Familia Rhabdoviridae Es una familia de virus con envoltura que incluye ms de 100 virus diferentes: Caractersticas: 1.

Poseen un amplio rango de huspedes incluyendo vertebrados, artrpodos (mayormente insectos), amebas y plantas. 2. Tienen forma de bastn y usualmente apariencia de bala. 3. Esta familia incluye 2 gneros: los Vesiculovirus (que incluyen Vesicular Stomatitis Virus (VSV) y los Lyssavirus que incluye los virus que ocasionan la rabia. Estos ltimos se limitan a infectar vertebrados. 4. El VSV puede ocasionar los siguientes sntomas en humanos: dolor de cabeza, laringitis, vmitos, diarreas y algunos pacientes desarrollan vesculas parecidas a las que se observan en herpes. 5. La mayora de los Rhabdovirus se transmiten por artrpodos y tambin se duplican en estos vectores. 6. Las enfermedades ocasionadas por stos van desde leves a letales. 7. Aqu inlcuimos la rabia que se transmite a humanos por mordeduras de animales frecuentemente domsticos. 8. El Makola Virus est relacionado a la rabia y es originario de Africa. Estructura 1. Posee una nucleocpsida helical cubierta por una envoltura rica en lpidos y espculas. 2. La envoltura contiene glicoprotenas externas (G) y protenas internas (M). La respuesta inmunolgica del organismo husped es contra la protena G. 3. Los viriones contiene actividad RNA dependiente de RNA capaz de transcribir y duplicar su RNA. 4. La hlice de RNAss negativa no es infecciosa ya que no posee la enzima que la puede duplicar, y no puede actuar como mRNA hasta que no se duplique o hasta que por lo menos se transcriba a una hlice +. 5. Contiene secuencias complementarias invertidas de aproximadamente 20 bases. Esta caracterstica est compartida por varias familias de virus no relacionados. Entrada y Transcripcin 1. El virin se une por medio de la protena G a un receptor en la superficie de la clula. 2. Penetra por endocitosis con subsecuente fusin de la envoltura viral con la membrana citoplasmtica del husped. Luego el genoma penetra al citoplasma.

3.

El virus ms estudiado de esta familia es VSV que posee una sola molcula de RNA (con peso de 42S) y con 11,162 n. Se transcribe a 5 mRNA que codifican para 5 protenas.
a. glicoprotena G, b. protena matrix (M) c. protena de la nucleocpsida d. protena mayor (L) e. protena P (protena estructural altamente fosforilada por enzimas de la clula husped y que forman un complejo con la protena L para dar lugar a una enzima funcional). En contraste con RNA libre de VSV el centro viral (core) incluyendo G y M es infeccioso. Esto indica que la actividad transcriptasa est asociado a uno o todas las protenas internas restantes. Estudios con el Infectious Hematopoeitic Necrosis Virus (IHNV) de peces ha revelado la presencia de un sexto segmento de mRNA, que codifica para una protena no esturctural (NV) la cual se encuentra en clulas infectadas pero no en el virin maduro. El orden de los genes en IHNV es: 3' N- M1-M2-G-NV-L 5' El M1 y M2 reemplazan a las protenas NS y M de VSV

4. 5.

6.

La protena NV es la primera protena viral no estructural descubierta en Rhabdovirus. Se cree est envuelta en duplicacin viral en clulas infectadas. Excepto por esta protena el IHNV se asemeja al VSV y virus de la rabia en RNA, tamao y organizacin del genoma. Representacin esquemtica del genoma de Rhabdovirus 3'--------N--------P-------M--------G--------L 5' Se producen 5 mRNA que se les coloca el cap y rabo de poli A necesario para que comience la transcripcin

Ciclo de replicacin[editar]
El virus entra en la clula tras reconocer su receptor, que suelen ser restos de cido silico de glicoprotenas de membrana, o receptores de crecimiento nervioso o de acetilcolina. Se produce un endocitosis tpica (Vescula de clatrina, fusin con lisosoma, bajada de pH, liberacin del ARN) La replicacin de muchos rhabdovirus se produce en el citoplasma, aunque varios de los virus que infectan plantas se replican en el ncleo. Acta la replicasa y produce 5 diferentes ARNm (uno por cada gen). Antes de cada gen, en la cadena (-) hay una secuencia de inicio, y al final de cada gen, una seal de terminacin y una de poliadenilacin.

