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Automatizacion Del Hemograma
Automatizacion Del Hemograma
Qu es el hemograma?
Anlisis en que se miden de forma global y en porcentaje los tres tipos bsicos de clulas sanguneas:
Serie eritrocitaria o serie roja Serie leucocitaria o serie blanca Serie plaquetaria
Hemograma
CBC: Complete blood count CSC: conteo sanguneo completo. BH o BHC: biometra hemtica o biometra hemtica completa. Sangre anticoagulada de preferencia con etilendiaminotetractico.
EDTA
Anticoagulante slido recomendado por varias razones:
No produce dilucin de la sangre. Respeta la morfologa eritrocitaria y leucocitaria. Asegura la conservacin de las clulas durante 24 horas. Inhibe la agregacin de las plaquetas, facilitando el recuento de las mismas.
Recuento automatizado Historia 1949 con Wallace Coulter (desarrollo el principio de resistencia elctrica o impedancia). A principio de los 60 s los equipos suministraron las principales magnitudes. En los 70 recuento de plaquetas. 1953 Parker y Horts, recuento mediante luz halgena (previa tincin) 1965 katmentsky introdujo la espectrofotometra y el principio del fondo oscuro.
Recuento automatizado Historia 1966 cambios en ondas de radiofrecuencias. 1980 citometra de flujo.
Equipos de hematologa
Segn el tipo de ondas electromagnticas empleadas se utilizan individual o combinadas las siguientes metodologas bsicas:
Impedancia (corriente directa) Dispersin lumnica. Fluorescencia (mejora la sensibilidad y precisin).
Automatizacin
Para obtener cantidad y volumen de los componentes sanguneos los analizadores hematolgicos automatizados utilizan las variaciaciones que ejercen las clulas al atravesar campos magnticos. Las condiciones son estrictas y constantes. Los datos cuantitativos se expresan en tablas, histogramas y citogramas.
VARIACIN DE IMPEDANCIA
El contador de impedancia elctrica trabaja mediante la suspensin de las clulas sanguneas en un lquido electrnicamente conductor. Cada partcula es forzada a atravesar un par de electrodos produciendo un cambio en la resistencia elctrica entre los electrodos. Cada clula produce un pulso elctrico especfico que permite su clasificacin y conteo.
IMPEDANCIA
Impedancia
Los impulsos generados son directamente proporcionales al tamao de la clula y el nmero de partculas que atraviesa el orificio de apertura por unidad de tiempo es proporcional a su concentracin en el medio electrolito. Para el recuento correcto necesitamos corriente directa y que las clulas sigan una trayectoria uniforme por el detector.
Impedancia
Ejemplos de instrumentos con este principio son el Contador Coulter, los instrumentos TOA Sysmex y los instrumentos Abbot CellDyn.
BUFFY COAT
Los resultados contenidos comprenden hematocrito, hemoglobina, nmero de clulas rojas, nmero de leucocitos, granulocitos totales, neutrfilos, eosinfilos y porcentaje de reticulocitos
Citometra de flujo
Tres haces de luz blanco al pasar por un coloide de partculas de azufre en un liquido, se convierten en anaranjados, rosados y azul verdosos.
Citometra de flujo
Para ello hacemos pasar dichas clulas, a velocidad constante de varios miles por segundo a travs de un cmara de flujo laminar sobre la que incide un haz de luz a una longitud de onda especfica Lser. Como consecuencia del impacto, se produce una dispersin de luz policromtica generada por los diferentes fluorocromos que es captada por diversos detectores de gran sensibilidad.
Citometra de flujo
Los detectores convierten las seales en seales electrnicas que posteriormente sern digitalizadas para permitir la medida simultnea de varios parmetros en la clula. Estos parmetros son: - caractersticas intrnsecas de la clula: tamao y la complejidad de su ncleo y citoplasma. - Caractersticas antignicas de cada clula.
Citometra de flujo
Analizar cada seal permite conocer propiedades celulares y el comportamiento al ponerlas en contacto con diferentes sustancias o marcadores. Las seales pueden ser de dispersin (interacta la partcula con la luz y produce cambios de direccin en el espacio) o de fluorescencia (interaccin del fluorocromo con la luz y emisin de energa radiante).
Citometra de flujo
Citometra de flujo
La citometra de flujo se utiliza en muy diversas aplicaciones, que van desde inmunofenotipado, muerte celular, contaje celular, expresin de genes reporteros, etc.
Determinacin de la Hemoglobina
Ferrocianuro potsico oxida la hemoglobina a hemiglobina (metahemoglobina). Cianuro de potasio para formar el compuesto cromognico (HiCN). Se mide por espectrofotometra a una longitud de onda de 550 nm. Resultado final: valor de absorbancia x coeficiente de calibracin.
Reactivos empleados
EQUIPOS DE TRES PARTES:
Diluyente Lisante Detergente.
Limitaciones
Mantenimiento. Muestras de sangre. Interferencias. Limitaciones del operador.
Gracias