Introduccin a la Espectroscopa de Absorcin

Molecular Ultravioleta, Visible e Infrarrojo Cercano

Ing. Carlos Brunatti
Lic. Ana Mara Martn

Introduccin
Desde hace muchos aos se ha usado el color como ayuda para reconocer las sustancias qumicas;
al reemplazar el ojo humano por otros detectores de radiacin se puede estudiar la absorcin de
sustancias, no solamente en la zona del espectro visible, sino tambin en ultravioleta e infrarrojo.
Se denomina espectrofotometra a la medicin de la cantidad de energa radiante que absorbe un
sistema qumico en funcin de la longitud de onda de la radiacin, y a las mediciones a una
determinada longitud de onda.
La teora ondulatoria de la luz propone la idea de que un haz de luz es un flujo de cuantos de
energa llamados fotones; la luz de una cierta longitud de onda est asociada con los fotones, cada
uno de los cuales posee una cantidad definida de energa.
Transmitancia

La figura muestra un haz de radiacin paralela antes y despus de que ha pasado a travs de una
capa de solucin que tiene un espesor de b cm y una concentracin c de una especie absorbente.
Como consecuencia de interacciones entre los fotones y las partculas absorbentes, la potencia del
haz es atenuada. La transmitancia T de la solucin es entonces la fraccin de la radiacin incidente
transmitida por la solucin:
T=

I
I0

La transmitancia se expresa a menudo como porcentaje:

%T =

I
100
I0

Absorbancia
La absorbancia A de una solucin se define mediante la ecuacin:
A = log T = log

I0
I

La mayor parte de los trabajos analticos se realizan con soluciones de manera que vamos a
desarrollarla relacin que existe entre la concentracin de la solucin y su capacidad de absorber
radiacin.
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Medicin de Transmitancia y Absorbancia

La transmitancia y la absorbancia se miden en un instrumento llamado espectrofotmetro, la
solucin del analito se debe contener en algn recipiente transparente, tubo o celda.
Prdidas por dispersin en la solucin
Haz incidente
Haz emergente
Prdidas por reflexin en interfases
Como se ve en la representacin, ocurre reflexin en las interfases: aire-pared, tanto como en la
pared-solucin. La atenuacin del haz resultante es sustancial. Adems, la atenuacin de un haz
puede ocurrir por dispersin de las molculas grandes y a veces por absorcin de las paredes del
recipiente.
Para compensar estos efectos, la potencia del haz transmitido por la solucin del analito es
comparada comnmente con la potencia del haz transmitido por una celda idntica que contiene
solamente solvente. Una absorbancia experimental que se aproxima mucho a la absorbancia
verdadera se obtiene con la ecuacin.
A = log

I solvente
I solucin

Los espectrofotmetros, estn a menudo, equipados con un dispositivo que tiene una escala lineal
que se extiende de 0 a 100%. De manera de hacer tal instrumento de lectura directa en porcentaje de
transmitancia, se efectan dos ajustes preliminares, llamados 0%T y 100%T.
El ajuste del 0%T se lleva a cabo mediante un cierre mecnico del detector.
El ajuste de 100%T se hace con el cierre abierto y el solvente en el camino de la luz.
Normalmente el solvente est contenido en una celda que es casi idntica a las que contienen las
muestras.
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Cuando la celda del solvente es reemplazada por la celda que contiene la muestra, la escala da la
transmitancia porcentual.
Los instrumentos actuales poseen un sistema electrnico que realiza la operacin matemtica y da
la respuesta directamente absorbancia. Tambin hay que hacer una calibracin previa con el
solvente o blanco.
Aspectos Cuantitativos de las Mediciones de Absorcin
Ley de Beer
Consideremos un bloque de materia absorbente (slido, lquido o gas). Un haz de radiacin
monocromtica paralelo con intensidad I0 llega al bloque perpendicular a la superficie; luego pasa a
travs de la longitud b del material, que contiene n partculas absorbentes (tomos, iones o
molculas), la intensidad del haz disminuye a I como resultado de la absorcin. Consideremos
ahora una seccin transversal del bloque que tiene un rea S (X x Y) y un espesor infinitesimal dx.
Dentro de esta seccin hay dn partculas absorbentes; asociada a cada partcula podemos imaginar
una superficie en que ocurrir la captura del fotn. Esto es, si un fotn alcanza una de esas reas por
casualidad, ocurrir inmediatamente la absorcin. El rea total de esas superficies de captura dentro
de la seccin se designa ds; la relacin del rea de captura al rea total es ds/S.
En un promedio estadstico, esta relacin representa la probabilidad para la captura de fotones
dentro de la seccin.
La intensidad del haz que entra en la seccin, Ix es proporcional al nmero de fotones por cm2 y por
segundo, y dIx representa la cantidad removida por segundo dentro de la seccin, la fraccin
absorbida es entonces -dIx/Ix y esta relacin tambin es la probabilidad promedio por captura. El
trmino tiene signo negativo para indicar que la intensidad del haz disminuye.

