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ELECTROFORESIS
La electroforesis es una tcnica para la separacin de molculas segn la movilidad de estas en un
campo elctrico a travs de una matriz porosa, la cual finalmente las separa por tamaos
moleculares y carga elctrica, dependiendo de la tcnica que se use.
La tcnica clsica utiliza una tira recubierta de una sustancia porosa impregnada de un electrolito.
Sus extremos se sumergen en dos depsitos independientes que contienen ambos al electrolito y
estn unidos a los electrodos del generador de corriente. La muestra se deposita en forma de un
pequeo trazo transversal en la tira. La distancia de migracin se mide en relacin un marcador
interno. Las placas son reveladas con sales de plata, azul de Coomassie, o reactivos en particular.
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de una carga elctrica global, bajo el efecto de un campo elctrico y en contacto con un soporte
(medio de desplazamiento) adecuado.
En electroforesis capilar la tira se reemplaza por un tubo capilar abierto en sus extremos, fabricado
con un dimetro pequeo (15 a 150m). El capilar oscila entre 20 y 80cm, y est lleno de una
solucin buffer. Un detector se encuentra ubicado en un extremo del capilar, cerca del
compartimiento catdico. La seal obtenida es la base de la obtencin del electroferograma, que
muestra el registro de la composicin de la muestra. Solo las especies que se dirigen hacia el
ctodo sern detectadas.
Mtodos de Deteccin
En la deteccin UV-Vis se mide la intensidad de la luz que pasa a travs del capilar en una
pequea zona en la que se ha eliminado el revestimiento opaco.
La deteccin por fluorescencia resulta ms sensible si se emplea una fuente lser muy intensa,
asociada a menudo a un procedimiento de preformacin de derivados de los analitos portadores
de un fluorforo.
Tcnicas Electroforticas
Electroforesis capilar en zona o en disolucin libre (CZE)
Es el procedimiento de electroforesis ms habitual, en el cual el capilar es recorrido por el
electrolito a travs de un medio buffer que puede ser cido (fosfato o citrato), bsico (borato), o
anftero (carcter cido y bsico). El flujo electroosmtico crece con el pH del medio
electrofortico.
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Electrocromatografa Capilar
Este tipo de separacin asocia la electromigracin de los iones, propio de la electroforesis, y los
efectos de separacin entre fases presentes en la cromatografa. La tcnica consiste en la utilizacin
de un capilar relleno con una fase estacionaria, cuyo papel es doble: acta como material selectivo
que debe, por otro lado, participar en la migracin del electrolito.
El factor de separacin es muy elevado, pero existen un cierto nmero de problemas que limitan
su aplicacin, como el efecto de los modificadores orgnicos sobre el flujo electroosmtico y la
dificultad de un control preciso del volumen de muestra introducido en el capilar.
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Referencia
Mesografa