INVENTARIO DE INSTRUMENTOS EN EL LABORATORIO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

En nuestra visita a laboratorio de biologa molecular y celular encontramos que estaba dividido en dos areas generales segn el tipo de exmenes que necesitamos realizar.

AREA DE GENETICA

1 AREA DE ESTERILIZACION:

AUTOCLAVES: Un autoclave de laboratorio es un dispositivo que sirve para esterilizar

material de laboratorio, utilizando vapor de agua a alta presin y temperatura para ello, evitando con las altas presiones que el agua llegue a ebullir a pesar de su alta temperatura. El fundamento del autoclave es que coagula las protenas de los microorganismos debido a la presin y temperatura, aunque recientemente se ha llegado a saber de algunos microorganismos, que tal como los priones, que pueden soportar las temperaturas de autoclave. Funcionan permitiendo la entrada o generacin de vapor de agua pero restringiendo su salida, hasta obtener una presin interna de 103 kPa, lo cual provoca que el vapor alcance una temperatura de 121 grados centgrados. Un tiempo tpico de esterilizacin a esta temperatura y presin es de 15-20 minutos. Las autoclaves ms modernas permiten realizar procesos a mayores temperaturas y presiones, con ciclos estndares a 134 C a 200 kPa durante 5 min para esterilizar material metlico; llegando incluso a realizar ciclos de vaco para acelerar el secado del material esterilizado.

ESTUFA: Artefacto utilizado en los laboratorios para esterilizar por calor seco. Se
requiere mayor temperatura y tiempo de exposicin que el autoclave. La temperatura vara entre 120 y 180C, requirindose distintos tiempos de exposicin. A 140C se necesitan por lo menos 5 horas de exposicin, mientras que a 160C se requieren al menos 2 horas de exposicin. Sirve para esterilizar material de vidrio. El papel y el algodn no pueden ser esterilizados a ms de 160C.

ENCUVADORES: dispositivo que sirve para mantener y hacer crecer cultivos

microbiolgicos o cultivos celulares. La incubadora mantiene la temperatura, la humedad y otras condiciones en grado ptimo, tales como el contenido de dixido de carbono (CO2) y de oxgeno en su atmsfera interior. Las incubadoras son esenciales para una gran cantidad de trabajos experimentales en biologa celular, la microbiologa y en biologa molecular y se utilizan para cultivos celulares, tanto bacterianos como de clulas eucariotas.

HORNO PARA INCINERAR: Un tipo de horno comnmente usado para deshidratar

reactivos de laboratorio o secar instrumentos. El horno aumenta su temperatura

gradualmente conforme pase el tiempo as como tambin sea su programacin, cuando la temperatura sea la ptima y se estabilice, el trmico mantendr la temperatura; si esta desciende volver a activar las resistencias para obtener la temperatura programada; posee un tablero de control que muestra el punto de regulacin y la temperatura real dentro del horno, est montada al frente para su fcil lectura, aunque algunos modelos anteriores no lo tienen, estos cuentan con una perilla graduada la cual regula temperatura del horno.

MUFLA: Una mufla a combustible tcnicamente es un horno para temperaturas

elevadas donde la fuente de calor est separada totalmente de la cmara de coccin para que no pueda contaminarse la muestra con los gases de combustin.

MICROTOMO: Los micrtomos para cortar material incluido en parafina son

probablemente los ms usados en los laboratorios de histologa. Todos poseen varias partes comunes: una cuchilla, un portabloques y un sistema mecnico que permite acercar el bloque de parafina a la cuchilla una distancia que se corresponde con el grosor de la seccin que pretendemos obtener y realizar el corte.

AUTOCLAVE VERTICAL: Los autoclaves verticales para laboratorio Tuttnauer estn

disponibles con cmaras de 23 a 160 litros. Con una capacidad superior y una mejor perfomance, la lnea ELV de esterilizadores automticos verticales de vapor Tuttnauer provee una esterilizacin segura, econmica y efectiva. Los modelos ELV tienen un avanzado sistema de control con microprocesador. LAVADORA: Este instrumento es utilizado para lavar los mandiles de laboratorio ya que ste se encuentra de el nivel 3 de bioseguridad.

