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BIOFARBO 17 (1) 2009171-8
(1) 2009 1-8
Alvaro Victor Gutierrez Rojas1, Luis Enrique Terrazas Siles1, Maria Teresa Álvarez
Aliaga1,2
1
Área de Biotecnología, Instituto de Investigaciones Fármaco Bioquímicas, Facultad de Ciencias
Farmacéuticas y Bioquímicas, Universidad Mayor de San Andrés. La Paz, Bolivia.
2
Department of Biotechnology, Lund University. SE-221 00 Lund, Sweden.
was achived. In a second step a mixed of the desventaja es el uso de reactivos agresivos y
modified Postgate C media with the effluent to contaminantes, siendo ente un proceso enemigo
treat (1:1), teh production of hidrigen sulfide was del medio ambiente. Esto especialmente cuando
improved around 7mM. Showing that the best la remediación de DAM y otras industrias
support it was letter paper. contaminantes son el blanco de estos procesos6.
Key Words: sulfate reducing bacteria, acid mine Los tratamientos biológicos utilizados para la
drainage, bioreactor, bioprecipitation. remoción de metales en aguas de desecho son:
Bioadsorcion, Captación y Acumulación
INTRODUCCIÓN Intracelular, Complexacion, Oxidación,
Reducción, Metilación, Volatilización y
Desde los tiempos de la colonia, Bolivia ha sido Precipitación extracelular7. Este último está dado
un país minero. Por décadas, el cerro rico de por consorcios de Bacterias Sulfato Reductoras
Potosí ha sido el yacimiento de minerales de plata (BSR), las cuales llegan a producir en su
más importante del mundo. Su descubrimiento en metabolismo sulfuro de hidrogeno (H2S) a través
1545 inicia el ciclo de la minería en el territorio de la reducción de sulfatos presentes en DAM,
que hoy constituye Bolivia. La minería colonial que tienen la característica de presentar una
inicia un circuito económico en el cual el acidez extrema y una gran cantidad de metales
transporte y el comercio asumen un rol pesados disueltos8.
determinante1. El grado de contaminación minera El presente trabajo constituye una propuesta en el
en Bolivia puede ser clasificado en mediana y tratamiento de drenajes ácido de mina, mediante
pequeña escala. Los compuestos inorgánicos la bioprecipitación, utilizando consorcios de
extraídos son zinc, oro, plata, estaño, plomo y bacterias sulfato reductoras acidófilas, las cuales
boratos. llegan a soportar la acidez extrema del efluente.
Los Drenajes Ácidos de Mina (DAM) son Para proporcionar una mayor resistencia a esta
producidos por la oxidación de sulfuros acidez se han utilizado diferentes soportes, los
metálicos, tales como pirita (FeS2), calcopirita cuales proporcionan una protección aun mayor a
(CuFeS2). Esta es una reacción química natural la los consorcios de BSR, cuando éstas son
cual puede ocurrir cuando los minerales están expuestas a un pH inferior al cual crecen
expuestos al aire y agua2. La oxidación de de normalmente.
sulfuros metálicos causa la liberación de los
metales y la consiguiente producción de ácido MATERIAL Y MÉTODOS
sulfúrico. Este proceso puede ocurrir como un
proceso climatológico natural de los minerales3. Toma de muestras. Las muestras fueron
Existen numerosos métodos para el tratamiento colectadas de la región altiplánica de Bolivia,
de DAM, pero pocos han sido aplicados4. Los departamento de Oruro, mina Machacamarquita.
métodos más comunes son métodos químicos, Las cuales consistieron de lodo y agua del mismo
como la neutralización, usando cal u otros efluente, manteniéndolos en envases de plástico
componentes alcalinos causando la precipitación llenas hasta el tope para evitar el ingreso de aire.
de metales en forma de óxidos e hidróxidos5. Sin Cultivo de Bacteria Sulfato Reductoras.
embargo estos son procesos caros y los resultados Enriquecimiento y cultivo. Dichos consorcios de
desaparecen a corto tiempo. Aunque la remoción BSR fueron enriquecidos previamente en
de metales tóxicos de industrias en aguas de columnas de Winogradsky9, y posteriormente
desecho ha sido practicada por varias décadas, cultivados en viales en diferentes soportes y
éstas tienen sus limitaciones debido al costo en el fuentes de carbono (Tabla 1).
proceso físico-químico comúnmente usado. Otra
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Tabla 2. Producción de Sulfuro de hidrogeno, utilizando papel como fuente de carbono y soporte.
