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Aceites Esenciales FRT
Aceites Esenciales FRT
ACEITES ESENCIALES
UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA
2.1. DEFINICION
Los aceites esenciales son las fracciones lquidas voltiles,
generalmente destilables por arrastre con vapor de agua, que
contienen las sustancias responsables del aroma de las plantas y que
son importantes en la industria cosmtica (perfumes y
aromatizantes), de alimentos (condimentos y saborizantes) y
farmacutica (saborizantes).
Los aceites esenciales generalmente son mezclas complejas de hasta
ms de 100 componentes que pueden ser:
ACEITES ESENCIALES
(alcanos,
Geraniol
Limoneno
Monoterpenos
OH
FARNESOL
DEFINICION Y CLASIFICACION
Los monoterpenos y sesquiterpenos son terpenos de 10 y 15 tomos
de carbonos derivados biosintticamente de geranilpirofosfato (GPP)
y farnesilpirofosfato (FPP) respectivamente. La Figura 1 muestra
ejemplos de monoterpenos y sesquiterpenos naturales. De acuerdo
con su estructura se les clasifica segn el nmero de ciclos como
acclicos, monocclicos, bicclicos, etc.
BISABOLENO
IONONA
Sesquiterpenos
10Rojas, S., CUADERNOS ACADEMICOS (QUIRAMA) (12) 77-82 (1992)
Medelln.
BIOSINTESIS11,12,13
Los monoterpenos y en general todos los compuestos terpenoides
naturales se biosintetizan por la ruta de la acetilcoenzima a travs de
un intermedio comn que es el cido mevalnico. Sin embargo,
recientemente se ha propuesto que algunos terpenoides no se
originan por esta ruta, sino por una ruta alterna que puede
involucrar piruvato, gliceraldehdo-3-fosfato y un intermedio de 5
tomos de carbono: 1-desoxi-xilulosa-5-fosfato14.
a. Biosntesis del cido mevalnico
La Figura 2 esquematiza el proceso de biosntesis del cido
mevalnico. Inicialmente se condensan dos molculas de acetilCoA,
con la participacin hipottica de una -cetotiolasa y una enzima
condensante. Enseguida esta unidad es atacada por otra unidad de
acetilCoA que ha perdido un H-. La hidrlisis de una de las dos
funciones tioster da lugar a la -hidroxi--metilglutarilcoenzima-A.
Una segunda hidrlisis del otro grupo tioster seguida de dos
reducciones sucesivas con una reductasa NADPH-dependiente se
llega al cido mevalnico.
b. Biognesis de IPP y DMAPP
El cido mevalnico es el precursor de las dos unidades bsicas que
dan origen a los terpenoides: Isopentenilpirofosfato (IPP) y
gama,gama-dimetilalilpirofosfato (DMAPP) tal como se esquematiza
en la Figura 3.
Inicialmente, una molcula de cido mevalnico es pirofosfatada por
dos unidades de ATP para originar mevalonil-pirofosfato. Enseguida
11J Chappell, Annual Review of Plant Physiology and Plant Molecular
Biology 46 (1995) 521-547.
12DJ Mcgarvey, R Croteau, Plant Cell 7: 7 (JUL 1995) 1015-1026.
13K Nabeta, K Kigure, M Fujita, T Nagoya, T Ishikawa, H Okuyama, T
Takasawa, Journal of the Chemical Society - Perkin Transactions 1 : 15
(AUG 7 1995) 1935-1939.
14 Adam, K. P., Zapp, J., PHYTOCHEMISTRY 48(6) 953 (1998).
CH2OH
CHO
CH2OH
HOCH2
OH
Nerol
Geraniol
Citronelal
Limoneno
Farnesol
OH
Car-3-eno
Alcohol
Fenchlico
Thuyona
O H
O
alfa-Pineno
gama-Bisaboleno
Fenchona
Nerolidol
O
Cariofileno
beta-Selineno
alfa-Cadineno
Alcanfor
gama-Thuyaplicina
Nepetalactona
OH
HO
Carotol
COOH
O
Acido abscsico
10
METODOS DE ANALISIS
a. EXTRACCION Y AISLAMIENTO 16
Como se mencion anteriormente, la mayora de monoterpenos y
sesquiterpenos se encuentran presentes en los aceites esenciales de
diversas plantas. A partir de dichos aceites es posible realizar su
aislamiento mediante la utilizacin de uno o varios mtodos
cromatogrficos tales como la cromatografa en columna, en capa
fina y HPLC. Para las cromatografas en columna y en capa fina se
utiliza ampliamente la slica gel como fase estacionaria. Como fase
mvil se emplean solventes apolares puros o mezclados tales como:
Tolueno-acetato de etilo 93:7, benceno, cloroformo, diclorometano,
benceno-acetato de etilo 9:1, benceno-acetato de etilo 95:5,
cloroformo-benceno
75:25,
cloroformo-etanol-cido
actico
17
18
19
94:5:1 , cloroformo-benceno 1:1 , .
