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Microbiologia PDF
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Microbiologa
Generalidades
Microbiologa Viral
Microbiologa Bacteriana
Enfermedades Infectocontagiosas
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PUNTAJE NACIONAL
PREPARACION PSU CIENCIAS BIOLOGIA
MODULO ELECTIVO
Microbiologa
Introduccin y generalidades
Como se mencion, la microbiologa es el rea de la biologa encargada del estudio de los
microorganismos, su fisiologa, dinmica, replicacin y ciclos dentro de los diferentes ecosistemas.
Actualmente es una disciplina tan amplia que han surgido diferentes especialidades para
poder mejorar el estudio de diferentes aristas (virologa, bacteriologa, micologa, etc), como
veremos en el desarrollo de esta gua.
Eugenio Espejo
Fue el primero en introducir los conceptos de asepsia y antisepsia
Louis Pasteur
Es considerado el padre de la microbiologa, por sus numerosas
contribuciones en el campo de caracterizacin , crecimiento, aislacin y
desarrollo de metodologa microbiolgica.
Robert Koch
Fue quien desarroll la teora de los grmenes de la enfermedad
(Postulados de Koch)
Martinus Beijerink
Fue el primero en describir y caracterizar un virus (Virus del mosaico del
tabaco)
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Bacteriologa
Virologa
Micologa
Ficologa
Parasitologa
Bacterias
Virus
Hongos
Algas
Parsitos
*La parasitologa no es puramente microbiolgica, puesto que existen muchos parsitos pluricelulares
macroscpicos.
En qu fenmenos vemos microbiologa? Existen muchas aplicaciones, dentro de las que se
pueden mencionar:
Fijacin del N2
Ciclo del Carbono
Microbiota comensal
Fermentacin industrial (Produccin de bebidas alcohlicas, pan, etc)
Produccin de antibiticos
Biotecnologa e Ingeniera gentica
Investigacin biolgica
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Se cree que los virus se generaron antes o al mismo tiempo que LUCA (el ltimo ancestro
celular comn). Algunos datos que hay que tener en consideracin para entrar al anlisis del origen
de estas partculas son los siguientes:
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Como ya te puedes ir dando cuenta, la existencia de los virus no solo es importante por su
rol infeccioso, sino por su misterioso rol biolgico. Qu funcin tuvo la aparicin y evolucin
paralela de los virus? Surgieron de manera espontnea o intencional?
Pese a que la respuesta a las preguntas anteriores tiene que surgir desde ustedes mismos,
a continuacin se muestran las tres teoras del origen de los virus ms aceptadas entre la
comunidad cientfica:
Teora
Teora de la regresin
Fundamento
En algn momento los virus fueron clulas que
infectaban otras clulas ms complejas y con el
tiempo los genes que no utilizaban para dicho
parasitismo desaparecieron.
Teora
celular
del
Teora
de
coevolucin
origen
la
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(a) Helicoidal
(b) Icosadrico
(c) Envueltos
(d) Complejos
El
virin
posee
estructuras
especializadas que le
permiten infectar.
Adems de la forma del virin, esta partcula posee componentes que deben caracterizarse
adecuadamente. Como lo profundizaremos ms adelante, utilizaremos la estructura del virin VIH
(Virus de Inmunodeficiencia Humana), un virus con envoltura:
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Pese a que el cuadro de la
izquierda puede llegar a verse complicado,
se traduce en que el material gentico de
los virus:
- Puede ser DNA o RNA
- Puede ser lineal o circular
- Puede ser monocatenario o
bicatenario
- Si es RNA monocatenario, puede
ser de sentido positivo o sentido negativo.
Lo que diferencia un RNA
monocaterianio de sentido positivo y uno
de sentido negativo es que el primero
(positivo)
puede
ser
traducido
inmediatamente en la clula husped,
mientras que el negativo requiere
realizar la transcripcin inversa.
Cmo se clasifican los virus?
Es un punto muy importante, porque existe
un gran nmero de virus descritos en la
naturaleza, tanto patgenos como no
patgenos.
La clasificacin se realiza de la
siguiente manera:
1. Se separan dos grandes grupos:
Los RNA virus y los DNA virus.
2. Luego se evala su forma
3. Finalmente, la presencia de
envoltura.
Esta caracterstica puede apreciarse
en el esquema de la pgina siguiente. No
es necesario saber dicho esquema para la
PSU, pero s comprenderlo.
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Ciclo viral
Lo ms importante que se debe recordar con respecto a los ciclos virales es que los virus
son entes trpicos, es decir, afectan ciertas poblaciones celulares determinadas
(dependiendo del tipo de virus).
