UNIVERSIDAD DE LA SABANA

FACULTAD DE MEDICINA
MORFOFISIOLOGIA II
FISIOLOGIA SANGUINEA
DETERMINACION DE LA VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR
(VSG), EL HEMATOCRITO, CONCENTRACION DE HEMOGLOBINA EN LA
SANGRE Y CONTEO DE CELULAS ROJAS Y BLANCAS DE LA SANGRE.
1. PRERREQUISITOS
I Composicin qumica de la sangre.
II Propiedades fsicas de la sangre
III Fisiologa del glbulo rojo
2. COMPETENCIAS A DESARROLLAR DURANTE LA PRCTICA
I. Realizar la toma de muestra de sangre venosa.
II. Determinar la VSG (mtodo segn Wintrobe)
III. Medir el Hematocrito (micromtodo con tubo capilar)
IV. Determinar la concentracin de hemoglobina en la sangre (mtodo de la
cianometahemoglobina o de Drabkin).
3. PROCEDIMIENTOS
I TOMA DE LA MUESTRA DE SANGRE VENOSA
a) MATERIALES:
-Guantes desechables
-Jeringa desechable de 5ml con aguja.
-Torniquete
-Algodn y alcohol antisptico
-Tubo de ensayo (con anticoagulante EDTA en cantidad suficiente para 5 ml de sangre)
b) REACTIVOS:
-Anticoagulante EDTA: 0,1 ml de una solucion al 10% (p/v) para cada 5 ml de sangre.
c) PROCEDIMIENTO:
-

Aplique el torniquete sobre el brazo del voluntario a quien se le va a extraer la

sangre, con una presin moderada, y haga que el voluntario apriete y afloje el
puo varias veces.
Escoja una vena adecuada en el pliegue del codo y desinfecte con algodn
embebido en alcohol la piel sobre la vena.
Deje secar el alcohol y luego puncione la vena, teniendo cuidado de que el bisel
de la aguja quede hacia arriba, hasta cuando encuentre retorno sanguneo hacia
la jeringa.
Succione la sangre hacia la jeringa lentamente, y cuando haya llenado
aproximadamente 4 ml, retire lentamente el torniquete mientras termina el
llenado de la jeringa.

Retire cuidadosamente la aguja de la vena y aplique una torunda seca de

algodn sobre el sitio de puncin.
Retire con prontitud la aguja de la jeringa y transfiera cuidadosamente la sangre
al tubo con EDTA, mezclando varias veces.
Deseche la aguja en el guardin. Deseche la jeringa y las torundas de algodn en
el recipiente rojo. Deseche el empaque de las jeringas en la caneca verde.

II DETERMINACION DE LA VELOCIDAD DE SEDIMENTACION

GLOBULAR (VSG).
-

Principio: En la sangre a la cual se le ha aadido anticoagulante, los glbulos

rojos sedimentan hasta formar una columna empaquetada en la parte inferior del
tubo, fenmeno conocido como eritrosedimentacin, debido a la mayor densidad
eritrocitaria con respecto al plasma (1.084-1.117 g/ml y 1.025-1.029,
respectivamente). La velocidad con que esto sucede se llama, velocidad de
sedimentacin globular (VSG)
Existen tres grandes factores que determinan la VSG: (1) Formacin de
agregados eritrocitarios en pila de monedas (rouleaux), (2) concentracin de
fibringeno en el plasma y (3) concentracin de albmina en el plasma.
(1) Formacin de rouleaux: el plasma se opone al movimiento de sedimentacin
globular, de forma directamente proporcional a la viscosidad plasmtica y al
rea de eritrocitos en contacto con el plasma. Al formar una pila de varios
eritrocitos, al rea de contacto se reducir, disminuyendo la resistencia
plasmtica a la sedimentacin. Esta formacin de columnas eritrocitarias, es
el principal factor que aumenta la VSG, y depende de cambios en el plasma
que disminuyan las fuerzas electrostticas de repulsin que habitualmente
existen entre los eritrocitos. Cambios en el conteo de eritrocitos tambin
modifican la formacin de rouleaux, siendo ms rpida entre menos
eritrocitos existan y viceversa.
(2) Concentracin de fibringeno: El fibringeno disminuye las fuerzas
electrostticas de repulsin entre eritrocitos, favoreciendo la formacin de
rouleaux, y por lo tanto la VSG aumenta en relacin casi lineal y
directamente proporcional con la concentracin plasmtica de fibringeno.
El fibringeno, junto con otras protenas como la protena C reactiva,
ferritina, ceruloplasmina, entre otras, conforma el grupo de las protenas de
respuesta aguda, por su aumento agudo e inespecfico ante dao tisular y
procesos inflamatorios, con el consecuente aumento de la VSG. Sin embargo
el fibringeno tambin se eleva durante la gestacin, lo cual se relaciona con
aumento de la vsg en mujeres gestantes.
(3) Concentracin de albmina: La albmina retarda la VSG al incrementar la
densidad plasmtica. As, en enfermedades inflamatorias tiende a disminuir la
concentracin de albmina, mientras que enfermedades hepticas o en estado de
desnutricin crnica, disminuye su produccin y en enfermedades renales
aumenta su prdida, conllevando a aumento de la VSG.

