus. 3) Lisis y liberacin. En una bacteria pueden formarse unos 100 bacterifagos, que salen al exterior debido a la accin de la endolisina, enzima que lisa la pared bacteriana. Debido a ello, se produce la ruptura de la pared bacteriana y la muerte de la clula. Los virus quedan libres para infectar nuevas clulas.

ii) Ciclo lisognico.

No siempre se produce la lisis inmediata de la clula. Hay fagos atemperados o atenuados que se integran en el ADN bacteriano por entrecruzamiento de dos regiones idnticas del fago y de la bacteria, del mismo modo a como ocurre en los plsmidos. Estos fagos integrados se denominan profagos, y se replican pasivamente con el ADN de la bacteria. Las bacterias capaces de establecer esa relacin con los fagos atenuados se denominan lisognicas.

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El ADN del profago puede permanecer en forma latente durante varias generaciones de la bacteria, hasta que un estmulo induzca la separacin del profago, lo que iniciar un ciclo ltico tpico. Mientras la clula posea el ADN profago ser inmune frente a infecciones de este mismo virus. Otros virus que no son bacterifagos pueden tambin tener ciclos lisognicos.

1) Respuesta ltica.

2) Respuesta lisognica.

Fig. 23 Ciclos ltico y lisognico de un fago.

VIROIDES

Son extremadamente sencillos y forman un escaln inferior a los virus. Son simplemente genomas desnudos, ARN de una cadena (pero en forma de horquilla, pues hay complementariedad entre sus bases, simulando un ARN doble para protegerse de los enzimas hidrolti cos celulares que atacan a los ARN simples) y no presentan cpsida proteica. Solamente causan enfermedades en los vegetales. Han producido prdidas econmicas importantes: en cultivos de patata en USA y en cocoteros en Filipinas.

Los viroides son de menor tamao que cualquiera de los genomas vricos conocidos, pero suficiente para poder codificar una protena, pero no se cree que lo hagan, ya que el ARN de los viroides carece de seales que se necesitan para la traduccin del ARN a una protena. Por lo tanto su informacin no se traduce, solo se replica. Parece probable que sea la ARNpolimerasa del hospedador, que est en el ncleo de las plantas, la que replica el genoma del viroide. No est claro cmo se transmiten entre clulas ( dada la pared celular de las clulas vegetales), y mucho menos entre individuos.

LOS PRIONES: De estos "organismos" sabemos an menos. Se descubren en 1983 como agentes causantes de afecciones neuronales espordicas. Ahora aumenta su inters debido al mal de las vacas locas. Es una partcula infecciosa protenica (protena patolgica). Las pruebas obtenidas hasta el momento parecen indicar que el prin carece de cido nuclico. Se conocen dos enfermedades causadas por priones: La Tembladera, una alteracin neurolgica de ovejas y cabras, conocida desde el siglo XVII y la enfermedad de Creutzfeld-Jacob, una rara demencia humana. Los priones tambin se consideran agentes probables de otras enfermedades humanas que afectan al sistema nervioso: el Kuru, observado slo en tribus de Nueva Guinea, asocindose al canibalismo tradicional (la enfermedad fue desapareciendo conforme cesaban las prcticas necrfagas). La enfermedad de Creutzfeld-Jacob en individuos menores de 35 aos se relacion con el consumo de subproductos de vacas enfermas, que estaban alimentadas con piensos fabricados con restos de ovejas con tembladera. La infeccin por priones no provoca una respuesta inmunitaria, debido a que el prin est dentro de nuestras propias clulas. El agente causante es una protena propia de la membrana plasmtica de las neuronas. Se sabe que est codificada por un gen del cromosoma 20. Esta protena sufre una alteracin que la convierte en patolgica (prin) Las protenas defectuosas actan como agentes infecciosos que cambian las protenas normales en defectuosas. La aparicin de la demencia es consecuencia de que se acumulan cristalizadas en las neuronas provocando su destruccin y muerte. Comparando las dos protenas, normal y patolgica, se comprueba que tienen la misma secuencia de aminocidos (estructura primaria), pero tienen un plegamiento distinto. Se han encontrado casos de transmisin hereditaria de la enfermedad, debido a una mutacin puntual que implica modificacin en la estructura primaria de la protena, sustituyndose una prolina por una leucina.

