TEMA 1.

INTRODUCCIN AL ANLISIS INSTRUMENTAL

Introduccin
Componentes de un instrumento de medida para el anlisis
Clasificacin de las tcnicas analticas
Eleccin de un mtodo analtico: propiedades analticas
Medida de la propiedad observable: calibrado

IMPORTANCIA DE LA QUIMICA ANALTICA

Debemos dar solucin a un problema analtico determinado. La informacin debe ser de calidad.

Alimentos
Aguas naturales
Industria
Aire
Materiales
Informacin sobre la composicin de las sustancias
Aguas residuales
Suelos
Medicina

METODOLOGA DE LA QUIMICA ANALTICA

Definir el problema correctamente
Asegurar la representatividad del problema a travs de las muestras (el muestreo es una de las partes
ms importantes)
Definir el tiempo y las exigencias requeridas por el cliente
Desarrollar un plan analtico (ver cmo se va a realizar el anlisis)
Realizar el trabajo con el ms alto nivel de calidad, experiencia y buen conocimiento qumico
Comunicar la respuesta, no los datos, incluyendo la precisin y exactitud, especificando los peligros o
limitaciones en la utilizacin de los datos
Interpretar la informacin y los resultados en un informe claro, consistente y significativo
PROCESO ANALITICO TOTAL (PAT)
Conjunto de Operaciones que
separan el Problema planteado
por el cliente de la
informacin suministrada por
el laboratorio de anlisis
PROCESO DE MEDIDA QUIMICO (PMQ)
Conjunto de etapas sistematizadas que
van a permitir resolver el problema
analtico. Separan las muestras de los
resultados.

Otras definiciones de algunos trminos que utilizaremos:

Tcnica: Principio cientfico genrico que se utiliza para extraer informacin. Por ejemplo:
espectrofotometra UV-visible, potenciometra o absorcin atmica.
Mtodo: Aplicacin concreta de la tcnica analtica para la determinacin de un analito o mezcla en
una muestra definida. Por ejemplo: determinacin de nitratos (NO3-) en aguas mediante
espectrofotometra de absorcin UV-visible.
Procedimiento: Descripcin detallada del mtodo analtico. (Nos dice paso a paso cmo debemos
tratar esa muestra)
Protocolo: conjunto de normas definitivas que deben seguirse sin ningn tipo de excepcin cuando se
pretende que los resultados analticos puedan utilizarse con un propsito especfico. Son preescritos
por un organismo oficial para su uso en una situacin dada. Por ejemplo: un proceso de regulacin
alimenticia (acidez de un aceite) o en dictamines legales (determinacin de alcohol en sangre).
Tcnica Mtodo Procedimiento Protocolo
ETAPAS DEL PROCESO ANALTICO TOTAL
1. Planteamiento general del problema tcnico-cientfico o socio-econmico: El cliente pretende conocer
alguna caracterstica bio(qumica) de la muestra en estudio; con la finalidad de tomar decisiones
fundamentales, eficaces y dentro de un tiempo razonable.
2. Planteamiento especfico del problema analtico y definicin del objetivo: En colaboracin estrecha
con el cliente hay que situar el problema en su contexto y recabar la mxima informacin posible
acerca de naturaleza de la muestra, especies que deben ser analizadas, uso final que se pretende de los
resultados analticos, evaluacin de costes, etc.
3. Seleccin del mtodo: Una seleccin correcta consiste en buscar una solucin de compromiso entre los
siguientes cuatro grupo de propiedades caractersticas:
Exactitud (comparado con el valor de referencia), precisin (cunto se parecen los valores entre
s), sensibilidad (capacidad que tiene el mtodo de detectar concentraciones bajas), selectividad
requeridas (capacidad de distinguir nuestro analito del resto de la matriz)
Rapidez requerida (operaciones previas + tiempo de anlisis)
Coste (nmero de muestras + reactivos + instrumentacin + formacin de personal)
Facilidad (seguridad + comodidad del personal)
Bsqueda bibliogrfica: solucin a nuestro problema con algn mtodo previamente establecido.
Si la bibliografa no ofrece solucin a nuestro problema, ser necesaria la adaptacin de un mtodo ya
existente o el desarrollo de un mtodo nuevo
4. Toma de muestra o muestreo: En general podemos decir, que un buen muestreo es aquel en que la
muestra seleccionada para el laboratorio sea representativa de la poblacin que se va a investigar. Un
resultado exacto pero no representativo del problema planteado es de mala calidad, de ah la
trascendencia del muestreo. Para ello hay que seguir un plan de muestreo.
5. Tratamiento y preparacin de la muestra: Adecuacin de la muestra a la medicin propiamente dicha.
Son el nexo de unin entre la muestra y el empleo del instrumento principal de medida. Son procesos
multietapa lentos con un alto grado de participacin humana.