La VSG tiene tres etapas definidas: (1) un periodo inicial de algunos minutos en la cual
no hay sedimentacin, pero se forma el rouleaux.
(2) un periodo entre 30 minutos y 3 horas, en el cual sucede la sedimentacin a una tasa
prcticamente constante.

(3) un periodo final con una tasa lenta de sedimentacin, con el final empaquetamiento
globular en el fondo del tubo. La etapa 2 es la ms significativa, por lo cual se usa en la
prctica clnica el valor de VSG al cabo de la primera hora. En el laboratorio la VSG se
mide como la longitud de la columna de plasma que se encuentra por encima de la
columna de clulas rojas. Por consiguiente la VSG se expresa como mm/hora.
TABLA 1
VALORES DE REFERENCIA DE VSG, MTODO DE WINTROBE.
Nios (Hasta los 10 aos)
Hombres menores de 50 aos
Mujeres menores de 50 aos
Mujeres gestantes
Hombres mayores de 50 aos
Mujeres mayores de 50 aos

0-10 mm/1a hora

0-10 mm/1a hora
0-16 mm/1a hora
0-30 mm/1a hora
0-20 mm/1a hora
0-30 mm/1a hora

-Determinacin de la VSG.
MUESTRA: -sangre venosa anticoagulada con EDTA
MATERIALES: -Tubo de eritrosedimentacin segn Wintrobe. Es un tubo de vidrio, de
11,5 cm de largo, y 3 mm de dimetro interno con escala en milmetros a lo largo del
tubo.
-Cnula de Wintrobe. Es una aguja metlica roma, de 15 cm de largo para llenar los
tubos de eritrosedimentacin con la ayuda de una jeringa.
-Jeringa (de vidrio o de plstico)
-Soporte para tubos de Wintrobe.
-Reloj.
- Guantes desechables
- Torundas de algodn
PROCEDIMIENTO:
a) Coloque la cnula de Wintrobe en la jeringa.
b) Succione aproximadamente 1,5 cm de sangre, manteniendo vertical la jeringa.
c) Llene el tubo de Wintrobe de sangre. Para esto introduzca la cnula hasta el fondo del
tubo y expulse lentamente la sangre, mientras que simultneamente saca la cnula,
cuidando que no queden burbujas de aire dentro del tubo y evitando que se riegue la
sangre. Llene el tubo hasta la marca 0 superior. Si hay exceso de muestra por encima
de este valor, retire el exceso con un poco de algodn.
NOTA: Entre muestra y muestra lave la jeringa y la cnula, primero con agua corriente
y luego con solucin salina antes de la siguiente determinacin.
d) Coloque el tubo en el soporte para tubos de Wintrobe, cuidando que quede en estricta
posicin vertical.
e) Registre el tiempo y mida la eritrosedimentacin cada 15 minutos, hasta completar 60
minutos de lectura. La VSG es el nmero de mm de plasma libre que van quedando por
encima de la columna de eritrocitos.
f) Haga unta tabla y una grafica de la VSG contra el tiempo.
g) Analice los datos obtenidos.
-Interpretacin de los resultados:
La diferencia de valores de VSG representados en la tabla 1, puede representar menos
concentracin de eritrocitos en mujeres adultas que en hombres de edad
correspondiente.