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CLASIFICACIN DE LOS VIRUS (slo para consultar)

Los criterios bsicos de clasificacin son el tipo de cido nucleico que contienen, el tipo de cpsida, la posesin de envolturas membranosas y el tipo de clula a la que parasita. Segn este ltimo criterio existen virus animales, virus vegetales y virus bacterianos o bacterifagos. Las caractersticas ms frecuentes de cada grupo ya se han visto en la pgina . A continuacin, y a modo de consulta veamos los ms importantes grupos de virus animales.

Clasificacin de los virus parsitos de clulas animales

N1

Familia

cido nucleico

Envoltura

Gnero y especie

Enfermedad

Papovaviridae (Papovairus)

ADN-bc circular

Desnudos

Virus del papiloma humano

Verrugas

Poxviridae (Poxvirus)

ADN-bc circular

Envueltos

Virus de la viruela

Viruela

Herpesviridae (Herpesvirus)

ADN-bc lineal

Envueltos

Virus de herpes simple I y II Virus de la varicela zoster

Grietas en los labios y herpes genital Varicela y herpes zoster Infecciones respiratorias, entricas y oftlmicas

Adenoviridae (Adenovirus)

ADN-bc lineal

Desnudos

Adenovirus humano

Parvoviridae (Parvovirus)

ADN-mc lineal

Desnudos

Virus adenoasociados

Infecciones en roedores

Reoviridae (Reovirus)

ARN-bc

Desnudos

Rotavirus

Diarreas infantiles

Orthomixoviridae (Ortomixovirus)

ARN-mc

Envueltos

Virus de la gripe

Gripe

Paramixoviridae (Paramixovirus)

ARN-mc

Envueltos

Virus de la parotiditis

Paperas (parotiditis)

Virus de sarampin 9 Rhabdoviridae (Rabdovirus) 10 Picornaviridae (Picornavirus) ARN-mc Desnudos Enterovirus (virus de la polio, Coxsakie y Echo ARN-mc Envueltos Virus de la rabia

Sarampin Rabia

Polio, miocarditis, pericarditis, gastroenteritis, meningoencefalitis.

11

Togaviridae (Togavirus)

ARN-mc

Envueltos

Virus de la rubola

Rubola

12

Retrovirus (Retrovirus)

ARN-mc

Envueltos

Virus de la inmunodeficiencia humana (VIH-1 y VIH-2) Virus de la leucemia de las clulas T

SIDA

Leucemia de las clulas T

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Forma de los virus que parasitan clulas animales

Leyenda: 1) Papovavirus; 2) Poxvirus; 3) Herpesvirus; 4) Adenovirus; 5) Parvovirus; 6) Reovirus; 7) Ortomixovirus; 8) Paramixovirus; 9) Rabdovirus; 10) Picornavirus; 11) Togavirus; 12) Retrovirus.

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Informacin: Modalidades de transcripcin de los virus animales

Los virus animales pueden clasificarse por su material gentico y por la forma de sintetizar su ARN mensajero.
Grupo I: Tienen como material gentico ADN de cadena doble (hebras + y -). La hebra (-) se transcribe en un ARNm. Ejemplo: virus del herpes. Grupo II: Tienen como material gentico ADN de cadena simple (+ -). La hebra de ADN sintetiza una molcula complementaria de ADN formndose un ADN de cadena doble. De estas dos hebras, la hebra (-) se transcribe en un ARNm. Ejemplo: Parvovirus. Grupo III: Tienen como material gentico ARN de cadena doble (hebras + y -). De estas dos hebras, la hebra (-) sirve de molde para la sntesis de un ARNm complementario. Ejemplo: Reovirus. Grupo IV : Tienen como material gentico ARN de cadena simple (hebra +). Esta hebra de ARN sintetiza una molcula complementaria de ARN: hebra (-) que sirve de molde para sintetizar un ARNm complementario. Ejemplo: Virus de la polio de los primates. Grupo V : Tienen como material gentico ARN de cadena simple (hebra -). Esta hebra de ARN sirve de molde para sintetizar un ARNm complementario. Ejemplo: Gripe. Grupo VI : Tienen como material gentico ARN de cadena simple (hebra +). Esta hebra de ARN sirve de molde para sintetizar un ADN complementario: hebra (-) que a su vez sirve de molde para sintetizar un ADN + . Se forma as un ADN de doble cadena (+ y -). La hebra de ADN (-) se transcribe formndose un ARNm+. Ejemplo: Retrovirus.