Muestra bruta

Disolucin
Disgregacin

Destruccin
materia orgnica

Muestreo

Conservacin

Tcnicas de
separacin

Instrumento

Medida de Masa/
Volumen

Triturado
Tamizado

Reacciones no
analticas

Transporte
Introduccin al
instrumento

Homogeneizacin

Secado

Reacciones
analticas

Medida de
Volumen (masa)

Reacciones no analticas: nos

sirven
para
enmascarar
otros
elementos que podran reaccionar con
el reactivo valorante.
Reacciones analticas: entre el
analito y el reactivo que utilizamos
para valorarlo
6. Etapa de medida: Se basa en
la observacin y/o determinacin de
una propiedad de la especie que se
quiere
analizar
mediante
la
utilizacin de un instrumento de
medida. Se obtiene una seal
analtica que se traduce en

informacin qumica.
Instrumentos propiamente dichos
Naturaleza
Sentidos humanos
pticos
Electroqumicos
Naturaleza de
las seales

Msicos
Magnticos
Trmicos

Tipo de instrumentos

Cualitativos
Cuantitativos
Finalidad
Analtica
Mixtos

Los instrumentos propiamente dichos pueden dar

diferentes naturaleza de las seales, mientras que los
sentidos humanos estn muy limitados.
Calibracin: para conocer la concentracin de las
especies, en la mayora de los casos tenemos que hacer
una calibracin. Utilizaremos patrones de concentracin
conocida para conocer la respuesta del equipo.
Primarios:
Solo
necesitan
calibracin
instrumental (pH-metro, auto-cero en balanzas)
Relativos: tenemos que relacionar la seal del
instrumento con la concentracin que se ha
proporcionado.

Estructurales

En relacin
con la
calibracin
En relacin
con otras
etapas del
PMQ

Primarios
Relativos
Independientes (fuera de lnea)

7. Adquisicin, tratamiento y evaluacin de

los datos: Es el nexo de unin entre el
instrumento y los resultados, expresados
segn los requerimientos solicitados.
Para lo cual se realizan clculos
empleando
procedimientos
quimiomtricos.
8. Interpretacin de los resultados. Conclusiones: El PMQ comienza con el planteamiento de un
problema y ha de terminar por lo tanto con su resolucin. Para lo cual los datos obtenidos han de
relacionarse con la finalidad perseguida en el anlisis. La interpretacin de los datos puede ser una
operacin simple en algunos casos y muy compleja en otros. As, en ocasiones puede resolverse
mediante la ayuda de los mtodos estadsticos clsicos, o puede necesitar de la aplicacin de tcnicas
quimiomtricas muy sofisticadas.
3

9. Realizacin del Informe: La misin bsica de un laboratorio analtico consiste en la generacin de

informes analticos de calidad en el tiempo requerido y dentro del precio establecido. En el informe
final el laboratorio analtico proporciona al cliente la informacin inicialmente solicitada de una forma
precisa, y exenta de ambigedad.
CLASIFICACIN DE LOS MTODOS ANALTICOS
1. Mtodos clsicos: Se basan en interacciones materia- materia, esto es, en reacciones qumicas.
2. Mtodos Instrumentales: pticos, electroqumicos y otros. Se basan en interacciones materia-energa,
utilizan un instrumento ms o menos complejo para evaluar una propiedad fsica o fsico-qumica del
sistema objeto de estudio. No es esencial el concurso de una reaccin qumica.
MTODOS CLSICOS DE ANLISIS

