Nematodos fitoparásitos en cultivos costarricenses

UNIVERSIDAD NACIONAL FACULTAD DE CIENCIAS DE LA TIERRA Y EL MAR ESCUELA DE CIENCIAS AGRARIAS LABORATORIO DE NEMATOLOGA
NEMATODOS FITOPARSITOS ASOCIADOS A CULTIVOS AGRCOLAS DE COSTA RICA PROYECTO # 23756
M.Sc ALEJANDRO ESQUIVEL HERNNDEZ Lic. WALTER PERAZA PADILLA
AVANCE 85 % 2010
INDICE INTRODUCCIN ............................................................................................................. 4 JUSTIFICACION .............................................................................................................. 4 RECOLECCION DE MUESTRAS DE SUELO ................................................................. 5 MANEJO Y CUIDADO DE LAS MUESTRAS ................................................................... 8 METODOS DE EXTRACCIN ......................................................................................... 9 EMBUDO DE BAERMAN ........................................................................................... 10 TCNICA DE CENTRIFUGACIN-FLOTACIN ....................................................... 13 EXTRACCIN DE NEMATODOS DE MATERIAL VEGETAL........................................ 18 FIJACIN DE ESPECIMENES ...................................................................................... 19 MONTAJE DE ESPECIMENES EN LMINAS COBB .................................................... 22 CARACTERISTICAS GENERALES DE LOS NEMATODOS ......................................... 27 HABITOS ALIMENTICIOS DE LOS NEMATODOS ....................................................... 28 SNTOMAS..................................................................................................................... 29 ANALISIS DE MUESTRAS E INTERPRETACION ........................................................ 30 LABORATORIO DE NEMATOLOGIA ......................................................................... 32 FORMULARIO PARA INGRESO DE MUESTRAS DE LABORATORIO ........................ 32 INFORMACIN DE CAMPO ......................................................................................... 32 RECOLECCION DE DATOS .......................................................................................... 35 CULTIVOS MUESTREADOS ......................................................................................... 36 FRUTALES ................................................................................................................. 36 HORTALIZAS ................................................................ Error! Marcador no definido. TUBRCULOS .............................................................. Error! Marcador no definido. ORNAMENTALES ......................................................... Error! Marcador no definido. PASTOS ........................................................................ Error! Marcador no definido. PALMAS ..................................................................................................................... 38 GRANOS BSICOS ...................................................... Error! Marcador no definido. CULTIVOS TRADICIONALES ....................................... Error! Marcador no definido. ZONAS MUESTREADAS (MAPA DE DISTRIBUCCIN) . Error! Marcador no definido. COLECCION DE REFERENCIA .................................................................................... 39 PRINCIPALES NEMATODOS ASOCIADOS A CULTIVOS AGRCOLAS DE COSTA RICA ........................................................................................................... 39
_____________________________________________________________________________ Nematodos Fitoparsitos Asociados a Cultivos Agrcolas de Costa Rica.
Peltamigratus .............................................................................................................. 54 Aphelenchus ............................................................................................................... 40 Aphelenchoides .......................................................................................................... 41 Criconemoides ............................................................................................................ 43 Discocriconemella ....................................................................................................... 45 Ditylenchus sp. ........................................................................................................... 49 Meloidogyne exigua .................................................................................................... 69 Aphelenchoides ritzemabosi ....................................................................................... 69 Aphelenchoides besseyi ............................................................................................. 69 Criconemella spp. ....................................................................................................... 69 Hirschmaniella oryzae ................................................................................................ 70 Meloidogyne arenaria ................................................................................................. 70 Meloidogyne exigua .................................................................................................... 70 Meloidogyne incgnita ................................................................................................ 70 Meloidogyne salassi ................................................................................................... 70 Pratylenchus zeae ...................................................................................................... 70 Aphelenchus sp. ......................................................................................................... 70 Aphelenchoides ritzemabosi ....................................................................................... 70 Helicotylenchus spp. ................................................................................................... 70 Meloidogyne incognita ................................................................................................ 70 Xiphinema spp. ........................................................................................................... 70 Xiphinema spp. ........................................................................................................... 71 Meloidogyne arabicida ................................................................................................ 71 Longidorus spp. .......................................................................................................... 71 Meloidogyne incognita ................................................................................................ 71 Pratylenchus zeae ...................................................................................................... 71
INTRODUCCIN
Los nematodos son organismos en forma de gusano que se encuentran prcticamente en todos los hbitat de la Tierra. Comprenden uno de los grupos ms ricos en especies del reino animal y, en trminos de abundancia, constituyen uno de los grupos ms numerosos, pues pueden encontrarse hasta 20.000.000 de individuos por metro
cuadrado de suelo. Los nematodos tienen gran impacto en la economa mundial, ya que son parsitos de cultivos agrcolas que proveen a la humanidad de alimento, fibra, madera, as como de plantas de uso ornamental. Adems son parsitos de
vertebrados, siendo responsanbles de enfermedades importantes en el ser humano y en animales domsticos. Los nematodos que parasitan insectos tienen hoy da un enorme potencial como agentes de control biolgico de plagas insectiles.
Otros nematodos, llamados de vida libre, contribuyen a la sostenibilidad de la biosfera manteniendo la fertilidad de los suelos a travs del reciclaje de nutrientes. Se ha demostrado que las comunidades de nematodos responden en forma diferencial a las alteraciones del ambiente, razn por la cul hoy da, se ha puesto enorme inters en el estudio de los nematodos de vida, como bioindicadores del estado de salud de los suelos y sedimentos acuticos.
JUSTIFICACION
Actualmente se han descrito unas 25.000 especies de nematodos de las cules unas 4000 especies son fitfagas (nematodos que se alimentan del citoplasma de las clulas vegetales). La importancia econmica de muchas especies an se desconoce, sin embargo, un estudio reciente a nivel mundial, revel que las prdidas atribuibles a nematodos fitoparsitos est en el orden de $ 100 billones anuales, lo que equivale aproximadamente entre un 12 a un 15 % de prdida del total de la produccin. Sin embargo, otros autores argumentan que el impacto econmico de los nematodos es probablemente mucho mayor, debido a que los sntomas que causan en las plantas no son especficos y en muchos casos pasan desapercibidos o asignados errneamente a otros patgenos o condiciones inadecuadas del suelo.
Costa Rica no cuenta con datos de prdidas agrcolas debido a los nematodos, sin embargo, su importancia como agentes patgenos se deduce parcialmente de la
importacin anual de nematicidas, que super las 4700 toneladas de ingrediente activo en el periodo 2000 -2004 (Ramrez, 2006) para combatir problemas de nematodos en banano, caf, ornamentales, hortalizas y otros. En Costa Rica aunque sabemos la existencia e importancia econmica de algunos nematodos fitoparsitos vg Radopholus similis en banano, Rhadinaphelenchus cocophilus en palma aceitera y Meloidogyne sp, Pratylenchus sp en caf y ornamentales entre otros, ciertamente carecemos de
informacin sobre la diversidad de especies fitoparsitas asociadas a la mayora de cultivos de importancia agrcola. Segn Luc, Sikora & Bridge (1991) un primer paso en pases, en dnde an se carece de mucha informacin, es la determinacin de los gneros y especies que ocurren en los cultivos, adems de poder establecer su patogenicidad. El objetivo del presente manual es poner a disposicin de estudiantes de agronoma, profesionales y productores, informacin general de los nematodos que ocurren con frecuencia en los cultivos, de tal manera que constituya un elemento de capacitacin, y ayude a la toma oportuna de decisiones, para un manejo adecuado de problemas nematolgicos.
RECOLECCION DE MUESTRAS DE SUELO
Las muestras de suelo para anlisis de nematodos pueden ser recolectadas con varios tipos de herramientas. Sin embargo, el barreno Oakfield (tubo de metlico de 2.2 cm de dimetro interno por 30 centmetros de profundidad) es la herramienta recomendada, ya que la cantidad de suelo que remueve en cada punto de muestreo es de tamao uniforme, lo que es sumamente importante cuando se realizan muestreos con carcter cuantitativo. No obstante, cuando las caractersticas del terreno o disponibilidad de equipo no lo permiten, se puede utilizar un paln o pala de mano, procurando hasta dnde sea posible, remover cantidades equivalentes de suelo en cada punto de muestreo (figura 1).
Figura 1. Muestreo en suelo desnudo con barreno tipo Oakfiled (A); muestreo con paln B A de jardinera en la zona de crecimiento radical (B). El uso de un recipiente de volumen conocido permite tomar unidades de muestreo uniforme en cada uno de los puntos de muestreo seleccionados.
La precisin del muestreo aumenta conforme se incrementa el nmero de muestras; en el caso de reas muy grandes es recomendable dividir el terreno en reas pequeas y muestrearlas individualmente. La distribucin espacial de los nematodos en el campo es tpicamente agregada, por lo que no es recomendable la recoleccin de una muestra aislada en el campo para el anlisis nematolgico. Se requiere que el muestreo brinde el nivel requerido de informacin al menor costo posible, lo cual se logra mediante un muestreo sistemtico, tomando una muestra compuesta de 20 a 50 sub-unidades
(barrenazos) por hectrea (figura.2). El nmero de barrenazos (submuestras) depender del conocimiento previo que se tenga del patrn de distribucin espacial del nematodo de inters.