Modalidades de transcripcin de los virus de clulas animales

I- Herpes II- Parvovirus III- Reovirus IV- Polio de los primates V- Gripe VI- V.I.H. ADN ARN Lnea fina, cadena que no se transcribe

Fig. 24

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4. MICROORGANISMOS CON ORGANIZACIN CELULAR EUCARIOTA PROTOZOOS

cil

Son organismos formados por una sola clula, es decir, poseen la estructura tpica de una clula eucaritica animal, aunque en ocasiones presentan una mayor complejidad en su organizacin. Tienen una membrana plasmtica que los rodea y delimita, algunos forman un caparazn duro, calizo o silceo, o bien una fina envoltura de quitina.

vp

Mn mn vp

vg

Fig. 25 Paramecio, ciliado de las aguas dulces. vp) Vacuola pulstil. vd) Vacuola digestiva. cil) Cilios. Mn) Macroncleo. mn) Microncleo.

ESTUDIO DE UN PROTOZOO: EL PARAMECIO.

Mirando con el microscopio una infusin o agua de una charca puede observarse fcilmente el paramecio (Paramecium ssp.). Tiene forma de suela de zapato y de su cuerpo salen muchos cilios, dispuestos en filas a lo largo de toda su superficie, que le sirven para nadar. A un lado del cuerpo hay una abertura, la boca o citostoma, que da acceso a un embudo que se estrecha hacia el interior. Sirve para su alimentacin: con los cilios provoca un remolino que arrastra las partculas alimenticias hacia el fondo del embudo, donde se forma un vacuola digestiva que engloba las partculas ingeridas. En su citoplasma podemos distinguir: * Unas pequeas cavidades esfricas, ms o menos numerosas, llamadas vacuolas digestivas. * En cada extremo del cuerpo se halla una vacuola pulstil, de forma estrellada, que presenta movimientos rtmicos de contraccin y cuya misin es expulsar de la clula los productos de deshecho de la digestin y agua. * Un par de ncleos: uno grande (macroncleo) y otro pequeo (microncleo). Se reproducen asexualmente por divisin simple. Se han observado procesos sexuales (conjugacin) en los cuales dos paramecios se unen por el citostoma y a travs de l realizan un intercambio de material nuclear, separndose despus. Aunque en este proceso no haya variacin numrica, se considera una reproduccin sexual por el intercambio de material nuclear, que es lo esencial de la sexualidad. Cuando falta agua, se rodea de una membrana gruesa, donde permanece con vida latente, pudiendo resistir largas temporadas hasta que nuevamente haya agua, este proceso se conoce como enquistamiento.

Los ciliados: Los protozoos como el paramecio que presentan cilios para su movimiento se conocen con el nombre de ciliados. Otros ciliados que abundan en al agua de charcas son:

* Las Vorticelas, con cuerpo en forma de campana y un largo pednculo que puede arrollarse en espiral como un muelle. Forman colonias. * Los Stentor, con forma de trompeta, que pueden medir hasta 1 mm. Se suelen fijar a races, etc. por su extremo puntiagudo.
Otros protozoos: * La Ameba, que vive en las charcas. Forma gruesos pseudpodos para moverse y capturar su alimento: bacterias, algas, etc. Los protozoos que forman pseudpodos se denominan rizpodos. Adems de la ameba existe Entamoeba histolytica que es parsita del hombre donde origina la disentera amebiana * El Trypanosoma, protozoo de forma alargada y con un largo flagelo para su movimiento. Vive parsito en la sangre de algunos mamferos africanos de donde puede pasar al hombre por picadura de la mosca tsets. En el hombre origina la enfermedad del sueo. Los protozoos con flagelos: flagelados. * Plasmodium, que produce en el hombre la enfermedad de la malaria o paludismo. Se introduce en la sangre mediante la picadura de la hembra del mosquito Anopheles , quien a su vez lo toma de otros individuos enfermos. De esta forma la enfermedad se transmite de individuos enfermos a otros sanos por la picadura del mosquito. El plasmodio, una vez en la sangre, pasa al interior de los glbulos rojos donde se divide por esporulacin y destruye las clulas sanguneas.