2 PREPARACION DE REACTIVOS:

CABINA DE EXTRACCION DE GASES: Las cabinas de extraccin de gases ofrecen

seguridad, evitan la contaminacin del laboratorio y protege al personal de inhalaciones en dnde se generen gases txicos. Estas se encargan de retener gases y vapores que desprenden al momento de la manipulacin de productos qumicos en el laboratorio. Las cabinas de extraccin de gases de Acequilabs se ajustan fcilmente a sus necesidades, se ofrecen en modelos de sobremesa y/o con poseta de lavado, sifn de desage y base con sistema de rodachinas de seguridad, opcionalmente diseamos y fabricamos cabinas acorde a las exigencias de seguridad para su laboratorio. ESPECTOFOTOMETRO: Un espectrofotmetro es un instrumento usado en el anlisis qumico que sirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentracin o reacciones qumicas que se miden en una muestra. Tambin es utilizado en los laboratorios de qumica para la cuantificacin de sustancias y microorganismos. . FUNCIONES: El espectrofotmetro realiza dos funciones principales:

1. Ofrece informacin de una muestra sobre la naturaleza de la sustancia que contiene. 2. Seala indirectamente la cantidad de la sustancia a investigar que se encuentra presente en la muestra

MULTIPORADOR: La unidad bsica del multiporador est formada por un mdulo

diseado para electroporar clulas eucariotas. Dos mdulos funcionales suplementarios amplan el espectro de aplicaciones del multiporador para la fusin celular o la transformacin de bacterias y levaduras. No son necesarios dispositivos adicionales ni piezas externas. Junto con los tampones, las cubetas y las cmaras, indicados precisamente para las correspondientes aplicaciones, el multiporador conforma un sistema perfecto.

HORNO DE EHIBRIDACION: LIOFILIZADOR: Equipo de desecacin en el que se elimina el agua por congelacin del
producto hmedo a -86C y posterior sublimacin del hielo en condiciones de vaco. Al suministrar calor el hielo sublima y se evita el paso por la fase lquida.

DETECTOR DE PLACAS ELISA: CENTRIFUGA CONVECIONAL: Es una mquina que pone en rotacin una muestra
para acelerar por fuerza centrfuga la decantacin o sedimentacin de sus componentes o fases (generalmente una slida y una lquida), en funcin de su densidad. Existen diversos tipos de estos, comnmente para objetivos especficos.

BAO MARIA: EQUIPOS DE HOMOGENEIZACION: Esta mquina cuenta con caldero, tanque de
agua y tanque de emulsionantes, plataforma de operacin y sistema de control. La mquina logra que el dimetro del material llegue hasta 0.5m. Aplicacin de la mquina homogenizadora al vaco: Es adecuada para el calentamiento, la fundicin y la homogenizacin de materiales. Es el dispositivo ideal para la elaboracin de cremas, pastas y pomadas.

REFRIGERADORA: Siempre es necesario el uso de este instrumento ya que mantiene

la conservacin de las muestras a estudiar. El conductmetro es un aparato que mide la resistencia elctrica que ejerce el volumen de una disolucin encerrado entre los dos electrodos. El aparato mide la resistencia, y dependiendo del electrodo, realiza las operaciones necesarias y muestra la conductividad en la pantalla.

CONDUCTIMETRO:

PH- metro: Es un sensor utilizado en el mtodo electroqumico para medir el pH de

una disolucin.

La determinacin de pH consiste en medir el potencial que se desarrolla a travs de una fina membrana de vidrio que separa dos soluciones con diferente concentracin de protones. En consecuencia se conoce muy bien la sensibilidad y la selectividad de las membranas de vidrio delante el pH. Una celda para la medida de pH consiste en un par de electrodos, uno de calomel (mercurio, cloruro de mercurio) y otro de vidrio, sumergidos en la disolucin de la que queremos medir el pH. La varita de soporte del electrodo es de vidrio comn y no es conductor, mientras que el bulbo sensible, que es el extremo sensible del electrodo, esta formado por un vidrio polarizable (vidrio sensible de pH). Se llena el bulbo con la solucin de cido clorhdrico 0.1M saturado con cloruro de plata. El voltaje en el interior del bulbo es constante, porque se mantiene su pH constante (pH 7) de manera que la diferencia de potencial solo depende del pH del medio externo. El alambre que se sumerge al interior (normalmente Ag/AgCl) permite conducir este potencial hasta un amplificador.

HOMOGENIZADOR CON MAGNETO: a temperatura 500 C.