Figura
2. Muestreo sistemtico en zig zag. Las estrellas representan el sitio de
recoleccin de la muestra. Para una de hectrea de terreno lo recomendable es la recoleccin de 20-30 sub unidades de muestreo (barrenazos).
La mayor densidad de nematodos fitoparsitos se ubica en la zona de crecimiento radical (rizosfera) de las plantas, por lo que es recomendable tomar las muestras de suelo entre los 5 y 30 cm de profundidad. En campos agrcolas, el perfil de suelo entre los 0 y 5 cm de profundidad, esta sujeto a variaciones diarias de temperatura y humedad, factores que influyen directamente en la densidad de nematodos fitoparsitos. Si el muestreo se lleva a cabo en presencia del cultivo, es recomendable incluir muestras de raz para su respectivo anlisis. Otro aspecto importante a considerar al momento del muestreo, es la humedad del suelo ya que la sobrevivencia de los nematodos decrece considerablemente en suelos secos o saturados. Una vez recolectada la muestra, se debe agregar una etiqueta con toda la informacin pertinente (nmero de identificacin, localidad, cultivo, fecha de recoleccin y colector).
La etiqueta debe colocarse preferiblemente fuera de la bolsa (figura 3), o en su defecto adentro de la bolsa, pero protegida en una bolsa plstica ms pequea con la finalidad de evitar que la etiqueta se deteriore por la humedad. Es recomendable anotar la informacin con lpiz o con marcador especial, dado que los lapiceros y marcadores corrientes, la tinta se corre con la humedad y podra hacer ilegible la informacin.
Figura 3. Muestra de suelo, mostrando una etiqueta de cartulina con la informacin bsica requerida en el laboratorio.
MANEJO Y CUIDADO DE LAS MUESTRAS
El manejo y cuidado de la muestra entre la recoleccin y el proceso de extraccin, es un aspecto que no se debe descuidar. El perodo de almacenamiento debe ser en lo posible muy corto, sin embargo, cuando se esta en sitios alejados y la muestra no puede ser enviada en forma inmediata al laboratorio, los dos parmetros ms importantes que se deben cuidar durante el almacenamiento y transporte son la temperatura y la humedad.
Para evitar el secado y mantener la humedad, es recomendable empacar las muestras (suelo o races) en bolsas plsticas bien cerradas; nunca exponindolas directamente al sol o en contacto con equipos que generen temperaturas elevadas. Lo
ms recomendable es almacenarlas en cajas o contenedores trmicos (figura 4). Algunos estudios han demostrado que el uso de cajas de estereofn o hieleras, permite recuperar hasta 3 veces ms especimenes, en relacin a muestras almacenadas en contenedores no aislados. Muestras vegetales (races, tallos, bulbos, etc) se pueden almacenar por unos das en el refrigerador a una temperatura entre 5 7 grados Celsius
Un manejo inapropiado durante el transporte, almacenamiento y extraccin, puede ocasionar un alto porcentaje de mortalidad, dando como resultado datos equivocados en relacin a las densidades de poblacin, lo que puede incidir directamente en un manejo oportuno del problema.
Figura 4. Almacenamiento y envo de muestras al laboratorio en un contenedor de aislamiento trmico (hielera).
METODOS DE EXTRACCIN
Hay varios mtodos de extraccin de nematodos usados en forma rutinaria en los laboratorios de nematologia. La seleccin del mtodo de extraccin depende de varios factores: objetivo del estudio, eficiencia deseada, equipo disponible y condicin de la muestra entre otros. Hay que tener presente que ningn mtodo de extraccin disponible hoy da, es capaz de remover el 100 % de los nematodos presentes en la muestra, por lo que hay elegir aquel con las menores deficiencias. Con la finalidad de
determinar las poblaciones de nematodos en un cultivo dado, es de suma importancia contar con un laboratorio de referencia, donde se utilice una tcnica estndar de extraccin. Cuando se envan muestras cruzadas a distintos laboratorios, se debe tener presente, que los mtodos de extraccin pueden variar y como consecuencia el resultado final.
Hay dos procesos bsicos mediante los cuales los nematodos pueden ser removidos del suelo o del material vegetal. Uno de ellos depende de la movilidad de los
nematodos para su extraccin, mientras que el otro es capaz de extraer formas inactivas y estados no mviles, mediante una corriente de agua ascendente, o por medio de una solucin de gravedad especfica superior a los fluidos del nematodo. Todas las tcnicas de extraccin estn basadas en estos procesos o combinacin de ambos, lo importante es elegir el mtodo adecuado de acuerdo con los objetivos del estudio. Algunas tcnicas de extraccin utilizadas en algunos laboratorios son las siguientes: embudo de Baerman, tcnica de cribado y centrifugacin en solucin azucarada, mtodo de cribado y decantacin de Cobb, elutriador de Oostenbrink, aparato de Fenwick para extraccin de quistes, etc. A continuacin se describe y discute dos mtodos de extraccin muy utilizados rutinariamente en los laboratorios de nematologa: embudo de Baerman y la tcnica de cribado y centrifugacin en solucin azucarada.
EMBUDO DE BAERMAN
Un buen ejemplo, en donde se requiere que los nematodos se muevan a travs de la muestra para su extraccin, es el embudo de Baermann. Existen varias modificaciones del mtodo original, en donde bsicamente han sido reemplazados algunos componentes por otros ms eficientes.
Los requerimientos bsicos de esta tcnica consisten en un embudo de vidrio o de plstico de tamao mediano. En su parte inferior se le ajusta una manguera de hule suave, que se cierra mediante una pinza de presin tipo mohr. El embudo se coloca en un soporte y se llena con agua potable. Posteriormente, pequeas cantidades de suelo
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(50 100 cc), material vegetal u otro tipo de materia orgnica, son colocadas dentro de una bolsa de tela porosa o papel, la cual se sumerge suavemente en el agua del embudo. Una de las variantes que se puede implementar consiste en colocar a pocos milmetros del borde superior del embudo, un cedazo o malla de alambre cuya funcin es soportar la muestra, la que es vertida sobre tela o papel, cuya consistencia, textura y porosidad puede variar (figura 5).
Figura 5. Embudo de Baerman mostrando sus principales componentes.
La tcnica del embudo de Baermann modificado segn Christie y Perry, ( figura 6) consiste en suspender el suelo en un determinado volumen de agua, y despus de un corto perodo de reposo, la suspensin se vierte sobre un juego superpuesto de cribas de 100 y 400 mallas. El suelo retenido en la criba ms fina, se transfiere a un cilindro con fondo de tela, que posteriormente se coloca en el embudo. Despus de 24 a 48 horas, todas las formas activas de nematodos han pasado a travs de la tela o papel y pueden ser recogidas en un pequeo volumen de agua al retirar la pinza mohr de la manguera.
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1. Submuestra de 100 cc de suelo.
2. Dos lavados, permitiendo 30 s de suspensin.
3. Tamizado a travs de dos tamices de 100 y 400 mallas
4. Suelo a un cilindro de PVC con un fondo de tela.
5. El cilindro se coloca en el embudo de Baermann procurando que el papel haga contacto con el agua
Figura 6. Mtodo de extraccin de nematodos mediante la tcnica de embudo de Baerman modificado.
Entre las ventajas de este mtodo estn el bajo costo y lo portabilidad del equipo, mientras que dentro de las desventajas se pueden citar la dependencia del mtodo de la movilidad de los nematodos, que difiere entre especies y estados del ciclo de vida, la cual adems puede ser afectada desde que la muestra es tomada en el campo.
La carencia de oxgeno, especialmente en la base del embudo donde los nematodos son colectados y el problema de que estos se alojan en las paredes inclinadas del mismo, son otras desventajas del mtodo. Sin embargo, estos
inconvenientes pueden ser superados, sustituyendo el embudo por una palangana pequea y colocando la muestra en el papel toalla o tela dentro de un cilindro de PVC de 17 cm de dimetro con fondo de malla. Es importante sujetar al fondo del cilindro de PVC un par de alambres, la separacin de unos milmetros del fondo de la palangana,
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favorece el paso de los nematodos a travs del papel filtro. La palangana debe de contener un volumen de agua suficiente que haga contacto con la muestra colocada en el papel filtro (figura 7). Todas las formas activas de nematodos son recuperadas despus de 18 a 24 horas. La eficiencia del mtodo depende entre otras cosas, de la
movilidad de los nematodos y el tipo papel filtro o tela utilizada.
Figura 7. A) Cilindro de PVC con fondo de malla y dos alambres, palangana plstica, papel filtro, B) Bandeja ensamblada y C) Bandeja ensamblada con muestra de suelo.