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Fig. 26 Diferentes especies de protozoos. 1) Paramecio; 2) Stentor; 3) Ciliado sp.; 4) Vorticela; 5) Ameba.

Su forma y tamao son variables, pero casi todos ellos son microscpicos por lo que deben observarse al microscopio. Algunos viven libres en aguas dulce o saladas. Cuando se deseca el medio en que viven forman un caparazn y se enquistan. Otros viven parsitos en animales o vegetales produciendo enfermedades, o bien, simbiosis con ellos. Se suelen reproducir por biparticin simple, aunque algunos tienen otras modalidades e incluso se conocen procesos de reproduccin sexual.

Fig. 27 Euglena.

ALGAS MICROSCPICAS UNICELULARES

Formadas por una sola clula. Viven en el agua y son capaces de realizar la fotosnte sis. Entre ellas podemos citar las Diatomeas, que viven tanto en el mar como en el agua dulce y poseen un caparazn de slice (frstula) constituido por dos piezas que encajan como una caja y su tapadera. Algunas algas unicelulares, como Euglena viridis, tienen flagelos con los que se desplazan en el agua. Las algas unicelulares forman parte importante del llamado plancton.

Fig. 28 Diatomeas.

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HONGOS MICROSCPICOS

Bajo esta denominacin se incluye un amplio grupo de organismos de gran heterogeneidad. Entre las caractersticas comunes a todos los hongos pueden destacarse: a) Estar formados por una o ms clulas eucariotas. b) Encontrarse desprovistos de clorofila u otro pigmento fotosinttico. c) La pared celular no es de celulosa sino de quitina. Los hongos son organismos hetertrofos que necesitan para su nutricin sustancias orgnicas ya elaboradas; la mayora son saprfitos - se desarrollan sobre materia orgnica en descomposicin - y otros son parsitos que producen enfermedades en el hombre y otros animales y vegetales. Dentro de los hongos podemos encontrarlos unicelulares (levaduras) y pluricelulares (mohos), estos tienen una estructura denominada " talo" y que suele estar constituida por una serie de filamentos denominados " hifas", que pueden ser ramificadas y tabicadas, formando, en su conjunto, una estructura denominada " micelio". Su reproduccin puede ser sexual o asexual (gemacin, esporulacin, fragmentacin) y su clasificacin es compleja y se puede realizar atendiendo a diferentes caracteres

esporangios

hifas

Fig. 29 Hifas y esporangios del Mucor, hongo que coloniza el pan hmedo.

Fig. 30 Clula de levadura.

Fig. 31 Clula de levadura dividindose por gemacin.

APLICACIONES Y PAPEL EN EL ECOSISTEMA

conidiforos

El papel que los hongos ejercen en la naturaleza resulta de gran importancia, sobre todo si tenemos en cuenta su actividad descomponedora en los ecosistemas (reciclaje de materia orgnica). Tambin tienen una parte fundamental en la actividad humana. As, es conocido su papel en la alimentacin, la agricultura, silvicultura, industria qumica, enfermedades, etc. Los hongos son capaces de descomponer

hifas

Fig. 32 Hifas y conidiforos de Penicillium. Este hongo aparece sobre pan hmedo y naranjas enmohecidas.

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algunos materiales fabricados y usados por el hombre a partir de materiales de origen orgnicos (vegetal y animal); reciclan por tanto estos materiales como si se tratara de la materia orgnica que forma parte del ecosistema (biodeterioro). Por otra parte, desde hace cientos de aos el hombre ha utilizado diferentes especies de hongos para la transformacin de alimentos, un claro ejemplo son las levaduras utilizadas en la elaboracin de la cerveza y del vino (Saccharomyces), de los quesos (algunas especies de Penicillium), del pan, etc. Los hongos son muy importantes en la industria qumica como productores de numerosas sustancias como vitaminas, cortisonas, cidos orgnicos y sobre todo antibiticos (en este sentido cabe recordar que la penicilina fue descubierta por Fleming a partir de una especie de Penicillium). Los hongos tambin pueden ser agentes patgenos directos sobre el ser humano, son causantes de numerosas micosis superficiales en la piel, uas, pelo, etc. y micosis profundas con mayor riesgo para la salud. Tambin puede haber alergias micgenas provocando molestias respiratorias (por las esporas).
R
1

H N H

S CH3
3

N O COOH

CH3

Fig. 33 Penicilina. 1) Grupo amino libre; 2) Anillo -lactmico; 3) Anillo de tiazolina; R) Radical que determina las propiedades farmacolgicas.