El incremento de VSG durante la gestacin se relaciona con aumento de la

concentracin de fibringeno durante este periodo, en especial despus del segundo
semestre.
El aumento de la VSG por encima de los valores de referencia para cada grupo, suele
representar, en ausencia de anemias no hipocrmicas, dao tisular, de origen
inflamatorio o infeccioso o neoplsico, generalmente por el aumento de las protenas de
respuesta aguda, en especial fibringeno, y, en casos de inflamacin crnica, quizs por
la hipoalbuminemia que esto causa.
Otras causas de hipoalbuminemia, como trastornos hepticos, y mas frecuentemente la
desnutricin tambin presentan aumento de la VSG.
Como ya se mencion, en presencia de anemia tambin se eleva la VSG, aunque se
discute si las anemias hipocrmicas se comporten igual puesto que en este caso
disminuye la densidad eritrocitaria, lo cual conllevara a disminucin de VSG.
III MEDICION DEL HEMATOCRITO
-Principio: La palabra hematocrito proviene de dos palabras griegas que significan
sangre y separar.
Cuando la sangre anticoagulada se centrifuga hasta empacar en el fondo del tubo, el
porcentaje de volumen ocupado por los elementos formes se denomina hematocrito. Por
ejemplo, si al centrifugar 10 cc de sangre, el volumen ocupado por los eritrocitos es de
4,3 ml, el hematocrito es de 43%.
Existen mltiples factores que modifican los valores de hematocrito, entre los cuales se
tienen:
a) Efecto de la edad: Este es el factor que ms modifica el hematocrito. As los
mayores valores de hematocrito son los del recin nacido, con valores que
oscilan entre 46 y 60%, reflejo del aumento progresivo durante la vida
intrauterina. 24 a 48 horas despus del nacimiento, sucede una hemlisis
fisiolgica intensa, con disminucin marcada del hematocrito, que es progresivo,
siendo a los tres meses el ms bajo de toda la vida del humano. De all en
adelante el hematocrito comienza un ascenso lento, pero sostenido, con valores
similares entre gnero hasta los 12 aos de edad aproximadamente (pubertad), a
partir de lo cual se evidencian cambios entre gneros, tanto del hematocrito, la
concentracin de hemoglobina y el conteo eritrocitario. (ver tabla 2)
b) Efecto del gnero: A partir de la pubertad, y durante toda la vida frtil, el hombre
posee hematocrito, concentracin de hemoglobina y conteo eritrocitario mayores
que la mujer, para edad correspondiente.
Este efecto parece ser debido al efecto estimulante de la eritropoyesis de la
testosterona. En hombres de edad avanzada, la diferencia de estos parmetros
disminuye con respecto a las mujeres. (ver tabla 3)
c) Efecto de la Gestacin: En la mujer gestante el hematocrito, la hemoglobina y el
conteo eritrocitario disminuyen, principalmente durante los dos primeros
trimestres de gestacin, para luego ascender durante el tercero. El valor de
hematocrito referenciado es de 37% durante los dos primeros trimestre y de 40%
al final de la gestacin.
d) Efecto de la altitud de residencia: La estancia en altitud genera aumento del
hematocrito, la concentracin de hemoglobina y del conteo eritrocitario, que se
evidencia despus de 5-7 das de permanencia, reflejando una aumento de la
eritropoyesis, como respuesta a la hipoxia hipobrica de la altitud. Esta respuesta
tambin se presenta en las mujeres gestantes, y en todos los casos es
proporcional a la altitud sobre el nivel del mar. (ver tabla 3)