dI x ds
=
Ix
S

Recordemos que ds es la suma de las reas de captura para cada partcula dentro de la seccin;
puede ser por eso proporcional al nmero de partculas ds = dn; siendo dn el nmero de partculas
dentro de la seccin y una constante de proporcionalidad, que se puede llamar seccin transversal
de captura.
Considerando las ecuaciones e integrando de 0 a n
n dn
dI x
=
I0 I
0
S
x

Queda
- ln

I n
=
I0
S

Luego de convertir los logaritmos a base 10 e invirtiendo la fraccin para cambiar de signo, se
obtiene:

log

I0
n
=
I 2,303 S

Siendo n el nmero total de partculas dentro del bloque.

La seccin transversal S se puede expresar en trminos del volumen del bloque en cm3 y su
longitud b en cm, entonces S = V/b
Sustituyendo en la ecuacin anterior, da:
log

I0
n b
=
I 2,303 V

Se nota que n/V tienes las unidades de concentracin (esto es nmero de partculas por cm3), se
puede convertir a moles por litro.
El nmero de moles es
n partculas
6,02 10 23 partculas/mol
y c expresado en mol/l:
c=

1000 cm 3 / l
n
mol

6,02 10 23
V[cm 3 ]

log

I 0 6,02 10 23 b c
=
I
2,303 1000

Combinando:

Finalmente, las constantes de esta ecuacin se pueden reunir en una nica constante:
log

I0
= bc = A
I

Absortividad y Absortividad Molar

La absorbancia es directamente proporcional a la longitud del camino b a travs de la solucin y la
concentracin c de la especie absorbente. Estas relaciones se dan como:
A = abc
Siendo a una constante de proporcionalidad llamada absortividad. La magnitud de a depender de
las unidades empleadas para b y c. A menudo b es dada en trminos de cm y c en gramos por litro,
entonces la absortividad tiene unidades de lg1cm1.
Cuando la concentracin se expresa en moles por litro y la longitud de la celda en centmetros, la
absortividad se llama absortividad molar, se designa como y tiene unidades de lmol1cm1,
entonces la absorbancia es:
A = bc

Curva de Calibracin
Denominamos espectro de una sustancia a la representacin de absorbancia (A) en funcin de
longitud de onda (),este grfico presenta ondulaciones con mximos y mnimos.
Para hacer las determinaciones cuantitativas se elige, en general, la longitud de onda
correspondiente a un mximo, pues el error de medicin es mnimo y la sensibilidad mxima.
Para verificar el cumplimiento de la ley de Beer, se debe realizar la curva de calibracin;
absorbancia (A) en funcin de concentracin (c), para lo cual se preparan soluciones de la sustancia
de concentraciones conocidas y se mide la absorbancia a la longitud de onda elegida.

Si es vlida la ley de Beer, para esa sustancia a esas concentraciones, la relacin debe ser una recta,
que pase por el origen de los ejes cartesianos; a menudo se observan desviaciones debidas a
diversos factores.

Aplicaciones de la Ley de Beer a Mezclas

La ley de Beer tambin se aplica a una solucin que contiene ms de una clase de sustancia
absorbente. Siempre que no haya interaccin entre las varias especies, la absorbancia total para un
sistema multicomponente est dada por:
A = A1 + A2 + A3 + ........... + An = 1 b c1 + 2 b c2 + 3 b c3 + ......... + n b cn

Indicando los subndices 1,2, .. n, las especies absorbentes.