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5. INTERVENCIN DE LOS MICROORGANISMOS EN LAS TRANSFORMACIONES O CICLOS BIOGEOQUMICOS.

Las bacterias y los hongos son los microorganismos que, junto a los productores, permiten la existencia del ciclo de la materia en la biosfera. Su funcin es descomponer la materia orgnica procedente de restos vegetales, cadveres y excrementos, convirtindola en materia inorgnica que vuelve a ser utilizada por los productores. La actividad de los descomponedores en la biosfera permite que la materia se recicle y no se disperse en las sucesivas transferencias, como ocurre con la energa. Muchos de los elementos qumicos que componen los materiales terrestres estn sometidos a unos circuitos cclicos que consisten, bsicamente, en que pasan de formar parte de materia inorgnica inerte a formar parte de materia constitutiva de seres vivos y de stos, posteriormente, de nuevo a materia inorgnica inerte, cerrndose el ciclo. Estos ciclos de la materia son los ciclos biogeoqumicos. Como ejemplos de ciclos biogeoqumicos, y el papel que desempean los microorganismos en ellos, estudiaremos el ciclo del carbono y el ciclo del nitrgeno:
A) EL CICLO DEL CARBONO

Mediante el proceso de fotosntesis, las plantas toman el carbono en forma de CO2 de la atmsfera o del agua, asimilndolo durante la fase oscura de dicho proceso para formar molculas orgnicas. Parte del carbono vuelve al medio inerte en la misma forma de CO2 como resultado de la respiracin tanto de las propias plantas como de los organismos consumidores y descomponedores. Los desechos, restos o cadveres que contienen carbono vuelven tambin al medio inorgnico por accin de los descomponedores (bacterias y hongos).

Combustin

CO2
Vegetales Descomponedores Respiracin
(Bacterias Hongos) Compuestos orgnicos

P e t r l e o

C a r b n

Fotosntesis

Consumidores
Compuestos orgnicos

Fig. 34 El ciclo del carbono.

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Una parte muy importante del carbono, puede tardar millones de aos en incorporarse al medio inerte. Es el caso del carbono que llega a formar parte del petrleo y del carbn mineral. Este carbono puede volver al ciclo por combustin de estos combustibles fsiles.
B) EL CICLO DEL NITRGENO

La fuente principal de nitrgeno es la atmsfera, de la que este gas constituye un 78%; sin embargo, este nitrgeno atmosfrico slo puede ser fijado por un grupo de bacterias fijadoras del nitrgeno que transforman este gas en compuestos nitrogenados utilizados directamente por las plantas. Entre el grupo de bacterias fijadoras del nitrgeno est el gnero Rhizobium que se encuentra en simbiosis con las races de las plantas leguminosas (guisantes, judas, trboles, alfalfa, etc.), estas bacterias se introducen en los tejidos del vegetal, donde proliferan y desarrollan una especie de ndulos fijadores del nitrgeno. El resto de las plantas depende del nitrgeno que se encuentra en el suelo, de donde lo toman en forma de nitratos. Cuando un organismo muere, el nitrgeno de los restos orgnicos, como son las protenas y los cidos nucleicos, por accin de bacterias y hongos presentes en el suelo, se convierte en amoniaco o in amonio (amonificacin). Otros grupos de bacterias del suelo oxidan los iones amonio a nitritos y finalmente las bacterias nitrificantes oxidan los nitritos a nitratos. Los nitratos son ya fcilmente absorbidos por las races de las plantas y utilizados para formar molculas nitrgenadas (protenas y cidos nucleicos). Mediante las cadenas trficas posteriores, el nitrgeno asimilado en estas molculas del vegetal pasa a los animales. Existe un grupo de bacterias desnitrificantes que en condiciones anaerobias y de inundacin, convierten los nitratos del suelo en nitrgeno molecular, que escapa a la atmsfera. Por eso los agricultores drenan las tierras para reducir la desnitrificacin y aaden fertilizantes para incrementar los niveles de nitrgeno del suelo.
Bacterias y hongos Animales

Nitrgeno atmosfrico

Bacterias fijadoras de nitrgeno de los suelos

Suelos Nitratos Nitritos Sales amoniacales

Sustancias nitrogenadas orgnicas: -Protenas - cidos nuclicos

Vegetales Algas

Fig. 35 El ciclo del nitrgeno.