Sin embargo actualmente se utilizan tcnicas de separacin ms
eficientes y rpidas como la cromatografa lquida de alta eficiencia
HPLC20, y la cromatografa de gases (CG)21,22,23,24, as como
11
Adicionalmente, la tcnica acoplada Cromatografa de GasesEspectrometra de masas, permite obtener el espectro de masas de
cada componente con el cual se obtiene el peso molecular e
informacin estructural 31. As mismo existen bases de datos con los
espectros de masas de muchos componentes, por lo cual el ndice de
Kovats (determinado en dos columnas de diferente polaridad) y el
espectro de masas son criterios para la asignacin qumica de
muchos componentes de aceites esenciales, no solo monoterpenos
sino tambin otros tipos de sustancias caractersticas de dichos
aceites.
Ms recientemente se han desarrollado columnas cromatogrficas
quirales para la separacin de componentes pticamente activos32,
Figura 8. Cromatograma de gases del aceite esencial de pia
y se han desarrollado mtodos para el anlisis combinado HPLCEspectrometra de Masas y HPLC-RMN de mezclas de
sesquiterpenos33.
b. ENSAYOS DE RECONOCIMIENTO
Debido a la diversidad de grupos funcionales que pueden estar
presentes en los componentes mono- y sesquiterpnicos de un
aceite esencial no existe una prueba especfica para su
reconocimiento. Sin embargo existen unos pocos procedimientos
experimentales que permiten reconocer algunos de ellos por su
coloracin con diferentes reactivos, su absorcin de luz UV de 254
nm y su Rf en cromatografa en capa fina. A manera de ejemplo la
Tabla 3 resume las caractersticas de varios monoterpenos y su
comportamiento al analizarlos por cromatografa en capa fina con
12
UV
Limoneno
-Pineno
Pulegona
Geraniol
Carvona
p-Cimeno
-Terpineol
1,8-Cineol
+
+
+
-
ENSAYO
BROMO
+
+
+
+
+
+
-
ENSAYO
2,4-DNFH
+
+
-
ENSAYO
H2SO4
Pardo
Pardo
Amarillo
Prpura
Rosa
Verde
Verde
c. CARACTERIZACION ESPECTRAL
Los monoterpenos y sesquiterpenos en un buen nmero se pueden
caracterizar qumicamente a partir de los datos de cromatografa de
gases y los espectros de masas tal como se anot anteriormente,
pero cuando existen dudas de tal caracterizacin se recurre a los
mtodos espectrales como Infrarrojo, Ultravioleta y Resonancia
Magntica Nuclear.
Infrarrojo
El espectro infrarrojo permite detectar la presencia de grupos
hidroxilo, carbonilo, anillos aromticos, enlaces dobles C=C cis y
trans, etc. Para determinar el espectro basta con colocar una gota
del componente en una celda de NaCl. Por ejemplo, en el espectro
infrarrojo del 3-p-menten-7-al presente en el aceite de comino. La
banda intensa en 1725 cm-1 indica un grupo carbonilo no
conjugado. El pico a 2710 cm-1 se asigna a la tensin C-H de un
protn aldehdico. El doblete centrado en 1375 cm-1 indica un grupo
isopropilo, y la banda de intensidad media en 817 cm-1 indica un
enlace doble trisustitudo 37.
Ultravioleta
El espectro UV de los monoterpenos y sesquiterpenos permite el
reconocimiento de grupos funcionales y grupos cromforos. Por
ejemplo el limoneno presenta un mximo de absorcin en 262 nm
(E=6400).
Resonancia Magntica Nuclear
Gracias a los desarrollos de la RMN se cuenta con bases de datos de
los espectros, especialmente de RMN-13C para los monoterpenos y
sesquiterpenos ms distribuidos. A continuacin se presentan los
desplazamientos qumicos de los carbonos de varios monoterpenos
como son: geraniol, linalool, mirceno, cis-citral, trans-citral,
mentano, mentol, -terpineol, -pineno, -pineno, limoneno,
37Varo, P. T., Heinz, D. E.; J. AGRIC. FOOD. CHEM. 18 234 (1970).