Limitaciones a la Aplicabilidad de la Ley de Beer
Se encuentran pocas excepciones a la generalizacin que la absorbancia est relacionada
linealmente a la longitud del camino ptico.
En cambio, las desviaciones de la proporcionalidad directa entre la absorbancia medida y la
concentracin, para b constante, son ms frecuentes.
Estas desviaciones son fundamentales y representan limitaciones reales de la ley.
Algunas ocurren como una consecuencia de la manera en que las mediciones de absorbancia se
hacen, o como un resultado de cambios qumicos asociados con cambios en la concentracin.
Otras ocurren a veces como desviaciones instrumentales.
Limitaciones Propias de la Ley de Beer
La ley de Beer es exitosa en describir el comportamiento de absorcin de soluciones diluidas
solamente; a concentraciones altas (generalmente mayores que 0,01 M), la distancia promedio entre
las especies responsables de la absorcin est disminuida hasta el punto que cada una afecta la
distribucin de cargas de sus vecinas. Esta interaccin, a su vez, puede alterar la habilidad de las
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especies para absorber en una longitud de onda de radiacin. Debido a que la extensin de la
interaccin depende de la concentracin, la ocurrencia de este fenmeno provoca desviaciones de la
relacin lineal entre absorbancia y concentracin.
Un efecto similar se encuentra a veces en soluciones que contienen altas concentraciones de otras
especies, particularmente electrolitos. La proximidad de iones a la especie absorbente altera la
absortividad molar de la ltima por atracciones electrostticas, este efecto se disminuye por
dilucin.
Se encuentran algunas excepciones entre ciertos iones o molculas orgnicas grandes, que
presentan interacciones significativas a concentraciones debajo de 0,01 M.
Desviaciones de la ley de Beer tambin surgen porque es dependiente del ndice de refraccin de
la solucin; entonces, si cambios de concentracin provocan alteraciones en el ndice de refraccin
de la solucin, se observan desviaciones de la ley.
Desviaciones Qumicas Aparentes
Surgen cuando un analito se disocia, se asocia, o reacciona con el solvente para producir un
producto teniendo un espectro de absorcin diferente del analito. Por ejemplo CrO42- en funcin del
pH va a absorber diferente.
Desviaciones Instrumentales Aparentes con Radiacin Policromtica
Se observa una adhesin estricta a la ley de Beer solamente cuando la radiacin es monocromtica
verdadera; esta observacin es otra informacin del carcter limitante de la ley. El uso de radiacin
que est restringida a una longitud de onda simple es raro porque los elementos que aislan
porciones de la salida de una fuente continua producen una banda mas o menos simtrica de
longitudes de onda alrededor de la deseada.
La derivacin siguiente muestra el efecto de la radiacin policromtica de la ley de Beer.
Consideremos un haz que consiste de dos longitudes de onda y . Suponiendo que la ley de
Beer se aplica estrictamente para cada una de estas individuales, se puede escribir para
A = log

I0
= b c
I

I0
= 10 b c
I

I = I0 10 b c

I0
= 10 b c
I

I = I0 10 b c

Igualmente para
A = log

I0
= b c
I

Cuando una medida de absorbancia se realiza con una radiacin compuesta por ambas longitudes de
onda, la intensidad del haz emergente de la solucin viene dada por (I + I) y la del haz
procedente del solvente por (I0 + I0). Por lo tanto, la absorbancia medida Am de la muestra es:
A m = log

(I0 + I0 )
(I0 + I0 )
= log
= log (I0 + I0 ) - log (I0 10 b c + I0 10 b c )
b c
b c

(I + I )
(I 0 10
+ I 0 10 )

De manera que la absorbancia medida es un rango (error de medicin instrumental).

Es conveniente hacer las mediciones en un mximo del espectro, para tener mayor sensibilidad y
menor error.
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Tipos Generales de Instrumentos Para Mediciones de Absorcin Molecular

Ver en libros de texto de Anlisis Instrumental esquemas de equipos de simple haz y de doble haz.
Titulaciones Fotomtricas
Las mediciones fotomtricas o espectrofotomtricas se pueden emplear para localizar el punto de
equivalencia de una titulacin, siempre que el analito, el reactivo o el producto de la titulacin
absorban radiacin. Alternativamente un indicador absorbente puede proveer el cambio necesario
de absorbancia para la ubicacin del punto final.
Curvas de Titulacin
Una curva de titulacin fotomtrica es un grfico de absorbancia, corregida por cambios de
volumen, como una funcin del volumen del titulante. Si se eligen las condiciones adecuadamente,
la curva consistir de dos regiones de lneas rectas con pendientes diferentes, una que ocurre al
comienzo de la titulacin y la otra ubicada ms all de la regin del punto de equivalencia; se toma
el punto final como la interseccin de las porciones lineales extrapoladas.
A

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A

1: Analito no absorbe; reactivo titulante absorbe; producto no absorbe. A = P = 0, T > 0

2: Analito no absorbe; reactivo titulante no absorbe; producto absorbe. A = T= 0, P > 0
3: Analito absorbe; reactivo titulante no absorbe; producto no absorbe. T = P = 0, A > 0
4: Analito absorbe; reactivo titulante absorbe; producto no absorbe. A > P > 0, T = 0
5: Analito no absorbe; reactivo titulante absorbe; producto absorbe. A = 0, T > P >0
6: Analito no absorbe; reactivo titulante absorbe; producto absorbe. A = 0, P > T >0

Bibliografa
Qumica Analtica Cuantitativa, Day and Underwood.
Qumica Analtica, Skoog and West.
Anlisis Instrumental, Douglas R. Skoog and Donald M. West.

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