e) Efecto del entrenamiento fsico: En los deportistas de fondo, que requieren un

alto consumo de oxgeno, el entrenamiento se acompaa de aumento la masa
eritrocitaria y del volumen plasmtico, pero con mayor proporcin del segundo,
lo cual se refleja en una disminucin del hematocrito, el conteo eritrocitario y la
concentracin de hemoglobina con respecto al individuo no entrenado, lo cual
sucede a pesar del efecto de la altura.
Estos cambios suceden tras entrenamiento crnico, pero en sesiones de ejercicio
agudo, puede presentarse aumento del hematocrito, la concentracin de
hemoglobina y el conteo eritrocitario debido a hemoconcentracin.
f) Efecto de la gravedad: En condiciones de microgravedad existe un aumento del
hematocrito, la concentracin de hemoglobina y del conteo eritrocitario debido a
la disminucin del volumen plasmtico. Al regresar a la tierra, (1G), los
parmetros regresan a sus valores previos al vuelo.
-Medicin del hematocrito:
MUESTRA: -sangre venosa anticoagulada con EDTA.
MATERIALES:
- Guantes desechables
-Tubos capilares de vidrio.
-Plastilina
-Regla milimtrica.
-Torundas de algodn
REACTIVOS: ninguno.
EQUIPOS: Microcentrfuga para hematocrito.
PROCEDIMIENTO: a) Llene el tubo por capilaridad hasta aproximadamente
partes de su longitud.
b) Selle uno de los extremos del tubo con plastilina.
c) Coloque los tubos capilares en la microcentrfuga.
d) Centrifugue los tubos capilares durante 5 minutos.
e) Mida en el tubo capilar con la regla milimetrada la altura total de la columna de
sangre y la altura de la columna de eritrocitos.
El valor del hematocrito se calcula con la siguiente frmula:
(Altura eritrocitos/altura total) * 100
f) Transfiera los datos a una tabla.
g) Descarte los tubos capilares en el guardin.
h) Escriba los datos en la hoja de laboratorio y analcelos .
-Interpretacin de los resultados: Como ya se mencion, el hematocrito presenta
variaciones fisiolgicas; sin embargo puede modificarse en estados no fisiolgicos,
lo cual permite su uso en diagnstico clnico.
Hematocrito disminuido: Esto puede deberse a disminucin de la masa de
eritrocitos, sin disminucin del volumen plasmtico, como en las anemias, o por
aumento del volumen plasmtico, como en la retencin anormal de lquidos
(hemodilucin).
Hematocrito aumentado: Esto puede deberse a un incremento de la masa de
eritrocitos (poliglobulia o policitemia) sin cambios en el volumen plasmtico, como

en el caso de enfermedades pulmonares y/o cardiacas crnicas, que cursan con

hipoxia. Tambin puede existir policitemia de origen tumoral, por proliferacin
anormal eritroide, como en la policitemia rubra vera. La otra situacin que eleva el
hematocrito es la disminucin del volumen plasmtico (deshidratacin), sin
disminuir la masa eritrocitaria, tal como sucede en la diarrea o quemaduras.
Cuando disminuye tanto el volumen eritrocitario como el plasmtico de forma
paralela, el hematocrito no se modifica, tal como en los primeros minutos de
hemorragia aguda.
IV DETERMINACION DE LA CONCENTRACION DE HEMOGLOBINA
EN SANGRE.
Principio: La hemoglobinemia se define como la concentracin de hemoglobina en
la sangre total, y constituye uno de los ndices ms importantes de la funcin
hematolgica y respiratoria.
Las tcnicas actuales se basan principalmente en el hecho de liberar la hemoglobina
de los eritrocitos y ponerla en solucin para transformarla en alguno de sus
derivados y su posterior medicin espectrofotomtrica.
Las variaciones fisiolgicas de la hemoglobina estn sujetos bsicamente a las
mismas del hematocrito. (Ver tablas 2 y 3)
Medicin de la Hemoglobinemia:
MUESTRA: -Sangre venosa anticoagulada con EDTA. (20 ul)
MATERIALES:
-Guantes desechables
-Tubos de ensayo.
-Pipeta graduada de 5 ml.
-Micropipeta ajustada para dispensar 20 ul.
-Puntas plsticas para pipeta.
-Tubos para lectura en espectrofotmetro.
REACTIVOS:
Solucin segn Drabkin (contiene bicarbonato de sodio 1g, ferricianuro de potasio
0.2 g, cianuro de potasio 0.05 g, agua destilada 1 litro).
NOTA: ESTE ES UN REACTIVO TOXICO POR SU CONTENIDO DE
CIANURO. MANEJESE CON PRECAUCION.
-Patrn de hemoglobina con ttulo conocido
EQUIPOS: Espectrofotmetro.
PROCEDIMIENTO: a) Pipetear 5 ml de reactivo de Drabkin a un tubo de ensayo y
marcar como muestra (1 tubo para cada muestra de sangre).
b) Tomar 20 ul de sangre de la muestra, con la micropipeta, limpiando muy bien con
algodn el exceso del exterior de la punta de pipeta, y dispensarla en el tubo con el
reactivo de Drabkin, luego de lo cual se debe homogenizar la solucin.

c) Deje reposar durante 10 minutos.