MTODOS INSTRUMENTALES DE ANLISIS

ESQUEMA GENERAL
INSTRUMENTAL

DE

UNA

MEDIDA

COMPONENTES DE UN INSTRUMENTO ANALTICO

CLASIFICACIN DE LAS TCNICAS ANALTICAS

TCNICAS PTICAS
TCNICAS ELECTROANALTICAS
OTRAS TCNICAS INSTRUMENTALES

TCNICAS PTICAS (Las subrayadas sern las que veamos durante el curso)
Tcnicas espectroscpicas (hay un intercambio de energa entre materia y radiacin electromagntica)
MOLECULARES (intervienen molculas)
Absorcin (se absorbe radiacin)
o Espectrofotometra ultravioleta visible
o Espectrofotometra de infrarrojo
o Espectroscopa de microondas
Emisin (se emite radiacin)
o Espectrofotometra de fluorescencia
o Espectrofotometra de fosforescencia
ATMICAS (intervienen tomos)
Absorcin
o Espectrofotometra de absorcin atmica
o Espestroscopa de absorcin de rayos X
Emisin
o Espectroscopa de emisin atmica (llama, arco, chispa, plasma)
o Espectroscopa de fluorescencia atmica
o Espectroscopa de fluorescencia de rayos X
o Espectroscopa de rayos gamma
Tcnicas no espectroscpicas (no hay intercambio de energa entre materia y radiacin
electromagntica, que sufre un cambio pero no recibe energa)
BASADAS EN LA DISPERSIN DE LA RADIACIN
o Turbidimetra
o Nefelometra
o Espectroscopa Raman
BASADAS EN LA MEDIDA DEL NDICE DE REFRACCIN
o Refractometra
o Interferometra
BASADAS EN LA DIFRACCIN
o Difraccin de rayos X
o Difraccin de neutrones
o Difraccin de electrones
BASADAS EN LA MEDIDA DE LA ACTIVIDAD PTICA
o Polarimetra
o Espectropolarimetra
o Espectrometra de dicroismo circular
TCNICAS ELECTROANALTICAS
Potenciometra
Tcnicas Voltamperomtricas
o Voltamperometra de barrido
lineal
o Voltamperometra de
redisolucin
o Voltamperometra cclica
Culombimetra
o Culombimetra a potencial
constante
o Culombimetra a intensidad
constante
o Electrogravimetra

OTRAS TCNICAS INSTRUMENTALES

Tcnicas magnticas
o Espectrometra de masas
o Resonancia magntica nuclear
Tcnicas radioqumicas
Tcnicas trmicas
Tcnicas de separacin
o Cromatografa lquida en
columna
o Cromatografa de gases
o Tcnicas electroforticas
Mtodos cinticos
Mtodos automticos

Los mtodos Instrumentales son usados para:

Anlisis cualitativo: identificacin de especies qumicas
Anlisis cuantitativo: determinacin de la cantidad de una especie o grupo de especies.
Dos tipos de clasificacin:
TAMAO DE MUESTRA