La replicasa reconoce el primer sitio de inicio y transcribe hasta un sitio de finalizacin. Aade el CAP y la cola de PoliA, y as sale el primer RNAm(N).Esta estructura es homloga al ARNm celular y, por lo tanto, puede ser traducido por los ribosomas celulares para producir tanto las protenas estructurales como las no estructurales. Despus, la replicasa continua leyendo y hace lo mismo con los dems genes. En ocasiones, al llegar a una seal de terminacin, vuelve al principio. De este modo, se sintetizan distintas cantidades de ARNm para los distintos genes. El virus controla su expresin a nivel de la transcripcin. El proceso de replicacin es ligeramente distinto. Comienza igual que el anterior, pero ahora hay mucha protena N, que en cuanto se replica el extremo 3, se une a l. Esto hace que la polimerasa no reconozca las secuencias de terminacin, y se forme un transcrito de ARN (+) de todo el genoma, a partir del cual, se vuelven a replicar hebras de ARN (-). Se requiere lapolimerasa viral para este proceso. Estas hebras son reconocidas por las protenas de la cpsida, que se asocian a ellas. La nucleocpsida se asocia a las protenas de la matriz, que a su vez se asocian a las protenas de la envuelta, que han alcanzado la membrana siguiendo la ruta de secrecin constitutiva (RER, Golgi, Vescula de secrecin), y se produce la salida por gemacin.

Refer
Transcripcin de FAMILIA RHABDOVIRIDAE
FAMILIA RHABDOVIRIDAE Vesiculovirus Lyssavirus Ephemerovirus Cytorhabdovirus Nucleorhabdovirus Virus de la Rabia, el cual infecta mamferos. Lyssavirus Clasficacin de virus de Rabia Rabia Urbana Rabia Silvestre Rabia Rural HOMBRE Perro Gato Zorros Coyotes Lobos. Animales de corral. Morfologa y Caractersticas generales Estructura del Genoma Contiene 5 genes que codifican para 5 protenas designadas como: G (Glicoprotena) M ( Protena de Matriz) N ( Nucleoprotena) P o NS (Fosfoprotena) L (ARN polimerasa dependiente de ARN) Forma de Bala, Proyectil o bacilos. Con una longitud de 180 a 380 nm y 60 a 80 nm de diamtro. Tpica Bicapa Lpidica Genoma compuesto de una sola cadena de RNA PATOGENIA Periodo de Incubacin En hombres se han descrito periodos de incubacin de varios aos y en animales (perros) el periodo de incubacin puede ser de 20 a 50 das o extenderse hasta 6 meses o ms. El virus realiza la primera Replicacin, lo cual puede durar 36 horas, o hasta semanas. Despus el virus viaja por los nervios perifricos, hasta alcanzar el SNC. Aqui realiza su segunda replicacin, en la que el virus se disemina a todo el organismo. Cambios Patolgicos En la Sustancia blanca hay desmielinizacin con degeneracin de axones y vainas de mielinas. Las regiones mas afectadas son las astas posteriores Destruccin