d) Seleccione como longitud de onda 540 nm en el espectrofotmetro.
e) Usando el tubo blanco lleve la absorbancia del equipo a cero.
f) Lea la absorbancia del tubo muestra y regstrela.
g) Calcule la concentracin de hemoglobina de la muestra usando la siguiente
ecuacin:
Hb = (Absorbancia de la muestra/ absorbancia del patrn) * Ttulo del patrn (g/dl)
h) Transfiera los datos a la hoja de resultados y analcelos.
Interpretacin de los resultados: La hemoglobina se comporta en trminos
generales como el hematocrito, siendo su interpretacin anloga al mismo. As
Hemoglobina disminuida se presenta en casos de anemia o de hemodilucin, y
hemoglobina aumentada en situaciones de poliglobulia y de hemoconcentracin.
V CONTEO DE GLOBULOS ROJOS.
Principio: Los glbulos rojos son el componente celular ms abundante en la
sangre. Su funcin comprende el transporte de oxgeno y de dixido de carbono y
regulacin del pH sanguneo, todo gracias a la accin de su principal componente, la
hemoglobina. Las variaciones fisiolgicas del conteo de glbulos rojos estn
determinadas por las mismas circunstancias que el hematocrito y la
hemoglobinemia. (Ver tablas 2 y 3).
ndices eritrocitarios: Estos son 3 valores que se calculan a partir de relaciones entre
el conteo de glbulos rojos, el hematocrito y la hemoglobinemia, los cuales permiten
evaluar las caractersticas funcionales del eritrocito (componente circulante) y de la
mdula sea (componente productivo), los cuales se usan como criterios
diagnsticos en la clnica para diferentes enfermedades hematolgicas,
principalmente cuando est implicada la anemia.
Los ndices eritrocitarios son:
- VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO (VCM): Este es el volumen promedio
de un glbulo rojo. Se calcula al dividir el hematocrito entre el conteo de
glbulos rojos (dado en los millones de glbulos rojos por cada microlitro) y
multiplicando esto por 10:
VCM = (hematocrito/millones de glbulos rojos por microlitro) x 10
Su valor normal est entre 85 y 100 fL (1 x 10 -15 L). Valores menores a 85 fL se
denominan MICROCITOSIS y valores superiores a 100 fL se denominan
MACROCITOSIS.
Las microcitosis se presentan en casos de anemias por deficiencia de hierro
principalmente, pero tambin se presenta en anemias asociadas a enfermedades
crnicas, anemias hemolticas, talasemias y anemia sideroblstica. La macrocitosis se
presenta en anemia asociada a la deficiencia de vitamina B12 como causa principal,
pero tambin se presenta en casos de hemlisis autoinmune.
Existe un tipo de anemia normoctica, en la cual el VCM no se altera, y se presenta en
pacientes con insuficiencia renal crnica y en pacientes con hemorragias agudas. En
algunas anemias aplsicas, o anemia por deficiencia de vitamina C tambin se puede
presentar normocitosis.

- HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA (HCM): Este ndice es la

cantidad promedio de hemoglobina que hay en cada glbulo rojo. Se calcula al
dividir la hemoglobinemia entre el conteo de glbulos rojos (dado en los
millones de glbulos rojos por cada microlitro) y multiplicando esto por 10:

HCM = (hemoglobinemia/millones de glbulos rojos por microlitro) x 10

Su valor normal est entre 26 y 33 pg (1 x 10-12 g).
Valores de HCM inferiores a 26 pg se denominan HIPOCROMIA, la cual suele estar
asociada a los estados donde se presenta microcitosis (anemia ferropnica es la ms
frecuente, anemia hemoltica, anemia en enfermedades crnicas). Valores de HCM
superiores a 33 pg se denominan HIPERCROMIA y se presentan en anemia asociada
deficiencia de vitamina B12, aunque est puede cursar tambin con normocromia, o
incluso en estados muy avanzados con hipocroma. Adems en deficiencia de vitamina
C en eritropoyesis acelerada tambin se presenta hipercromia.
-CONCENTRACION DE HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA (CHCM): Este
ndice se describe como el porcentaje del volumen de un eritrocito ocupado por la
hemoglobina, y se calcula al dividir la hemoglobinemia entre el hematocrito y multipliar
esto por 100:
CHCM = (hemoglobinemia/hematocrito) x 100
El valor normal de la CHCM se encuentra entre 30 y 35%.
Valores por debajo del lmite inferior se asocian a estados ferropnicos, o anemias
hemolticas, o por talasemia. Valores incrementados por encima de 35% se observan en
ciertos trastornos congnitos como la esferocitosis, los cuales no son frecuentes.
Existe otro dato de referencia para el estudio de los glbulos rojos, conocido como
ANCHO DE DISTRIBUCION DE BANDA (RDW), el cual mide la variacin en el
tamao eritrocitario circulante. En la sangre existen en condiciones fisiolgicas glbulos
rojos de diferentes tamaos, pues los eritrocitos pierden normalmente volumen a medida
que envejecen. As que el RDW en condiciones normales se encuentra entre 11-14%.
Valores superiores al 14% se denomina HETEROGENEIDAD.
Este valor es importante para valorar en general la respuesta medular a ciertas
circunstancias, pues cuando la mdula sea est activa, suele presentarse aumento del
RDW, mientras que en condiciones de mala actividad medular, se presenta RDW
normal.