TCNICA DE CENTRIFUGACIN-FLOTACIN
La tcnica fue introducida por Caveness y Jensen (1955), quienes mezclaron y centrifugaron pequeas muestras de suelo (<4ml) con agua. Posteriormente mediante una segunda centrifugacin en solucin de azcar, los nematodos eran recuperados del suelo. El principio de la tcnica, es la recuperacin de los nematodos por flotacin, mediante soluciones de gravedad especifica superior a los fluidos del nematodo. Por el bajo costo, en la mayora de laboratorios se utiliza soluciones preparadas con azcar de caa, sin embargo, soluciones de sulfato de magnesio y sulfato de zinc tambin pueden ser utilizadas. Cuando se trata de suelos arcillosos, es recomendable agregar a la muestra algn tipo de detergente (metafosfato de sodio, carbonato de sodio) que ayude a la dispersin de las partculas de arcilla y favorezca la extraccin de los nematodos. De lo contrario muchos nematodos pueden quedar atrapados en los agregados del suelo.
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El estrs osmtico ocasionado por estas soluciones puede matar o distorsionar los nematodos, por lo tanto es necesario enjuagarlos con suficiente agua para ayudar a la recuperacin. Actualmente la tcnica, es utilizada rutinariamente en muchos huevos, estados
laboratorios, debido especialmente a que es efectiva para extraer
inmviles, formas inactivas y nematodos muertos. Adems es un mtodo rpido, que permite procesar y leer gran cantidad de muestras en pocas horas. Ligeras
modificaciones se pueden encontrar en la literatura, en relacin al arreglo de los tamices, nmero de lavados, tiempo y velocidad de centrifugacin, y gravedad especfica de la solucin extractora.
Procedimiento 1. Tomar una submuestra de suelo (100 gr) homogeneizado para la extraccin de nematodos. Se deben eliminar las races, piedras y cualquier otro desecho ( 8a). 2. Colocar la muestra en una cubeta y lavarla directamente bajo un chorro de agua a presin, la cantidad de agua agregada no debe superar la mitad de la misma (8b y 8c) 3. La suspensin resultante se agita bien con una paleta de medera u otro utensilio y se deja reposar alrededor de 30 45 segundos 4. Posteriormente se procede a decantar la solucin sobre un juego de tamices superpuesto de 100 y 400 mallas. La operacin se puede repetir una vez ms con el suelo remanente en la cubeta (8 d y 8e) 5. Con la ayuda de un frasco lavador (pizeta) los residuos retenidos en la criba de 400 mallas se transfieren a tubos de centrifuga de 50 ml, con el cuidado de que stos una vez colocados en la centrifuga queden balanceados (8f). 6. Se procede a centrifugar de 3 a 4 minutos alrededor de 3000 r.p.m. Se decanta cuidadosamente el sobrenadante y se agrega una solucin de azcar la que se prepara pesando 484 gr. de azcar de caa y aforando posteriormente con agua corriente a un litro (8g, 8h, 8i). 7. Se resuspende nuevamente el suelo y se centrifuga a la misma velocidad por 3 minutos (8j)
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8. El sobrenadante que contiene los nematodos es vertido sobre una criba de 400 mallas, y el exceso de azcar adherida a los nematodos, es removido lavando con suficiente agua. (8k, 8l). Por ltimo, los nematodos recuperados, se transfieren a un plato de conteo o siracuza para su examen (8m). Por medio de esta tcnica se pueden recuperar prcticamente todos los tipos de nematodos del suelo, y el proceso entero puede realizarse en menos de 10 minutos.
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a. Una vez homogenizada y cuarteada la submuestra se procede a pesar 100 cc de suelo.
b. La submuestra de 100 cc de suelo es colocada en un balde.
c. Se adiciona agua hasta llenar unos del balde con el objetivo de suspender la submuestra de suelo. Deja en reposo de 30-45 s.
d. La suspensin es pasada a travs de un juego de tamices supersupestos de 100 y 400 mallas respectivamente.
e. El movimiento constante del tamiz permite un mejor paso de la suspensin de suelo.
f. Recoger en un tubo de ensayo los residuos retenidos en el tamiz de 400 mallas
g. Centrifugar durante 3 minutos a 3000 rpm.
h. Descartar el sobrenadante.
i. Adicionar solucin extractora a base de azcar con una densidad especfica de 1.18.
j. Centrifugar nuevamente minutos a 3000 rpm.
k. Los nematodos son recuperados en un tamiz pequeo de 400 mallas. m. Finalmente, los nematodos recuperados se transfieren a una cajita de conteo.
l. Eliminar el exceso de azcar por lavado.
Fig. 8. Extraccin de nematodos por el mtodo de tamizado y centrifugacin azucarada.
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EXTRACCIN DE NEMATODOS DE MATERIAL VEGETAL
Algunas de las tcnicas ya discutidas pueden ser utilizadas para la extraccin de nematodos de material vegetal. As por ejemplo, el empleo del embudo de Baermann o el mtodo de centrifugacin-flotacin son recomendables para la extraccin de nematodos endoparsitos migratorios.
El examen directo en el estereoscopio a baja magnificacin, es otra tcnica que se emplea para pequeas cantidades de material vegetal. La tcnica es muy sencilla, y consiste primero en lavar las races suavemente de todo resto de suelo. Posteriormente, las races son trasladadas a placas petri, siracuzas o vidrios reloj, a los que previamente se les ha adicionado una pequea cantidad de agua. Con la ayuda de agujas de
diseccin, el material se va rasgando cuidadosamente para liberar a los nematodos. Los nematodos liberados flotan y pueden ser recolectados con una microaguja o una micropipeta. Al igual que con el suelo, previo al anlisis, las races deben mantenerse a una temperatura y humedad adecuada y examinarse tan pronto como sea posible.
La maceracin de tejidos con ayuda de una licuadora es otra tcnica adecuada para la obtencin de nematodos endoparsitos. Se toman aproximadamente 10 gr. de races, se cortan en trozos de 2 a 3 cm de longitud y se colocan dentro de una licuadora. Se agrega cierta cantidad de agua y dependiendo de la dureza del material, se licua a mxima velocidad de 20 a 60 seg. La suspensin resultante se vierte sobre un juego de cribas de 100 y 400 mallas. Los nematodos junto con los desechos vegetales retenidos en la criba ms fina, son trasladados al embudo de Baermann, en donde se logra la separacin final. Una vez macerado el tejido en la licuadora, otra opcin es extraer los nematodos con la tcnica de centrifugacin en solucin azucarada, similar a lo explicado para las muestras de suelo.
En la figura 9, se ilustran otras tcnicas utilizadas en la extraccin de nematodos. El elutriador de Oostenbrink y el mtodo de cribado y decantacin de Cobb, se basan en la velocidad de asentamiento de las partculas de suelo suspendidas en agua, respecto a la de los nematodos.
Figura 9. Elutriador de Oostenbrink para la extraccin de nematodos de suelo. Equipo ubicado en el laboratorio de nematologa de la Escuela de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional.
FIJACIN DE ESPECIMENES Depediendo de los objetivos de la investigacin, en ocasiones es necesario preservar los nematodos en algn fijador para estudios posteriores. Los fijadores los podemos dividir en dos grupos de acuerdo a su reaccin con las protenas solubres: 1) Fijadores coagulantes como el etanol al 96 % y 2) Fijadores no coagulantes como la formalina y el cido actico glacial . El etanol tiene alto poder deshidrante y moderada penetracin, coagula muchas protenas, pero no nucleoprotenas, tiene la desventaja que endureze y encoge los tejidos tratados. El cido actico tiene olor penetrante, es misible en agua y etanol y precipita nucleoprotenas. Es utilizado en la preparacin de fijadores
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compuestos, por su capacidad de contrarestar el encogimiento producido por otros reactivos. La formalina es un gas soluble en agua con alta capacidad de penetracin y preservacin de protenas, lpidos y glicgeno. Los mejores resultados de fijacin, se obtienen concentrando los nematodos en una pequea cantidad de agua (2 ml) y aplicandoles formalina caliente (80 a 90 C) al 4 %. Este procedimiento permite matar y fijar los nematodos en un solo paso, adems los nematodos se mantienen en buen estado de conservacin por tiempo indefinido. La formalina es muy utilizada en los laboratorios de nematologa, sin embargo, su manejo requiere de cierta precaucin, ya que se ha demostrado que es daino para el ser humano. La figura 10, muestra paso a paso el proceso de fijacin de nematodos, el procedimiento ilustra el protocolo seguido en el laboratorio de nematologa de la Escuela de Ciencias Agrarias.
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Cuadro 1. Algunos fijadores de mayor uso en nematologa y su forma de preparacin Fijador TAF Reactivo Trietanolamina Formalina 40% Agua destilada FA 4:1 Formalina 4 % cido actico glacial Agua destilada Volumen 2 ml 7 ml 91 ml 10 ml 1 ml 89 ml El Observaciones fijador se mantiene
estable por largo tiempo y los nematodos conservan
excelente aparaciencia para estudios taxonmicos Es un fijador que preserva muy bien las estructuras de los nematodos, sin
embargo, algunas de ellas pueden decolarse con el tiempo.
Formalina -Glycerol
Formalina 4 % Glycerol Agua destilada
10 ml 1 ml 89 ml
Excelente
fijador
por
su
capacidad de penetracin y preservacin. nematodos Los pueden
almacenarse por periodos indefinidos de tiempo. Los gases son dainos para la salud, requierendo capilla de gases y equipo de
proteccin para su manejo.