de clulas de la corteza. Destruccin en mesencfalo, ganglios basales y en bulbo raqudeo. El virus de la rabia tiene un efecto electrofisiolgico de las nueronas: Alteracin del sueo Cambios en expresin de genes Cuadro Clnico en el Hombre Periodo de incubacin Periodo Prodrmico Periodo Neurolgico agudo rbico Periodo de coma o terminal. Puede variar desde 6 das, meses, hasta dos o 6 aos, con promedio de 21 a 56 dias. Duracin de 2 a 10 das. Malestar General Fatiga Cefalea Dolor de garganta Dolor abdominal Diarrea Fiebre Vmito Nuseas Escalofros Tos Anorexia Sensacin anormal alrededor del sitio de la herida. Irritable o nervioso Depresin o insomnio Aumento en actividad simptica Puede ser de dos formas: Rabia furiosa Rabia paraltica muda o tranquila Rabia Furiosa: Se presenta con mayor frecuencia Puede durar de 2 a 24 das. Hiperactividad con agitacin psicomotriz. Puede ser provocada por estimulos tactiles. Hidrofobia Fasciculaciones musculares, sofocacin. Hipersalivacin y convulsiones. Aerofobia. Debilidad muscular que progresa con parlisis de grado variable. Rabia Paraltica muda o tranquila: Solo en un 5 a 10% de pacientes. Sntomas paralticos desde el inicio. Puede evolucionar a coma o la muerte de forma brusca. Los pacientes pueden vivir mas de 30 das sin asistencia respiratoria ni cuidados intensivos. Deterioro del SNC es progresivo hasta llegar a un coma profundo. Puede durar algunas horas o das. Desequilibrio hidroelectroltico.

Bronconeumona Paro respiratorio. Cuadro Clnico en el Perro. Periodo de Incubacin. Periodo Prodrmico. Periodo de excitacin. Periodo Paraltico y fase final o muerte. De 10 das, 2 a 6 meses con una duracin media de 21 a 60 das. Fiebre Melancola Prdida de apetito.

Rhabdovirus
MicrobiologyBytes: ltimas actualizaciones

Introduccin:
Rabdo = griego. 'En forma de barra'. La rabia se conoce desde hace
ms de 20.000 aos, la primera descripcin data del siglo 23 antes de Cristo en la Mesopotamia ( Fu, Z. 1997 La rabia y la investigacin: La rabia. Vacuna pasado, presente y futuro, 15, S20-S24 ) . Genticamente, estos virus tienen no segmentado (-) RNA de sentido genoma recuerda paramixovirus. Hay> 200 Rhabdovirus conocidos (probablemente todava una subestimacin del total), que infectan al hombre (Rabia - el nico miembro del grupo de hacerlo "naturalmente"), otros mamferos, peces, insectos (algunos repetidos en los artrpodos y fueron previamente clasificado como arbovirus) y plantas - verstil! La familia se divide en seis gneros: Grupo V: (-) Los virus de ARN de sentido Solicitar Mononegavirales
Familia Gnero Especies Tipo Hosts Vertebrados Vertebrados Vertebrados Vertebrados Plantas Plantas

Rhabdoviridae Vesiculovirus Lyssavirus (en griego,

'frenes')

Virus de la estomatitis vesicular Indiana Virus de la rabia Virus de la fiebre efmera bovina Virus de la necrosis hematopoytica infecciosa Lechuga Virus del amarilleo necrtico Virus del enanismo amarillo de la patata

Ephemerovirus Novirhabdovirus Cytorhabdovirus Nucleorhabdovirus

La rabia es una enfermedad 'antiguo', muestra por primera vez que es de origen infeccioso en 1808, demostrado ser de etiologa viral por Pasteur en la dcada de 1880 (cuando Pasteur y Koch estaban

desarrollando la teora microbiana de la enfermedad - con anterioridad a la firma de definicin moderna de " virus 'por Beijerinick (1898)). Ms de una dcada, Pasteur llev a cabo el paso en serie del virus de la rabia en los conejos, y, finalmente, logr aislar una preparacin atenuada que se utiliza para tratar a los pacientes mordidos por perros rabiosos (no sin riesgos).

Morfologa:

Partculas ca. 180 x 70 nm con aspecto nico en forma de bala (todos bastante similares). Envuelta con picos prominentes en la superficie ( T protena - haemagglutinates glbulos rojos), pero no es muy variable en apariencia. La envoltura est recubierta por la protena de la matriz y contiene la nucleocpside (ARN + N protena) enrollada helicoidalmente en el interior del ncleo. Dos protenas no estructurales, L y NS , se asocian con la nucleocpside y actuar en concierto como la polimerasa viral. Al igual que con la mayora de los virus con envoltura, la partcula es relativamente inestables. MicrobiologyBytes: Bite the Bullet