MUESTRA: -Sangre venosa anticoagulada con EDTA. (20 ul)

MATERIALES:
-Guantes desechables
-Tubos de ensayo.

-Pipeta graduada de 1 ml.

-Micropipeta ajustada para dispensar 5 ul.
-Puntas plsticas para pipeta.
-Pipetas Pasteur
- Cmara de conteo celular segn Neubauer (ver figura 1)
- Cubreobjetos.
REACTIVOS:
-Solucin de Gower: (sulfato sdico 6,25% p/v, cido actico glacial 16,66 v/v).
EQUIPOS: Microscopio.

Figura 1. Cmara de conteo celular segn Neubauer. Tomada y modificada a partir

de (2)
PROCEDIMIENTO: a) Pipetee 1 mL de la solucin de Gower en un tubo de ensayo
limpio y marcado.
b) Pipetee 5 uL de muestra en el tubo con el reactivo de Gower, mezcle suavemente
y deje reposar durante 5 minutos. Esto nos permite obtener una dilucin 1:200.
c) Tome la cmara de conteo y cbrala con un cubreobjetos, teniendo precaucin de
no mancharla con los dedos.
d) Encienda el microscopio, cierre el diafragma y coloque la cmara en el
microscopio, con el objetivo 10X busque la cuadrcula y familiarcese con ella.
e) Con la pipeta Pasteur tome una alcuota de la mezcla que realiz y colquela en el
borde de la cmara, dejando que esta se llene por capilaridad.
f) Cuente los eritrocitos en las zonas demarcadas para ello. Se deben contar en total
5 reas de 0,04 mm2, es decir 80 cuadros pequeos. (Ver figura 1). Para evitar
errores de conteo, un glbulo rojo que toque el borde izquierdo o superior de un
cuadro se incluir dentro de este, mientras que si toca el borde inferior o derecho, no
se incluir.
Clculo: Cada cuadro grande de la cmara de Neubauer representa 1 mm2. El
cuadro grande del centro tiene a su vez 25 cuadros medianos de 0,04 mm 2. Cada
cuadro mediano se subdivide a su vez en 16 cuadros pequeos, de 0,0025 mm 2. Este

cuadro grande es el determinado para el conteo de glbulos rojos; de l se tomarn

los cuatro cuadros de las esquinas y el del centro, para tal determinacin; es decir se
tomarn 80 cuadros pequeos. Esto nos da un rea de conteo de 0,2 mm 2. Dado que
la profundidad de la cmara es de 0,1 mm, el volumen contado sera de 0,02 mm 3.
Este valor se multiplica por 50 para calcular el nmero de eritrocitos en 1 mm 3, y
este valor se multiplica por 200 para compensar la dilucin 1:200 al mezclar con el
reactivo, lo cual nos da un factor total de 10000 para saber el conteo total de
eritrocitos por cada microlitro en la muestra analizada:
Conteo de glbulos rojos (millones/uL) = glbulos rojos contados en los 80
cuadros pequeos X 10000.
g) Escriba los datos en la hoja de laboratorio y haga el respectivo anlisis
Interpretacin de los resultados: El conteo de glbulos rojos se comporta en
trminos generales como el hematocrito y la hemoglobinemia, siendo su
interpretacin anloga al mismo. As conteos eritrocitarios disminuidos se
encuentran en anemia o hemodilucin, mientras que conteos eritrocitarios elevados
se encuentran en policitemia y hemoconcentracin.
TABLA 2
VALORES FISIOLOGICOS DE PARAMETROS HEMATIMETRICOS
DEPENDIENDO DE LA EDAD
EDAD
cordn
1 dia
3 das
7 das
3 meses
6 meses
1 ao
2 aos
5 aos
10 aos
12 aos