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1. Como primer paso, los nematodos

recuperados se transfieren a un plato de conteo para su respectiva cuantificacin.
2. La suspensin de nematodos se
transfiere a precipitacin un embudo
de
3. Concentracin de los nematodos en un pequeo volumen de agua. Se puede utilizar una bomba de vaco para acelerar el proceso.
4. Agregar formalina al 4% a una temperatura aproximada de 80 a 90 C.
5. Una fra la formalina, los nematodos fijados se pueden almacenar indefinidamente en viales con tapa hasta su utilizacin.
Fig. 10. Proceso de fijacin de nematodos con formalina caliente al 4 %. Por la toxicidad de la formalina es recomendable realizar la fijacin en una capilla de gases y con el equipo de proteccin requerido
MONTAJE DE ESPECIMENES El estudio detallado de los nematodos requiere la preparacin de lminas temporales, semipermanentes o permanentes que faciliten la observacin de las caractersticas ms relevantes de los especimenes. Ciertas estructuras y rganos internos se obsevan mucho mejor en nematodos vivos que en especimenes fijados, no obstante, la observacin de las caractersticas se torna difcil si el nematodo esta en movimiento. Una forma rpida que permite
resultados de alta calidad es la preparacin de montajes temporales, sin embargo, las observaciones deben hacerse en un periodo de tiempo muy corto, debido a la poca estabilidad de estas preparaciones. La tcnica consiste en trasnsferir el nematodo con una microaguja a una gota de agua colocada previamente en un portaobjetos. Hay que asegurarse de colocar el nematodo en el fondo y en el centro de la gota. Si el nematodo es muy activo y presenta mucha movilidad, lo recomendable es pasar la preparacin suavemente por la flama del mechero de alcohol para inmovilizar, matar y relajar el nematodo. Posteriomente se coloca el cubreobjetos para la observacin al microscopio. Las preparaciones se pueden sellar con esmalte transparente de uas para una mayor durabilidad de la lmina. En ocasiones resulta conveniente la preparacin de montajes
semipermanentes. Son muy tiles, cuando por la naturaleza de la investigacin, es necesario preservar los montajes de especmenes por ms tiempo, que permite al investigador realizar las mediciones, fotografas y dibujos de los nematodos
recolectados. Las preparaciones semipermanentes son especialmente tiles para la enseanza de la anatoma y morfologa de los nematodos, ya que permite al profesor hacer las preparaciones con cierta antelacin. La tcnica es similar a la explicada
anteriormente, la diferencia consiste en transferir el nematodo a una gota de lactofenol azul o formalina como preservante, en lugar de agua. Posteriormente se coloca el cubreobjetos y la preparacin se puede sellar con parafina, esmalte de uas o glycel. La estabilidad y durabilidad de estas preparaciones puede ser de dis, semanas, meses o
incluso algunos aos, no obstante, conforme pasa el tiempo ciertas estructuras tienden a desvanerse y los montajes pierden la calidad deseada. Los montajes permanentes son recomendados para mantener los especimenes en colecciones de referencia en museos, universidades e institutos de investigacin. Hay que recordar que toda especie (animal o vegetal) descrita en la literatura y considerada como vlida, debe tener al menos un voucher de respaldo en alguna coleccin que valide su existencia. La preparacin de un montaje permante requiere de un procemiento un poco ms largo que describimos a continuacin. MTODO MODIFICADO DE SEINHORST Este mtodo ha sido utilizado por el laboratorio de nematologa de la Escuela de Ciencias Agrarias desde 1996. Los nematodos que se mantienen en la coleccin,
algunos de ellos con ms de 10 aos de almacenamiento, permancen en perfecto estado. El mtodo fue introducido por el Dr Seinhorst en 1959, algunas variantes se han introducido al protocolo original, siendo lo correcto denominarlo Mtodo modificado rpido de Seinhorst . En resumen, el objetivo del procedimiento que se describe a continuacin, es transferir mediante un proceso lento los nematodos preservados en formalina o cualquier otro fijador a glicerina pura. La densidad de la glicerina impide el crecimiento de hongos o bacterias que puean deteriror al nematodo y los mantiene en buenas condiciones por tiempo indefinido, siempre y cuando cada portaobjetos se hayan sellado adecuadamente. 1. El primer paso es fijar los especimenes con formalina caliente al 4 %. Tambin se pueden utilizar otros fijadores como el TAF o el FA 4:1. Es recomendable mantener los nematodos en viales bien cerrados al menos 2 semanas en el fijador. 2. Mediante un proceso lento, el paso que sigue es remover la formalina del vial y reemplazarla por una solucin (S1) contituida por 20 % de etanol, 1 % de
glicerina pura anhydra y 79 % de agua destilada. Una tcnica empleada para remover la formalina, consiste en dejar los viales con nematodos en reposo por al menos 1-2 horas, permitiendo que los nematodos se precipiten al fondo del vial.
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Posteriomente con vaco se remueve partes de la formalina cuidando de no perder los nematodos, agregando posteriormente S1. Los nematodos deben
permanecer en esta solucin de 24 a 48 horas. El proceso se repite una vez mas, de tal forma que se disminuya los residuos de formalina presentes, iniciando simultnemamete la infiltracin lenta de glicerina. 3. Al da siguiente se remueve nuevamente partes de la solucin S1 y los viales sin tapa se transfieren a un desecador o recipiente hermtico que contenga en el fondo alcohol al 95 %. Los viales no deben tener contacto directo con el alcohol, por lo que es necesario colocar una plataforma o soporte adentro del desecador. 4. El desecador se coloca en una incubadora calibrada a 40 C durante 3 das. El objetivo es aumentar la concentracin de alcohol lentamente en los viales. 5. Trancurrido el tiempo indicado, el desecador se retira de la incubadora y el contenido de los viales se transfiere a cajas petri de 5 cm. Cuando se manejan varias muestras simultneamente, es muy importante etiquetar cada vial y cada caja petri con una pequea colilla de papel. 6. Agregar a las cajas petri, solucin (S2) constituida por 7 % de glicerina pura anhydra y 93 % de etanol. Las cajas se mantienen destapadas a temperatura ambiente y cuando se ha evaporado el 50 % de la solucin, se procede agregar solucin (S3) con un porcentaje de glicerina pura anhydra del 30 % y 70 % de etanol. 7. Dejar las cajas abiertas a temperatura ambiente para favorecer la evaporacin del alcohol. Cualquier remante de alcohol se puede eliminar colocando las cajas petri en la incubadora a 40 C por un par de horas. Las cajas con los nematodos en glicerina pura se deben guardar tapadas en un desecador con silica gel. 8. Los nematodos estan listos para hacer montajes permanentes en portaobjetos convencionales o en laminillas de Cobb, mediante la tcnica de anillo de parafina. Cada lmina permanente debe de contener informacin bsica necesaria para su adecuado almacenamiento: nmero de recolecta, lugar de recoleccin, cultivo, cantidad y sexo de los especimenes.
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Fig.11. Reactivos (S1,S2 y S3), desecador e incubadora requeridos para el proceso de infiltracin de los nematodos en glicerina pura por el mtodo rpido de Seinhorst.
2. Un vez caliente el tubo se coloca en paraplast o parafina 1. En un mechero, se calienta un tubo de cobre con mango de madera
3. Inmediatamente el tubo caliente con paraplast se coloca en el portaobjetos.
4. Lamilnilla de Cobb con anillo de parafina terminado.
5. Nematodos en glicerina, se pescan con ayuda de una microaguja. .
6. El nematodo es transferido a una gotita de glicerina pura previamente colocada en el centro del anillo de parafina. Se coloca el cubrertaobjetos.
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7. En un plantilla caliente a 40 C se coloca la lmina hasta que el anillo de parafina se funda.
8. Montaje permanente terminado
Figura 12. Ilustra la preparacin de montajes permanentes mediante la tcnica de anillo de parafina. Los nematodos son montados en laminillas de Cobb o en su defecto en portaobjetos de vidrio.
CARACTERISTICAS GENERALES DE LOS NEMATODOS
Los nematodos comparten las siguientes caractersticas: vermiformes (forma de gusano), son redondos en seccin transversal, presentan simetra bilateral (cuerpo en dos mitades idnticas), los nematodos fitoparsitos y de vida libre son hialinos
(transparentes), el cuerpo no es segmentado. Tienen seudoceloma (presencia de un espacio lleno de lquido entre el tubo digestivo y la pared del cuerpo) y son tripoblastos (presencia de ectodermo, mesodermo y endodermo). Algunas especies muestran un dimorfismo sexual muy marcado (machos y hembras con formas diferentes) en dnde las hembras adultas sufren de atrofia muscular, adquieren forma de pera, redonda o arionada lo que les impide el movimiento. Una de las caractersticas que identifica a un nematodo fitoparsito es la presencia de un estilete en la parte anterior del cuerpo (cabeza), la cual es una estructura protrctil (que puede extenderse hacia afuera) y hueca a manera de aguja hipodrmica que le permite al nematodo penetrar la raz, as como perforar las clulas vegetales y extraer sus nutrimentos. Los nematodos fitoparsitos son de pequeo tamao, oscilando entre los 250 micras los ms pequeos (Ej: Paratylenchus sp) a los 5 mm los de mayor tamao (Ej : Longidorus sp) y de 15 a 30 micras de ancho. La pared del cuerpo de los nematodos est constituida por una cutcula externa, una hipodermis y una capa de msculos somticos. La cavidad interna es un seudoceloma que est llena de un fluido viscoso en donde se encuentran el
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sistema digestivo, reproductor, excretor y nervioso. El movimiento del fluido seudocelomtico dentro de la cavidad corporal, lleva a cabo las funciones de
respiracin y circulacin. En la figura 11 a, 11 b y 11 c se ilustra algunas caractersticas de los nematodos.
