Curva del Crecimiento Bacteriano.

La curva del crecimiento bacteriano resulta de la representacin grfica de la determinacin peridica del nmero de clulas viables por mililitro que existen en un lquido inoculado con clulas microbianas provenientes de un cultivo que ha crecido previamente hasta la saturacin. Dicha curva se divide en seis fases, como se representa en la figura, mismas que se simbolizan con letras de la A a la F. A continuacin tambin se muestra un cuadro con las caractersticas principales de cada fase y se desarrollan las fases ms relevantes. Parte de la Curva A B C D E F A : Fase de Rezago. Este periodo consiste en la adaptacin de las clulas microbianas a su nuevo ambiente. En esta fase, las clulas microbianas se encuentran empobrecidas en cuanto a metabolitos y enzimas, esto debido a las condiciones desfavorables que representaba el cultivo previo. Por lo anterior, en este lapso de tiempo se forman las enzimas y los metabolitos intermedios hasta alcanzar las concentraciones necesarias para reiniciar el crecimiento. Este periodo se puede prolongar en el caso de que el medio de cultivo previo y las condiciones actuales resulten tan diferentes que las clulas sean genticamente incapaces de sobrevivir, por lo que slo unas cuantas mutantes podrn subsistir, y obviamente se requerir ms tiempo para que stas se multipliquen lo suficiente y sea notorio el aumento de clulas. C : Fase Exponencial. Como el nombre lo indica, en esta fase las clulas se encuentran en un estado de crecimiento sostenido. Se sintetiza nuevo material celular a una tasa constante, pero ste material es en s cataltico y la masa aumenta de manera exponencial. Lo anterior continua hasta que uno o ms nutrimentos se agoten, o hasta que se acumule tal cantidad de metabolitos txicos que se inhiba el crecimiento. El nutrimento limitante para los organismos aerobios suele ser el oxgeno : cuando la concentracin bacteriana es de aproximadamente 1 x 107 / ml es necesario incrementar el ingreso de oxgeno mediante agitacin o burbujeo ; pero cuando la concentracin alcanza 4 o 5 x 109 bacterias por ml, la tasa de difusin de Rezago Aceleracin Exponencial De retraso Estacionaria mxima Declinacin Fase Tasa de Crecimiento. Cero Creciente Constante Decreciente Cero Negativa (muerte)

oxgeno no puede satisfacer las demandas aun en un medio aireado, por lo que el crecimiento disminuye progresivamente. Durante el crecimiento exponencial, la tasa de crecimiento de las clulas (medida en gramos de biomasa producida por hora), cuando el crecimiento no es limitado por los nutrimentos, se puede obtener multiplicando la constante de la tasa de crecimiento (k) por la concentracin de biomasa. La constante de la tasa de crecimiento es la tasa a la cul las clulas producen ms clulas, y el valor que esta toma se interpreta como los gramos de biomasa producidos por cada gramo de biomasa preexistente creados en una hora. El crecimiento se denomina exponencial porque la biomasa se incrementa exponencialmente con respecto al tiempo. De lo anterior se deriva que, si graficamos el logaritmo de la concentracin de la biomasa (o celular) en funcin del tiempo, como ocurre en la curva del crecimiento, obtendremos una lnea recta como representacin de esta fase. Esta fase puede prolongarse indefinidamente si las clulas se transfieren repetidamente a un medio nuevo (fresco) de composicin idntica al anterior, lo cual se logra de manera automtica mediante dos aparatos : el quimiostato y el turbidostato. E : Fase Estacionaria Mxima. Como se explic en la descripcin de la fase anterior, ante el agotamiento de nutrimentos en el medio o la acumulacin de metabolitos txicos el crecimiento cesa por completo despus de un periodo de decrecimiento en la tasa de crecimiento, lo cual corresponde a la fase D o de retraso. No obstante, por lo general en esta fase se puede observar recambio celular, lo cual se debe a que, aunque existe una prdida lenta de clulas por muerte, dicha prdida se compensa exactamente por la formacin de nuevas clulas a travs de crecimiento y divisn. As, la cifra de clulas viables se mantiene constante, aunque en realidad en el conteo aumente poco a poco el nmero de clulas, si se cuentan tambin las muertas. Para comprender lo anterior debemos considerar que, para una clula microbiana, muerte significa la prdida irreversible de la capacidad para reproducirse (crecer y dividirse), lo cul se comprueba cuando una clula es incapaz de producir una colonia en cualquier medio. De lo anterior se deriva que designar a una clula microbiana como muerta no implica su destruccin fsica. La duracin de esta fase depende de la naturaleza del microorganismo y de las condiciones del medio. F : Fase de Declinacin. Esta fase, tambin conocida como fase de muerte, representa el decremento de clulas debido al aumento progresivo de la tasa de mortalidad, misma que tarde o temprano alcanza un valor sostenido. Por lo general, una vez que la mayora de las clulas ha muerto, la tasa de mortalidad disminuye bruscamente, por lo que un nmero pequeo de sobrevivientes pueden persistir en cultivo por meses o aos. Dicha persistencia puede deberse a que las clulas consiguen crecer gracias a los nutrimientos liberados por las clulas que mueren y se lisan, observndose recambio celular. Bibliografa.