Genoma:
~ 11kb. ~ Regin "lder" 50nt en el extremo 3 'y ~ 60 regin no traducida en el extremo 5' de la (-) vRNA sentido. Similar a paramixovirus , hay una seal de poliadenilacin conservada en el extremo de cada gen y una regin intergnica corta entre cada uno de los 5 genes. La mayor parte de nuestro conocimiento de Rhabdovirus proviene del virus de la estomatitis vesicular (VSV) - muy similar a la

rabia, sino de todo el genoma rabia ahora se ha clonado, secuenciado y expresado (vase ms adelante).

Replicacin:
La transmisin vara dependiendo de virus / husped, pero la mayora se transmiten por contacto directo - por ejemplo, la rabia mordeduras de animales o insectos vectores. Hay un largo perodo de incubacin in vivo, pero esto no se refleja en la cintica de replicacin del virus en cultivo. Los picos de protena G se unen a receptores en la superficie de las clulas husped y los virus entra en la clula por endocitosis y la fusin con la membrana de la vescula (como paramixovirus), mediado por la protena G.

Hogenhout SA, et al. vegetales y animales gama de huspedes rhabdovirus: vista de un insecto . Tendencias en Microbiol. 2003 11: 264-271 . Las molculas receptoras para rabdovirus no se conocen, pero se cree que son los fosfolpidos en lugar de protenas especficas. La replicacin se produce en el citoplasma - tanto la L y las protenas no estructurales son necesarios para la transcripcin - ni la funcin solo. Cinco mRNAs monocistrnicos se producen, un tope en el extremo 5 'y polyadenylated en el extremo 3' y cada una contiene la secuencia lder del "fin de la vRNA a los 5 'el 3 final del mensaje. Estos ARNm se hacen por la transcripcin secuencial de los ORFs en el genoma del virus y se ha demostrado que la secuencia intergnica es responsable de la terminacin y de re-iniciacin de la transcripcin por la polimerasa entre cada gen, produciendo de este modo transcripciones separadas. ARNv progenie se hace a partir un sentido intermedio, pero este paso no se entiende bien (+). El genoma se replica por la L + P complejo de la polimerasa (como en la transcripcin), pero tambin se requieren factores de la clula husped adicionales (no conocida). Es

caracterstico de rabdovirus que todos estos eventos ocurren en una parte del citoplasma que acta como "fbrica" un virus y aparece como un cuerpo de inclusin citoplasmtica caracterstica - por ejemplo, la rabia - perinuclear cuerpos de Negri (Negri, 1909).

Los viriones se ensamblan alrededor del ncleo de enrollado firmemente nucleoprotena, y la yema tanto de las membranas citoplsmicas y de la membrana externa de la clula (la adquisicin de la protenas G M + como lo hacen).

ESTRUCTURA DE LOS RABDOVIRUS (figura 1) Los Rabdovirus son virus de ARN de cadena negativa; esto es que tienen una nica hebra de ARN que est en sentido contrario al del ARNm necesario para codificar protenas virales. Esto significa que el ARN no puede codificar directamente la sntesis proteica y ha de ser copiado a una cadena de ARNm de sentido positivo. Como resultado, el virus debe de portar su propia ARN polimerasa dependiente de ARN. Como lo sugiere su nombre estos virus tienen forma bacilar. Tienen un lado que termina en una forma redondeada y por ello se dice que tiene forma de bala. Cada partcula vrica es de casi 100nm de dimetro y 400 nm de largo, pero esto puede variar. Tienen una envoltura derivada de la membrana plasmtica de la clula husped. El virus slo tiene cinco protenas. Protena G (de superficie). Esta es la glicoprotena que forma una espina en la

