PRACTICA CONTROL DE CALIDAD MICROBIOLOGICA ALIMENTOS MODELOS: Verdura Picada Para Sopas o Ensaladas (arveja, habichuela, zanahoria) Carne

Fresca MATERIALES Y REACTIVOS ELEMENTOS Probeta * 100 ml. Estril Tubo De ensayo 120*16. Estril Pipeta graduada * 1 ml. Estril Pipeta Graduada * 5 ml. Estril Pipeta Graduada * 10 ml. Estril Asa De Vidrio. Estril Vidrio de Reloj. Estril Esptula o cuchillo estril Cajas De Petri 100*15. Estril Diluente Estril. Recipiente con 150 ml. Agar Plate Count (Agar Caso) Fundido, Estril. Recipiente con 200 ml. Agar PDA (Agar Sabureaud) Fundido, Estril. Recipiente con 100 ml Agar MRS Fundido, Estril. Recipiente con 80 ml Tubos De Ensayo 120*16 con 9 ml de Caldo Fluorocult y Campana De Durham Caja de Agar VRBD Caja de Agar SS Caja de Agar Cetrimida Caja de Agar Baird Parker Caja de Agar SPS Reactivo de Kovacs CANTIDAD 1 2 6 3 2 1 1 1 20 1 1 1 1 9 2 2 2 2 2 GENERAL 2 4 12 6 4 2 2 2 40 2 2 2 2 18 4 4 4 4 4

Diluente: Triptona 10 g., NaCl 5 g., agua destilada c.s.p. 1 litro.

PROCEDIMIENTO Pesar 10 g. de la muestra en el vidrio de reloj estril. Para El caso del queso y la carne con ayuda del cuchillo o esptula estril picar la muestra. Colocar la muestra en la Probeta Estril y completar a 100 ml con el diluente. Esta ser la dilucin 10-1. Tapar y agitar fuertemente y dejar en reposo para que decante. Colocar 10 ml de diluente en cada uno de los tubos de ensayo estriles y marcarlos como diluciones 10-3 y 10-5. De la suspensin decantada en la probeta, con ayuda de una pipeta de 1 ml estril tomar 0.1 ml, colocarlo en el tubo marcado 10-3 y homogenizar. De la dilucin 10-3 con ayuda de una pipeta de 1 ml estril tomar 0.1 ml, colocarlo en el tubo marcado 10-5 y homogenizar. Tomar 12 cajas de Petri estriles,marcar en parajes como MESOFILOS 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5 y 10-6. Tomar 6 cajas de Petri estriles y marcar en parajes como HONGOS 10-1, 10-2, 10-3. Tomar 4 cajas de Petri estriles y marcar en parajes como LACTOBACILOS 10-1, 10-2. Tomar dos cajas de los agares VRBD, SS, CETRIMIDA, BAIRD PARKER y SPS y marcarlas como 10-2. Tomar los 9 tubos de caldo FLUOROCULT y marcarlos en grupos de 3 como 10-1, 10-2, 10-3. Con ayuda de una pipeta estril de 5 ml tomar 5 ml de muestra de la dilucin 10-1 (suspensin decantada en la probeta) y depositar sendas muestras de 1ml en las cajas de Petri estriles marcadas como MESOFILOS 10-1. HONGOS 10-1, LACTOBACILOS 10-1 y en los caldos de FLUOROCULT marcados como 10-1. Con una pipeta estril de 1 ml tomar 1 ml de la dilucin 10-1 (Probeta) y depositar sendas muestras de 0.1 ml en las cajas de Petri estriles marcadas como MESOFILOS 10-2, HONGOS 10-2 y LACTOBACILOS 10-2 y en los caldos de FLUOROCULT marcados como 10-2. Con una pipeta estril de 1 ml tomar 1 ml de la dilucin 10-1 (Probeta) y depositar sendas muestras de 0.1 ml en las cajas de agares selectivos marcadas como 10-2, e inmediatamente, con ayuda del asa de vidrio, extender de manera homognea la muestra sobre la superficie de los agares selectivos. Luego llevar las cajas inoculadas a incubadora a 37C de 24 a 48 horas. Con ayuda de una pipeta estril de 5 ml tomar 5 ml de muestra de la dilucin marcada como 10-3 y depositar sendas muestras de 1ml en las cajas de Petri estriles marcadas como MESOFILOS 10-3, HONGOS 10-3 y en los caldos de FLUOROCULT marcados como 10-3. Con una pipeta estril de 1 ml tomar 1 ml de la misma dilucin (10 -3) y depositar sendas muestras de 0.1 ml en las cajas de Petri estriles marcadas como MESOFILOS 10-4. Con ayuda de una pipeta estril de 5 ml tomar 5 ml de muestra de la dilucin marcada como 10-5 y depositar sendas muestras de 1ml en las cajas de Petri estriles marcadas como MESOFILOS 10-5, HONGOS 10-5. Con una pipeta estril de 1 ml tomar 1 ml de la misma dilucin (10 -3) y depositar sendas muestras de 0.1 ml en las cajas de Petri estriles marcadas como MESOFILOS 10-6. Agregar el agar Plate Count (Agar Caso) fundido aproximadamente 15 ml a las cajas marcadas como MESOFILOS y homogenizar moviendo las cajas en forma de ocho. Dejar solidificar. Luego pasar a incubadora a 37C de 24 a 48 horas.

