HISTORIA DE LA MICROBIOLOGIA Introduccin La microbiologa es la ciencia encargada del estudio de los microorganismos, seres vivos pequeos (de mikros

"pequeo", bios, "vida" y logos, "estudio"), tambin conocidos como microbios. Es la rama de la biologa dedicada a estudiar los organismos que son slo visibles a travs del microscopio: organismos procariontes y eucariontes simples. Son considerados microbios todos los seres vivos microscpicos, estos pueden estar constituidos por una sola clula (unicelulares), as como pequeos agregados celulares formados por clulas equivalentes (sin diferenciacin celular); estos pueden ser eucariotas (clulas con ncleo) tales como hongos y protistas, procariotas (clulas sin ncleo definido) como las bacterias]. Sin embargo la microbiologa tradicional se ha ocupado especialmente de los microorganismos patgenos entre bacterias, virus y hongos, dejando a otros microorganismos en manos de la parasitologa y otras categoras de la biologa. Aunque los conocimientos microbiolgicos de que se dispone en la actualidad son muy amplios, todava es mucho lo que queda por conocer y constantemente se efectan nuevos descubrimientos en este campo. Tanto es as que, segn las estimaciones ms habituales, slo un 1% de los microbios existentes en la biosfera han sido estudiados hasta el momento. Por lo tanto, a pesar de que han pasado ms de 300 aos desde el descubrimiento de los microorganismos, la ciencia de la microbiologa se halla todava en su infancia en comparacin con otras disciplinas biolgicas tales como la zoologa, la botnica o incluso la entomologa. Al tratar la microbiologa sobre todo los microorganismos patgenos para el hombre, se relaciona con categoras de la medicina como patologa, inmunologa y epidemiologa.

Historia Aunque el trmino bacteria, derivado del griego ("bastoncillo"), no fue introducido hasta el ao 1828 por Christian Gottfried Ehrenberg, ya en 1676 Anton van Leeuwenhoek, el cual usando un microscopio de una sola lente que l mismo haba construido basado en el modelo creado por el erudito Robert Hooke en su libro "Micrographia", fue capaz de realizar la primera observacin microbiolgica registrada de "animculos" como van Leeuwenhoek los llam y dibuj entonces. La bacteriologa (ms tarde una subdisciplina de la microbiologa) se considera fundada por el botnico Ferdinand Cohn (18281898]. Ferdinand Cohn fue tambin el primero en formular un esquema para la clasificacin taxonmica de las bacterias. Louis Pasteur (1822-1895) considerado el padre de la Microbiologa Mdica, y Robert Koch (1843-1910) fueron contemporneos de Cohn. Quiz el mayor logro de Pasteur consisti en la refutacin mediante cuidadosos experimentos de la por aquel entonces muy respetada teora de la generacin espontnea, lo cual permiti establecer firmemente a la microbiologa dentro de las ciencias biolgicas. Pasteur tambin dise mtodos para la conservacin de los alimentos (pasteurizacin) y vacunas contra varias enfermedades como el ntrax, el clera aviar y la rabia. Robert Koch es especialmente conocido por su contribucin a la teora de los grmenes de la enfermedad, donde, mediante la aplicacin de los llamados postulados de Koch, logr demostrar que enfermedades especficas estn causadas por microorganismos patognicos especficos. Koch fue uno de los primeros cientficos en concentrarse en la obtencin de cultivos puros de bacterias, lo cual le permiti aislar y describir varias especies nuevas de bacterias, entre ellas Mycobacterium tuberculosis, el agente causal de la tuberculosis. Mientras Louis Pasteur y Robert Koch son a menudo considerados los fundadores de la microbiologa, su trabajo no reflej fielmente la autntica diversidad del mundo microbiano, dado su enfoque exclusivo en microorganismos de relevancia mdica. Dicha diversidad no fue revelada hasta ms tarde, con el trabajo de Martinus Beijerinck (1851-1931) y Sergei Winogradsky (1856-1953). Martinus Beijerinck hizo dos grandes contribuciones a la microbiologa: el descubrimiento de los virus y el desarrollo de tcnicas de cultivo microbiolgico. Mientras que su trabajo con el virus del mosaico del tabaco estableci los principios bsicos de la virologa, fue su desarrollo de nuevos mtodos de cultivo el que tuvo mayor impacto inmediato, pues permiti el cultivo de una gran variedad de microbios que hasta ese momento no haban podido ser aislados. Sergei Winogradsky fue el primero en desarrollar el concepto de quimiolitotrofa y de este modo revelar el papel esencial que los microorganismos juegan en los procesos geoqumicos. Fue el responsable del aislamiento y descripcin por vez primera tanto de las bacterias nitrificantes como de las fijadoras de nitrgeno.