CONCENTRACIN DEL ANALITO EN LA MUESTRA

Constituyentes mayoritarios (presentes en la muestra entre 1-100 % p/p)
Componentes minoritarios (presentes en la muestra entre 0.01-1% p/p)
Constituyentes traza (presentes en la muestra entre < 0.01 % p/p).
Otras definiciones de inters:
Muestra: porcin del material, o poblacin de la que se requiere informacin analtica, de la cual
partimos para iniciar el anlisis. (ej: muestra de aire, suelo o agua)
Muestra analtica: indica la porcin de la muestra que se presenta al instrumento de anlisis. Se
diferencia de la muestra en que la muestra analtica tendr distintas condiciones por las operaciones
previas que se le han realizado.
Matriz: conjunto de todos los constituyentes en la muestra. Esta incluye al analito y a todos lo dems
constituyentes, que son llamados concomitantes.
Matriz analtica: se refiere especficamente a la matriz de la muestra analtica.
Analito: especie o especies a determinarse en la muestra analtica.
Interferente: sustancia presente en la muestra analtica que afecta a la magnitud de la seal medida
para el analito.
Blanco: Disolucin que contiene todos los constituyentes de la muestra analtica excepto el analito.
Sirve para evaluar la seal que da todo lo que no es analito.
MEDIDA ANALTICA
Cada medida analtica consta de dos componentes:
Seal: lleva la informacin relativa al analito de inters.
Ruido: compuesto por informacin no deseada que degrada la exactitud y la precisin del anlisis y
aumenta el lmite inferior de la cantidad de analito detectable (ya que necesitamos diferenciar la lnea
base de la seal propia del analito). Su origen puede ser qumico (variables incontroladas relacionadas
con la qumica del sistema) o instrumental (relacionado con los componentes del instrumento
utilizado: generador de seales, detector).
En la segunda seal, el ruido ha sido
suavizado, bien quitando las variables
incontroladas o bien utilizando equipos
que con un tratamiento matemtico
eliminan parte del ruido.
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SEALES
Seal: puede definirse como la salida de un
detector que est respondiendo al sistema
qumico de inters.
Seal total (St): seal de salida no modificada
obtenida de la medida de una muestra analtica
o de un patrn. St = Sa + Sb
Seal blanco (Sb): seal de salida obtenida de la
medida de un blanco. Esta incluye la seal de
fondo, debida a las seales que provienen del medio/clula de medida y de los concomitantes en el
blanco.
Seal analtica: est relacionada directamente con la concentracin del analito, y se obtiene restando la
seal blanco de la seal total. Sa =St -Sb
Blanco: disolucin (slido o vapor) de composicin parecida a la muestra, que no contiene al analito y
sirve para medir/estimar la seal fondo (sirve para ajustar el cero del instrumento).
MTODOS QUMICOS CUANTITATIVOS:

MTODOS INSTRUMENTALES CUANTITATIVOS:

CALIBRACIN
La calibracin consiste en comparar el valor de la magnitud medida (o representada) por el sistema de
medicin, con los valores que, bajo condiciones estrictamente definidas, producen patrones conocidos o
materiales de referencia.
MTODOS DE CALIBRACIN
Calibracin externa
Adicin estndar
Patrn interno
Dependiendo de las condiciones en las que se encuentre la muestra, utilizaremos uno u otro mtodo de
calibracin.
1. Calibracin externa
Se prepara un blanco. Se suele utilizar en disoluciones con matrices conocidas ya que necesitamos imitar la
matriz.
C1,2,3,4 son disoluciones conocidas que se preparan con
patrones para poder obtener la curva de calibrado.
Debemos tomar el valor del blanco y restarlo a los
patrones.
Mtodo ms usado y ms sencillo
Consiste en preparar una serie de disoluciones
patrn de analito, de concentraciones crecientes, en donde
se mide la seal de patrones y muestra frente a un blanco.
Las disoluciones patrn deben:
Cubrir el intervalo de concentraciones de inters: desde cero (corresponde al blanco) hasta una
concentracin por encima de la concentracin esperada para la muestra. Si la muestra no se puede
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interpolar dentro de la recta, debemos preparar otra recta que llegue hasta una concentracin mayor a
la esperada para la muestra.
Tener una matriz tan parecida a la muestra analtica como sea necesario.
La pendiente m es la sensibilidad ya que
las pequeas variaciones en la concentracin se
notarn ms cuanto mayor sea la pendiente.
Todas las medidas deben hacerse en las
mismas condiciones ya que se trata de un mtodo
relativo (donde la constante K depende de las
concentraciones experimentales)

2. Adicin Estndar
En ocasiones la interaccin del analito con otros componentes de la muestra puede producir un aumento o
una disminucin de la sensibilidad del analito. El mtodo de adicin estndar permite eliminar los errores de
matriz sin necesidad de efectuar la equiparacin de matriz (no podemos hacer la equiparacin de matriz ya
que en muchas ocasiones no conocemos la matriz de manera exacta) en la preparacin de patrones.
Adicin nica:
Se registran dos seales: la seal de la muestra y la de la muestra ms la adicin de un volumen conocido de
una disolucin patrn concentrada:
La seal correspondiente a la disolucin de la muestra: ! = !
Y la seal correspondiente a la muestra con adicin: ! =

!! !!
!! !!!