Soporte y fuente
Muestra de carbono Sulfuro [mM]
MM1_08 Papel higiénico 8,94
MM3_08 Papel higiénico 13,19
MM1_X Papel higienico 13,07
MM1_08 Papel bond 13,63
MM3_08 Papel bond 13,17
MM1_X Papel bond 19,05
MM1_08 Mix 10,91
MM3_08 Mix 17,14
MM1_X Mix 15,71
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Se llegó a utilizar la concentración más alta de Los biorreactores utilizados fueron armados
sulfuro en cada uno de los experimentos donde se calculando el tiempo de duplicación del consorcio
generó concentraciones de sulfuro de hidrogeno bacteriano (MM1_X), el cual se utilizó para los
de 19.05mM papel bond, 9.51mM cerámica y tres biorreactores, por presentar mejor producción
1.37mM agar-agar. Seleccionados como mejores de sulfuro y menor tiempo de duplicación (Figura
soportes y llevados a cultivo continuo en 1).
biorreactores.
Figura 1. Biorreactores. Papel como soporte y fuente de carbono (izquierda), cerámica como soporte + AGV
como fuente de carbono (centro) y agar-agar como soporte + AGV como fuente de carbono (derecha).
Una vez armados los biorreactores se determinó la producción de sulfuro y consumo de sulfato
(Gráfico 1).
Los niveles de sulfuro presentes en cada uno de En una segunda instancia se realizó un mix entre
los reactores se mantiene constante, mostrando el medio mineral Postgate C modificado y el
concentraciones mas altas en papel, ésto puede efluente a tratar 1:1 (recolectado de la región de
deberse a que tanto la fuente de carbono y el Antequera-Oruro), en el cual se pudo observar
soporte se encuentra juntos, y la bacteria tiene una mejor producción de sulfuro que fue
disponibilidad completa de la fuente de carbono. 13.79mM en papel, en relación al primer
El consumo de sulfato se encuentra experimento que fue alrededor de 4-8mM para
correlacionado con la producción de sulfuro papel (Grafico 1), con lo que se comprueba que el
teniendo el mayor consumo de sulfato cuando se consorcio de BSR llegó a adaptarse a las
utliza como soporte papel. condiciones del efluente (Gráfico 2).
Grafico 2. Produccion de sulfuro y consumo de sulfato en medio Postgate C modificado mezclado con el
efluente minero de Antequera.
Los resultados obtenidos mostraron una Así también, como se demuestra en los gráficos
producción máxima de sulfuro en papel y un estadísticos (Gráfica 3), se encontró una
consumo mayor de sulfato en agar-agar, diferencia significativa con un p<0.001 tanto para
demostrando así que el tipo de soporte utilizado la producción de sulfuro como para el consumo
llegó a proporcionar protección a los consorcios de sulfato.
de BSR.
6
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>7
<7
<6
<5
<4 > 30
<3 < 30
<2 < 20
<1 < 10
Lo cual nos indica que existe una diferencia Se pudo notar que la precipitación de metales
significativa entre la producción de sulfuro y pesados en condiciones de acidez extrema es
consumo de sulfato entre los diferentes tipos de posible cuando se utilizan soportes, los cuales
soportes utilizados, teniendo una mayor proporcionaron protección a consorcios de
producción de sulfuro con el soporte papel. bacterias sulfato reductoras, notándose que la
efectividad en la producción de sulfuro fue mayor
DISCUSIÓN cuando se utilizó papel bond tanto para cultivos
en batch (19.05mM), como para cultivo continuo
El crecimiento de Bacteria Sulfato Reductoras (al rededor de 7mM).
está muy limitada a pH bajo ya que se pudo
evidenciar el crecimiento de éstas en papel AGRADECIMIENTOS
(establecido como soporte), pero no así cuando se
utilizó AGV, el cual no presentaba soporte, A la cooperación Sueca ASDI/SAREC por el
ambos a pH 4, lo que indica la necesidad de apoyo económico que representa en el proyecto
utilizar soportes para proteger BSR en biodiversidad microbiana; a International
condiciones extremas de pH15. Foundation for Science (IFS) también por el
La concentración de sulfuro presente en soporte económico en la ejecución del presente
condiciones batch definieron al consorcio y el trabajo; al Institut de Recherche pour
tipo de soporte a utilizar para el armado de los Developpement (IRD) por el apoyo económico en
biorreactores, en los cuales la producción de la Maestría en Ciencias Biológicas y Biomédicas.
sulfuro y consumo de sulfato se mantienen en
condiciones constantes, y siempre presentándose REERENCIAS
mejores concentraciones cuando se utiliza papel
tanto para la primera etapa como en la segunda 1. Equipo MMSD. Minería, minerales y desarrollo
etapa donde las concentraciones de sulfuro son sustentable en América del sur. 2002;
mayores, pero encontrándose similares a los International Institute for Environment and
niveles ya descritos6. Sustainable Development (IIED), World Business
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Council for sustainable Development (WBCSD). 9. Gutierrez AV, Terrazas E, Alvarez MT.
Capítulo 4: 137-214. Aislamiento y cultivo de bacterias sulfato
2. Jennings SR, Neuman DR, Blicker PS. Acid reductoras acidófilas para la producción de
Mine Drainage and Effects on Fish Health and sulfuro biogénico para la precipitación de metales
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