13.

DETERMINACIN DE Kd DE MEDICAMENTOS
Objetivo
Determinar las constantes de particin agua/octanol (w/o) de diversos medicamentos,
utilizando los conceptos de espectroscopa UV/Vis.
Material que el estudiante debe traer
Esptula pequea, agitador magntico, micropipetas de vidrio desechables con bulbo
(mnimo 6). Equipo de Seguridad COMPLETO.
Cuestionario
1. Por qu se utilizarn solventes (Agua y 1-octanol) presaturados?
2. Cul es el blanco que deber utilizar para stas determinaciones?
Fundamento terico
El diseo de una droga o medicamento incluye crear una molcula que acte sobre un
objetivo o diana teraputica, que puede ser una regin general o un sitio especfico y que
tenga un efecto teraputico en el paciente. Esta propiedad depender de la estructura de
la molcula as como su afinidad por las diferentes fases (acuosas o lipdicas) que
encuentre en el organismo. Cuando una droga o medicamento se administra va oral,
sta pasa del estmago al intestino y de all, la molcula debe pasar a travs de una capa
de clulas antes de que pueda ingresar a la corriente sangunea y ser distribuida a travs
del cuerpo. Esto requiere cruzar dos veces a travs de la membrana celular,
principalmente apolar; primero, para pasar del intestino a la clula y luego para pasar de
la clula a la sangre.
Las propiedades de solubilidad tienen una gran influencia en la habilidad de la molcula
para poder sufrir este proceso; debe ser lo suficientemente polar para que no precipite en
la solucin acuosa que conforma bsicamente a los organismos vivos, pero lo
suficientemente apolar para poder atravesar la bicapa lipdica que forma la membrana
celular. En la membrana celular se van a encontrar fosfolpidos, que son molculas
anfipticas, ordenadas en la bicapa lipdica de la membrana celular de manera que dentro
de la bicapa est la parte hidrofbica y orientada hacia afuera, estar la parte hidroflica.

La figura representa de forma muy simplificada una capa de clulas separando el intestino
del corriente sanguneo y el trayecto que debe seguir un medicamento o droga para llegar
al torrente sanguneo. (Tomado de Harris M., Logan J. J.Chem.Educ. 2014, 91, 915)
El coeficiente de particin (P) o coeficiente de distribucin (KD) es una constante que
describe el equilibrio para un proceso en el cual un soluto es repartido entre dos fases.
Este valor resulta til para estimar la distribucin de drogas o medicamentos dentro del
cuerpo.
K=[Droga]fase lipdica/[Droga]fase acuosa
Drogas con alto coeficiente de particin (hidrofbicas) se distribuyen preferencialmente
hacia los tejidos grasos, por ejemplo mientras que drogas con bajo coeficiente de particin
(hidroflicas) preferirn el suero sanguneo u otra regin con alto contenido acuoso. Los
coeficientes de particin son tiles tambin para predecir estabilidad metablica, ya que
drogas muy hidrofbicas deben ser metabolizadas a compuestos ms polares para
incrementar su solubilidad en agua y hacer ms eficiente la excrecin urinaria.
Dada la complejidad de las clulas no se hacen mediciones directas de la particin de un
compuesto dentro de los componentes lipdcos y acuosos de la clula, sino se puede
emplear un modelo simple, en el cual el 1-octanol funciona como lo hara la parte lipdica
de la membrana celular y agua o una solucin buffer, como la parte acuosa, pudiendo
entonces calcular KD que tambin, por lo general, se reporta como logKD y que nos
indicar si la droga prefiere sitios lipdicos o acuosos.
En este experimento, se investigar la capacidad de diversas drogas para moverse a
travs de fases acuosas y orgnicas y se determinar logKD al medir la concentracin en
equilibrio entre una fase acuosa y una orgnica, usando espectroscopa UV-Vis.
Procedimiento
Preparacin de los disolventes:
Agua saturada con 1-octanol y 1-octanol saturado con agua: en un vaso de precipitados o
matraz Erlenmeyer de tamao adecuado, colocar agua y 1-octanol y agitar durante varias
horas, luego, trasvasar a un embudo de separacin y separar las fases. Guardar en

frascos etiquetados adecuadamente, sin olvidar incluir en la etiqueta, la fecha de

preparacin.
Preparacin de soluciones madre:
Pesar 0.0050 g de cada una de las siguientes sustancias y disolver en agua saturada con
1-octanol, aforando a 100.0 mL en un matraz volumtrico. Se necesitar agitacin para
disolver completamente la sustancia y se sugieren los siguientes tiempos de agitacin:
Fenacetina
Acetaminofn
Sulfanilamida
Cafena

20 min
10 min
05 min
agitar hasta disolver, es ms soluble que las otras sustancias

Determinar la longitud de mxima absorcin (max) para cada una de las sustancias y
determinar la absorbancia a esa longitud de onda para calcular el coeficiente de extincin
molar () de cada sustancia. Debe procurarse obtener un valor de absorbancia entre 0.6 y
0.8; puede diluir la solucin madre en el caso de que la absorbancia sea mayor, pero si es
menor, deber preparar una solucin de mayor concentracin.
En este experimento, no se preparar una curva que relacione absorbancia vrs.
Concentracin, sino que se trabajar asumiendo que todas las sustancias, en el rango de
concentraciones que se trabajarn, cumplen adecuadamente la ley de Lambert-Beer.
Para el clculo de las concentraciones, se utilizar la ecuacin A = bc.

Clculo de KD para cada sustancia

El instructor les indicar cul es la sustancia que cada pareja de trabajo debe usar.
Utilizando pipetas volumtricas, mida 10.0 mL de la solucin madre (recuerde que esta
solucin debe tener una absorbancia entre 0.6 y 0.8) y colquela en un embudo de
separacin. Aada 10.0 mL de 1-octanol saturado con agua y proceda a realizar la
extraccin, agitando la ampolla con movimientos circulares. Cuide de no sacudir la
ampolla, porque se formarn emulsiones que tardan mucho en romperse, pero agite de
manera tal que garantice una buena extraccin. Deje reposar por 2 minutos para que las
fases se separen y determine la absorbancia de la fase acuosa a la longitud de onda de
mxima absorcin que usted encontr para su sustancia. Repita este procedimiento dos
veces ms. Note que solamente realiza una extraccin para cada alcuota de solucin
madre. Ahora, repita el procedimiento usando 5.0 mL de solucin acuosa y 10.0 mL de 1octanol saturado con agua.
Diagrama de Flujo
Dibujar el diagrama de flujo en el cuaderno.

Referencias
Logan, J. Harris, M. (2012). Determination of log Kow Values for Four Drugs.
Journal of Chemical Education. DOI: 10.1021/ed400655b