superficie saliendo de la misma como trmeros. Hay cerca de 1200 protenas G (400 trmeros) por particular viral. Es una protena transmembrana con una secuencia de seal N-terminal. La protena G se fija a los receptores celulares y es el blanco de anticuerpos neutralizantes. Hay tres cadenas sacarosas unidas por enlaces N-glicosdicos. La penetracin del virus al citoplasma toma lugar por una va endoctica y no por la membrana plasmtica. Esto es porque el trmero de protena G sufre un cambio de conformacin a un pH de 6.1 que lo hace ms estable y probablemente permite que una regin hidrofbica de la molcula sea expuesta y se embeba en la membrana de la clula a ser infectada. Protena M (matriz). Esta es una protena perifrica de membrana (originalmente la M era por membrana) que parece bordear la superficie interna de la membrana viral, aunque esto sigue en controversia. Puede actuar como un puente entre la membrana o la protena G y la nucleocpside. Nucleocpside. Esta es el ncleo de ribonucleoprotena infeccioso. Tiene una estructura helicoidal que descansa sobre la membrana. En micrografas de electrones con tincin negativa, tal como se ve en la figura 1, la nucleocpside tiene una apariencia estriada. Protena N (Nucleoprotena). Esta es la principal protena estructural y cubre el genoma de ARN. Protege al genoma de las nucleasas y mantiene su conformacin de forma tal que permite la transcripcin. Protena L (Larga) y NS (no estructural, tambin conocida como P (fosfo)) Juntas forman la ARN polimerasa ARN dependiente o transcriptasa. La protena L tiene un peso molecular de240 kiloDaltons y su gen ocupa casi el 60% del genoma (figura 3).

REPLICACIN (figura 2) Fijacin Los receptores para los rabdovirus todava no han sido identificados definitivamente pero algunos experimentos sugieren fosfolpidos, particularmente la fosfatidil serina, como el receptor de superficie celular. Penetracin Figura Luego de la endocitosis, ocurre la fusin, que es pH-dependiente, de la 3 El genoma del vesicular endoctica con la membrana. La nucleocpside entra al Rabdovirus CDC citoplasma. Todas las etapas subsiguientes toman lugar aqu sin ninguna implicacin del ncleo celular. Transcripcin Primero, la polimerasa, la cual es portada por el virus infectante, sintetiza cinco ARNm individuales, uno para cada protena viral. Note que, el ARN debe de sintetizar antes de la sntesis de cualquier protena viral y por tanto el virus infectante debe de suplir la enzima

polimerasa. (Como es de esperar, este proceso de transcripcin primaria se da en la presencia de inhibidores de la sntesis proteica). Los ARNm son chapados, metilados y poliadenilados. La secuencia de transcripcin es N, NS (P), M, G y L y en cada unin de los genes la sntesis de los ARNm es atenuada (figura 3). Esto significa que se sintetiza menos de ARNm de L que de cualquiera de los otros. Replicacin Adems, la polimerasa transcribe el genoma de ARN de sentido negativo a una hebra de sentido positivo. Esto sirve como plantilla para que la transcriptasa transcriba nuevas molculas de ARN de sentido negativo. Esta fase replicativa requiere de sntesis proteica implicando la misma polimerasa. En la fase replicativa, esta enzima debe ignorar seales que definen la especia original de ARNm y sintetiza una nica molcula de ARN. El cambio de transcripcin de ARNm a replicacin de los ARN genmicos parece estar controlado por el nivel de protena N. Ensamblaje El ARNm de la protena G se traduce en conjunto con el retculo endoplsmico y es transportado mediante el cuerpo de Golgi a la superficie celular. Aqu, forma parches con la protena M. El ARN de sentido negativo y de longitud genmica se asocia con protenas N, L y NS (P) formando las nucleocpsides. Estas, a su vez, se asocian con la protena M en la superficie interna de la membrana plasmtica o quizs en el citoplasma. La interaccin entre la nucleocpside y la protena M causa en la primera un cambio de conformacin para que parezca ms condensada. La nucleocpside entonces yema a travs de la membrana.

RABDOVIRUS
Ejemplo: Virus de la rabia. El miembro ms estudiado es el virus de la estomatitis vesicular. El ARN es: de cadena sencilla de sentido negativo codifica 5 protenas FIJACIN, PENETRACIN Y PRDIDA DE LAS ENVOLTURAS El virus se fija a la superficie celular. La protena G (Glicoprotena) es la protena de fijacin (figura 7) la cual se une a un receptor de la superficie de la clula husped. El virus fijado es engullido por endocitosis.