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6. LOS MICROORGANISMOS COMO AGENTES DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS

La mayora de los microorganismos son inocuos para los dems seres vivos. Muchos de ellos incluso se han adaptado a las condiciones especiales que tienen los tejidos de los animales viviendo en ellos, en su piel, en sus conductos digestivos o respiratorios; son la denominada flora normal. Sin embargo, los microbios ms conocidos son aquellos que producen enfermedades infecciosas en las plantas, en los animales y en la especie humana. Estos son los microorganismos patgenos. El grado de patogenidad se denomina virulencia y se mide, generalmente, por el nmero de microorganismos necesarios para desarrollar la enfermedad. Hay microorganismos que normalmente no son patgenos pero pueden serlo cuando disminuyen los mecanismos defensivos de un animal: son los microorganismos oportunistas.

Robert Koch (1843- 1910) fue el primero en comprobar que una bacteria era la causante de una enfermedad infecciosa, el carbunco en ovinos. Estableci cuatro postulados que constituyen la base de las investigaciones mdicas para establecer el tratamiento de las infecciones:

1)El organismo especfico ha de encontrarse siempre asociado a la enfermedad. 2)El organismo tiene que ser aislado y obtenido en cultivo puro en el laboratorio. 3)Este cultivo puro inoculado en un animal susceptible de ser infectado produce la enfermedad. 4)Se debe recuperar el organismo del animal infectado experimentalmente en cultivo puro. Otros aportes de la labor investigadora de Koch fueron el descubrimiento de los cultivos en medios slidos y el descubrimiento de los agentes causantes de la tuberculosis (llamado desde entonces bacilo de Koch) y del clera.

V AS DE INFECCIN

El primer paso en una infeccin es la colonizacin por parte de los microorganismos de tegumentos y mucosas corporales, donde deben competir con otros microorganismos comensales. Los que superan esta primera fase con ms xito son los que producen las enfermedades ms contagiosas. La entrada de microorganismos en el cuerpo del hospedador puede tener lugar a travs de distintas vas: - Heridas o abrasiones en los tegumentos. - Roturas microscpicas en las mucosas. - Picaduras de artrpodos (arcnidos e insectos, principalmente). - Adherencia especfica del microorganismo a las clulas del hospedador y paso a travs de clulas epiteliales. - En determinadas circunstancias, algunos microorganismos forman colonias muy numerosas en los tegumentos, las cuales son responsables de una lesin epitelial, producindose inflamacin y rotura, a travs de la cual penetran. Una vez dentro, los microbios tienen que reproducirse, ya sea en una lesin superficial, ya sea en un tejido especfico al que son conducidos por va linftica o sangunea. En esta primera fase tienen que superar los mecanismos defensivos del hospedador, lo que incluye

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la inflamacin, la detencin en los ganglios linfticos y su eliminacin de la sangre por accin de los fagocitos. Si consiguen superarlos, se desarrolla la enfermedad. El tiempo que transcurre desde que penetran hasta la manifestacin de los sntomas de enfermedad se denomina perodo de incubacin. Las infecciones pueden ser superficiales, si el microorganismo se multiplica en las clulas epiteliales de la zona de entrada, o sistmicas si alcanzan los vasos sanguneos y se multiplican en varios rganos a la vez.
Factores de patogenicidad. Toxinas

Segn la infeccin va progresando, se empiezan a manifestar los sntomas de la enfermedad. Esto nos indica que el hospedador ya ha sufrido una lesin por diversas causas:

* La proliferacin de los microorganismos El crecimiento del nmero de clulas microbianas puede conllevar dos clases de peligro: de un lado, se puede crear una competencia entre el microbio y las clulas del hospedador por un determinado nutriente; de otro lado, se puede producir el bloqueo de vasos sanguneos o un dao directo sobre las clulas del hospedador * Produccin de toxinas Las toxinas son sustancias venenosas de bajo peso molecular, que pueden ser excretadas al medio (exotoxinas), como la del botulismo o el ttanos, o retenidas dentro de la clula (endotoxinas). Estas toxinas pueden provocar daos locales, cuando son muy especficas, o difundirse y causar lesin sistmica. * La produccin de enzimas extracelulares como la lecitinasa que hidroliza los lpidos de membrana de las clulas husped; las hemolisinas que lisan los glbulos rojos, liberando al plasma su hemoglobina, etc.