Descubrimiento y perfeccionamiento del microscopio El invento del microscopio parece remontarse al siglo XVI cuando en 1590 los hermanos Jansen en Holanda inventaron el microscopio compuesto, constaba de un tubo con dos lentes convexas en cada extremo y ampliaba ms que las lupas, que existan desde la Edad Media, aunque daba una imagen borrosa. Un importante microscopista fue el holands Antonie van Leeuwenhoeck nacido en Delft en 1632 ) quien, sin ninguna preparacin cientfica, puede considerarse el fundador de la bacteriologa. Tallaba el mismo sus lupas sobre esferitas de cristal, cuyos dimetros no alcanzaban el milmetro (su campo de visin era muy limitado, de dcimas de milmetro). Con estas pequeas distancias focales alcanzaba los 275 aumentos. Observ los glbulos de la sangre, bacterias y protozoos; examin por primera vez los glbulos rojos y descubri que el semen est compuesto de espermatozoides. Durante su vida no revel sus mtodos secretos y a su muerte en 1723, 26 de sus aparatos fueron cedidos a la Royal Society de Londres. En 1665, Robert Hooke observ con un microscopio un delgado corte de corcho. Hooke not que el material era poroso. Esos poros, en su conjunto, formaban cavidades poco profundas a modo de cajas a las que llam clulas. Hooke haba observado clulas muertas. Unos aos ms tarde, Marcelo Malpighi, anatomista y bilogo italiano, observ clulas vivas. Fue el primero en estudiar tejidos vivos al microscopio. Durante el siglo XVIII continu el progreso y se lograron objetivos acromticos por asociacin de vidrios flint y crown obtenidos en 1740 por H.M. Hall y mejorados por Dollond. De esta poca son los estudios efectuados por Newton y Euler.

Generacin espontanea
Desde los tiempos primitivos la gente crea en la generacin espontnea es decir que los organismos vivos puede originarse a partir de materia no viva ,incluso el gran aristteles pensaba que uno de los inberbrados mas sencillos podrian originar por generacin espontnea esta opinin fuedesafiada por franshesco redes, experimento la carne en tres recvipiente ,unacubierto con papel .otro decubierto y el otro cubierto con una gasa ,para evitar pasar la moscas depositaran sus huevos en la carne descubierta y se desarrollar gusanos.

Helmont (1684) realiz ensayos cuyos resultados fue la generacin de ratones a partir de trapos sucios y de gusanos en fermentacin. L. Joblot (1711) Demostr que en infusiones calentadas no se producan animalillos mientras que las fras se plagaban en ellas. Needham (1749) realiz algunos experimentos para demostrar la generacin espontnea de las bacterias. Coloc infusiones vegetales en frascos que luego sell y luego las calent a bao Mara por un corto tiempo. A pesar de este tratamiento, la mayora de los frascos se volvan turbios y llenos de microorganismos en pocos das. Needham pens que haba matado todos los microbios mediante el calentamiento: la aparicin de grmenes en el lquido era porque se haban generado espontneamente. Spallanzani, (1765 y 1776), quiso demostrar el error de esta conclusin. Repiti el experimento de Needham, pero hirvi las infusiones durante ms tiempo. Ahora se sabe que Sapallanzani mat algunas formas resistentes de microbios (esporas) que haban sobrevivido a la exposicin al calor aplicado por Needham demostrando la inexistencia de de la generacin espontnea de los microbios. Schulze (1836) demostr que un lquido hervido como el usado por Spallanzani, no poda contener bacterias vivas, incluso si se permita la entrada de aire, siempre y cuando antes fuera librado de microbios, pasndolo lentamente a travs de cido sulfrico. Schwann (1837) obtuvo los mismos resultados, cuando pas aire a travs de tubos muy calientes, antes de que entrara en los frascos. Louis Pasteur (1822-1895), llev acabo experimentos que probaran definitivamente que la generacin espontnea no era posible. l prepar un matraz con una entrada larga y delgada en forma de cuello de ganso. A s se estableci que los microorganismos no se generan espontneamente, sino que siempre se originan, como sucede con todas las clases de seres vivos, mediante la reproduccin de otros seres vivos semejantes a ellos mismos. Esta verdad fue demostrada nuevamente en 1876-1877 por el trabajo de Jhon Tyndall (18201893), fsico ingls que prob que los microorganismos son llevados por el polvo y ste es la fuente de contaminacin de los lquidos expuestos al aire.