! !

+ ! !!!!
!

Adicin Mltiple
Cuando y = 0, en valor absoluto obtendremos la concentracin de la sustancia buscada.

Inconvenientes:
Al ser un mtodo de extrapolacin es menos preciso que la recta de calibrado (interpolacin).
Requiere ms cantidad de muestra y reactivos.
Hay que realizar una recta de calibrado para cada determinacin, mientras que en patrn externo una
sola recta de calibrado es vlida para ms de una muestra.
Cmo sabemos si tenemos efectos de matriz (para utilizar PE, ms exacto o AD que elimina efectos de
matriz? R: Debemos hacer los clculos con los dos mtodos y si salen pendientes diferentes, tendremos
efectos de matriz.
8

3. Patrn Interno
Se emplea en aquellas tcnicas en las que la seal depende de factores poco reproducibles y que pueden
variar en el curso del anlisis. La variable analtica es el cociente de seales del analito y del patrn interno.
El patrn interno es una sustancia que no est presente en la muestra a analizar, con un comportamiento
similar al del analito y que no interfiere en la determinacin de ste.
Patrn interno simple
Primero tendremos una disolucin patrn en la que CM y CP sern conocidas y podremos hallar el factor de
respuesta del detector para el analito (F). Despus, utilizando F y un patrn de concentracin conocida,
podremos hallar la concentracin de analito.
! ! !
!
=

=
!" ! !"
!
Al trabajar siempre con cocientes de seales eliminamos los problemas de reproducibilidad que se originan,
por ejemplo, por una mala inyeccin en HPLC (es muy difcil inyectar siempre lo mismo en HPLC ya que
es del orden del microlitro). De esta forma, aunque inyectemos mal, tanto la seal del analito como la del
patrn interno variarn por lo que el cociente ser el mismo.
Patrn interno mltiple
El patrn interno debe ser una sustancia
que:
No debe aparecer en la muestra
Similar al analito qumicamente
Con una seal fcilmente medible
que no interfiera con el analito.
Debe responder de una manera
similar a l, para cualquiera de las variables
que puedan afectar al detector.
Su concentracin debe ser del mismo
orden de magnitud que la del analito.
Al ser la concentracin del patrn interno constante, podemos incluirlo como la ordenada en el origen en la
recta y = mx+n, donde x ser nicamente la concentracin de analito. Si la concentracin de patrn interno
va variando, deberemos representar el cociente de seales frente al cociente de concentraciones.
CALIDAD Y PROPIEDADES ANALTICAS

EXACTITUD
Expresa el grado de concordancia entre el resultado de un ensayo y el valor de referencia aceptado como
verdadero.Cuando se desconoce el valor verdadero se evala mediante:
1. Anlisis de estndares de referencia: Materiales que contienen uno o ms analitos en concentracin
conocida.
2. Comparacin con otros mtodos analticos, preferiblemente vlidos y fiables.
3. Anlisis de muestras blanco.
4. Comparacin entre varios laboratorios (interlaboratorio):
Todos los laboratorios utilizan la misma muestra llamado Material de referencia.
Es mejor que haya un laboratorio vlido.
Error absoluto: = ! !
Error relativo: ! =

!! !!!
!!

100

PRECISIN
Expresa el grado de concordancia, entre s, de un conjunto de resultados obtenidos al efectuar varias veces la
determinacin de un analito. Se evala mediante:
Desviacin estndar: =

!! !! !
!!!