HCTO %
52.3 +/-5.3
58.2 +/- 6.6
54.5 +/-6.3
54.9 +/- 6.2
33.1 +/- 2.6
34.8 +/-2.5
34.5 +/-4.1
35.8 +/-3.0
37.2 +/-2.5
38.5 +/-2.8
39.7 +/-3.3

CONTEO ERITROCITARIO X 106/UL

4.63 +/-0.49
5.30 +/-0.55
5.06 +/-0.60
5.21 +/-0.62
3.76 +/-0.34
4.48 +/-0.41
4.75 +/-0.51
4.77 +/-0.42
4.65 +/-0.46
4.80 +/-0.47
4.92 +/-0.51

TABLA 3

Hb g/dl
17.1 +/-1.7
19.4 +/-2.1
18.5 +/-2.1
18.8 +/-2.1
11.4 +/-0.9
11.6 +/-0.9
11.1 +/-1.7
11.7 +/-1.4
12.7 +/-1.0
13.2 +/-1.2
13.6 +/-1.4

VALORES FISIOLOGICOS DE PARAMETROS HEMATIMETRICOS

RELACIONADOS CON LA ALTURA
ALTITUD
(m snm)
0-50

750

1350

1800

2550

GENERO Y
EDAD
Nios
Mujeres
adultas
Hombres
adultos
Nios
Mujeres
adultas
Hombres
adultos
Nios
Mujeres
adultas
Hombres
adultos
Nios
Mujeres
adultas
Hombres
adultos
Nios
Mujeres
adultas
Hombres
adultos

HEMATOCRITO HEMOGLOBINA
%
(g/dl)
40.9 +/- 1.0
13.0 +/- 1.43

CONTEO ERITROCITARIO
* 106/ul
4.45 +/- 0.10

41.5 +/- 1.5

13.1 +/- 0.62

4.33 +/- 0.14

47.0 +/- 0.5

44.2 +/- 2.8

15.5 +/- 1.40

14.2 +/- 0.84

5.03 +/- 0.10

4.66 +/- 0.34

42.0 +/- 2.3

13.4 +/- 0.91

4.41 +/- 0.25

49.2 +/- 1.2

43.5 +/- 1.0

16.2 +/- 1.10

14.5 +/- 0.57

5.11 +/- 0.24

4.80 +/- 0.30

42.7 +/- 1.4

14.3 +/- 0.93

5.17 +/- 0.20

48.7 +/- 1.0

45.2 +/- 1.5

16.7 +/- 0.50

15.1 +/- 0.81

5.45 +/- 0.30

4.97 +/- 0.30

42.4 +/- 1.0

14.5 +/- 1.17

4.78 +/- 0.31

49.4 +/- 2.9

45.4 +/- 2.5

17.2 +/- 0.83

15.2 +/- 0.51

5.26 +/- 0.24

5.07 +/- 0.29

45.3 +/- 2.2

15.5 +/- 0.51

4.93 +/- 0.24

51.1 +/- 2.4

16.5 +/- 1.00

5.61 +/- 0.28

VI CONTEO DE GLOBULOS BLANCOS

MUESTRA: -Sangre venosa anticoagulada con EDTA. (20 ul)
MATERIALES:
-Guantes desechables
-Tubos de ensayo.
-Pipeta graduada de 1 ml.
-Micropipeta ajustada para dispensar 50 ul.
-Puntas plsticas para pipeta.
-Pipetas Pasteur
- Cmara de conteo celular segn Neubauer (ver figura 1)
- Cubreobjetos.
REACTIVOS:
-Solucin de Turk: (acido actico glacial 2% v/v, solucin de violeta de genciana 1%
v/v).
EQUIPOS: Microscopio.
PROCEDIMIENTO: a) Pipetee 1 mL de la solucin de Turk en un tubo de ensayo
limpio y marcado.