Descubrimiento de la fermentacin
Una profundizacin en los fenmenos de fermentacin lleg cuando en 1897 Buchner obtuvo, a partir de levaduras, una preparacin enzimtica (zimasa) que era capaz de realizar la misma transformacin de "fermentacin" que las clulas vivas. Este descubrimiento, que evocaba las propuestas de Berzelius y Liebig, supuso en realidad la confluencia de los enfoques qumico y biolgico: las fermentaciones eran procesos qumicos catalizados por enzimas presentes dentro de clulas vivas, que podan ser estudiados extracelularmente. De esta forma, la Bioqumica, nacida como una rama de la qumica fisiolgica, que se vena especializando en la enzimologa, encontr una alianza fructfera y duradera con la joven Microbiologa. Un segundo factor contribuyente al nacimiento de la ciencia microbiolgica fue el establecimiento de la relacin que une ciertas transformaciones qumicas que se dan en las infusiones con el crecimiento de los grmenes en ellas existentes. Cagniard-Latour en 1836, y Schwann y Ktzing en 1837 haban sugerido que las levaduras eran las causantes de la fermentacin alcohlica por la que el azcar pasa a alcohol etlico y dixido de carbono, pero se encontraron con la crtica adversa de los grandes qumicos de la poca (Berzelius, Wohler y Liebig). Liebig, hacia 1840, haba realizado importantes confirmaciones a la "teora mineral" sobre la nutricin de las plantas, enfrentndose a la "teora del humus" sostenida por Thaer, asestando un golpe a las ideas vitalistas heredadas de Leibniz. Puesto que se consideraba a las levaduras como plantas microscpicas, se supona que los procesos de fermentacin y putrefaccin se deban a fenmenos qumicos de descomposicin y muerte encuadrables en el marco de la teora mineral de la fisiologa vegetal. Fue Pasteur (que, desde sus primeros estudios sobre las propiedades pticas de los cristales de tartrato, vena suponiendo que estos compuestos tenan un orgen orgnico) quien de nuevo intervino en el debate de forma decisiva. En 1857 demostr que los agentes de la fermentacin lctica eran microorganismos, la fermentacin alcohlica se vio sustituida por una indeseable fermentacin lctica. Este fue el inicio de una larga serie de estudios que habra de durar hasta 1876, en los que Pasteur identific distintos microorganismos responsables de diferentes clases de procesos fermentativos. As, en 1860 adscribe inequvocamente la fermentacin alcohlica a ciertos tipos de levaduras, y en 1866, en sus tudes sur le vin resume sus hallazgos al respecto, inaugurando la Microbiologa Aplicada, una de las primeras derivaciones prcticas no empricas emanadas de la Biologa. A finales del siglo XIX eminentes bilogos como Hansen, en Copenhague, y Beijerink, en Delft, desarrollaban su actividad en industrias y destileras.