3 AREA DE CULTIVOS

CABINA DE BIOSEGURIDAD: Una cabina de bioseguridad, cabina de seguridad

biolgica o cabina de seguridad microbiolgica es un recinto o espacio de trabajo cerrado y ventilado para trabajar de modo seguro con materiales contaminados (o potencialmente contaminados) con agentes patgenos (bacterias, virus...) y forma parte del equipamiento de laboratorio de muchas unidades biomdicas. Existen diferentes tipos, diferenciados por las caractersticas especficas de su construccin.

CABINA DE FLUJO LAMINAR: Una cabina de flujo laminar, cmara de flujo

laminar o campana de flujo laminar es un recinto que emplea un ventilador para forzar el paso de aire a travs de un filtro HEPA o ULPA y proporcionar aire limpio a la zona de trabajo libre de partculas de hasta 0.1 micras. Este tipo de equipos se fabrican en forma generalmente prismtica con una nica cara libre (la frontal) que da acceso al interior, donde se localiza la superficie de trabajo, que normalmente permanece limpia y estril.

Se divide en tres zonas: 1. Zona de material limpio. 2. Area de trabajo. 3. Area de desecho.

MICROSCOPIO INVERTIDO: Como su nombre indica un microscopio invertido tiene

una disposicin inversa de sus componentes respecto a un microscopio convencional. La fuente de luz y el condensador estn sobre la plataforma apuntando hacia abajo. Los objetivos estn debajo de la plataforma apuntando hacia arriba. Los nicos componentes que estn en la misma posicin son los oculares, as mismo la muestra es colocada sobre la platina mecnica. Aunque un microscopio electrnico tiene gran capacidad demagnificacin y resolucin de la muestra, ste requiere que el especmen sea procesado. Por otra parte, el microscopio de luz concede una observacin temporal de muestras vivas, sin embargo, stas requieren una hidratacin constante que las somete a estrs permanente, imposibilitando de tal manera su supervivencia. A diferencia de estos microscopios, el microscopio invertido permite observar organismos o tejidos en cultivo sin una preparacin previa, favoreciendo el seguimiento del estado de crecimiento, comportamiento y dems parmetros involucrados en el desarrollo del cultivo. La observacin se realiza a travs de las bases de diferentes recipientes con espesores y caractersticas pticas variables, tales como placas de Terasaki, frascos Corning, frascos Roux, cajas de Petri plsticas y de vidrio. El material plstico es pticamente superior que el de vidrio debido que son ms delgados y uniformes. Una desventaja del microscopio invertido es su limitada magnificacin, debido a que los objetivos ms potentes son de 40X y de 60X.

4 AREA DE MEDICIONES

BALANZAS ANALITICAS: instrumentos de medida ms usados en laboratorio y de la

cual dependen basicamente todos los resultados analticos.

Las balanzas analticas modernas, que pueden ofrecer valores de precisin de lectura de 0,1 g a 0,1 mg, estn bastante desarrolladas de manera que no es necesaria la utilizacin de cuartos especiales para la medida del peso. An as, el simple empleo de circuitos electrnicos no elimina las interacciones del sistema con el ambiente. De estos, los efectos fsicos son los ms importantes porque no pueden ser suprimidos.

ESTEREOSCOPIO CON DOS OBJETIVOS: Es un dispositivo muy simple que consta de

cuatro pequeos espejos, ubicados en forma tal que permiten desviar las imgenes correspondientes a cada ojo puestas una al lado de la otra de tal manera al verse montadas una sobre la otra dan el efecto estereoscpico o tridimensional; para ajustarse al tamao de distintas imgenes el dispositivo tiene un eje o pivote que altera el grado de separacin. Este aparato sustituye el cruzar los ojos para ver fotos o videos estereoscpicos, que para muchos que es algo difcil y/o incomodo.

CABINA DE PCR: Crean un ambiente ideal para la preparacin de muestras para

PCR reduciendo la probabilidad de contaminacin, permite descontaminar aparatos y reactivos en cuestin de minutos entre los experimentos.

5 AREA DE EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS (ARN ADN) MICROPIPETAS: La micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para succionar y transferir pequeos volmenes de lquidos y permitir su manejo en las distintas tcnicas analticas. Los volmenes captables por estos instrumentos varan segn el modelo: los ms habituales, denominados p20, p200 y p1000, admiten un mximo de 20, 200 y 1000 l, respectivamente. Es de destacar que el uso de micropipetas permite emplear distintos lquidos sin tener que lavar el aparato: para ello, se emplean puntas desechables, de plstico, que habitualmente son estriles. Existen varios tipos de puntas: por ejemplo, las amarillas para pipetear volmenes pequeos (por ejemplo, 10 l), y las azules para pipetear volmenes grandes (por ejemplo, 800 l).