Figura 13. Algunas de las caractersticas de los nematodos. A) Estilete, B) regin genital de la hembra (vulva) y C) regin genital del macho (espcula).
HABITOS ALIMENTICIOS DE LOS NEMATODOS
Los nematodos que se alimentan de las plantas son parsitos obligados. Esto significa que requieren de un hospedero susceptible con races sanas para que puedan llevar a cabo las funciones de alimentacin, reproduccin y crecimiento. La poblacin tiende a decrecer en la medida que el sistema radical se deteriora. De acuerdo a la forma como los nematodos se alimentan de sus hospederos se pueden clasificar en tres grupos: a) nematodos ectoparsitos, b) nematodos semiendoparsitos y c) nematodos
endoparsitos. Los nematodos ectoparsitos no penetran al interior de los tejidos de la planta, obtienen su alimento perforando las clulas vegetales con el estilete, que es una estructura ubicada en la parte anterior del cuerpo y funciona a manera de aguja hipodrmica. En general los nematodos ectoparsitos tienen estiletes largos y la profundidad a la que pueden alimentarse depende de la longitud del mismo (Ejemplos: Hemicycliophora sp y Criconemella sp). Los nematodos semi-endoparsitos se caracterizan por que slo introducen la parte anterior de su cuerpo en la raz, la seccin posterior se mantiene en el suelo (Ejemplos: Rotylenchulus sp y Tylenchulus sp). Los nematodos endoparsitos penetran totalmente la raz, se alimentan, crecen, maduran y depositan los huevos dentro de la raz o unidos a sta. Estos nematodos se dividen en dos grupos: endoparsitos migratorios y endoparsitos sedentarios. Los primeros se
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introducen por completo dentro de la raz, se desplazan a travs del tejido alimentndose conforme se movilizan (Ejemplos: Pratylenchus sp y Radopholus similis) mientras que en el segundo grupo, los nematodos tienen un sitio fijo de alimentacin, pierden la movilidad y adquieren forma periforme o globosa (Ejemplos: Meloidogyne sp y Heterodera sp). En la figura 14 se ilustra los hbitos alimenticios de varios nematodos fitoparsitos.
Figura 14. Ampliacin de un pelo radical mostrando los distintos hbitos alimenticios de los nematodos fitoparsitos. A) nematodo ectoparsito, B) nematodo endoparsito migratorio, C) nematodo endoparsito sedentario y D) nematodo semiendoparsito
SNTOMAS
Los nematodos fitoparsitos, al alimentarse de las races de las plantas, pueden causar daos destructivos de las clulas por accin mecnica o enzimtica, daos adaptativos por modificacin de las clulas del hospedero y daos neoplsticos que inducen a crecimiento de nuevo tejido. La planta se ve afectada cuando los nematodos se
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encuentran en altas densidades, provocando un deterioro paulatino del sistema radical,

el cul se manifiesta en la parte area de la planta de distintas maneras: pobre crecimiento, marchitez generalizada, baja produccin, clorosis, defoliacin, cada prematura de flores y frutos. A nivel de races es posible observar races cortas y engrosadas, necrosis, ramificacin anormal y agallas o ndulos radicales (figuras 15 a y 15 b). Los sntomas varan de acuerdo al tipo de nematodo presente y susceptibilidad del cultivo, sin embargo, a nivel de campo los sntomas causados por nematodos son difciles de distinguir, ya que fcilmente se pueden confundir con sntomas causados por otros patgenos de suelo o factores abiticos. En este sentido, es indispensable tomar muestras de suelo y raz de las plantas afectadas y enviarlas a un laboratorio competente para su respectivo anlisis. El diagnstico debe ser comprobado en el laboratorio y fundamentarse en el tipo de nematodo y densidad poblacional detectada en el suelo como en las races. Los sntomas producidos por especies que afectan la parte area de la planta como tallos y hojas (figura 15 c), son ms especficos y generalmente estn asociados con la presencia de una sola especie de nematodo, lo que contrasta con lo que sucede en el suelo, en dnde varios gneros y especies pueden simultneamente parasitar la misma planta hospedera.
A A B
B C
Figura 15. Agallas radicales causadas por Meloidogyne sp (A); necrosis de rizoma causado por Pratylenchus sp (B); Manchas necrticas foliares en frijol causadas por Aphelenchoides besseyi.
ANALISIS DE MUESTRAS E INTERPRETACION
En principio, ningn productor o empresa debera implementar el control de nematodos en un determinado cultivo, si desconoce que nematodos estn presentes y en que
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densidad poblacional. La presencia de nematodos en el suelo, no significa necesariamente que se esta ante un problema fitosanitario. El combate o manejo de nematodos, implica la recoleccin de muestras en el campo, el anlisis de las mismas en un laboratorio especializado, la interpretacin de los resultados y la implementacin de una estrategia adecuada de manejo. El decision final debe estar en funcin de los nematodos detectados en la muestra, la densidad poblacional y la susceptibilidad del cultivo
Cuando el muestreo se realiza en forma inadecuada, los resultados pueden conducir a una estimacin errnea de la poblacin, por lo tanto, la implementacin de un plan adecuado de muestreo acorde a los objetivos del estudio es absolutamente necesario. Cuando hay desconocimiento por parte del personal de campo sobre la forma de realizar un muestreo de nematodos, lo recomendable es solicitar la asesora respectiva.
Otro factor a considerar, es el mtodo de extraccin empleado en el laboratorio y el peso de muestra utilizado. Ningn mtodo de extraccin es 100 % eficiente, por lo que los datos pueden variar de acuerdo al protocolo de extraccin utilizado en cada laboratorio. Esto adquiere especial relevancia cuando el productor o empresa enva muestras a distintos laboratorios para obtener informacin cruzada, lo que es totalmente vlido, siempre y cuando ambos laboratorios empleen los mismos protocolos de extraccin que permita al interesado llegar a conclusiones vlidas.
A continuacin se presenta el formato de recibo de muestras y el tipo de informe que emite el laboratorio de nematologa de la Escuela de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional. La informacin anexa a la muestra es vital para el personal del laboratorio y contribuye substancialmente a la interpretacin de los resultados. El
informe que recibe el usuario incluye: datos de identificacin de la muestra, mtodo de extraccin utilizado, cuadro de resultados (identificacin y densidad poblacional de los nematodos detectados) y comentarios generales. Este formato puede variar de acuerdo a los protocolos de cada laboratorio.
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UNIVERSIDAD NACIONAL LABORATORIO DE NEMATOLOGIA ESCUELA DE CIENCIAS AGRARIAS
FORMULARIO PARA INGRESO DE MUESTRAS DE LABORATORIO
Nombre del productor o empresa________________________Telfono_________ Procedencia de la muestra (localidad)______________________ Fecha de muestreo___________ Fecha de ingreso de la muestra ___________ Cultivo_________________ Edad aproximada del cultivo_______________ Muestra: Suelo Raz
Tipo de muestreo: Sntomas (aspecto general del cultivo): _____________________________ __________________________________________________________________
INFORMACIN DE CAMPO Cultivo actual ________________ Cultivos previos _________________________ Patrn de distribucin del problema: plantas aisladas___ en parches_________ en hileras________ distribucin uniforme__________ Cunto tiempo hace que empez el dao?____________________________ Agroqumicos aplicados? Si No _________________________
Frecuencia de aplicacin____________________________________________
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ANLISIS NEMATOLGICO
ESCUELA DE CIENCIAS AGRARIAS
UNIVERSIDAD NACIONAL
Apartado Postal 86-3000 Heredia, Costa Rica Tel: (506) 2277-3299
Heredia, 31 de enero del 2007 1. DATOS GENERALES Productor o empresa: Finca Experimental Santa Luca. Escuela de Ciencias Agrarias, Universidad Nacional. Tel: 2237 15 75 Fecha del muestreo: 30 de enero de 2007 Fecha de ingreso de la muestra: 30 de enero de 2007 Fecha de procesamiento: 30 de enero de 2007 Cultivo: Chile Edad: Cosecha Muestra: Suelo y Raz. Localidad: Finca Experimental Santa Luca. Barva, Heredia.
