Pinza ptica

Saltar a: navegacin, bsqueda Una pinza ptica es un instrumento cientfico que usa un rayo lser para proveer una fuerza atractiva o repulsiva, dependiendo del emparejamiento de ndice (tpicamente en el orden de pico Newtons) para sostener y mover fsicamente objetos dielctricos microscpicos. Las pinzas pticas han sido particularmente exitosas en el estudio de una variedad de sistemas biolgicos en los aos recientes.

ndice

1 Algunos conceptos preliminares o 1.1 La Teora Electromagntica de la luz y los fotones como una descripcin cuntica o 1.2 Las ecuaciones de Maxwell o 1.3 Resumen de las "ecuaciones de Maxwell" en su forma Diferencial e Integral o 1.4 Las ecuaciones de Maxwell en el vaco, sin cargas ni corrientes 2 Momento y presin de Radiacin o 2.1 Descripcin de segunda cuantizacin 3 Pinzas pticas o 3.1 Historia y desarrollo 4 La fsica de las pinzas pticas o 4.1 Descripcin General o 4.2 Visin detallada de las pinzas pticas 4.2.1 El enfoque de ptica de rayos 4.2.2 La aproximacin del dipolo elctrico 5 Diseo experimental, construccin y operacin 6 Aplicaciones Biolgicas de las pinzas pticas o 6.1 Las pinzas pticas aplicadas al estudio de los motores biolgicos o 6.2 Motores Moleculares: Cinesina 7 Enlaces Multimedia 8 Referencias 9 Referencias

Algunos conceptos preliminares

La Teora Electromagntica de la luz y los fotones como una descripcin cuntica
El trabajo de James Clerk Maxwell y los desarrollos posteriores desde finales del siglo XIX pusieron de manifiesto que la luz tiene naturaleza electromagntica. La electrodinmica clsica conduce a la idea de una transferencia continua de energa por medio de ondas

electromagnticas. En cambio, el punto de vista ms moderno de la electrodinmica cuntica describe las interacciones electromagnticas y el transporte de energa en trminos de "partculas" elementales sin masa, denominadas fotones. La naturaleza cuntica de la energa radiante no es siempre evidente, ni tampoco de inters prctico en ptica. Hay situaciones en las cuales el equipo de deteccin es tal que es imposible distinguir cuantos individuales. Si la longitud de onda de la luz es pequea en comparacin con el aparato, podran utilizarse, como primera aproximacin, las tcnicas de ptica geomtrica. Un tratamiento algo ms preciso, que es aplicable tambin cuando las dimensiones del aparato son pequeas, es el de la ptica fsica en la que la propiedad dominante de la luz es su naturaleza ondulatoria. Por lo que al estudio clsico de la ptica fsica se refiere, ser ms que suficiente tratar la luz como una onda electromagntica. El tratamiento mecnico-cuntico asocia una ecuacin de onda con una partcula, sea sta un fotn, electrn, protn, etc. En el caso de partculas materiales, los aspectos ondulatorios se introducen por medio de la ecuacin de campo, conocida como ecuacin de Schrodinger. Para la luz, tenemos una representacin de la naturaleza ondulatoria en la forma de las ecuaciones de campo electromagntico de Maxwell. Con stas como punto de partida se puede construir una teora mecnico-cuntica de fotones y su interaccin con las cargas. La doble naturaleza de la luz se pone de manifiesto por el hecho de que se propaga en el espacio como lo hace una onda, demostrando, sin embargo, un comportamiento de partcula durante los procesos de emisin y absorcin cuando existe interaccin con la materia. La energa radiante electromagntica en estos casos es emitida y absorbida en cuantos o tambin llamados fotones y no de forma continua como sucede con una onda clsica. No obstante, su movimiento a travs de una lente, un agujero o conjunto de rendijas, est supeditado a sus caractersticas ondulatorias (tal es el caso de los efectos de interferencia y difraccin). El fotn tiene masa cero y, por consiguiente, puede imaginarse que en un haz de luz hay un nmero sumamente grande de fotones de "baja energa", porque dentro de ese modelo, haces muy densos de fotones actan en promedio para producir campos clsicos bien definidos. La energa transportada por un gran nmero de fotones es, en promedio, equivalente a la energa transferida por una onda electromagntica clsica. Por tales razones en algunas condiciones podemos considerar que la luz es una onda electromagntica clsica, teniendo en cuenta el hecho de que hay situaciones para las cuales esta descripcin es inadecuada (como por ejemplo cuando se considera la descripcin terica del efecto fotoelctrico).

Las ecuaciones de Maxwell

En electromagnetismo, las ecuaciones de Maxwell son un conjunto de cuatro ecuaciones que fueron primeramente presentadas como un grupo notable en 1884 por Oliver Heaviside en conjunto con Josiah Willard Gibbs. Estas ecuaciones haban aparecido en una publicacin de Maxwell en 1861 titulada On Physical Lines of Force. Estas describen la interrelacin entre los campos elctricos, los campos magnticos, la carga elctrica y la corriente elctrica, y Maxwell fue el creador de solo una de estas