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7. BIOTECNOLOGA

La biotecnologa es el conjunto de procesos industriales que se sirve de microorganismos o de clulas procedentes de animales o vegetales para obtener determinados productos comerciales o para realizar importantes transformaciones qumicas. La biotecnologa se ocupa, entre otros, de procesos tan diferentes como la clonacin, la terapia gnica, la inseminacin in vitro, la obtencin de bebidas alcohlicas, etc. Aunque el trmino es moderno, rene tcnicas y mtodos conocidos desde la antigedad. Por ejemplo, la fabricacin del pan, que ya realizaban los antiguos egipcios, la mejora de las razas de animales y la obtencin de plantas con mayor produccin de frutos. El trmino biotecnologa se comenz a usar a finales de los aos setenta, tras la aparicin de la ingeniera gentica, que se basa en la manipulacin del material gentico de las clulas. En la actualidad, con la expansin de la biotecnologa y los mtodos de manipulacin gentica, los microorganismos han sido modificados para fabricar productos tiles que los microorganismos no producen de manera natural.

BIOTECNOLOGAS APLICADAS A LA MEJORA DEL MEDIO AMBIENTE

Diversas tcnicas biotecnolgicas permiten resolver, de diferentes y novedosas maneras, el problema de la contaminacin ambiental. Se pueden utilizar diversos microorganismos para afrontar problemas de tratamiento y control de la contaminacin qumica de distintos ecosistemas. La ingeniera gentica permite combinar las caractersticas de estos microorganismos para aumentar su eficacia o generar microbios recombinantes con nuevas caractersticas. Aunque muchos microorganismos diferentes juegan un papel esencial en los equilibrios ambientales, la mayora de las aplicaciones biotecnolgicas actuales se realizan con ciertos tipos de bacterias. Algunas de las aplicaciones de la biotecnologa a la mejora del medio ambiente son las siguientes: - Eliminacin de metales pesados. - Eliminacin de mareas negras. - Obtencin de energa no contaminante. - Tratamiento de residuos urbanos e industriales. - Tratamiento de diferentes tipos de contaminacin asociados a la industria del petrleo. - Tratamiento de la contaminacin producida por herbicidas, pesticidas e insecticidas. - Depuracin de aguas residuales.

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Control de mareas negras

Se llama marea negra al vertido masivo de petrleo debido a un accidente durante el transporte del petrleo en grandes barcos. Es posible utilizar bacterias que digieren los hidrocarburos que forman el petrleo y los transforman en sustancias qumicas nada o menos contaminantes. Aunque generalmente cada tipo de bacteria utiliza una clase de hidrocarburo, se intenta combinar las caractersticas de varias bacterias para conseguir una bacteria recombinante capaz de transformar muchos hidrocarburos diferentes.

Eliminacin de metales pesados

Los iones metlicos de los elementos pesados (por ejemplo, mercurio, cinc, nquel, cobre, plomo) movilizados por la accin humana a distintos ecosistemas constituyen el tipo de contaminacin ms grave del planeta. Los efectos contaminantes de los metales pesados superan en cuanta la suma de todos los dems tipos de contaminacin qumica. Gracias a la ingeniera gentica se han desarrollado bacterias que pueden vivir en presencia de metales pesados y eliminarlos mediante diversas reacciones qumicas.

BIOTECNOLOGAS APLICADAS A LA MEJORA DE LA SALUD

La biotecnologa tiene en la salud humana, entre otros, los siguientes campos de aplicacin: - Prevencin de enfermedades hereditarias. - Terapia gnica. - Produccin de vacunas. - Obtencin de anticuerpos monoclonales e interferones. - Produccin de hormonas (por ejemplo insulina y hormona del crecimiento). - Produccin de antibiticos y otros productos farmacuticos.
Antibiticos