Existen dos tipos de ciclo que pueden desarrollar los virus (un mismo virus puede
desarrollar ambos tipos):
Un ciclo ltico para una clula procariota posee las siguientes etapas:
1. Fijacin: Unin virus-membrana celular diana.
2. Penetracin: Inoculacin del genoma viral a la clula, adems de la maquinaria proteica
viral.
3. Eclipse: No se ensamblan viriones, pero se producen muchas copias de mRNA y enzimas
DNAsas.
4. Ensamblaje: Se ensamblan los capsmeros (para formar la cpside)
5. Lisis: Se destruye la clula y se liberan los viriones.
Un ciclo ltico para una clula eucariota posee casi las mismas etapas, con algunos cambios:
1. Fijacin: Unin virus-membrana celular diana
2. Penetracin: Inoculacin de la nucleocpside viral a la clula
3. Despojo: Degradacin de la cpside y nucleocpside viral.
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Cmo puedo inhibir la replicacin de un virus? Si se conoce en detalle los pasos bioqumicos
de la replicacin de un virus, se puede intentar detener alguno de ellos.
A continuacin se muestran algunos ejemplos:
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Nombre
Oseltamivir
Aciclovir
Lamivudina
Zidovudina (AZT)
Funcin
Inhibidor de neuraminidasa
viral
Inhibidor de DNA polimerasa
viral
Inhibidor de Transcriptasa
Inversa
Inhibidor de Transcriptasa
Inversa
Aplicacin
Virus Influenza
Herpes Simplex I y I
Epstein-Barr Virus
Terapia antiretroviral (VIH)
Terapia antiretroviral (VIH)
Aplicaciones biotecnolgicas
Los virus son partculas que pueden ser modificadas, e incluso sintetizadas in vitro. Gracias
a este principio, los virus son utilizados como vectores de informacin gentica.
Recordemos que los virus carecen de maquinaria para sintetizar protenas. Por esta razn,
los virus del tipo bacterifago (virus complejos), son inoculados con genes destinados a ser
integrados a un cromosoma bacteriano (cultivadas en laboratorio).
Esta integracin permitir que dicha bacteria comience a sintetizar el producto del gen
inoculado a travs del virus, por ejemplo, la produccin de insulina humana recombinante y otros
biofrmacos utilizados en esta era en la medicina.
Esta misma tecnologa puede aplicarse modificando el virus y su clula diana, como por
ejemplo clulas vegetales e incluso humanas, en lo que comienza a estructurarse bajo la
denominacin terapia gentica.
Imagen: Ejemplo de terapia gentica aplicada a pacientes portadores de Diabetes Mellitus Tipo I.
De esa manera hemos descrito las principales propiedades de los virus. La siguiente
seccin de esta gua est dedicada a uno de los virus ms polmicos del siglo XX, y que contina
sindolo: El Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH) y la enfermedad que este causa: El
Sndrome de Inmunodeficiencia Adquirido (SIDA).
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Generalidades
La particula viral (virin), desde las capas ms externas est formada por las siguientes
estructuras:
a) Membrana externa: Al momento de gemar desde la clula infectada la partcula viral
adquiere esta membrana plasmtica. En esta membrana se encuentran dos protenas:
a. Gp41: Es una protena transmembrana, anclada sobre ella est la protena
Gp120.
b. Gp120: Es una protena anclada a la nucleocpside viral. Interacciona con la
protena CD4 de los linfocitos T Helper e induce la fagocitosis de la
partcula viral.
b) Matriz: Capa proteica bajo la membrana plasmtica formada por una polimerizacin de
p17. Esta protena posee una regin que se une al DNA viral (una vez formado) y otra
regin afn al ncleo de la clula, permitiendo su ingreso a travs del complejo del poro
nuclear.
c) Cpside (core viral): Es un cascarn proteico de forma icosadrica formado por
polmeros de p6/p7 y p24.
d) Nucleocpside: Proteccin a las molculas genmicas formada por las protenas p6 y
p7
e) Genoma: Formado por dos molculas de RNA monocatenario ubicado al interior de la
nucleocpside. En esta zona tambin se encuentran las enzimas y protenas
reguladoras fundamentales para el inicio de la replicacin (transcriptasa reversa,
integrasa, la proteasa selectiva y la RNAsa)
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Otras protenas reguladoras: VIF (incrementa la infectividad y permite que los ciclos de
transcripcin reversa se realicen) y VPU (desprendimiento de viriones en clulas
infectadas)
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El SIDA es una manifestacin sistmica producto de una infeccin activa por VIH. Es
posible distinguir una condicin asintomtica seropositiva (Portador; La persona posee el VIH
pero no ha manifestado sntomas de inmunodepresin) y una condicin sintomtica
seropositiva (SIDA).