La membrana del virus se funde con la membrana del endosoma (el pH cido del endosoma es importante puesto que la protena G necesita ser expuesta a un pH cido para facilitar la fusin). Como resultado de la fusin de la envoltura viral con la membrana del endosoma, la nucleocpside es liberada dentro del citoplasma. TRANSCRIPCIN El trmino 'transcripcin' es utilizado en este contexto para referirse a la sntesis de ARNm. La prdida completa de la nucleocpside no es necesaria para la transcripcin la ARN polimerasa del virin pueden copiar el ARN del mismo an cuando este est en la nucleocpside. Esto es una ventaja por el hecho de que entonces el ARN genmico est protegida de las ribonucleasas. Hay un ARNm monocistrnico para cada una de las cinco protenas codificadas por el virus (figura 8). Los ARNm son chapados, metilados, y poliadenilados. Como esto ocurre en el citoplasma, ya que son virus ARN con cadena en sentido negativo, las enzimas para la sntesis y modificacin de ARNm estn empacadas con el virin. TRADUCCIN Los ARN mensajeros son traducidos en los ribosomas de la clula husped y las cinco protenas virales son sintetizadas a un tiempo. No hay distincin de funciones en tempranas o tardas.

REPLICACIN DE ARN La replicacin del ARN es el proceso mediante el cual nuevas copias de ARN son sintetizadas (figura 8). La replicacin de ARN se da en el citoplasma y es llevada a cabo por las ARN polimerasa vricas. La cadena positiva en su totalidad es envuelta por una protena de nucleocpside mientras se va sintetizando (el ARNm no es envuelto con esta protena, porque esto interrumpira con la maquinaria de traduccin de la clula husped). Las recin sintetizadas cadenas de sentido positivo son copiadas en su Figura totalidad en cadenas de sentido negativo, la misma tambin es envuelta con protena de nucleocpside mientras es sintetizada. (Nota: como la ARN polimerasa viral sintetiza ARNm (transcripcin) y tambin ARN completo (replicacin), se le conoce tambin como transcriptasa o replicasa, estas denominaciones slo se enfocan en los diferentes aspectos de la actividad de la polimerasa.) Las cadenas negativas recin sintetizadas pueden: i. Ser usadas como plantillas para la sntesis de ms cadenas enteras de sentido positivo

ii. Ser usadas como plantillas para la sntesis de ms ARNm iii. Ser empacadas en los viriones

ENSAMBLAJE El virus consiste en dos mdulos la envoltura y la nucleocpside: Envoltura Las protenas transmembranales son sintetizadas en los ribosomas que se encuentran adyacentes al retculo endoplsmico. Mientras son sintetizadas son insertadas en retculo endoplsmico en donde son Figura glicosiladas y luego transportadas al aparato de Golgi en donde se dan modificaciones sustanciales de las cadenas de carbohidratos. Posteriormente, son transportadas, en vesculas, hacia la membrana celular apropiada; en el caso del virus de la estomatitis vesicular, sta es la membrana plasmtica (figura 9).

Nucleocpside La sntesis de la nucleocpside fue descrita anteriormente. El complejo de ARN polimerasa vira se asocia con las nucleocpsides cuando se estn sintetizando. Las nucleocpsides yeman a travs de reas modificadas de la membrana, las cuales contienen protenas G y M (figura 10). La protena M (matriz) est involucrada en el ensamblaje interacta con parches de G en la membrana y con nucleocpsides. Figura NOTA: 10

TODO EL CICLO DE VIDA OCURRE EN EL CITOPLASMA LA ARN POLIMERASA Y LAS ENZIMAS DE MODIFICACIN D ARN CON CODIFICADAS POR EL VIRUS MISMO Y ESTN PRESENTES EN EL VIRIN NO HAY DIVISIN EN FASES TEMPRANA/TARDA

http://es.scribd.com/doc/109887007/TEMA-23-Rhabdovirus