13
17.6
16.1
25.6
39.8
124.4
17.6
136.9
26.8
131.1
58.6
131.5
OH
125.3
22.8
27.7
25.6
124.5
25.4
15.9
13.7
17.4
134.9
26.9
39.7
125.0
124.3
39.8
145.9
OH
124.7
26.1
30.8
131.0
17.4
17.0
162.1
27.2
25.1
124.4
MIRCENO
24.4
17.4
132.2
128.7
32.5
123.1
145.1
17.1
139.0
58.6
FARNESOL
26.3
OH
115.5
137.1
25.6
112.9
132.9
42.2
111.5
LINALOOL
GERANIOL
130.8
73.3
25.3
CHO
162.1
26.0
40.5
123.5
190.0
CHO
127.5
189.4
trans-CITRAL
cis-CITRAL
120.7
35.0
45.6
30.9
120.8
23.5
70.9
23.6
30.6
25.9
OH
50.4
MENTOL
TERPINEOL
197.7
31.3
43.1
119.6
9.7
24.8
34.0
110.3
CARVONA
19.5
46.6
57.0
30.1
43.2
O
214.7
140.9
147.2
20.2
LIMONENO
28.5
116.5
42.7
108.4
20.0
131.5
143.8
149.7
20.5
22.2
15.4
135.2
27.1
26.7
28.0
41.2
OH
71.9
16.0
30.9
44.6
25.8
21.0
133.2
132.9
31.9
23.8
23.1
22.3
20.6
27.4
43.2
20.6
TERPINENO
ALCANFOR
14
23.4
20.8
23.8
23.0
120.6
30.4
26.8
27.9
31.0
17.2
39.2
152.9
107.0
34.5
26.4
130.2
132.7
32.4
28.7
54.3
23.2
132.3
25.2
124.1
26.8
122.5
beta-BISABOLENO
27.0
140.7
196.0
32.6
38.4
27.5
147.5
31.5
31.8
alfa-IONONA
195.5
134.7 130.7
133.4
17.5
120.8
30.9
124.3
30.6
28.0
32.6
27.0
19.7
108.4
21.8
22.8
144.2
26.4
47.3
106.0
38.1
31.5
151.8
27.0
23.6
alfa-PINENO
21.2
27.9
41.0
149.3
107.0
20.7
109.7
CALCULADO CON
CHEMWIND 3.1
CALCULADO CON
ACD-Labs SOFTWARE
40.5
40.5
41.0
31.5
30.7
26.1
51.7
23.6
116.1
31.6
30.6
beta-IONONA
REPORTADO
20.8
120.8
150.0
149.7
20.5
38.3
45.5
41.2
25.2
133.1
141.1
133.2
132.6
beta-PINENO
40 E-mail : http://www.bio-rad.com
41 Internet : http ://www.acdlabs.com
15
16
17
Espectrometra de Masas
Actualmente existen bases de
datos
que
contienen
informacin y espectros de
masas de los componentes
mono- y sesquiterpenoides de
aceites
esenciales.
Estas
bases de datos ya estn
disponibles
en
muchos
instrumentos comerciales de
anlisis como cromatgrafos
de
gases
acoplados
a
espectrmetros de masas.
SINTESIS
Se han reportado mtodos
sintticos para mono- y
sesquiterpenos45,46,47.
18
FENILPROPANOS
OH
OH
CHO
HO
OCH3
Alcohol hidrocinamlico
CH3O
Cinamaldehdo
Alcohol coniferlico
HO
HO
OCH3
OCH3
Ans-cetona
Isoeugenol
Eugenol
DEFINICION
Los fenilpropanos son sustancias naturales ampliamente distribuidas
en los vegetales caracterizadas por un anillo aromtico unido a una
cadena de 3 carbonos y derivados biosintticamente del cido
shikmico. La Figura 11 muestra varios ejemplos de fenilpropanoides
ampliamente distribuidos. Ntese como la cadena lateral puede
presentar varios estados de oxidacin (grupos metilo,
hidroximetileno, aldehdo y carboxilo) e insaturacin. El anillo
aromtico generalmente est sustituido en los carbonos 3, 4 y 5,
siendo estos sustituyentes grupos hidroxilo, metoxilo o metilndioxi,
principalmente.
CH3O
O
O
Isosafrol
Safrol
Isomiristicina
CH3O
OH CH3O
GluO
O
O
Miristicina
OCH3
OH
O
O
Coniferina
(glicsido)
Apiol
HO
HO
CH3O
OH
Anetol
Elemicina
19
BIOGENESIS
Los fenilpropanos presentes en los aceites esenciales se originan
biosintticamente a partir del cido shikmico48. El cido shikmico
se aisl inicialmente de la planta asitica Illicium sp. (Fam.