ecuaciones por s mismo (va la modificacin de una ecuacin que ya exista), l las deriv todas independientemente en conjuncin con su modelo de vrtice molecular de las lneas de fuerza de Faraday. Maxwell introdujo un trmino extra a la ley circuital de Ampre la cual es una derivada temporal del campo elctrico y conocida como la corriente de desplazamiento de Maxwell. Esta modificacin es el aspecto ms significativo del trabajo de Mxwell en electromagnetismo. En el artculo de Maxwell de 1865 titulado A Dynamical Theory of the Electromagnetic Field versin modificada de Maxwell de la ley circuital de Ampre le permiti derivar la ecuacin de onda electromagntica, demostrando tericamente que la luz es una onda electromagntica con velocidad de propagacin c. Esta formulacin contena 20 ecuaciones de 20 variables. En 1873 James Clerk Maxwell intent una formulacin simplificada que finalmente no result popular. Posteriormente la formulacin vectorial result especialmente atractiva porque remarcaba las simetras intrnsecas en las ecuaciones haciendo ms fcil su utilizacin e inspirando aplicaciones posteriores.

Resumen de las "ecuaciones de Maxwell" en su forma Diferencial e Integral

Nombre Ley de Gauss: Ley de Gauss para el campo magntico (ausencia de monopolo magntico): Ley de Faraday: Ley de Ampre generalizada: En la siguiente tabla se proporciona el significado de cada smbolo y su unidad de medida en el SI: Forma diferencial Forma integral

Smbolo campo elctrico campo magntico

Significado

Unidad de medida SI (Volt sobre metro) (Amper sobre metro) (Coulomb sobre metro cuadrado) (Tesla) (Coulomb sobre metro cbico) (Amper sobre metro cuadrado) (metros cuadrados)

desplazamiento elctrico desplazamiento magntico densidad de carga elctrica

densidad de corriente vector del elemento diferencial de superficie normal a la superficie S elemento diferencial de volumen encerrado por la superficie S vector del elemento de longitud del contorno que limita la superficie S divergencia rotacional

(metros cbicos) (metros) por metro por metro

La segunda ecuacin es equivalente a afirmar que el monopolo magntico no existe. La fuerza ejercida sobre una partcula cargada por los campos elctricos y campo magntico viene dada por la ecuacin de la Fuerza de Lorentz: ............(1) donde es la carga de la partcula y es la velocidad de sta.

Las ecuaciones de Maxwell en el vaco, sin cargas ni corrientes

El vaco es un medio lineal, homogneo, istropo y no dispersivo. Las constantes de proporcionalidad en el vaco son 0 y 0.

............(2) ............(3) Como no hay ni corriente ni carga elctrica en el vaco, las ecuaciones de Maxwell en espacio libre son: ............(4) ............(5) .........(6) ........(7) Estas ecuaciones tienen soluciones sencillas para ondas planas sinusoidales, con campos elctricos y magnticos con direcciones ortogonales entre ellos y ortogonales a la direccin de propagacin. Su velocidad de propagacin es

............(8) Maxwell descubri que esta cantidad c era simplemente la velocidad de la luz en el vaco, por lo que la luz es una forma de radiacin electromagntica. Los valores aceptados actualmente para la velocidad de la luz y para la permitividad y permeabilidad se resumen en la siguiente tabla: Unidad de medida SI

Smbolo

Nombre Velocidad de la luz Permitividad Elctrica Permeabilidad Magntica

Valor numrico

Tipo definido derivado

definido

Momento y presin de Radiacin

En 1619, Johannes Kepler sugiri que era la presin de la luz solar lo que desviaba la cola de un cometa de manera que siempre apuntaba lejos del Sol [16]. Esta argumentacin cautiv especialmente a los defensores futuros de la teora corpuscular de la luz. Despus de todo, ellos imaginaban un haz de luz como un flujo de partculas y dicho flujo ejercera, naturalmente, una fuerza al bombardear la materia. Durante algn tiempo pareca como si

este efecto permitiera establecer, al final, la superioridad de la teora corpuscular sobre la ondulatoria, pero todos los experimentos que se realizaron en esa direccin no consiguieron detectar la fuerza de la radiacin, as que el inters se fue apagando poco a poco. Irnicamente, fue Maxwell en 1873 quien volvi a sacar este tema estableciendo, en teora, que las ondas ejercen efectivamente una presin. "En un medio en el que las ondas se propagan", escribi Maxwell, "hay una presin en la direccin normal a las ondas, numricamente igual a la energa en una unidad de volumen". Cuando una onda electromagntica incide en la superficie de un material, interacciona con las cargas que constituyen el material masivo. Independientemente de que la onda sea absorbida parcialmente o reflejada, ejerce una fuerza sobre aquellas cargas y, por consiguiente, sobre la superficie misma. Por ejemplo, en el caso de un buen conductor, el campo elctrico de la onda genera una corriente mientras que su campo magntico genera unas fuerzas sobre esas corrientes. Es posible calcular la fuerza resultante por la teora electromagntica, en la que la segunda Ley de Newton (segn la cul la fuerza equivale al ritmo de cambio del momento) sugiere que la onda misma lleva un momento. Realmente, cuando tenemos un flujo de energa, es normal pensar que haya un momento asociado - se trata de los dos aspectos relacionados de tiempo y espacio del movimiento -. Como demostr Maxwell, la presin de radiacin, la onda electromagntica. Para el vaco sabemos que , equivale a la densidad de energa de

.........(9) y

.........(10) Puesto que

.........(11)

.........(12)

de manera alternativa podemos expresar la presin en trminos de la magnitud del vector de Poynting, es decir

