Instituto Las Américas

Educación para la vida

Ciencias III

Práctica No. 8

Métodos de separación de mezclas.- Cromatografía I

I.- Introducción

Se llama cromatografía a una técnica que permite separar o fraccionar, los componentes de una mezcla;
en ella intervienen dos fases: una móvil y una estacionaria. La fase móvil está conformada por sustancias
contenidas en un disolvente al que se le denomina solución eluyente. La fase estacionaria consiste en un
material adsorbente en el que se va a separar la mezcla y que tiene una afinidad diferente por cada uno de los
componentes de la mezcla; el cromatograma se forma cuando la fase móvil eluye sobre la fase estacionaria.
El término deriva de chrôma, color, ya que los primeros ensayos del método tuvieron por objeto separar
compuestos que eran naturalmente coloreados. En un principio se utilizó la cromatografía para fraccionar e
identificar moléculas pequeñas, como aminoácidos o azúcares. En estos casos, se usó la cromatografía de
partición, que consiste en aplicar una gota de la solución con la mezcla de substancias a separar en la parte
inferior de una tira de papel (cromatografía en papel) o en una delgada capa de un material inerte, como
silicagel o celulosa (cromatografía en capa delgada). Luego, el papel o material inerte (los denominaremos
soportes) se colocan en un recipiente con un solvente, de manera que, poco a poco, este los vaya
impregnando. Dicho solvente es una mezcla de dos líquidos (por ejemplo, agua y etanol), que se eligen de
manera tal que uno de ellos se adsorba más al soporte que el otro; así, a medida que el solvente avance a lo
largo del soporte -los líquidos suben espontáneamente por capilaridad-, aquellos componentes de la muestra
que sean más solubles en el líquido que queda adsorbido serán retenidos, y los que tengan mayor afinidad
por el que no se adsorbe serán arrastrados por este. Una vez finalizado el proceso, el soporte se seca y se tiñe
con un colorante conveniente, para revelar los compuestos separados, los que se identifican colocando, sobre
el mismo soporte, muestras de substancias conocidas.

El uso de la cromatografía está ampliamente extendido en el análisis de alimentos, fármacos,

medicinas, sangre, productos petrolíferos y de fisión radiactiva.
II.- Objetivos

1. Aplicar la técnica de cromatografía en la separación de los componentes de una mezcla.

2. Reforzar los conceptos de cálculo y preparación de soluciones porcentuales.

III.- Material

5 vasos de precipitados de 50 ml, 5 tubos capilares, pinzas de disección, vaso de precipitados de 500 ml,
papel filtro, pipeta de 10 ml, solución de cloruro de sodio NaCl al 5%, bolsita de chocolates M&M’s.

IV.- Método

1. Preparar las 5 “muestras problema” poniendo 10 grageas de M&M’s de un solo color en cada vaso
de precipitados de 50 ml y agregar agua destilada con una pipeta hasta cubrir completamente los
chocolates. Cuando todo el color se haya disuelto, sacar con mucho cuidado las grageas con una
pinza y agitar la solución.
2. Preparar la cámara cromatográfica; para ello añadir con mucho cuidado al vaso de precipitados
grande 10 ml de la solución de NaCl al 10% ¡evitar salpicar las paredes del vaso!
3. Cubrir la cámara con la bolsa de plástico.
4. Cortar un rectángulo de papel filtro de 10 x 20 cm y trazar con lápiz una línea recta a 1 cm de una
de las orillas más largas.
5. Marcar sobre la línea con lápiz cinco X equidistantes.
6. Con un tubo capilar tomar una pequeña cantidad de las muestras problema y con mucho cuidado
depositar una gota pequeña en una de las X de forma que se forme un círculo colorido no mayor a 5
mm de diámetro. Repetir esta operación con cada muestra problema evitando mezclar los tubos
capilares.
7. Dejar secar y repetir el proceso para aumentar la concentración de cada muestra.
8. Formar con el papel filtro un cilindro de tal manera que las muestras queden en su interior, para
formarlo, se debe enrollar el papel dejando las muestras en la parte interior.
9. Introducir el cilindro con mucho cuidado dentro de la cámara cromatográfica y taparla con el vaso.
10. Una vez que las bandas ya no asciendan más, destapar el vaso, sacar el cromatograma con cuidado y
dejar secar el cilindro extendido sobre una hoja limpia. Una vez seco, medir la distancia para
calcular el Rf de cada colorante.

V.- Resultados

1.-Anotar en la siguiente tabla los resultados obtenidos

dmuestra (cm) ddisolvente (cm) Rf

1er componente ___________
2º componente ____________
3er componente ___________
4º componente ____________
5º componente ____________
2.- Dibuja tu cromatograma señalando el frente del solvente, las posiciones de las muestras eluídas, la
posición de las muestras originales, la distancia recorrida por el solvente y la distancia recorrida de la
muestra

V.- Conclusiones

1.- ¿Qué significan los diferentes valores de Rf de los componentes?

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2.- Considerando que el agua y la sal son compuestos polares, ¿cuál será el colorante más polar?

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3.- A manera de conclusión, expresa con tus propias palabras cuál fue la finalidad y utilidad de la
práctica

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