Illiciaceae) y es reconocido como un compuesto que es el punto de
partida para un vasto nmero de compuestos naturales de muchas
clases. Aunque es un discreto constituyente vegetal, no hay duda de
que es un metabolito universal de las plantas superiores.
El cido shikmico es el precursor de los constituyentes vegetales
que contienen anillos aromticos diferentes a los formados por la
ruta de la malonilcoenzima-A49 Hay en muchos casos dos patrones
estructurales claros que permiten reconocer los compuestos
aromticos derivados biosintticamente desde el cido shikmico, y
son: el patrn de oxigenacin, y la presencia de anillos aromticos
ligados a cadenas de tres tomos de carbono (patrn C6C3).
20
H 2O
COOH
P
COOH
COOH
COOH
COOH
ADP
ATP
CH2
FEP
PEP
O
O
P
HO
HO
-Pi
OH
COOH
HO
OH
OH
HOOC
COOH
COOH
HOOC
O
-Pi
-2H
CH2
-2H
E4P
O
COOH
HO
Acido corsmico
Acido prefnico
COOH
-H2O
-H 2 O
-CO 2
O
COOH
OH
OH
OH
OH
Acido
fenilpirvico
OH
Acido deshidroqunico
Acido deshidroshikmico
Transaminasa
Transaminasa
+2H
COOH
COOH
COOH
NH2
NH2
HO
OH
OH
OH
Tirosina
COOH
OH
OH
-CO 2
COOH
COOH
OH
OH
OH
-Pi
PO
OH
PO
OH
Fenilalanina
21
COOH
COOH
NH2
FAL TAL
R=H, FAL
R=OH, TAL
R=H, Fenilalanina
R=OH, Tirosina
R
R=H, Acido cinmico
R=OH, Acido p-cumrico
Safrol
Estragol
Anetol
Miristicina
Apiol
Timol
Eugenol
Isoeugenol
Metileugenol
Metilisoeugenol
Elemicina
Rf
en Rf en
Color
Benceno
n-hexano/CHCl3 (3 :2) VainillinaH2SO4
0.74
0.86
0.72
Rosado
0.69
Rojo
0.50
0.71
Pardo
0.39
0.41
Pardo
0.38
Rojo
0.20
0.31
Pardo
0.29
0.27
Rojo
0.42
0.42
0.27
-
con Color co
Gibbs
Gris
Pardo
Pardo
Pardo
Amarillo
Rojo pard
Prpura
Amarillo
22
c. CARACTERIZACION ESPECTRAL
Infrarrojo
Por tratarse de sustancias con anillo aromtico, sus espectros
infrarrojo muestran las seales caractersticas de estos compuestos y
dan informacin sobre el tipo de sustitucin del anillo aromtico
adems de los grupos funcionales presentes en la molcula54. Por
ejemplo, el espectro IR del eugenol muestra entre otras bandas en
3500 (ancha) debida al grupo hidroxilo, 1510 caracterstica de
aromticos, y tres bandas en 990, 920 y 938 cm-1 caractersticas de
un grupo vinilo monosustituido. El espectro IR del cinamaldehdo
muestra bandas en 3330 (dbil), 3050, 2820, 2750, 1660 (intensa,
debida al grupo carbonilo), 975, 740 y 695 cm-1 entre otras.
A manera de ejemplos, la Figura 15 muestra el espectro IR del transanetol55, y la figura 16 muestra el espectro IR del safrol.
Ultravioleta
A diferencia de la mayora de mono- y sesquiterpenos, los
fenilpropanos absorben luz UV con mximos alrededor de 254 nm
dependiendo de los grupos cromforos presentes en la molcula. Por
ejemplo el isoeugenol muestra mximos en 260 (15850) y 305
(7000), el safrol en 286 nm, la miristicina en 276 nm, el isosafrol en
264 nm, el cido trans-cinmico en 273 nm y el cido cis-cinmico
en 264 nm56.
23
24
Espectrometra de Masas
Debido tambin a su anillo aromtico, los fenilpropanos presentan
espectros de masas con iones moleculares intensos, lo que facilita la
determinacin de su peso molecular.
A manera de ejemplo, la Figura 20 muestra el espectro de masas del
trans-anetol, donde se alcanza a apreciar el fragmento m/z 148
correspondiente al ion molecular.
25
26
27
Ans
Bergamota
CG63
Buch
(2002).