.........(13) Esta ecuacin tiene unidades de potencia divididas por unidades de rea por velocidad o de forma equivalente, fuerza por la velocidad dividida por el rea y la velocidad, o slo fuerza dividida por el rea. Esta es la presin instantnea que se ejercera en una superficie perfectamente absorbente por un haz que incide normalmente. Puesto que los campos E y B cambian rpidamente, S(t) cambia rpidamente tambin, por lo tanto por razones prcticas nos ocupamos de la presin de la radiacin media, es decir,

..........(14) Expresada en Newtons sobre metro cuadrado. Esta misma presin se ejerce en una fuente que ella misma irradia energa. Si p es el momento, la fuerza ejercida por el rayo en una superficie absorbente es

............(15) Si es el momento por unidad de volumen de la radiacin, entonces una cantidad de es transportada hacia durante cada inversin de tiempo

momento ,y

..........(16) Por lo tanto, la densidad de volumen del momento electromagntico es

.............(17) cuando la superficie iluminada es perfectamente reflectora, el rayo que entr con una velocidad +c, saldr con una velocidad -c. Esto equivale a dos veces el cambio de momento que ocurre en la absorcin, y por tanto

.............(18)

Obsrvese, de las ecuaciones (13) y (15), que si alguna cantidad de la energa es transportada por metro cuadrado por segundo, entonces habr un momento correspondiente que es transportado por metro cuadrado por segundo.

Descripcin de segunda cuantizacin

En la imagen del fotn, cada uno tiene una energa Por lo tanto, podemos pensar que un fotn lleve un momento .

.....................(19) Su momento vectorial sera ...........................(20)

donde es el vector de onda y . Esto concuerda bien con la Relatividad especial que pone en relacin la masa m, la energa y el momento de una partcula mediante .........................(21)

Para un fotn m=0 y

Estas concepciones mecnico-cunticas se han confirmado experimentalmente utilizando el efecto Compton, que detecta la energa y el momento que se transfiere a un electrn al interaccionar con un fotn individual de rayos X.

La densidad de flujo medio de la energa electromagntica del Sol que incide normalmente en una superficie justo en el exterior de la atmsfera terrestre es de unos 1400 W/m^2. Imaginando una absorcin completa, la presin resultante sera de 4.7 x 10^-6 N/m^2, comparada una presin atmosfrica de aproximadamente 10^5 N/m^2. La presin de la radiacin solar en la Tiera es pequea siendo, sin embargo, responsable de una fuerza en todo el planeta de unas 10 toneladas. Hasta en la superficie misma del Sol, la presin de la radiacin es relativamente pequea. Como podra esperarse, se vuelve apreciable dentro del cuerpo ardiente de una gran estrella

luminosa, donde desempea un papel importante en sostener la misma contra la gravedad. A pesar de la modesta densidad de flujo del Sol, puede producir efectos apreciables durante largo tiempo. por ejemplo, si se hubiera despreciado la presin de la luz solar ejercida sobre el vehculo espacial Viking durante su viaje, el mismo se hubiera desviado de Marte unos 15,000 km. Los clculos demuestran que es viable utilizar la presin de la luz solar para impulsar un vehculo espacial entre los planetas ms internos. Algn da vehculos con velas inmensas reflectoras accionadas por la presin de la radiacin solar podrn navegar por el mar oscuro del espacio local. La presin ejercida por la luz fue medida en 1901 por el experimentador ruso Pyotr Nikolaievich Lebedev (1866-1912) e independientemente, por los americanos Ernst Fox Nichols (1869-1924) y Gordon Ferrie Hull (1870-1956). Sus logros fueron asombrosos si consideramos las fuentes luminosas de las que disponan en aquel entonces. Hoy en da, con la llegada del lser, la luz puede concentrarse en un punto cuyo radio se acerca a los lmites de aproximadamente una longitd de onda. La irradiancia resultante y por tanto, la presin, se aprecia hasta con un lser de unos pocos Watts. Por consiguiente, se ha vuelto prctico considerar la presin de la radiacin para cualquier aplicacin como la separacin de istopos, la aceleracin de partculas y hasta la levitacin ptica de pequeos objetos.

Pinzas pticas
Historia y desarrollo
La deteccin de la dispersin ptica y las fuerzas de gradiente sobre partculas micromtricas fue reportada por primera vez en 1970 por Arthur Ashkin,1 trabajando en los Laboratorios Bell. Aos despus, Ashkin y sus colegas reportaron la primera observacin2 de lo que es ahora referido comnmente como una trampa ptica: un haz de luz altamente enfocado capaz de sostener partculas microscpicas estables en tres dimensiones. Uno de los autores de este artculo pionero de 1986, Steven Chu, podra haber llegado a ser utilizado con pinzas pticas en su trabajo sobre enfriamiento y atrapamiento de tomos. Esta investigacin le vali a Chu el Premio Nobel en Fsica de 1997.3 En una entrevista,4 Steven Chu describi como Askhin haba visualizado por primera vez el uso de las pinzas pticas como un mtodo para atrapar tomos. Ashkin fue capaz de atrapar partculas ms grandes ( de 10 a 10,000 nanmetros de dimetro) pero Chu extendi estas tcnicas para el atrapamiento de tomos (0.1 nanmetros de dimetro). A finales de 1980,Arthur Ashkin y sus colegas aplicaron primero la tecnologa a las ciencias biolgicas, usndola para atrapar un virus de mosaico del tabaco individual y la bacteria Escherichia coli.5 A travs de la dcada de los 90's y despus, investigadores como Carlos Bustamante, James Spudich, y Steven Block fueron los pioneros en el uso de la trampa ptica para caracterizar los motores biolgicos a escala molecular. Estos motores moleculares son ubicuos en biologa, y son los responsables de la locomocin y la accin mecnica dentro de la clula. Las trampas pticas permitieron a estos biofsicos observar las fuerzas y la dinmica de los motores a un nivel de nano-escala o de molcula-nica; la