Agregar el agar PDA (Agar SABOUREAUD) fundido aproximadamente 15 ml a las cajas marcadas como HONGOS y homogenizar moviendo las cajas en forma de ocho. Dejar solidificar. Luego pasar a incubadora a 30C de 24 a 48 horas. Agregar el agar MRS fundido aproximadamente 15 ml a las cajas marcadas como LACTOBACILOS y homogenizar moviendo las cajas en forma de ocho. Dejar solidificar. Colocar en jarra anaerbica junto con las cajas de SPS, adicionar el catalizador, cerrar hermticamente. Luego pasar a incubadora a 37C de 24 a 48 horas. Los Tubos con caldo FLUOROCULT incubarlos a 37C de 24 a 48 horas. Retirar las cajas de la incubadora y hacer los respectivos recuentos para los MESOFILOS, los HONGOS y los LACTOBACILOS. Retirar de la incubadora los Tubos con caldo FLUOROCULT y determinar la clave de recuentos. Cuantos tubos de cada serie de tres tiene gas en la campana (coliformes totales). Cuantos tubos de cada serie de tres fluorece a la luz ultravioleta (E. coli). Cuantos tubos de cada serie de tres dan positivo para la prueba del INDOL con el reactivo de KOVACS (E. coli). Examinar los agares selectivos y detectar la presencia presuntiva de los diferentes tipos de bacterios.

MEDICAMENTOS MODELOS: Mediamentos: Jarabe, Suspencin, Tabletas Cosmticos: Crema de manos, sombra de ojos, labial

MATERIALES, MEDIOS Y REA CTIVOS ELEMENTOS Probeta * 100 ml. Estril Tubo De ensayo 120*16. Estril Pipeta graduada * 1 ml. Estril Pipeta Graduada * 5 ml. Estril Pipeta Graduada * 10 ml. Estril Asa De Vidrio. Estril Vidrio de Reloj. Estril Esptula o cuchillo estril Mortero de Porcelana con pistilo Cajas De Petri 100*15. Estril Diluente (Caldo Peptona de Caseina-Lecitina-Tween), Estril. Recipiente con 120 ml. Caldo Casoy estril. Recipiente con 90 ml Agar Plate Count (Agar Caso) Fundido, Estril. Recipiente con 120 ml. Agar PDA (Agar Sabureaud) Fundido, Estril. Recipiente con 80 ml Caja de Agar VRBD Caja de Agar SS Caja de Agar Cetrimida Caja de Agar Baird Parker CANTIDAD 1 1 4 2 2 1 1 1 1 12 1 1 1 1 2 2 2 2 GENERAL 6 6 24 12 12 6 3 3 3 72 6 6 6 6 12 12 12 12