Un punto fundamental de comprender en estos pacientes es que el fallecimiento y las
complicaciones no se producen por la infeccin VIH, sino por la inmunosupresin que este virus
produce, permitiendo la infeccin con microorganismos oportunistas.
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Es posible distinguir diferentes etapas de la infeccin por VIH:
-
Etapa A: Portadores
Etapa B: Seropositivos con sntomas de enfermedades no C.
Etapa C: Seropositivos con sntomas relacionados con enfermedades incluidas por la
OMS para la definicin de SIDA (infecciones oportunistas bacterianas, virales, fngicas,
neumona por P jiroveci, etc)
Etapa D: Neuropatas y Procesos neoplsicos (Linfomas)
Estas etapas pueden clasificarse en base al Recuento Absoluto de CD4, como muestra la
siguiente tabla:
De esa manera, un portador (Etapa A) o etapa B que tenga un RACD4 < 199 cel/ml es
clasificado como SIDA, al igual que todas las etapas C.
Es muy importante conocer cmo el RACD4 y la carga viral oscilan durante el tiempo en
una persona infectada por VIH (es importante para la PSU):
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Las bacterias, ciertamente fueron probablemente las primeras clulas en originarse (se
cree que LUCA, el ancestro celular ms antiguo, fue una bacteria), de las cuales divergieron y
evolucionaron las arqueas y los eucariotas.
Morfologa bacteriana
-7
-5
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Forma
Organismo
Diplococo
Estafilococo
Staphylococcus aureus
Bacilo
Escherichia coli
Espiroqueta
Treponema pallidum
Vibrio
Vibrio cholerae
Diplococo arrionado
Neisseria gonorrhoeae
Una bacteria posee una estructura celular propia de las clulas procariotas, con algunas
especializaciones caractersticas de cada tipo. A continuacin se describen las principales, y ms
adelante se profundizar en ellas:
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Ribosomas bacterianos
Al igual que los ribosomas eucariotas, estos ribosomas tienen como funcin la sntesis de
pptidos primarios. Son ms pequeos que los eucariotas (70S vs 80S), y estn compuestos por
una subunidad mayor de 50S (RNAr 5S + RNA 23S) y una menor de 30S (RNAr de 16S).
Hay que destacar que los eucariotas, de 80S, estn compuestos por una subunidad mayor
y una menor pero con diferentes tipos de RNAr (la mayor posee RNAr de 5S + RNAr de 28S +
RNAr de 5,8S y la menor RNAr de 18S).
Esta diferencia es crucial para el uso de antibiticos de accin ribosmica, puestos que son
afines a subunidades bacterianas y no eucariotas (sino seran txicos).
-
Cromosoma bacteriano
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Pared celular
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La pared celular es una de las estructuras ms importantes de las bacterias, puesto que
adems de tener una funcin importante, permite realizar la clasificacin ms importante utilizada
en trminos teraputicos: La clasificacin de Gram.
La pared celular es una estructura ubicada externamente a la membrana plasmtica. Existe
un grupo de bacterias que posee una prominente pared celular (Gram positivas) y otras que
poseen una tenue pared celular con una membrana plasmtica extra por fuera (membrana externa,
presente en las bacterias Gram negativas).
El fundamento de la pared celular de las bacterias Gram positivas es una gruesa capa de
N-acetilglucosamina y N-acetilmurmico entrecruzado, estabilizado por molculas de cido
teicico y lipoteicico.
El entrecruzamiento de N-acetilglucosamina y N-acetilmurmico genera el peptidoglicano,
por lo que la inhibicin de la enzima responsable de esta reaccin es una potente accin
antibitica, realizada por un grupo de sustancias ampliamente utilizadas denominadas BLactmicos.
La presencia de pared celular es muy importante, puesto que es una estructura que brinda
un soporte estructural necesario para tolerar las diferencias osmticas que podran generar la
lisis de la bacteria en un contexto determinado.
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Por esa razn esta molcula recibe el nombre de endotoxina (a diferencia de las bacterias
Gram positivas, que pueden secretar toxinas, recibiendo el nombre de exotoxinas)
Adems, la membrana externa posee una serie de porinas (protenas que actan en el
transporte de sustancias), que pueden ser modificadas a modo de resistencia de antibiticos.
A modo comparativo, la siguiente imagen ilustra una pared celular en bacterias Gram
positivas (izquierda) y otra en bacterias Gram negativas (derecha):
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Citoesqueleto bacteriano
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Cpsula bacteriana
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Como se mencion, no todas las bacterias poseen esta estructura. Es una capa de
mucopolisacridos que son capaces de esconder los PAMPs (Patrones moleculares asociados a
patgenos; revisar la gua de sistemas de defensa) y disminuir la respuesta inmunolgica de un
determinado patgeno.