trampa ptica de espectroscopia de fuerza ha permitido desde entonces llegar a un mayor entendimiento de la naturaleza estocstica de estas fuerzas generadoras en la molcula. Las pinzas pticas han probado ser tiles tambin en otras reas de la Biologa. Por ejemplo, en 2003 las tcnicas de las pinzas pticas fueron aplicadas en el campo de la clasificacin celular (cell sorting); creando una gran intensidad ptica sobre el rea de llenada con muestra micro-biolgica, la clula puede ser clasificada por sus caractersticas pticas intrnsecas.6 7 En el 2004 las pinzas pticas hicieron el salto desde las grandes, complicadas y costosas mquinas a mucho ms simples, pequeas, poco costosas y recientemente sistemas portables con la introduccin de los DLBT (Diode Laser Bar Trapping);sistemas liderados por Applegate et al. en la Colorado School of Mines.8 Las pinzas pticas tambin han sido usadas para probar el citoesqueleto, medir las propiedades visco-elsticas de biopolmeros, y estudiar la motilidad celular.

La fsica de las pinzas pticas

Los objetos dielctricos son atrados al centro del rayo, un poco ms arriba de la cintura del haz, como se describe en el texto. La fuerza aplicada sobre el objeto depende linealmente en su desplazamiento desde el centro de la trampa como lo que ocurre con un sistema de resorte simple.

Descripcin General
Las pinzas pticas son capaces de manipular partculas dielctricas tanto de tamao nanomtrico como micromtrico ejerciendo fuerzas extremadamente pequeas por medio de un haz lser altamente enfocado. El haz es tpicamente enfocado envindolo a travs de un objetivo microscpico. El punto ms angosto del haz enfocado, conocido como la cintura del haz, contiene un gradiente de campo elctrico muy fuerte. Resulta ser que las partculas dielctricas son atradas a lo largo del gradiente a la regin del campo elctrico ms fuerte, el cul es el centro del haz. La luz lser tambin tiende a ejercer una fuerza sobre las partculas en el haz a lo largo de la direccin de propagacin del haz. Esto es fcil de comprender si imaginamos a la luz como un grupo de pequeas partculas, cada un a de ellas ejerciendo sobre la pequea partcula dielctrica en su camino. Esto es conocido como la fuerza de dispersin y cuyo resultado es el de la partcula siendo desplazada ligeramente abajo de la de la posicin exacta de la cintura del haz, como se puede ver en la figura.

Las pinzas pticas son instrumentos muy sensibles y son capaces de manipular y detectar desplazamientos sub-nanomtricos para partculas dielctricas sub-micrnicas.9 Por esta razn son comnmente utilizadas para manipular y estudiar molculas individuales por la interaccin con una cuenta que ha sido adjuntada a esa molcula. El ADN, las protenas y las enzimas que interactan con esta son comnmente estudiadas de esta forma. Para mediciones cientficas cuantitativas, la mayora de las trampas pticas son operadas de tal forma que la partcula dielctrica raramente se mueve lejos del centro de la trampa. La razn de esto es que la fuerza aplicada a la partcula es lineal con respecto a su desplazamiento desde el centro de la trampa mientras el desplazamiento sea pequeo. De esta forma, una trampa ptica puede ser comparada con un resorte simple, que sigue la ley de Hooke.

Visin detallada de las pinzas pticas

Una explicacin apropiada del comportamiento del atrapamiento ptico depende del tamao de la partcula atrapada relativo a la longitud de onda de la luz utilizada para atraparla. En casos en donde las dimensiones de la partcula son mayores que esta longitud de onda, un simple tratamiento de rayos es suficiente. Por otro lado, si la longitud de onda de la luz excede a las dimensiones de la partcula, entonces las partculas debern ser tratadas como pequeos dipolos elctricos en un campo elctrico. El enfoque de ptica de rayos

Explicacin de ptica de rayos. Cuando la cuenta es desplazada desde el centro del haz como en (a), el cambio de momento ms grande de los rayos ms intensos produce una fuerza neta que es aplicada en la direccin inversa con respecto al centro de la trampa. Cuando la cuenta est lateralmente centrada sobre el haz, como en (b), fuerza neta apunta en la direccin de la cintura del haz. En casos en donde el dimetro de la partcula atrapada es significativamente mayor que la longitud de onda de la luz, el fenmeno de atrapamiento pude ser explicado usando una ptica de rayos o geomtrica. Como se muestra en la figura, lo rayos individuales de luz emitida desde el lser sern refractados en la medida en que entran y salen de la cuenta dielctrica. Como un resultado, el rayo saldr en una direccin distinta a la que inicialmente ingres. Dado que la luz tiene un momento asociado a ella, este cambio en direccin de la