Desarrollo y mtodos de laboratorio

Entre las funciones de aseguramiento de la calidad en el Laboratorio de Microbiologa se encuentran: y y y y y y Aprobar las especificaciones y procedimientos. Aprobar los reactivos, diagnosticadores y materiales de laboratorios que se utilicen. Desarrollar y controlar el sistema de documentacin. Validar los mtodos de ensayos. Establecer y garantizar el uso de materiales de referencia apropiados, tanto calibradores como controladores, en la realizacin de las investigaciones. Establecer y garantizar la aplicacin de procedimientos de control interno de la calidad para todos los ensayos, incluyendo algoritmos que oriente la conducta a seguir antes las diferentes alternativas posibles. Garantizar que los informes de ensayos sean revisados antes de su entrega a los usuarios. Elaborar, ejecutar y controlar el programa de auditoria internas o auto inspecciones. Tales auditorias debern llevarse a cabo por un personal calificado independientemente de la actividad que se realiza. Adoptar las acciones correctivas que resultarn pertinentes como resultados de una auditoria interna o inspeccin de las autoridades sanitarias. Investigar las quejas y reclamaciones que se produzcan. Mantener una sistemtica interaccin y educacin continuada con los mdicos usuarios del Laboratorio con relacin a los mtodos, caractersticas y resultados de los ensayos que se realizan en los laboratorios.

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Agentes microscpicos

Inmunologa y serologa El primer acercamiento a la inmunizacin con criterios racionales fue realizado por el mdico ingls Edward Jenner (1749-1823), tras su constatacin de que los vaqueros que haban adquirido la viruela vacunal (una forma benigna de enfermedad que slo produca pstulas en las manos) no eran atacados por la grave y deformante viruela humana. En mayo de 1796 inocul a un nio fl uido procedente de las pstulas vacunales de Sarah Nelmes; semanas despus el nio fue inyectado con pus de una pstula de un enfermo de viruela, comprobando que no quedaba afectado por la enfermedad. Jenner public sus resultados en 1798 ("An enquiry into the causes and effects of the variolae vaccinae..."), pronosticando que la aplicacin de su mtodo podra llegar a erradicar la viruela. Jenner fue el primero en recalcar la importancia de realizar estudios clnicos de seguimiento de los pacientes inmunizados, consciente de la necesidad de contar con controles fiables.
Una importante faceta de la inmunologa de la primera mitad del siglo XX fue la obtencin de vacunas. Se lograron toxoides inmunognicos a partir de toxinas bacterianas, en muchos casos por tratamiento con formol: toxoide tetnico (Eisler y Lowenstein, 1915) y toxoide diftrico (Glenny, 1921). En 1922 se desarrolla la vacuna BCG contra la tuberculosis, haciendo uso de una cepa atenuada de Mycobacterium tuberculosis , el bacilo de Calmette-Gurin. La utilizacin de coadyuvantes se inicia en 1916, por LeMoignic y Piroy

La antisepsia descubrimiento de la enfermedad

Los antispticos son sustancias antimicrobianas que se aplican a un tejido vivo o sobre la piel para reducir la posibilidad de infeccin, sepsis o putrefaccin. En general, deben distinguirse de los antibiticos que destruyen microorganismos en el cuerpo, y de los desinfectantes, que destruyen microorganismos existentes en objetos no vivos. Algunos antispticos son autnticos germicidas, capaces de destruir microbios (bactericidas), mientras que otros son bacteriostticos y solamente previenen o inhiben su crecimiento. Los antibacterianos son antispticos que slo actan contra bacterias. Fue Joseph Lister quien se percat de que la putrefaccin de las heridas quirrgicas, causaban una alta mortalidad en los hospitales, equivalente a la contaminacin de las infusiones que Louis Pasteur intentaba evitar en la misma poca. Para evitarlo, mientras trabaj en el Glasgow Royal Infirmary, desarroll mediante calor la prctica quirrgica de la asepsia y la antisepsia, mejorando notablemente la situacin postoperatoria de los pacientes.

Su mayor progreso vino cuando su amigo, el profesor de qumica Thomas Anderson, le entreg algunos escritos. Los documentos los haba escrito el cientfico Luis Pasteur. En ellos, el cientfico francs deca que en su opinin la gangrena era causada no por el aire, sino por una bacteria y grmenes presentes en el aire. Lister encontr notables estas ideas. Y teoriz en el sentido de que si se lograba eliminar a los microbios peligrosos, sus pacientes tendran ms probabilidades de evitar la gangrena, envenenamiento de la sangre y las otras infecciones que a menudo les causaban la muerte. Finalmente, Lister Tendra que experimentar con cido carbnico en un paciente vivo, sin saber si este podra morir. decidi esperar hasta dar con la persona adecuada. Buscaba a alguien que estuviera condenado a morir. El 12 de agosto de 1865 encontr a su paciente en un nio de once aos, que haba sido llevado al hospital tras haberse cado de una carreta. Sus piernas haban resultado tan daadas que los huesos rotos haban traspasado la piel quedando expuestos. Y sus heridas tenan ms de ocho horas. Era la clase de paciente que por lo general no lograba sobrevivir, Al realizar este experimento, despus del cuarto da no haba seales de fiebre o envenenamiento de la sangre. Despus de seis semanas, el nio pudo volver a caminar.