Brooks, et. al., Microbiologa Mdica de Jawetz, Melnick y Adelberg, 16a ed., Manual Moderno, Mxico, 1999. Curva de Concentracin Celular

El crecimiento bacteriano, o mejor, la curva del crecimiento bacteriano.

El ganador del premio Nobel de Medicina Jacques Monod resume en este artculo publicado en 1949 (no les dije? De mucha actualidad), un hecho bien conocido en el campo de la microbiologa: La curva de crecimiento bacteriano. Hoy utilizar esta sencilla analoga para explicar fenmenos histricos que normalmente seran complicados de explicar de otra manera. Prestaremos ms atencin a los conceptos en lugar de las particularidades. Las bacterias se reproducen de manera asexual, o sea mediante fisin binaria. Esta se refiere a la reparticin equitativa de sus componentes celulares y copias exactas de su material gentico en dos clulas hijas. Aunque las bacterias tambin intercambian material gentico a travs de mecanismos similares al sexo (como por ejemplo para adquirir resistencia a los antibiticos), no tratar este punto a pesar de su obvio inters. Baste decir que cuando existen condiciones ??ptimas de alimento, acidez, oxgeno y humedad, las bacterias toman nutrientes, aumentan su tamao, duplican su material gentico y lo reparten por igual en dos clulas hijas de igual tamao y cada una portando una copia de su ADN. Si las condiciones se mantienen, cada clula hija sera capaz de originar otras 2 clulas hijas. En el caso de Escherichia coli, un habitante de nuestro intestino, tarda aproximadamente media hora en dividirse bajo condiciones ptimas. La siguiente tabla y video resumen el proceso:

Divisin nmero Nmero de clulas 0 1 (primera divisin) 2 (segunda divisin) 3 4 1 2 4 8 16

32 2n

La conclusin es que por n nmero de divisiones, habr tericamente 2n clulas asumiendo que las condiciones ptimas se mantengan. El hecho que podamos calcular el nmero esperado de bacterias luego de determinado nmero de divisiones con elevar la base 2 al exponente n, es lo que define aquella parte de la curva de crecimiento bacteriano llamada EXPONENCIAL o logartmica (recordemos que el trmino logartmo es sinnimo de exponente). Pero esta etapa corresponde slo a aquel trozo de la curva demarcada con el nmero 3 (ver abajo). Monod nos resume las otras etapas previas y posteriores al crecimiento exponencial que tambin son muy interesantes. Vamos a anotar algunas caractersticas para entender que sucede.