28
Canela
Cilantro
Las semillas de cilantro adems de su uso como condimento para
alimentos, mezcladas con miel se usa para reducir la presin
sangunea72. Anlisis del aceite esencial por CG73
69 Basaran, P., Espino, N., Basaran, N., CEREAL FOODS WORLD 175-177
(2002).
70Dweck, A. C.; COSM. TOIL. 112 47 (1997).
71Mangas, J.J. y col., CHROMATOGRAPHIA 42 101-105 (1996).
72 Basaran, P., Espino, N., Basaran, N., CEREAL FOODS WORLD 175-177
67 Basaran, P., Espino, N., Basaran, N., CEREAL FOODS WORLD 175-177
(2002).
(2002).
68Moya, L. y col., POLITECNICA (QUITO) 18 (2) 109-122 (1993).
29
Clavo de olor
Comino
Corresponde a las semillas de Cuminum cyminum L., de la familia de
las umbelferas. Su aceite esencial contiene -pineno, -pineno,
mirceno, -felandreno, -terpineno, limoneno, -felandreno, 1,8cineol,
p-cimeno,
-terpineno,
3-p-menten-7-al,
mirtenal,
cuminaldehdo, felandral, 1,3-p-mentadien-7-al, cis-sabineno hidrato,
trans-sabineno hidrato, -terpineol, alcohol cuminlico, -cariofileno,
-farneseno y -bisaboleno74. La planta es nativa de la regin
Eucalipto
(2002).
76Kreis, P. y col., FLAVOUR FRAGRANCE J. 9 257-260 (1994).
30
Matricaria
Lavanda
Extraccin y caracterizacin81
Limn
CG-EM82,83
Marrubio
El aceite esencial de las hojas del Ageratum conyzoides, Asteraceae,
contiene principalmente -cariofileno y precoceno 84.
Marrubium parviflorum
CG85
79Nishimura, O., J. AGRIC. FOOD CHEM. 43 2941 (1995).
80Yonei, Y. y col., J. SUPERCRIT. FLUIDS 8 156-161 (1995).
81Pascual T. y col., ANALES DE QUIMICA 87 (3) 402-404 (1991).
82Combariza, M.Y. y col., J. HIGH RESOLUT. CHROMATOGR. 17 643-646
(1994).
83Blanco Tirado C. y col., J. CHROMATOG. 697A 501-503 (1995).
84Wandji, J. y col., FITOTERAPIA (5) 427 (1996).
31
Menta
Naranja
HPLC90,91
Organo
(2002).
89J. CHROMATOG. 666A 163 (1994).
32
Toronjil
Perejil
Las semillas de perejil, Petroselinum crispum, se usan actualmente
contra la calvicie, mientras que el jugo se usa para enfermedades
renales. Los frutos del perejil contienen apiol y miristicina y se usan
como diurticos94.
Pino
CG-EM95
Ruda
CG-EM96
Salvia
Composicin del aceite esencial97
Sndalo
CG98
93 Basaran, P., Espino, N., Basaran, N., CEREAL FOODS WORLD 175-177
(2002).
94 Basaran, P., Espino, N., Basaran, N., CEREAL FOODS WORLD 175-177
(2002).
95Tazerouti, F. y col., PLANTA MED. PHYTOTHER. 26 (3) 161-176 (1993).
96Stashenko, E.E. y col., J. MICROCOLUMN SEP. 7 117-122 (1995).
97 Perry, N. B., y col., J. AGRIC. FOOD CHEM. 47 (5) 2048-2054 (1999).
98Naqvi A.A. y col., INDIAN PERFUM. 39 (1) 62-63 (1995).
33
Yerba mate
Ylang-Ylang
Corresponde a Cananga odorata, ... CG-EM103
Otros
Kaempferia galanga fam. zingiberceas, contiene en sus races un
aceite esencial con 50% del ster isoamlico del cido p-
102Kubo I., Muroi H., Himejima, J. AGRIC. FOOD CHEM. 41 107 (1993).
103Stashenko, E.E. y col., J. HIGH RESOLUT. CHROMATOGR. 19 353-358
(1996).
34
2.10. PROBLEMAS
1. (Anetol: IR, RMNH, EMIE) Marcus, C., Lichtenstein, E. P.,
J.AGRIC. FOOD CHEM. 27 1217-1220 (1979).
2. (-Gurgujeno, un sesquiterpeno del blsamo Gurjun: EMIE, RMNH,
RMNC, SINTESIS), Lombarda, I. y col., J. AGRIC. FOOD CHEM. 45
(1) 221-226 (1997).