Descubrimiento de los antibiticos

Los antibiticos (AB) son compuestos relativamente sencillos, producidos por bacterias u hongos que atacan especficamente a las bacterias. Interfieren en algn paso del metabolismo donde encuentran un blanco adecuado. Desde el descubrimiento de la penicilina, se han descubierto una docena de nuevos tipos de AB y optimizado o sintetizado cerca de una centena. Sin embargo, su eficacia se ha visto alterada por su uso excesivo o incorrecto, que conduce a la aparicin y diseminacin de bacterias resistentes (ABR). Estas ABR actan impidiendo el ingreso, modificando o inactivando la droga, modificando al blanco, o activando los sistemas de enflujo. La gran capacidad de las bacterias de mutar y transferir genes, y la presencia de genes de resistencia esencialmente en plsmidos y transposones, contribuyen a su diseminacin tanto entre bacterias emparentadas y/o patgenas como hacia bacterias no patgenas que son los reservorios de ABR. La sensacin de haber perdido la batalla o de que las ganancias a futuro no son tan importantes, han disminuido el inters de los laboratorios farmacuticos por buscar nuevos compuestos. Sin embargo desde la investigaci bsica n aparecen nuevas alternativas ya sea utilizando la genmica como material de anlisis de nuevos blancos, las defensas naturales del organismo husped, u otros agentes olvidados como las bacterias predadoras y los fagos, ambos capaces de destruir bacterias.

Que paso en el IXX,XX en la dcada del 40,50 y en la actualidad

Una contribucin esencial a las ideas sobre el mecanismo de formacin de los anticuerpos la realiz el australiano Macfarlane Burnet (1899-1985), al establecer su teora de la seleccin clonal; sta argumenta que cada linfocito B sintetiza un nico tipo de anticuerpo, especfico para cada antgeno (determinante antignico), de modo que la unin del antgeno causa la proliferacin clonal del linfocito B, con la consecuente sntesis incrementada de anticuerpos especficos. Igualmente, Burnet lanz una hiptesis sobre el mecanismo subyacente a la auto-tolerancia inmunolgica, que fue confirmada experimentalmente por Peter Medawar. Ms recientemente Niels Jerne ha realizado nuevas aportaciones y refinamientos a la teora de la seleccin clonal, proponiendo un modelo de regulacin inmune conocido como teora de las redes idiotpicas. Los avances en Inmunologa durante los ltimos aos han sido espectaculares, consolidando a sta como ciencia independiente, con su conjunto propio de paradigmas, ya relativamente escindida de su tronco originario microbiolgico. Entre los hitos recientes hay que citar la tcnica de produccin de anticuerpos monoclonales a partir de hibridomas, desarrollada originalmente por Csar Milstein y Georges Kohler en 1975, y que presenta una enorme gama de aplicaciones en biomedicina, o el desentraamiento de los fenmenos de reorganizacin gentica responsables de la expresin de los genes de inmunoglobulinas, por Susumu Tonegawa.

Actualmente, el conocimiento microbiolgico se ha especializado tanto que lo encontramos divididos: la microbiologa mdica estudia los microorganismos patgenos y la posible cura para las enfermedades que producen, la inmunologa averigua las causas de la aparicin de las enfermedades desde una perspectiva inmunolgica, la microbiologa ecolgica estudia el nicho que le corresponde a los microorganismos en el medio, la microbiologa agricultural las relaciones existentes entre plantas y microorganismos, y la biotecnologa los posibles beneficios que puede llevar para el hombre la explotacin de microbios