Electroforesis

Integrantes: María José Caneo

María José Díaz
Electroforesis
• 1937 Bioquímico Arne Tisselius.
• Método de laboratorio en el que se utiliza
una corriente eléctrica controlada con la
finalidad de separar biomoléculas según su
tamaño y carga eléctrica a través de una
matriz gelatinosa.
 Proteínas
•Biopolímeros.
•Variadas formas y pesos moleculares
•Conformadas por aminoácidos.
•Anfóteros.
 Obtención Proteínas
• Centrifugación
• Cromatografía
• Precipitación por sales
• Diálisis
• Fraccionamiento por
solventes
Fundamento Electroforesis

1. Partículas ionizadas y carga neta.

2. Campo eléctrico.
3. Movimiento hacia polos opuestos.
4. *Fricción solvente.
5. *Movimiento Browniano
Equipo de Electroforesis
Procedimientos electroforesis

*Preparar gel
*Preparar amortiguador
*Incluirlos en equipo de electroforesis
*Aplicar con micropipeta muestras de proteína
*Encender Batería
*Tinción
Métodos electroforéticos
para separación de proteínas
•Electroforesis Capilar
•Electroforesis en papel
•Geles Nativos
•SDS-PAGE
•Isoelectroenfoque
•Electroforesis Bidimensional
 Isoelectroenfoque
*Gradiente de pH
*PI proteína
 Poliacrilamida SDS-PAGE
SDS: Dodecil Sulfato
de Sodio
Desnaturalización
proteínas.
Iguala densidad de
carga por unidad de
superficie en
proteínas.
Electroforesis
Bidimensional
• Se separan de manera secuencial, primero por
sus cargas y luego por sus masa.
• Se puede combinar el enfoque isoeléctrico
(IEF) y la electroforesis SDS.
Otros tipos de electroforesis
• Capilar: Se realiza en
tubos capilares muy
delgados (20 a 10 µm de
diámetro interno) hechos
de cuarzo, vidrio o
plástico.

• En Papel: Separa iones en

mayor medida sobre la
base de sus cargas iónicas
 Tintes

• Azul de Coomassie • Tinción de Plata

• Tinción Fluorescente
Conclusión / Aplicaciones
• Número de diferentes proteínas en una
muestra.
• Grado de pureza de una proteína en una
muestra.
• Determinación de PI y PM.
• Se utiliza en clínica humana y animal para
diagnosticas algunas enfermedades.
• Estudios de proteínas en alimentos.
 Bibliografía
• Bioquímica, Donald Voet, 5° Edición, Año
2006.
• Biología Celular y Molecular de
• Fundamentos de Bioquimica, Donald Voet, 2°
Edición, Año 2003
• Bioquímica, Christopher K. Mathews,