b) Pipetee 50 uL de muestra en el tubo con el reactivo de Turk, mezcle suavemente y

deje reposar durante 5 minutos. Esto nos permite obtener una dilucin 1:20.
c) Tome la cmara de conteo y cbrala con un cubreobjetos, teniendo precaucin de
no mancharla con los dedos.
d) Encienda el microscopio, cierre el diafragma y coloque la cmara en el
microscopio, con el objetivo 10X busque la cuadrcula y familiarcese con ella.
e) Con la pipeta Pasteur tome una alcuota de la mezcla que realiz y colquela en el
borde de la cmara, dejando que esta se llene por capilaridad.
f) Cuente los leucocitos en las zonas demarcadas para ello. Se deben contar en total
4 reas de 1 mm2, es decir 64 cuadros medianos. (Ver figura 1). Para evitar errores
de conteo, un glbulo blanco que toque el borde izquierdo o superior de un cuadro
se incluir dentro de este, mientras que si toca el borde inferior o derecho, no se
incluir.
Clculo: Cada cuadro grande de la cmara de Neubauer representa 1 mm 2. Cada
cuadro grande de cada esquina se divide a su vez en 16 cuadros medianos, cada uno
con un rea de 0,0625 mm2. Esto nos da un rea de conteo de 4 mm2. Dado que la
profundidad de la cmara es de 0,1 mm, el volumen contado sera de 0,4 mm3. Este
valor se multiplica por 2,5 para calcular el nmero de eritrocitos en 1 mm 3, y este
valor se multiplica por 20 para compensar la dilucin 1:20 al mezclar con el
reactivo, lo cual nos da un factor total de 50 para saber el conteo total de leucocitos
por cada microlitro en la muestra analizada:
Conteo de glbulos blancos (miles/uL) = glbulos blancos contados en los 64
cuadros medianos X 50.
g) Escriba los datos en la hoja de laboratorio y haga el respectivo anlisis.
BIBLIOGRAFIA
(1) http://www.labtestsonline.es/tests/cbc.html?lnk=3
(2)http://www.ugr.es/~jhuertas/EvaluacionFisiologica/Recuento_rojos/Imagenes/gri
d.gif
(3) DAVIDSHON J, HENRY B, DIAGNOSTICO CLINICO POR EL
LABORATORIO, Ed Salvat, 6 edicin, 1982.
(4) BORON WF, BOULPAEP EL, MEDICAL PHYSIOLOGY, Segunda Edicin,
ED ELSEVIER, 2009
EDWARD ACERO, MARIA INES MALDONADO, JULIO C MARTINEZ,

HOJA DE LABORATORIO
1. RESULTADO DE ERITROSEDIMENTACIN.
TIEMPO (s)
SEDIMENTACION GLOBULAR
MUESTRA 1(mm)
SEDIMENTACION GLOBULAR
MUESTRA 2(mm)

15

30

45

60

GRAFICA DE ERITROSEDIMENTACION.

2. RESULTADO DE HEMATOCRITO
MUESTRA 1

MUESTRA 2

ALTURA DE LA MUESTRA
ALTURA DE LA COLUMNA DE
ERITROCITOS
VALOR DEL HEMATOCRITO

3. RESULTADO DE HEMOGLOBINA
MUESTRA 1

MUESTRA 2

ABSORBACIA DEL PATRON

TITULO DEL PATRON (g/dL)
ABSORBANCIA D ELA MUESTRA
TITULO DE LA MUESTRA (g/dL)

4. CONTEO DE GLOBULOS ROJOS

MUESTRA 1

MUESTRA2

GLOBULOS ROJOS EN EL CUADRO 1

GLOBULOS ROJOS EN EL CUADRO 2
GLOBULOS ROJOS EN EL CUADRO 3
GLOBULOS ROJOS EN EL CUADRO 4
GLOBULOS ROJOS EN EL CUADRO 5
TOTAL GLOBULOS ROJOS EN LOS 5
CUADROS
TOTAL POR 10000

5. CONTEO DE GLOBULOS BLANCOS

MUESTRA
1
GLOBULOS BLANCOS EN EL CUADRO 1
GLOBULOS BLANCOS EN EL CUADRO 2
GLOBULOS BLANCOS EN EL CUADRO 3
GLOBULOS BLANCOS EN EL CUADRO 4
TOTAL GLOBULOS BLANCOS EN LOS 5
CUADROS

MUESTRA2

TOTAL POR 50

PREGUNTAS DE ESTUDIO:
1. Qu entendi por velocidad de sedimentacin globular?
2. Qu relacin tienen la velocidad de sedimentacin globular y el hematocrito?
3. Haga una grfica donde demuestre cmo se modifican durante la vida el
hematocrito, la hemoglobina, el conteo eritrocitario y los ndices eritrocitarios.
4. Calcule los ndices eritrocitarios en las muestras que estudi. Analcelos. Escriba
las diferencias que hay en estos ndices entre hombres y mujeres.
5. Qu variaciones fisiolgicas modifican el conteo de glbulos blancos y cmo lo
hacen?