Etapa 1 o etapa de adaptacin. Si uno mira la linea que se mueve de

izquierda a derecha sin observarse ni aumento ni disminucin de la densidad bacteriana, da la sensacin que nada est pasando. Pero no muchsimo est pasando!. De aqu Jacques Monod sac junto con su colega Francois Jacob el Premio Nobel. Resulta que las bacterias fundadoras las que seguramente estaban descansando en algn lugar y fueron puestas en condiciones de cultivo, y lo primero que hacen es averiguar qu comida hay, qu recursos pueden utilizarse y basadas en esto proceden a adaptar su maquinaria metablica para aprovechar los recursos disponibles. Hacen lo del dicho Si del cielo te caen limones, aprende a hacer limonada. Los microbilogos Jacques Monod y Francois Jacob fueron premiados por descubrir el mecanismo gentico (el famoso operon lac) que permite a las bacterias hacer limonada si del cielo les caen limones. Entonces, aunque aparentemente no est pasando nada, est sucediendo un proceso de adaptacin muy importante para hacer mejor uso de los recursos disponibles. Etapa 2 o de aceleramiento del crecimiento. En esta etapa las bacterias ya han adaptado su maquinaria metablica que les permitir utilizar el

carbono y aminocidos disponibles. Ya algunas bacterias se multiplican mientras otras vienen rezagadas y por eso la curva se ve ascendente pero no es una lnea recta. Saban que en geometra las curvas pueden ser lneas rectas y las lneas rectas curvas? S, es verdad, porque depende de la escala en que se haga la grfica. Es como darle la vuelta al mundo: no se tiene la sensacin de dar la curva a pesar de estar yendo en linea recta. Etapa 3 o de crecimiento exponencial o logartmico. Es la etapa ms famosa por la impresin que causa. Y la ms temible. De hecho, es la que motiva que escriba estas lneas. Su cintica tan matemticamente atractiva ser el tema de una serie de videos muy reveladora. Aqu las bacterias consumen a un ritmo constante los recursos, crecen a un ritmo constante y dan origen a las clulas hijas que repiten el ciclo a una velocidad constante gracias a la abundancia de recursos,estn y se creen las dueas del Jardn del Edn. Cuando esta curva se grafica en papel logartmico y se mantiene el tiempo a escala lineal, se observa como una lnea recta ascendente, pero si se grafica en escala lineal vemos que los nmeros suben vertiginosamente y atraviesan el techo, entonces ah si formaran una curva. Etapa 4 o de desaceleracin del crecimiento. Las bacterias que venan creciendo a un ritmo sostenido gracias a la abundancia de recursos, deben desacelerar cuando stos se agotan, los desperdicios se acumulan, la acidez aumenta, el oxgeno no se puede utilizar. Algunas bacterias dejan de crecer, otras crecen ms lentamente y otras logran captar algunos recursos y pueden seguir creciendo. Por eso la curva se observa nuevamente curva, pero aplanndose esta vez. Es la vspera del ocaso. Etapa 5 o fase estacionaria. En esta fase hay agotamiento de recursos, la mayora de bacterias estn vivas pero ya no pueden tener hijas. Se mantienen vivas de milagro, consumen lo mnimo necesario para subsistir. Viven del rebusque, algunas logran adaptarse, cortan gastos suprfluos, dejan de comer tanto o comen carroa, consumen menos oxgeno, pierden peso pero llegado el caso que mejorasen las condiciones podran superarse (starvation survival). Ejemplos sonlos enquistamientos y esporulacin de Bacillus subtilis. Hay otras menos afortunadas, la escacs las deja marcadas y deciden hibernar. Luego si las condiciones mejoran estas bacterias no pueden reproducirse, estado conocido como Viable Pero No Cultivable de Vibrio vulnificus. Sin embargo, si los recursos han sido agotados ni siquiera estas hibernaciones son suficientes para evitar la muerte. Etapa 6 o fase de muerte. En esta fase se evidencia otro terrible desenlace: la muerte. Es cierto que algunas bacterias pueden entran en estados de recesin econmica pero muchas no logran adaptarse y sucumben a la acumulacin de desechos txicos, ausencia de fuentes de carbono asimilables, acidez, falta de oxgeno y muchos otros. Al final, la vida no se sostiene de la nada. Habiendo introducido esta curva podremos hablar del crecimiento poblacional en similares escenarios, la pregunta que queda es: hay evidencia de estas etapas en poblaciones humanas?. La respuesta corta es s. Pero es ms interesante la respuesta larga. En otros posts examinaremos en mamferos y

humanos las etapas ms interesantes de esta curva. Concentraremos nuestra atencin en la etapa de crecimiento logartmica (etapa vegetativa) y del colapso poblacional por ser las ms interesantes.