La palabra antibitico designa a aquellas sustancias que, producidas por determinados microorganismos, pueden acabar con la vida de otros. En 1929, Alexander Fleming descubri estas sustancias. Estaba trabajando con Staphylococcus aureus y su cultivo se contamin con un hongo del gnero Penicillium, de forma que las colonias rodeadas por ste moran. Fleming supuso que el hongo produca alguna sustancia antibacteriana, por lo que hizo un filtrado, descubriendo as, la penicilina. Fue incapaz de purificarla, dado que era qumicamente inestable, lo que se hizo aos ms tarde, gracias al desarrollo de un proceso industrial adecuado. Desde 1945 se han aislado cientos de antibiticos producidos por hongos del gnero Penicillium y bacterias de los gneros Bacillus y Streptomyces. El gran problema de la actualidad es que han comenzado a desarrollarse a un ritmo alarmante cepas de patgenos resistentes a antibiticos e, incluso, cepas multirresistentes a varios antibiticos simultneamente, por lo que hay que encontrar otros nuevos, o modificar los existentes para que recobren su eficacia, lo que constituye el gran reto de la biotecnologa.

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1) Microbiologa

Hormonas

Las personas que sufren diabetes mellitus deben inyectarse insulina varias veces al da. Hasta 1983 la insulina que utilizaban las personas diabticas era insulina de cerdo purificada (diferente de la humana). Desde esa fecha se utiliza insulina obtenida por ingeniera gentica: se ha introducido el gen de la insulina humana en la bacteria Escherichia coli, que la produce en cantidades masivas y con las mismas caractersticas. La insulina es la primera protena fabricada por ingeniera gentica y comercializada. Tambin por ingeniera gentica se obtiene la hormona del crecimiento. Otras hormonas como la testosterona y progesterona, hormonas sexuales masculina y femenina, utilizada sta ltima en la fabricacin de frmacos anticonceptivos se obtienen de la fermentacin de ciertas levaduras.

BIOTECNOLOGAS DE LOS ALIMENTOS

El hombre desde la antigedad ha obtenido productos alimenticios con la intervencin de los microorganismos, a pesar de desconocer su existencia. Hoy da gracias al conocimiento de sus caractersticas y metabolismo, son explotados industrialmente en la fabricacin de numerosos alimentos y bebidas. Por ejemplo: Pan. Yogur. Queso. Mantequilla. Vinagre. Vino. Cerveza. Encurti dos. Produccin de protenas para piensos de animales domsticos. Sntesis de vitaminas que se aaden a los alimentos o en compuestos farmacuticos. (Por ejemplo la vitamina B12 es producida industrialmente a partir de bacterias y la riboflavina es producida por diversos microorganismos como bacterias y hongos). Sntesis de aminocidos que se utilizan como aditivos alimentarios. (Ejemplos de aminocidos producidos por fermentacin microbiana son el cido glutmico, la lisina, la glicina, la metionina y la alanina).

Fabricacin del yogur Se utiliza leche, que fermenta mediante determinadas cepas de las bacterias Lactobacillus y Streptococcus que transforman la lactosa en cido lctico. El cido lctico es el causante de la precipitacin de las protenas de la leche. Ambos microorganismos necesitan una temperatura de

45C para desarrollarse al mximo, por eso la leche se envasa en caliente para que despus siga el proceso de fermentacin en la estufa a dicha temperatura. El pH del yogur (despus del enfriamiento a 4 C) es alrededor de 4, este medio cido impide el crecimiento de otras bacterias. Actualmente la produccin de yogures se ha especializado en gran cantidad de sabores e incluso en el enriquecimiento de nuevas bacterias.

Fabricacin de cerveza Es un proceso que se conoce desde antiguo, ya que, al parecer, los babilonios fueron los primeros en elaborar la cerveza. Se basa en la fermentacin alcohlica que realizan las levaduras del gnero Saccharomyces. La cerveza se obtiene por fermentacin de la cebada realizada por las levaduras S. cerevisae o S. carlsbergensis. Los granos de cebada se ponen a remojo, de forma que germinan y generan amilasas suficientes que hidrolizan el almidn. Despus se secan, lo que constituye la malta, la cual se puede almacenar hasta su uso. Con la malta se obtiene el mosto de cerveza, al cual se adiciona el lpulo, encargado de dar a la cerveza el sabor amargo y de conservarla del crecimiento bacteriano. Es entonces cuando se aade el inculo, que fermenta durante cinco a diez das a temperatura y pH adecuados.

J. L. Snchez Guilln

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