Plsmidos
Adaptaciones celulares
Las fimbrias son estructuras anlogas a pelos que no poseen movimiento propio, pero
que poseen molculas en sus extremos denominadas adhesinas. Ciertos epitelios (como el
urinario) poseen receptores celulares para estas adhesinas, lo que permite la adhesin de las
bacterias a dicha zona corporal.
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Los pili (en singular pilus) son estructuras similares a pelos derivados de finas
evaginaciones de la membrana plasmtica. Tienen diferentes funciones, una de las ms
importantes sera la transferencia de material gentico entre bacterias (que se ver ms adelante).
Los flagelos son estructuras formadas por un motor, una articulacin en forma de codo
y un filamento, que poseen un movimiento generado por gradientes de energa protn-motriz. La
estructura del flagelo no posee microtbulos (a diferencia del espermatozoide), sino que posee un
complejo sistema de diferentes protenas que son capaces de generar un movimiento cercano a
las 1000 RPM netas, de forma helicoidal.
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Metabolismo bacteriano
Las bacterias han generado adaptaciones que les han permitido utilizar los recursos de
diferentes ecosistemas para poder generar sus constituyentes biomoleculares. Respecto a esta
idea, es conveniente estudiar la siguiente tabla, en donde se clasifican las bacterias segn
diferentes aspectos:
Elemento estudiado
Fuente de carbono
Clasificacin
Hetertrofas
Auttrofas
Fuente de energa
Fottrofas
Quimitrofas
Donadores de electrones
Littrofas
Organtrofas
Significado
Obtienen C a partir de otros
seres vivos
Obtienen C de elementos
inorgnicos
Utilizan luz como fuente
primaria
Utilizan biomolculas como
fuente primaria
Utilizan elementos inorgnicos
Utilizan elementos orgnicos
Existe tambin otra clasificacin segn el uso y tolerancia al oxgeno. Esta clasificacin es
muy utilizada en aspectos teraputicos:
Movimiento bacteriano
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a)
b)
c)
d)
Montrico
Loftrico
Anftrico
Pertrico
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1. Fase de adaptacin: No existe aumento del nmero poblacional. Las bacterias presentes
se adaptan al medio.
2. Fase exponencial: Si existe una adecuada temperatura (generalmente entre 30 - 37C) y
abundancia de nutrientes, comienza una reproduccin activa de los primeros individuos,
aumentando exponencialmente el nmero poblacional.
3. Fase estacional: En esta fase el nmero poblacional alcanza la capacidad de carga del
medio (nmero poblacional mximo que soporta un determinado ambiente), por lo tanto el
nmero poblacional no aumenta.
4. Decrecimiento poblacional: Luego de un tiempo, los nutrientes comienzan a disminuir y los
desechos aumentan, por lo que los organismos comienzan a morir, disminuyendo el
nmero poblacional.
Variacin gentica
Conjugacin
En esta modalidad, existe una bacteria dadora y una receptora. A travs de un Pili sexual
(no confundir con reproduccin sexual), un plsmido es transferido a la bacteria receptora y luego
puede ser integrado en el cromosoma circular, otorgando caractersticas nuevas.
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Transduccin
Transformacin
En esta forma de variabilidad gentica, una bacteria que adquiri una caracterstica y
muere, deja en el espacio fsico restos de DNA que contienen genes que brindan estas
caractersticas. Si una bacteria incorpora estos fragmentos de DNA a su cromosoma, ella
expresar dichas caractersticas.
Este es uno de los fundamentos por el cual pueden generarse cepas de bacterias
resistentes a antibiticos
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Clasificacin de Gram
Nombre
Cristal Violeta
Tiempo
1 minuto
Segundo
Lugol
1 minuto
Tercero
Alcohol-Acetona
5 segundos
Cuarto
Safranina
1,5 minutos
Accin
Ingresa al citoplasma
y tie violeta su
interior
Forma un complejo
insoluble con el cristal
violeta.
Lava el cristal violeta
en las bacterias Gram
negativas
Tie el citoplasma
decolorado de las
Gram negativas
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Las siguientes son microfotografas que representan las dos bacterias nombradas en la
imagen anterior (S aureus; izquierda y E coli; derecha), una vez teidas:
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Reservorio
Agente
transmisor
Puerta de
entrada
Vas de transmisin
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Antibiticos
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DATO PUNTAJE
Tip PSU
Esta gua tiene mucha informacin y diferentes secciones. Es muy recomendable estudiar
una seccin a la vez, y luego ver la clase respectiva. De esa manera los conceptos sern mejor
comprendidos y se har menos tedioso leer toda la gua.
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