2. MTODO DE EXTRACCIN Tcnica de centrifugacin en solucin azucarada (Jenkins, 1964), utilizando dos lavados, 30 segundos de suspensin, un juego de tamices superpuesto de 100 y 400 mallas y una solucin extractora de sacarosa de 1.18 de gravedad especfica. Cada muestra fue homogenizada antes del anlisis nematolgico. Los nematodos fueron contados e identificados en un microscopio invertido a 200 X. Los resultados estn referidos a una submuestra de 100 gramos de suelo y 10 gramos de raz respectivamente.
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RESULTADOS Cuadro 1. Nmero de nematodos fitoparsitos y de vida libre detectados en 100 gr de suelo y 10 gr. de peso fresco de raz. Chile Nematodos detectados Meloidogyne sp (J2) Meloidogyne sp (machos) Trichodorus sp Nematodos de Vida Libre 100 gr suelo 225 1 111 10 gr raz 816 2 39
3. OBSERVACIONES La densidad de juveniles de Meloidogyne sp (J2) detectada tanto en suelo como en raz es considerada de importancia econmica. El impacto en la sanidad y rendimiento puede ser mayor en siembras posteriores de cultivos susceptibles al nematodo. Se recomienda mantener un plan de muestreo, un registro del historial de la parcela e implementar un plan de manejo para mitigar el efecto de los nematodos. El uso de cualquier producto qumico, requiere seguir estrictamente las recomendaciones del fabricante y la asesora de un profesional en agronoma, con la finalidad de obtener los mejores resultados y minimizar los efectos negativos en el ambiente Atentamente,
__________________. Alejandro Esquivel H. Nematlogo Laboratorio de Nematologa Universidad Nacional
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RECOLECCION DE DATOS
La informacin sobre los nematodos fitoparsitos que se presenta en este manual, es el resultado de varios aos de investigacin, dnde el personal del laboratorio de nematologa de la Escuela de Ciencias Agrarias de la UNA, program visitas a distintos agroecosistemas y el muestreo de suelo y raz de distintos cultivos. El plan de muestreo, consisti en delimitar un rea de aproximadamente 400 m 2, colectndose un muestra compuesta de suelo y raz de cinco puntos al azar en la base de la planta hospedera. En cada punto de muestreo se registraron las coordenadas geogrficas mediante una unidad porttil de posicionamiento global, as como la informacin de campo respectiva. En el laboratorio, cada muestra fue homogenizada y cuarteada procesndose una submuestra de 100 gramos de suelo y 10 gramos de raz respectivamente.
D A B C C
Figura 15. Ilustra algunas de las etapas de la recolecta, procesamiento e identificacin de nematodos por parte del personal del laboratorio de nematologa de la Escuela de Ciencias Agrarias. Recoleccin de muestras (A); unidad porttil de posicionamiento global (B); preparacin de alcuotas para conteo de nematodos (C); identificacin (D).
Tambin se logr recolectar informacin importante sobre los nematodos asociados a los cultivos a travs del programa de venta de servicios que ofrece el laboratorio de nematologa de la Escuela de Ciencias Agrarias. Muestras de suelo y raz procedentes de distintas regiones del pas y de distintos cultivos se procesaron y la informacin obtenida se incorpor a la base de datos sobre los nematodos fitoparsitos asociados a los cultivos agrcolas de Costa Rica. Finalmente, se complementa el listado con la informacin recolectada por el laboratorio de nematologa del Ministerio de
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Agricultura,
disponible
en
la
siguiente
direccin
electrnica
(http://www.protecnet.go.cr/plagas/listanematodos.htm).
CULTIVOS MUESTREADOS
La propuesta original del proyecto era el estudio de los nematodos fitoparsitos asociados a treinta cultivos agrcolas de Costa Rica, sin embargo, durante la ejecucin del proyecto se logr ampliar la informacin a ms de setenta cultivos. Siendo Costa Rica un pas de vocacin agrcola, es claro, que la informacin de este manual no incluye todos los cultivos y ni todas las zonas agroecolgicas del pas. No obstante, agrega informacin valiosa de cultivos, en donde los nematodos han sido poco estudiados. A continuacin se enlistan los cultivos analizados durante la ejecucin del proyecto. Las fotografas es con fines ilustrativos.
FRUTALES Aguacate, banano, cacao, cas, durazno, guanbana, guayaba, higo, mamn chino, mango, maracuy, maran, meln, mora, naranja, naranjilla, nspero, noni, papaya, pejibaye, pia, tomate de palo.
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HORTALIZAS Arracache, brcoli, cebolla, cebollin, chile, chayote, culantro, rbano, remolacha,
repollo, papa, tomate, tomate orgnico, zanahoria, vainica, lechuga.
TUBRCULOS ame, ampi, tiquisque, yuca
ORNAMENTALES Aglaonema, croton, crcuma, dracena, fatsia, helecho hoja de cuero, lirio, liriope, palmera ornamental, rosa, schefflera, sebrina, spathoglotis, pothos, aralia.
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GRANOS BSICOS Arroz, frijol, maz
CULTIVOS TRADICIONALES Caf, caa de azcar, banano, pltano
PALMAS Palma aceitera, palmito, cocotero
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PASTOS Braquipara, estrella, kikuyo, san agustn, tif-eagle, aztec grass
COLECCION DE REFERENCIA El laboratorio de nematologa ha creado una coleccin de nematodos de referencia, actualmente con ms de 21.000 especmenes debidamente montados en laminillas de Cobb, identificados al nivel taxonmico posible y la informacin en una base de datos. Esta coleccin es nica en Latino Amrica y reconocida a nivel internacional. Mencionar nemas fitoparasitos montados
PRINCIPALES NEMATODOS ASOCIADOS A CULTIVOS AGRCOLAS DE COSTA RICA
En esta seccin se incluyen los nematodos fitoparsitos detectados en el laboratorio de nematologa de la Escuela de Ciencias Agrarias. Actualmente se han descrito aproximadamente unas 2200 especies de nematodos fitoparsitos a nivel mundial, no obstante, la falta de experiencia taxnomica de nuestro pas y el escaso personal entrenado a nivel nacional, constituye una limitante en la identificacin de nematodos a nivel de especie. Actualmente algunos laboratorios estn incursionado en nuevas tecnologas como lo son las tcnicas moleculares para la identificacin de especies. A pesar de lo anterior, se espera que la informacin brindada en este manual constituya una gua til para productores y profesionales dedicados a la agricultura. El listado a
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continuacin brinda los gneros de nematodos fitoparsitos detectados, la familia taxonmica a la que pertenece y el o los cultivos en dnde se ha encontrado asociado. Los lectores interesados en la descripcin taxonmica, pueden consultar algunos de los textos que se indican en el apartado de bibliografa recomendada
CLASISFICACIN
En los ltimos aos se han propuesto varios sistemas de clasificacin para el filo Nematoda, entre que podemos mencionar los siguientes: Andrssy 1976, Lorenzen 1981, Maggenti 1983, Inglis 1983. Recientemente de Ley y Blaxter (2004) proponen un sistema de clasificacin que combina datos de taxonoma tradicional con datos moleculares (secuencia de subunidades de ADNr) y es la que se presenta a continuacin:
ORDEN APHELENCHIDA Familia Aphelenchidae Aphelenchus Bastian, 1865 Aphelenchus sp es un gnero ampliamente distribuido en regiones templadas y tropicales. Se encuenta en todos los tipos de suelos y en material vegetal en descomposicin. Tpicamente es un nematodo micfago y existen pocos registros de su patogenicidad en plantas superiores. Aphelenchus avenae, es la nica especie que se ha encontrado en asocio a hojas y al cortex de algunas races, demostrando algunos autores su importancia econmica cuando se inocula en grandes cantidades. Aphelenchus sp es frecuente encontrarlo en material vegetal en descomposicin donde se presume se alimenta de las hifas de los hongos. Lo hemos detectado en bajas poblaciones en una gran variedad de cultivos pero se desconoce el potencial de este nematodo como patgeno. Los anlisis realizados en el laboratorio han permitido detectarlo en: AGLAONEMA (Aglaonema commutatum), AGUACATE (Persea
americana), ARROZ (Oryza sativa), AZTEC GRASS (pasto ornamental), BANANO (Musa acuminata x Musa balbisiana AAA), BROCOL (Brassica oleracea), CAF
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(Coffea arabica), CAS (Psidium friendrischsthalianum),CEBOLLA (Allium cepa), CEBOLLIN (Allium fistulosum ), COCOTERO (Cocos nucifera), CROTON (Codiaeum variegatum), CURCUMA (Curcuma longa), CHAYOTE (Sechium edule), CHILE (Capsicum annum), DRACAENA (Cordiline australis),DURAZNO (Prunus persica), FRIJOL COMN (Phaseolus vulgaris), GUAYABA (Psidium guajava), HIGO (Ficus carica), LECHUGA (Lactuca sativa), LIRIO ORNAMENTAL (Lillium sp), MARACUY (Passiflora edulis), MARAN (Anacardium occidentale), MELON (Cucumis melo), MORA (Rubus frutticosus), NARANJA (Citrus sinensis), NSPERO ( ), NONI (Morinda citrifolia), AME (Dioscorea alata), AMPI (Colocasia esculenta), PALMA ACEITERA (Elaeis guineensis), PALMERA ORNAMENTAL, PAPA (Solanum tuberosum), PAPAYA (Carica papaya), PEJIBAYE ( ), PIA (Ananas comosus), PLTANO
(M. acuminata x M. balbisiana AAB), POTHOS (Scindapsus aureus), REMOLACHA (Beta vulgaris), REPOLLO (Brassica oleracea) ROSA (Rosa sp), SCHEFFLERA (Brassaia arboricola), SPATHAGLOTIS ORNAMENTAL ( ), TIQUISQUE (Xanthosoma saggitifolium), TOMATE y TOMATE ORGANICO (Lycopersicon esculentum), YUCA (Manihot esculenta), VAINICA ( ), VAINILLA ( ), ZANAHORIA (Daucus carota).