PROCEDIMIENTO Para las muestras slidas, pesar 10 g. de la muestra en el vidrio de reloj estril. Pasar la muestra a l mortero estril y con ayuda del pistilo pulverizar la muestra. Agregar una pequea cantidad del diluente y con ayuda del pistilo macerar la muestra. Pasar la muestra a la Probeta Estril cuidando de lavar con el diluente los residuos que queden en el mortero y completar a 100 ml con el diluente. Esta ser la dilucin 10-1. Tapar y agitar fuertemente y dejar en reposo para que decante. Para la muestra lquida medir en la probeta 10 ml y completar a 100 ml con el diluente. Colocar 10 ml de diluente en el tubo de ensayo estriles y marcarlos como diluciones 10-3. De la suspensin decantada en la probeta, con ayuda de una pipeta de 1 ml estril tomar 0.1 ml, colocarlo en el tubo marcado 10-3 y homogenizar. Tomar 6 cajas de Petri estriles y marcar en parajes como MESOFILOS 10-1, 10-2, 10-3. Tomar 4 cajas de Petri estriles y marcar en parajes como HONGOS 10-1, 10-2. Marcar el caldo CASO (90 ml) con el nombre de la muestra Tomar las dos cajas de los agares VRBD, SS, CETRIMIDA, BAIRD PARKER y SPS y marcarlas Despus de 20 minutos de contacto de la muestra con el diluente, con ayuda de una pipeta estril de 5 ml tomar 5 ml de muestra de la suspensin decantada en la probeta y depositar sendas muestras de 1ml en las cajas de Petri estriles marcadas como MESOFILOS 10-1. HONGOS 10-1. De nuevo tomar 10 ml de la dilucin bien homogenizada y colocarlos en el caldo CASO. Homogenizar muy bien y pasarlo a la incubadora a 37C por 24 horas. Con una pipeta estril de 1 ml tomar 1 ml de la misma dilucin (Probeta) y depositar sendas muestras de 0.1 ml en las cajas de Petri estriles marcadas como MESOFILOS 10-2, HONGOS 10-2. Con ayuda de una pipeta estril de 5 ml tomar 5 ml de muestra de la dilucin marcada como 10-3 y depositar sendas muestras de 1ml en las cajas de Petri estriles marcadas como MESOFILOS 10-3. Agregar el agar Plate Count (Agar Caso) fundido aproximadamente 15 ml a las cajas marcadas como MESOFILOS y homogenizar moviendo las cajas en forma de ocho. Dejar solidificar. Luego pasar a incubadora a 37C de 24 a 48 horas. Agregar el agar PDA (Agar SABOUREAUD) fundido aproximadamente 15 ml a las cajas marcadas como HONGOS y homogenizar moviendo las cajas en forma de ocho. Dejar solidificar. Luego pasar a incubadora a 30C de 24 a 48 horas. Luego de la incubacin a 37C por 24 horas del caldo de enriquecimiento, con ayuda de una pipeta de 1 ml estril, tomar un 1 ml y depositar sendas muestras de 0.1 ml en todas y cada una de las cajas de los agares selectivos, e inmediatamente distribuir la muestra sobre la superficie de los agares de manera homognea con ayuda del asa de vidrio. Luego incubar a 37C por 24 horas. Retirar las cajas de la incubadora y hacer los respectivos recuentos para los MESOFILOS, los HONGOS. Examinar los agares selectivos y detectar la presencia presuntiva de los diferentes tipos de bacterios.

AGUAS MODELOS: Agua Potable, 500 ml Suero Fisiolgico 1 de 500 ml (Producto Esteril) MATERIALES, MEDIOS Y REACTIVOS ELEMENTOS Equipo De Filtracin Membrana De Filtracin de 0.45 mm * 47 mm de dimetro. Estriles Pinza Para Membranas. Estril Tijeras en acero inoxidable estril Desinfectante Gasa Estril Diluente (Solucin Salina Isotnica Estril). Recipiente con 600 ml Caja de agar Caso Caja de Agar PDA (Agar Saboureaud) Caja de Agar VRBD Caja de Agar SS Caja de Agar Cetrimida Caldo Caso (50 ml) Caldo Tioglicolato con rezasurina CANTIDAD 1 5 1 1 2 1 1 1 1 1 1 NA NA PRUEBA DE ESTERILIDAD 1 1 1 1 1 2 1 NA NA NA NA NA 1 1

PROCEDIMIENTO Con ayuda de la gasa estril y el desinfectante limpiar el recipiente en donde viene la muestra. Dejar actuar por 10 minutos. Conectar el Equipo de filtracin a la bomba de vaco. Retirar el vaso del sistema de filtracin. Con ayuda de la pinza colocar la membrana estril en el portafiltro y ajustar muy bien el vaso del sistema de filtracin. Destapar el recipiente con la muestra y colocar 100 ml en el vaso de filtracin. Accionar la bomba de vacio hasta que se filtre completamente la muestra y esperar 1 minuto antes de apagar la bomba de vaco. Adicionar al vaso 100 ml de diluente para lavar la membrana Accionar la bomba de vacio hasta que se filtre completamente la muestra y esperar 1 minuto antes de apagar la bomba de vaco. Con ayuda de la pinza estril retirar cuidadosamente la membrana y depositarla sobre la caja de agar Caso, cuidando de no dejar burbujas entre la membrana y el agar. Tapar la caja y llevarla a incubacin a 37C de 24 48 horas. De nuevo retirar el vaso del equipo de filtracin, colocar la membrana en el portafiltro y colocar el vaso y ajustar muy bien el vaso. colocar 100 ml en el vaso de filtracin.

Accionar la bomba de vacio hasta que se filtre completamente la muestra y esperar 1 minuto antes de apagar la bomba de vaco. Adicionar al vaso 100 ml de diluente para lavar la membrana Accionar la bomba de vacio hasta que se filtre completamente la muestra y esperar 1 minuto antes de apagar la bomba de vaco. Con ayuda de la pinza estril retirar cuidadosamente la membrana y depositarla sobre la caja de agar PDA, cuidando de no dejar burbujas entre la membrana y el agar. Tapar la caja y llevarla a incubacin a 30C por 48 horas. Repetir este procedimiento para los agares VRBD, SS y CETRIMIDA. Estas cajas se incuban a 37 de 24 a 48 horas. Retirar las cajas de la incubadora para los respectivos recuentos y la deteccin de bacterias patgenas en los agares selectivos.