Desviacin estndar relativa: % = , % = ! 100

Varianza: es el cuadrado de la desviacin estndar: !
Parmetros que definen la precisin:
Precisin en patrones o una muestra analtica: repetibilidad. Se parte de una misma muestra de la que se
hacen varias determinaciones.
Precisin en muestras: reproducibilidad. Se parte de varias muestras y se desarrolla todo el mtodo con
cada una de ellas.
ERRORES
ERRORES SISTEMTICOS (Determinados)

Tienen valor definido

Tiene causa asignable
Tienen igual signo y magnitud
Afectan a la exactitud
Se pueden eliminar

Pueden ser debidos a:

Errores de instrumento
Errores del mtodo
Errores personales

ERRORES ALEATORIOS (Indeterminados)

Afectan a la precisin
No tienen signo concreto no pueden
corregirse
Errores aleatorios (indeterminados)
No se pueden eliminar pero se pueden
evaluar (son el signo que se pone en los
resultados)
Son debidas a:
Variables no controladas: parte inevitable de
toda medicin fsica o qumica

ERRORES CRASOS (espordicos)

Resultados disparatados
Para detectarlos, utilizamos el rechazo de datos mediante la Q de Dixon
OTRAS DEFINICIONES QUE AFECTAN A LA CALIDAD
Lmite de deteccin: mnima concentracin (o cantidad) de analito en una muestra que puede ser
detectada, pero no necesariamente cuantificada, bajo las condiciones experimentales establecidas.
Se establece como aquella concentracin de analito que proporciona una seal igual a la del blanco ms tres
veces la desviacin estndar del blanco:
10

3 !
; 10

La determinacin de ! se corresponde con la desviacin estndar del blanco y m con la pendiente de la

recta de calibrado.
=

Lmite de cuantificacin (o de determincacin): mnima concentracin (o cantidad) de analito en una

muestra que puede ser determinado con aceptable exactitud y precisin, bajo las condiciones
experimentales establecidas.
Se establece como aquella concentracin de analito que proporciona una seal igual a la del blanco ms diez
veces la desviacin estndar del blanco:
=

10 !
; 10

Intervalo de linealidad: es el intervalo de concentraciones donde la relacin seal-concentracin es

lineal.
Intervalo dinmico: intervalo de
concentraciones de analito en el que se produce una
seal de salida dependiente de la concentracin. A
concentraciones ms altas la seal de salida
permanece constante (saturada).
Intervalo dinmico lineal: intervalo de
concentraciones de analito en el que la seal de
salida presenta un comportamiento lineal. Su limite
mximo es el lmite mximo de linealidad (LOL).
El lmite inferior coincide con el LC.
Sensibilidad (s): razn del cambio en la seal de salida del instrumento, S, al cambio correspondiente
en el estmulo, en este caso la concentracin del analito, C.
Las pendientes de las curvas de calibrado se usan para determinar los valores de sensibilidad.
Qu nos indica la sensibilidad de un
mtodo analtico?
La capacidad de discriminar entre
pequeas
diferencias
en
la
concentracin del analito. A mayor
sensibilidad, ms fcil discriminar
estas pequeas variaciones en la
concentracin del analito y se obtienen
menores Lmites de Deteccin (LOD).
Selectividad: Hace referencia al grado de interferencia de unas especies sobre la identificacin de
otras. El coeficiente de selectividad para una sustancia potencialmente interferente B sobre un
determinado analito A viene dado por la relacin entre las pendientes de calibrado
KB,A= mB/mA
Robusted: Expresa la capacidad del mtodo para permanecer invariable a pequeas modificaciones
ambientales o de procedimiento. Se mide mediante la reproducibilidad.
Relacin seal/ruido: Para describir la calidad de un mtodo analtico o el funcionamiento de un
instrumento, se utiliza la relacin seal/ruido (S/N). Las condiciones ms favorables se obtendran
para altas relaciones:
S/N = x /s siendo x la media de la seal analtica medida y s la desviacin estndar de
numerosas mediciones de la seal analtica. Cuanto mayor sea x, ms favorable sern las
condiciones.

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