Familia Aphelenchoididae. Aphelenchoides Fisher, 1894 Aphelenchoides sp, de amplia distribucin mundial. La mayora de las especies son de vida libre y se encuentran en diversos sustratos (suelo, material vegetal en
descomposicin, etc) donde probablemente se alimentan de hifas (micetfagos). Solo una pocas especies son de importancia econmica: Aphelenchoides fragarie, A. ritzemabossi , A. arachidis y A. besseyi. En Costa Rica, esta ltima especie es de
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gran importancia econmica, ya que es el agente causal de la falsa mancha angular en frijol, tambin es reponsable de la enfermedad llamada punta blanca en arroz, y recientemente junto con el laboratorio de fitopatologa de la ECA, se ha encontrado en asocio a daos foliares en orqudeas (datos sin publicar). Otros cultivos en donde hemos detectado al gnero son: AGUACATE (Persea americana), ARALIA (Polyscias sp), ARROZ (Oryza sativa), AZTEC GRASS (pasto ornamental), BANANO (Musa acuminata x Musa balbisiana AAA), CACAO (Theobroma cacao), CAF (Coffea arabica) CAS (Psidium friendrischsthalianum), CEBOLLA (Allium cepa), CEBOLLIN (Allium fistulosu ), COCOTERO (Cocos nucifera) CROTON (Codiaeum variegatum), CURCUMA (Curcuma longa), CHILE (Capsicum annum), DRACAENA (Cordiline australis), DURAZNO (Prunus persica), FRIJOL COMN (Phaseolus vulgaris), GUANBANA (Annona muricata), GUAYABA (Psidium guajava), HELECHO HOJA DE CUERO (Rumohra adiantiformis), HIGO (Ficus carica), LECHUGA (Lactuca sativa), MAZ (Zea mays), MAMON CHINO ( ), MANGO (Mangifera indica), MARACUY
(Passiflora edulis), MARAN (Anacardium occidentale), MELON (Cucumis melo), MORA (Rubus frutticosus), NARANJA (Citrus sinensis), NARANJILLA (Solanum quitoense), NSPERO ( ), NONI (Morinda citrifolia), AME (Dioscorea alata), PALMERA ORNAMENTAL, PAPA (Solanum tuberosum), PAPAYA (Carica papaya), PASTO KIKUYO (Pennisetum clandestinum ), PEJIBAYE ( PLTANO (M. acuminata x M. balbisiana AAB), ) PIA (Ananas comosus), POTHOS (Scindapsus aureus),
REMOLACHA (Beta vulgaris), ROSA (Rosa sp), SCHEFFLERA ( Brassaia arboricola), SPATHAGLOTIS ( ), TIQUISQUE (Xanthosoma saggitifolium), TOMATE y TOMATE ORGANICO (Lycopersicon esculentum), TIQUISQUE (Xanthosoma saggitifolium), VAINICA (), VAINILLA(), ZANAHORIA (Daucus carota)
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Rhadinaphelenchus cocophilus (Cobb, 1919) J.B.Goodey,1960
Nematodo endoparsito migratorio que afecta principalmente tallos de palma aceitera y coco., pero tambin se ha informado la presencia del nematodo en el cortex de palmas de coco. El nematodo es transmitido de planta a planta por un coleptero vector (Rhynchophorus palmarun) que lo puede llevar externamente (ectoforesis) o internamente (endoforesis). En este ltimo caso, la palma es infectada cuando el insecto oviposita. Las palmas afectadas por el nematodo pueden morir en muy pocos meses. La infeccin por el nematodo, causa un anillo rojo caracterstico en el tallo de las plantas afectadas. Sntomas externos como clorosis y necrosis de hojas bajeras, as como enanismo se pueden presentan tanto en plantas jvenes como en aquellas de ms 15 a 20 aos. La enfermedad del anillo rojo como se le conoce commente, se ha detectado en America Central, el Caribe y Sur Amrica. Algunos textos recientes refieren al nematodo al gnero Bursaphelenchus. Principales cultivos en donde se ha detectado el nematodo: COCOTERO (Cocos nucifera), PALMA ACEITERA (Elaeis guineensis)
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ORDEN TYLENCHIDA Familia Criconematidae Criconemoides Taylor, 1936 Criconemoides sp es un nematodo ectoparsito de rboles, cultivos perennes y enredaderas. Tambin es frecuente encontrarlo asociado a gramneas. La mayora de especies son partenognicas, los machos no se alimentan. La patogenicidad solo se ha demostrado en unas pocas especies, siendo las de mayor importancia C. axestis, C. onoensis, C. sphaerocephalus y C. xenoplax. Segn el cdigo de nomenclatura zoolgica (ICZN), Criconemoides es el gnero valido, no obstante algunos autores errneamente lo identifican como Criconemella. Siddiqi (2000), Criconemoides es sinnimo de Criconemella y lo considera un subgnero de Criconemoides. En los anlisis de laboratorio lo hemos detectado en los siguientes cultivos: (Persea americana), AGLAONEMA (Aglaonema commutatum), AGUACATE ARRACACHE
(Arracacia xanthorribiza), ARROZ (Oryza sativa), BANANO (Musa acuminata x Musa balbisiana AAA), CACAO (Theobroma cacao), CAF (Coffea arabica), CAA DE AZCAR (Saccharum officinarum), CEBOLLA (Allium cepa), CROTON (Codiaeum variegatum), CULANTRO (Coriandrum sativum), CURCUMA (Curcuma longa), CHAYOTE (Sechium edule), CHILE (Capsicum annum), FRIJOL COMN (Phaseolus vulgaris), GUANBANA (Annona muricata), HELECHO HOJA DE CUERO (Rumohra diantiformis), HIGO (Ficus carica), LECHUGA (Lactuca sativa), MAZ (Zea mays ), MANGO (Mangifera indica), MARACUY (Passiflora edulis), MARAN (Anacardium occidentale), MORA (Rubus frutticosus), NARANJA (Citrus sinensis), NARANJILLA (Solanum quitoense), NONI ( ), AMPI (Colocasia
esculenta), PAPA (Solanum tuberosum), PAPAYA (Carica papaya), PASTO BRANQUIPARA ( ), PASTO ESTRELLA (Cynodon nlemfuensis), PASTO KIKUYO (Pennisetum clandestinum), PASTO TIF-EAGLE ( ), PASTO SAN AGUSTN (Stenotaphorum secundatum), PEJIBAYE (Bactris gasipaes), PIA (Ananas comosus), PLTANO (M. acuminata x M. balbisiana AAB), REMOLACHA ( Beta vulgaris), REPOLLO (Brassica oleracea var. capitana), ROSA (Rosa sp), TOMATE (Lycopersicon esculentum), TIQUISQUE (Xanthosoma saggitifolium), VAINILLA, ZANAHORIA (Daucus carota)
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Hemicriconemoides Chitwood & Birchfield, 1957
La biologa de Hemicriconemoides es similar a la de Criconemoides sp. Es un nematodo ectoparsito de amplia distribucin geogrfica y se ha encontrado asociado a una gran variedad de cultivos. Las principales especies que menciona la literatura son: H.
cocophilus y H. mangifera. Es un nematodo que presenta fuerte dimorfismo sexual, no obstante, su identificacin se puede confundir fcilmente con Hemicycliophora. El tamao ligeramente ms pequeo y los ndulos basales del estilete con procesos anteriores similar a un ancla ayudan a diferenciar a este gnero. Hasta el momento lo hemos detectado en CAF (Coffea arabica), PASTO ESTRELLA (Cynodon
nlemfuensis) y PASTO KIKUYO (Pennisetum clandestinum)
Discocriconemella De Grisse& Loof, 1965 Es un gnero muy fcil de distinguir. Cuerpo de pequeo taman y una postura arqueda o C abierta. Una caracterstica distintiva es la anulacin ceflica a manera de un gran disco aplanado. En Costa Rica es frecuente encontrarlo en muestras de suelo provenientes de reas protegidas, sin embargo, entre los cultivos en los que hemos detectado el gnero estn: CACAO (Theobroma cacao), CAF (Coffea arabica) y CURCUMA (Curcuma longa)
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Criconema Hofmnner & Menzel 1914 (Mehta & Raski, 1971)
Es un nematodo muy interesante con un disco labial prominente y aplanado, estile largo y cutcula ornamentada con apariencia de flecos. Es un gnero que solo lo hemos encontrado en una muestra de MAZ (Zea mays) prodedente de una parcela de San Isidro de Heredia.