CENTRIFUGA MINISPIN: De 14500 RPM. TERMOSTATO: Un termostato es el componente de un sistema de control simple que
abre o cierra un circuito elctrico en funcin de la temperatura. Su versin ms simple consiste en una lmina bimetlica como la que utilizan los equipos de aire acondicionado para apagar o encender el compresor. Otro ejemplo lo podemos encontrar en los motores de combustin interna, donde controlan el flujo del lquido refrigerante que regresa al radiador dependiendo de la temperatura del motor.

VORTEX MIXER: Un agitador tipo vrtex o mezclador de vrtice es un dispositivo

simple que se usa comnmente en los laboratorios para agitar pequeos tubos o frascos de lquido. Se compone de un motor elctrico con el eje de transmisin orientado verticalmente y unido a un trozo de goma o caucho montado en forma de copa, ligeramente excntrico. A medida que el motor gira la pieza de caucho oscila rpidamente en un movimiento circular. Cuando un tubo de ensayo o recipiente adecuado se coloca en el soporte de goma (o toca su borde) el movimiento se transmite al lquido en su interior y se crea un vrtice. La mayora de los mezcladores de vrtice tienen una configuracin de velocidad variable y pueden ser configurados para ejecutarse de forma continua, o para que funcione slo cuando una dbil presin se aplica a la goma. Poseen unos pies de ventosa en la base para evitar desplazamientos.

CENTRIFUGA REFRIGERADA: Equipo que permite la centrifugacin de tubos (0.2

50ml) para la separacin de constituyentes de mezclas liquidas o suspensiones, a

temperaturas comprendidas entre 20 y 40C. tambin permite la separacin de clulas y macroclulas.

EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS: CONCENTRADOR PLUS DE ACIDOS NUCLEICOS: AREA MOLECULAR

1 SALA MASTER MIX PCR

CABINA PCR: Crean un ambiente ideal para la preparacin de muestras para PCR reduciendo
la probabilidad de contaminacin, permite descontaminar aparatos y reactivos en cuestin de minutos entre los experimentos.

2 AREA DE AMPLIFICACION TERMOCICLADORE TIEMPO REAL: Un termociclador, tambin conocido como mquina de PCR o reciclador trmico de PCR es un aparato usado en Biologa Molecular que permite realizar los ciclos de temperaturas necesarios para una reaccin en cadena de la polimerasa de amplificacin de ADN o para reacciones de secuencia con el mtodo de Sanger. El modelo ms comn consiste en un bloque de resistencia elctrica que distribuye a travs de una placa una temperatura homognea durante tiempos que pueden ser programables, normalmente con rangos de temperatura de 4 C a 96 C. Dado que las reacciones incubadas en el aparato son en soluciones acuosas, suelen incluir una placa de tapa calentada constantemente a 103 C para evitar la condensacin de agua en las tapas de los tubos donde ocurre la reaccin, y as evitar que los solutos se concentren, lo que modificara las condiciones ptimas para la enzima polimerizante y la termodinmica del apareamiento de los iniciadores. Tambin existen otras tecnologas menos populares utilizando distribucin de aire caliente en tubos suspendidos, logrando el mismo objetivo de transferir calor eficientemente a la reaccin para que cambien los ciclos de temperaturas.

3 EXTENSION FINAL CAMARA DE ELECTROFORESIS: Ideales para preparaciones rutinarias de tcnicas de

electroforesis, para la separacin de proteinas u cidos nucleicos, tcnicas de secuenciacin de ADN, patrones de bandas y anlisis de oligonucletidos, es una solucin para estudios e investigaciones sobre mutaciones y polimorfismos de ADN, disponibles en diferentes tamaos segn las necesidades del usuario.

I.

ANEXOS:

Fig. N1: Autoclave horizontal.

Fig. N2: Autoclave vertical.

Fig. N3: Estufa de laboratorio.

Fig. N4: Horno de laboratorio.

Fig. N5: Microtomo

Fig. N6: Cabina de extraccin de gases

Fig. N7: Balanza analtica

Fig. N8: Cabina de PCR

Fig. N9: Cabina de bioseguridad

Fig. N 10: Puntas para micropipetas y micropipetas