luz indica que su momento ha cambiado. Debido a la Tercera Ley de Newton, tendr que haber un cambio de momento igual y opuesto sobre la partcula. La mayora de las trampas pticas tienen un perfil de intensidad de un haz Gaussiano (modo TEM00). En este caso, si la partcula es desplazada desde el centro del haz, como en la figura (a), la partcula tiene una fuerza neta que la regresa al centro de la trampa debido a que haces ms intensos impelen un cambio de momento mayor hacia el centro de la trampa que los haces menos intensos, lo cuales impelen un cambio de momento menor lejos del centro de la trampa. El cambio de momento neto o fuerza, regresa a la partcula al centro de la trampa. Si la partcula est localizada en el centro del haz, entonces los rayos de luz individuales son refractados a travs de la partcula simtricamente, resultando esto en una fuerza lateral nula. La fuerza neta en este caso est a lo largo de la direccin axial de la trampa, la cual cancela la fuerza de esparcimiento de la luz lser. La anulacin de esta fuerza gradiente axial con la fuerza de esparcimiento es lo que causa que la cuenta se mantenga estable ligeramente alejada de la cintura del haz.

La aproximacin del dipolo elctrico En casos en los que el dimetro de la partcula atrapada es significativamente ms pequea que la longitud de onda de la luz, las condiciones del esparcimiento de Rayleigh son satisfechas y la partcula puede ser tratada como un punto dipolo en un campo electromagntico inhomogneo. La fuerza aplicada sobre un dipolo en un campo electromagntico se conoce como la fuerza de Lorentz,

..................(22) La fuerza sobre el dipolo puede ser calcula sustituyendo dos trminos del campo elctrico en la ecuacin anterior, uno para cada carga. La polarizacin de un dipolo es donde es la distancia entre las dos cargas. Para un dipolo puntual, la distancia es infinitesimal, Tomando en cuenta que las dos cargas tienen signos opuestos, la fuerza toma la forma

..........................(23)

.................(24)

Notemos que se cancela. Multiplicando todo por la carga, en polarizacin, ,

, convertimos posicin,

............(25) .................(26) En donde en la segunda igualdad se ha asumido que la partcula dielctrica es lineal (i.e. ). En los pasos finales, dos igualdades sern utilizadas: (1) Una igualdad de anlisis vectorial, (2) Una de las ecuaciones de Maxwell.

1. 2. ...................(28)

................(27)

Primero, la igualdad vectorial ser insertada para el primer trmino en la fuerza de la ecuacin de arriba. La ecuacin de Maxwell ser sustituida en el segundo trmino de la igualdad vectorial. Despus los dos trminos que contienen derivadas en el tiempo pueden ser combinados en un solo trmino.10

...................(29) ...................(30) .....(31) El segundo trmino en la ltima igualdad es la derivada temporal de una cantidada que se relaciona a travs de una constante multiplicativa que es el vector de Poynting, que describe la potencia por unidad de rea que pasa a travs de una superficie. Asumiendo que la potencia del lser es constante, la derivada de este trmino es cero y la fuerza se puede escribir como

........(32)

El cuadrado de la magnitud del campo elctrico es igual a la intensidad del haz como una funcin de la posicin. De esta forma, el resultado indica que la fuerza sobre la partcula dielctrica, cuando es tratada como un dipolo puntual, es proporcional al gradiente a lo largo de la intensidad del haz. En otras palabras, la fuerza gradiente descrita aqu tiende a atraer a la partcula a la regin de ms alta intensidad. En realidad, la fuerza de dispersin de la luz acta en contra de la fuerza de gradiente en la direccin axial de la trampa, resultando esto en una posicin de equilibrio que es desplazada ligeramente por abaja del mximo de intensidad. La fuerza de esparcimiento depende linealmente de la intensidad del haz, la seccin eficaz del haz y el ndice de refraccin del medio en donde se encuentra la trampa (i.e. agua).

Diseo experimental, construccin y operacin

Un diagrama genrico de pinza ptica solamente con los componentes ms bsicos. La configuracin ms bsica de pinza ptica incluir ms o menos los siguientes componentes: un lser (usualmente un lser de Nd:YAG), un expansor del haz, algunos elementos pticos para dirigir la localizacin del haz en el mismo plano, un objetivo de microscopio y un condensador para crear la trampa en el mismo plano, un detector de posicin (i.e. un fotodiodo de cuadrante) para medir los desplazamientos del haz y una fuente de iluminacin microscpica acoplada a una cmara CCD. El lser de Nd:YAG (longitud de onda de 1064 nm) es la eleccin de lser ms comn debido a que los especmenes biolgicos son en su mayora transparentes a longitudes de onda lser alrededor de 1000 nm. Esto asegura un bajo coeficiente de absorcin , minimizando el dao al especmen, algunas veces referido como opticution en ingls. Quiz la consideracin ms importante en una pinza ptica es la eleccin del objetivo. Una trampa estable requiere que la fuerza de gradiente, que depende de la apertura numrica (AN) del

