CULTIVO DE HONGOS

Introduccin

La rama de la microbiologa que estudia los hongos (reino Fungi) se

conoce como la micologa. Los hongos se clasifican en 4 grupos principales a
base de su modo de reproduccin sexual:
1.

Phycomycetes: mohos (molds) del agua, del pan y trerrestres.

Las
esporas reproductivas son externas y descubiertas.
2.
sexuales

Ascomycetes: levaduras (yeast) y mohos. Poseen esporas

llamadas ascoesporas. Estas se producen en sacos llamados

ascos.
3.

Basidiomycetes: setas. Forman esporas reproductivas conocidas

como
basidioesporas en estructuras llamadas basidios.
4.
Deuteromycetes: Tambin llamados hongos
imperfectos porque no tienen
fase reproductive sexual.
Los hongos son organismos heterotrficos, eucariotas capaces de
metabolizar gran variedad de sustratos orgnicos. Los hongos pueden ser de
gran beneficio as como tambin perjudiciales al ser humano. Aquellos que
habitan en el suelo ayudan a descomponer plantas y animales muertos,
manteniendo frtil el terreno. Los hongos que llevan a cabo fermentacin son
de gran importancia industrial. La industria de la cerveza, el vino, los quesos,
los antibiticos, las enzimas, la repostera, dependen de los hongos. Algunas
actividades detrimentales de los hongos son por ejemplo: el moho que le d a
las frutas , vegetales y granos, el dao a los alimentos en general. Algunas
especies son capaces de producir drogas como toxinas y
halucingenos. Algunas especies pueden causar enfermedades al hombre,
ejemplo de stos son las micosis superficiales (en piel, pelo y uas) y
las micosis sistmicas (en pulmones, sistema nervioso, genitales).
La asociacin entre la densidad de hongos y las descargas orgnicas a
cuerpos de agua o en el suelo, sugieren que los hongos pueden
ser indicadores de contaminacin. Desafortunadamente no se han

identificado especies o grupos de hongos importantes en este rol. Algunas

especies de levaduras y hongos filamentosos son caractersticos de aguas
calientes y pueden ser indicadores tiles de contaminacin termal.
La identificacin de hongos es dependiente de la morfologa (forma) de
las colonias cuando se crecen en medio slido, as como su crecimiento y
morfologa de estructuras reproductivas. Para la identificacin de las
levaduras es importante la actividad fisiolgica en cultivos en el laboratorio.
Mtodo:

Muestras:
1.
envases

Envases: las muestras de agua o suelo se debe coleccionar en

estrilizados con tapas. El transporte de los envases debe ser de

forma
2.
tarde de 24

derecha y deben descartarse luego de su uso.

Almacenamiento: las muestras deben ser procesadas no ms
horas de se recoleccin el campo. Si el anlisis no se

comienza
prontamente, se debern refrigerar.

Medios de Cultivo:
Es donde se ponen a crecer los hongos. Se pueden usa los siguientes
medios:
Agar Sabouraud
Agar Neopeptone-glucose-rose Bengal-aureomycin
Agar Czapek (para Aspergillus, penicillium y hongos relacionedos
Agar Yeast extract-malt extract-glucose
Agar Diamalt (para levaduras)
Preparacin y diluciones:
Una vez recolectada las muestras en el campo se deben hacer
diluciones de las mismas antes de sembrar en placas. Cuando se procesan
muestras de agua de quebradas se deber hacer diluciones de 1/10 de la
muestra original. Para muestras de agua con gran material orgnico se debern

hacer diluciones de 1/100 o 1/1,000. Para muestras de suelo, utilizar

diluciones de 1/1,000 o 1/10,000.
Para realizar diluciones de las muestras se deber usar agua esteril y
toda la cristalera tambin esteriles.
Cultivo en placas:
Preparar placas para cada dilucin a ser examinada. Transferir 10 ml
de medio a 45 0C a placas petri de 9 cm. Aadir 1 ml de la muestra diluda y
mezclar mediante rotacin de la placa.
Solidificar el agar lo ms rpido possible. Tapar de inmediato las
placas para evitar contaminacin.
Incubacin:
Incubar las placas sin invertirlas a temperatura de saln (20-24 0C) en
luz, pero evitar que sea directa. Examinar y contar las colonias en las placas
luego de 3, 5 y 7 das.
Conteo e inventario:
El conteo de hongos en una placa proveer la base para comparaciones
cuantitativas entre muestras tomadas en distintas localidades. El inventario
nos hablar de la abundancia de especies de hongos en la zona. Descartar
placas con ms de 300 colonias.
Se puede calcular el nmero de hongos por volmen de agua en las
muestras y as comparar varios sitios muestreados.
# de hongos/ ml de muestra = suma del nmero de colonias en las 5
placas X dilucin de una misma dilucin
Para realizar un inventario se deber utilizar el microscopio para ver
morfologa y estructuras reproductivas que ayuden en la clasificacin de las
especies.
Referencias:
Laboratory Exercices in Microbiology, R. A. Pollack. 2002 John
Wiley & sons,
Inc
J.G. y N. Sherman.1992. Microbiology a Laboratory Manual 3ra
edicin
Cappuccino Benjamin/Cummings Inc.

A.E. Greenberg, L.S. Clesceri y A. D. Eaton 1992.

Standard Methods for Examination of Water and
Wastewater 18th edicin