objetivo sea ms grande que la fuerza de dispersin. Objetivos adecuados tpicamente tienen una AN entre 1.2 y 1.4.11 Existen alternativas disponibles, pero quiz el mtodo ms simple para deteccin de la posicin tiene que ver con la visualizacin de la trampa lser excitando a la cmara en donde se encuentra la muestra dentro de un fotodiodo de cuadrante. Las deflexiones laterales del haz son medidas de forma similar a como se hace cuando se utiliza el microscopio de fuerza atmica (MFA). Expandiendo el haz emitido desde el lser para llenar la apertura del objetivo resultar en un punto difractado-limitado ms apretado.12 Mientras que la traslacin lateral de la trampa relativa a la muestra puede ser lograda por el portaobjetos del microscopio, la mayora de las configuraciones de pinzas pticas implementan ptica adicional diseada para trasladar el haz para dar un grado extra de libertad traslacional. Esto se puede hacer trasladando el primero de los dos lentes llamado "Direccionador del haz" en la figura(Beam Steering). Por ejemplo, la traslacin de ese lente en el plano lateral resultar en un haz deflectado lateralmente desde lo que es mostrado en la fugura. Si la distancia entre los lentes de direccionamiento del haz y el objetivo es escogida adecuadamente, esto corresponder a una deflexin antes de que el objetivo entre y resultando en una traslacin lateral en el mismo plano. La posicin de la cintura del haz, que est en el foco de la trampa ptica, puede ser ajustada por un desplazamiento axial del lente inicial. Tal desplazamiento axial causa que el haz diverja o converja ligeramente, resultado de lo cual es una posicin axial desplazada de la cintura del haz en la cmara de la muestra. Una explicacin muy clara ha sido presentada por Joshua W. Shaevitz un estudiante graduado en el Block Lab en Stanford University.13 La visualizacin del plano de la muestra se logra usualmente a travs de iluminacin va una fuente de luz separada acoplada dentro del camino ptico en la direccin opuesta usando un espejos dicricos. Esta luz incide sobre una cmara CCD y puede ser vista en un monitor externo o usada para trazar a la partcula atrapada va la posicin por seguimiento de video.

Aplicaciones Biolgicas de las pinzas pticas

Los Bilogos tomaron ventaja rpidamente de las pinzas pticas como una herramienta para propsitos como la medicin del rendimiento de las colas de las bacterias, las fuerzas ejercidas por un solo motor protenico y el alargamiento de molculas de DNA [17]. Las pinzas pticas tambin han sido combinadas con un lser adicional para formar tijeras pticas o usado como parte de la fluoresencia, confocal o como sensores de escaneo de fuerzas. Los primeros estudios fueron realizados en material que era lo suficientemente grande para manipularlo directamente usando pinzas pticas. Ashkin y colaboradores usaron pinzas pticas para capturar bacteria y pequeas cantidades del virus del mosaico del tabaco, despus para manipular clulas individuales orgnulos celulares y finalmente para medir la fuerza del movimiento de los orgnulos dentro de clulas vivas. En 1989, Block et al. hicieron las primeras mediciones calibradas de la conformacin de los flagelos bacterianos usando las pinzas pticas. Ellos calibraron las fuerzas aplicadas por las pinzas

pticas para la constante de tiempo de la cte. elstica de reculada de la bacteria en el medio viscoso.

Las pinzas pticas aplicadas al estudio de los motores biolgicos

Actualmente existe un enorme inters por parte de muchos fsicos en estudiar diversos tipos de sistemas biolgicos [15]. El estudio de estos sistemas presenta un enorme reto, ya que se trata de los sistemas ms complejos que puedan encontrarse en la naturaleza. Esta reciente incursin de los fsicos en el estudio de los sistemas biolgicos complejos involucra diversas ramas, desde la biologa molecular y celular, hasta la ecologa, pasando por la genmica, las protenas, el ADN, la sincronizacin de ritmos biolgicos, las redes neuronales, los fenmenos de auto-organizacin y las propiedades emergentes en sociedades de insectos, por mencionar algunos campos. En particular, un avance reciente se refiere al estudio del transporte intracelular de las llamadas protenas motoras, o motores moleculares. Estos motores son protena que transportan diversas sustancias y vesculas dentro de las clulas eucariontes y que llevan a cabo muchos tipos de funciones en el organismo. Como ejemplos de protenas motoras podemos citar a un tipo de miosinas, que son responsables del movimiento de los msculos, o las cinesinas, que se encargan de transportar sustancias dentro de las clulas y que se desplazan a lo largo del citoesqueleto. Un motor molecular que ha despertado el inters de algunos fsicos es un tipo de cinesina que tiene una estructura con dos porciones, que simula una especie de caminante a escala de nanmetros y que alterna las dos porciones, dando como resultado una caminata a lo largo de los microtbulos que forman parte del citoesqueleto. La cinesina utiliza como fuente de energa la hidrlisis de ATP y como todo sistema biolgico, se encuentra fuera del equilibrio termodinmico. Aun cuando el estudio de los motores moleculares ha tenido un avance sorprendente, no es claro el mecanismo mediante el cual la cinesina logra moverse preferentemente en una direccin, ya que las fuerzas que actan sobre la protena no tienen una direccin particular, sino que se trata de fuerzas fluctuantes de promedio cero. Desde la perspectiva de la fsica, estos motores nos llevan a preguntarnos: Es posible generar transporte unidireccional a partir de fluctuaciones fuera del equilibrio? La respuesta es positiva ya que en un sistema fuera de equilibrio es posible generar trabajo sin violar por ello la segunda ley de la termodinmica. Adems de tener un sistema lejos del equilibrio, es necesario romper alguna simetra del sistema para poder rectificar las fluctuaciones. Esta asimetra se puede conseguir a partir de un potencial peridico y asimtrico, como el de rueda dentada (ratchet), que simulara al microtbulo asimtrico en el caso de la cinesina. Un modelo muy simplificado de este sistema consiste en una partcula con un potencial diente de sierra, en presencia de ruido trmico (que simula fluctuaciones trmicas) y sujeta a fuerzas externas de promedio cero. La ecuacin de movimiento para este modelo es entonces una ecuacin de Langevin no lineal, o bien su correspondiente ecuacin de Fokker-Planck. La cantidad de inters es la corriente o bien, la velocidad promedio de un ensamble de partculas en estas condiciones. A este tipo de modelos se les llama ratchets o motores brownianos. Actualmente existe una gran variedad de modelos de motores moleculares o brownianos: una partcula en potenciales en una o ms dimensiones, con diferentes tipos de fuerzas

externas (deterministas o estocsticas), sistemas con diferentes tipos de ruido trmico (blanco o correlacionado), sistemas con muchas partculas acopladas, partculas con inercia o en el rgimen sobreamortiguado, partculas en el rgimen cuntico, etc.

Motores Moleculares: Cinesina

En el interior de las clulas eucariontes, es decir clulas ms evolucionadas que las bacterias, tenemos un ncleo celular y una red de filamentos formada por polmeros que semejan una red de avenidas dentro de una ciudad. Esta red llamada citoesqueleto, est compuesta por tres tipos de filamentos: filamentos de actina, con un dimetro del orden de 6 nm, formados por agregacin de una protena llamada actina y que transportan protenas motoras como las miosinas; filamentos intermedio con dimetros de alrededor de 10 nm, y por microtbulos que transportan otro tipo de protenas motoras como las cinesinas. Los microtbulos tienen un dimetro del orden de 20 nm y estn formados por protenas llamadas tubulinas. Los filamentos de actina y los microtbulos, a pesar de tener dimetros del orden de decenas de nanmetros, pueden crecer a longitudes del orden de decenas de micrones, es decir tres rdenes de magnitud ms largos que anchos, y por lo tanto se trata de estructuras esencialmente unidimensionales. Los microtbulos estn formados por dmeros compuestos por alfa-tubulinas y beta-tubulinas que se agregan formando una estructura helicoidal. Debido a la asimetra de los dmeros, los microtbulos son estructuras polares, peridicas y asimtrica con una periodicidad del orden de 8 nm; su dimetro interno es de 18 nm y el externo de 25 nm. Su longitud vara con el tiempo y puede hacerlo considerablemente, debido a procesos de agregacin de los dmeros de tubulina que lo componen. Es decir al agregarse dmeros en un extremo la longitud del microtbulo aumenta y, naturalmente, disminuye su longitud durante el proceso de desagregacin. Su longitud puede ser del orden de micrones para el caso de microtbulos involucrados en la divisin celular, o del orden de 100 micrones en los axones de las neuronas y hasta de 1 mm en los microtbulos en la cola de los espermatozoides. A lo largo de los microtbulos se mueve un tipo de protenas llamadas cinesinas. Existen varios tipos de cinesinas, pero la ms comn tiene una estructura que asemeja a un caminante a escala de nanmetros. Consiste en dos porciones que se alternan dando lugar a una caminata a lo largo del microtbulo, de la misma manera que un caminante alterna sus pies al caminar. Estas cinesinas tienen velocidades tpicas del orden de 1800 nm/s in vivo y de 840 nm/s in vitro, aunque estos valores pueden variar dependiendo de la temperatura y de la concentracin de ATP. Los pasos son de 8 nm y por lo tanto una cinesina convencional in vivo realiza cientos de pasos por segundo. Las cinesinas tienen como funcin, por ejemplo, el transporte axonal a lo largo del axn de las neuronas, el transporte de vesculas y mitocondrias dentro de la clula, y la meiosis y mitosis durante la divisin celular. En algunos casos como en el transporte de mitocondrias, varias cinesinas tienen que actuar colectivamente para llevar a cabo su funcin, ya que se trata de protenas muy pequeas, de unas decenas de nanmetros, que tienen que transportar estructuras mucho ms grandes, como las mitocondrias. La energa que usan las cinesinas, al igual que el resto de de protenas motoras, se obtiene a partir del ATP. Actualmente se sabe que una cinesina consume una molcula de ATP por cada paso de 8 nm y que ejercen fuerzas del orden de picoNewtons, que se miden con una gran precisin usando pinzas pticas. Existe un

dispositivo experimental que ha usado Steven Block de la Universidad de Stanford y que permite medir desplazamientos, velocidades y fuerzas. Se mantiene fijo al microtbulo y se sujeta, con pinzas pticas de luz lser, auna esfera de vidrios o poliestireno que, a su vez est conectada a la cinesina. En forma natural la cinesina tiende a desplazarse a los largo del microtbulo, pero al estar sujeta por una trampa ptica no puede moverse, sin embargo contina ejerciendo una fuerza que puede medirse usando el desplazamiento de la esfera de vidrio o poliestireno, a a partir del centro de la trampa ptica, ya que dicha trampa sujeta a la esfera como si fuera un resorte lineal. De esta forma se determina que la fuerza que ejerce la cinesina es de 6.5 picoNewtons. Gracias a los resultados que se han obtenido recientemente con experimentos muy finos, actualmente sabemos muchos detalles de la caminata de la cinesina. Particularmente ha sido difcil determinar con precisin que tipo de caminata realiza esta protena, debido a que sus dimensiones son muy pequeas, del orden de 70 nm y da pasos de 8 nm; por lo tanto es muy complicado tener la resolucin experimental para determinar que tipo de caminata est llevando a cabo. Existen bsicamente dos tipos de caminata: pies alternantes, en donde los dos pies se alternan como en la caminata normal de los humanos y tipo gusano, en donde los pies se juntan y se separan, pero nunca se alterna el orden. En los experimentos con trampas pticas, se mide el desplazamiento del centro de masa de la esfera de vidrio ligada a la cinesina; esta esfera tiene dimensiones del orden de micrones y la resolucin es muy buena. Pero la cinesina, con pasos en la escala de nanmetros, es muy difcil de resolver. Existe una controversia en la literatura sobre el tipo de caminata que realiza, es decir si es con pies alternantes o tipo gusano; sin embrago, recientemente se ha determinado que es con pies alternantes. Cabe mencionar que existen otras protenas motoras como las miosinas V y VI que tambin tienen dos "pies" y que caminan sobre filamentos de actina alternndolos.

Enlaces Multimedia

Luz wiki, sitio en internet creado por el Doctor en Ciencias Manuel Fernndez Guasti de la Universidad Autnoma Metropolitana en Mxico en donde se fomenta la colaboracin acadmica delocalizada en temticas de investigacin y docencia [1]. Pelcula que muestra el control por pinzas pticas de una clula [2] Videos de pinzas pticas siendo usadas en hongos. Video de pinzas pticas usadas para jugar el ms pequeo juego de Tetris.

Referencias
[1]Ashkin, A. "Phys. Rev. Lett. 24, 156-159", (1970) [2]A Ashkin, J M Dziedzic, J E Bjorkholm y S Chu, Opt. Lett. 11, 288-290, 1986. [3]Hill, Murray (noviembre de 1987). "escrib el libro sobre atrapamiento ptico". Junio 25, 2005. Entrevista conducida para un diario interno en los Laboratorios Bell. Contiene la

confirmacin de Ashkin como el inventor del atrapamiento pico y provee de informacin sobre el premio Nobel en Fsica de 1997. [4]"Conversations with History: An Interview with Steven Chu" (2004), Institute of International Studies, UC Berkeley. [5]Ashkin, A. et al "Science vol. 235, iss. 4795, pp. 1517" (1987) [6]Macdonald MP, Spalding GC, Dholakia K, "Microfluidic sorting in an optical lattice., Nature (2003); 421: 421-424. [7]Koss BA, Grier DG, "Optical Peristalsis" [8]Applegate, Jr. R. W. et al Optics Express vol. 12, iss. 19, pp. 4390 (2004) [9]Moffitt JR, Chemla YR, Izhaky D, Bustamante C, "Differential detection of dual traps improves the spatial resolution of optical tweezers", PNAS (2006); 103(24): 9006-9011. [10]Gordon JP, "Radiation Forces and Momenta in Dielectric Media", Physical Review A (1973). 8(1): 14-21. [11]Neuman KC, Block SM, "Optical trapping", Review of Scientific Instruments (2004); 75(9): 2787-2809. [12]Svoboda K, Block SM, "Biological Application of Optical Forces", Annual Reviews of Biophysics and Biomolecular Structure (1994); 23:247-285. [13]Shaevitz JW, "A Practical Guide to Optical Trapping" (August 22, 2006). [14] Cotterill Rodney. "Biophysics: An Introduction", Wiley 2002,103-108. [15] Garca Coln L. et.al., "La Fsica Biolgica en Mxico: Temas selectos", El Colegio Nacional 2006, 101-119. [16] Hecht Eugene, "Optics", Addison Wesley Longman, 1998, 55-57. [17] Ashkin, A., Schutze, K., Dziedzic, J. M., Euteneuer, U., and Schliwa, M., 1990, Nature, 348, 346.

Referencias
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Ashkin as the inventor of optical trapping and provides information on the 1997 Nobel Prize in Physics. 4. "Conversations with History: An Interview with Steven Chu" (2004), Institute of International Studies, UC Berkeley. Last accessed on September 2, 2006. 5. Ashkin, A. et al "Science vol. 235, iss. 4795, pp. 1517" (1987) 6. Macdonald MP, Spalding GC, Dholakia K, "Microfluidic sorting in an optical lattice., Nature (2003); 421: 421-424. 7. Koss BA, Grier DG, "Optical Peristalsis" 8. Applegate, Jr. R. W. et al Optics Express vol. 12, iss. 19, pp. 4390 (2004) 9. Moffitt JR, Chemla YR, Izhaky D, Bustamante C, "Differential detection of dual traps improves the spatial resolution of optical tweezers", PNAS (2006); 103(24): 9006-9011. 10. Gordon JP, "Radiation Forces and Momenta in Dielectric Media", Physical Review A (1973). 8(1): 14-21. 11. Neuman KC, Block SM, "Optical trapping", Review of Scientific Instruments (2004); 75(9): 2787-2809. 12. Svoboda K, Block SM, "Biological Application of Optical Forces", Annual Reviews of Biophysics and Biomolecular Structure (1994); 23:247-285. 13. Shaevitz JW, "A Practical Guide to Optical Trapping" (August 22, 2006). Last accessed on September 12, 2006.