Ogma Southern, 1914 De amplia distribucin geogrfica, encontrndose asociado en gran variedad de muestras procedentes de areas protegidas y de zonas agrcolas. Es un nematodo ectoparsito que se alimenta de las races de las plantas, no obstante, no se tiene informes sobre la importancia econmica de este nematodo en cultivos tropicales. Cultivos como: ARALIA ORNAMENTAL (Polyscias spp), CROTON (Codiaeum
variegatum), HELECHO HOJA DE CUERO (Rumohra adiantiformis), MORA (Rubus frutticosus) y NARANJILLA (Solanum quitoense), son cultivos en donde hemos detectado al nematodo.
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Hemicycliophora de Man, 1921 Es un nematodo ectoparsito que se encuentra asociado a una amplia variedad de cultivos vg rboles frutales y forestales, cultivos perennes, plantas silvestres y
enredaderas. Tambin es frecuente encontrarlo asociado a gramneas. La mayora de especies son partenognicas, los machos tienen un aparatro digestivo atrofiado por lo que no se alimentan. Las principales especies detectadas en zonas tropicales y subtropicales son las siguientes: H. arenaria, H.parvana y H. typica. Es un nematodo que presenta caractersticas similares a Hemicriconeloides sp. Diversos muestreos realizados por el laboratorio de nematologa , ha permitido detectar el gnero en los siguientes cultivos: AGUACATE (Persea americana - Lauraceae), CACAO (Theobroma cacao - Sterculiaceae) CEBOLLA (Allium cepa - Liliaceae), CROTON (Codiaeum variegatum - Euphorbiaceae) CHAYOTE (Sechium edule - Cucurbitaceae), CHILE (Capsicum annum - Solanaceae) HELECHO HOJA DE CUERO ( Rumohra adiantiformis Polypodiacea), HIGO (Ficus carica - Moraceae) NARANJILLA ( Solanum quitoense - Solanaceae), PAPA (Solanum tuberosum - Solanaceae), PASTO ESTRELLA ( Cynodon nlemfuensis - Poaceae), PASTO KIKUYO (Pennisetum clandestinum - Poaceae) PASTO TIF-EAGLE ( ), TOMATE (Lycopersicon esculentum Solanaceae), ZANAHORIA (Daucus carota - Apiaceae)
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Familia: Tylenchulidae Tylenchulus Cobb, 1913 Las hembras jvenes son migratorias, penetran la raz hasta alcanzar el crtex, donde establecen sitios permanentes de alimentacin. El nematodo se alimenta de un complejo sistema de clulas nodriza que se forman alrededor de su cabeza, y que sirven de desaguadero permanente de nutrientes. Posteriormente, el deterioro de la raz favorece la invasin de otros microorganismos. La tasa de multiplicacin del nematodo se ve favorecida por suelos franco arenosos. Las hembras adultas son
semiendoparasitas, depositan entre 75 y 100 huevos en una matrix gelatinosa, que requieren de alta humedad en el suelo para su eclosin. Los machos se desarrollan pocos das despus de la eclosin y presentan la caracterstica de no alimentarse. Otro factor muy importante relacionado con la infeccin, es la presencia de heridas en las races. Las larvas son atradas a las micro y macroheridas, por lo tanto las heridas mecnicas deben ser evitadas. Tambin la nutricin del rbol influye en los niveles de poblacin. T. semipenetrans es un patgeno de gran importancia en el agroecosistema de ctricos a nivel mundial. Causa la enfermedad conocida como declinamiento lento y segn el nivel de infeccin, los sntomas pueden ser desde imperceptibles hasta muy severos. Las plantas afectadas por el nematodo pueden mostrar poco desarrollo, produccin de frutos de menor tamao, hojas ms pequeas y clorticas, marchitamiento generalizado y destruccin de las races absorbentes. Las races pueden mostrar un aspecto sucio, debido a que las partculas de suelo se adhieren a la matriz gelatinosa donde la hembra deposita los huevos. Esta ampliamente distribuido en todas las zonas productoras de ctricos de Costa Rica. NARANJA (Citrus sinensis)
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Familia Anguinidae Ditylenchus Filipjev, 1936 Muchas especies son micfagas, siendo usual encontrarlo en muestras con alto contenido orgnico. Algunas especies son parasitas de plantas superiores, donde se alimentan ectoparsiticamente de tallos, hojas y bulbos. Usulamente causan marchitamiento y deformacin del tejido afectado. Las principales especies fitoparsitas son D.angustus, D.dipsaci y D.africaunus. Solo D. dipsaci se han encontrado en zonas tropicales altas afectando cultivos como ajo y cebolla. Otros cultivos en donde hemos detectado el gnero estan: CHILE (Capsicum annum), HIGO (Ficus carica) LECHUGA (Lactuca sativa) LIRIO (Lillium spp) PIA (Ananas comosus) SPATHAGLOTIS ( ) TOMATE (Lycopersicon esculentum) VAINICA ( )
Familia Telotylenchidae Quinisulcius Siddiqi, 1971 Es un nematodo que se ha encontrado infectando maz y sorgo en algunas regiones tropicales, no obstante su importancia econmica no ha sido bien determinada. En nuestro laboratorio solo hemos detectado en el cultivo de REPOLLO (Brassica oleracea var. capitana) en la finca experimental Santa Luca de la Escuela de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional.
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Tylenchorhynchus Cobb, 1913.
Es un nematodo de amplia distribucin geogrfica. Se alimenta de una gran variedad de cultivos, donde puede comportarse como ectoparasito, semi-ectoparsito o
endoparasito migratorio. No obstante, no es un nematodo considerado de gran importancia econmica. En nuestro pas lo hemos encontrado en altas densidades en ARROZ de secano (Oryza sativa - Poaceae), asi como en : ARALIA ORNAMENTAL (Polyscias spp. - Araliaceae), BANANO (Musa acuminata x Musa balbisiana AAA Musaceae), CACAO (Theobroma cacao - Sterculiaceae), CAF (Coffea arabica Rubiaceae), CAA DE AZCAR (Saccharum officinarum - Poaceae), CROTON (Codiaeum variegatum - Euphorbiaceae), FRIJOL COMN ( Phaseolus vulgaris Papilionaceae), MAZ (Zea mays - Poaceae), PALMA ACEITERA (Elaeis guineensis Araceae), PALMITO ( = PEJIBAYE) (Bactris gasipaes - Araceae), PAPA (Solanum tuberosum Solanaceae)
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Familia Dolichodoridae Dolichodorus Cobb, 1914 Algunas publicaciones informan sobre la importancia econmica del nematodo en cultivos como tomate, apio, maz, frijol y pimienta. En nuestro pas, se ha informado como posible patgeno del cultivo de cao, no obstante, an se requiere de mayores datos para establecer su patogenicidad. Adems de los cultivos mencionados, lo hemos detectado en PALMITO (= PEJIBAYE) (Bactris gasipaes - Araceae).
Familia Ecphyadophoridae Sharbilovich, 1959 La familia incluye gneros como Ecphyadophoroides Corbett, 1964 y Ecphyaphora de Man, 1921. No es claro si son nematodos ectoparsitos de pelos radicales de plantas superiores o micfagos. La caracterstica distintiva de estos nematodos su longitud y delgado tamao, aunado a su cuerpo transparente los hace difcil de detectar bajo el luz blanca del estereoscpio. No es considerado un nematodo de importancia econmica, sin embargo Ecphyadophoroides en cultivos ornamentales como CROTON (Codiaeum variegatum) HELECHO HOJA DE CUERO (Rumohra adiantiformis) SPATHAGLOTIS ()
Familia Paratylenchidae Paratylenchus Micoletzky, 1922. Es un gnero con amplia distribucin geogrfica encontrado en una gran variedad de hospederos y tipos de suelo. Es un nematodo ectoparsito que se alimenta de las clulas epidermales de las races. Se ha determinado que altas poblaciones causa una reduccin significativa del crecimiento radical, acompaado de necrosis, an cuando en algunos hospederos los sntomas no son evidentes. De acuerdo a Siddiqi, 2000, Paratylenchus presenta dos subgneros (Paratylenchus y Gracilaucus) que pueden
clasificarse y separarse fcilmente segn la longitud del estile. Este nematodo lo hemos detectado en los siguientes cultivos AGUACATE (Persea americana), ARALIA
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ORNAMENTAL (Polyscias spp.) CACAO (Theobroma cacao), CAF (Coffea arabica), CAA DE AZCAR (Saccharum officinarum), CEBOLLA (Allium cepa -), CROTON (Codiaeum variegatum),CHILE (Capsicum annum), MANGO (Mangifera indica )MARAN ( Anacardium occidentale), MORA (Rubus frutticosus)NARANJA (Citrus sinensis), PALMITO ( = PEJIBAYE ) (Bactris gasipaes) PAPA (Solanum tuberosum), PAPAYA (Carica papaya), PASTO SAN AGUSTN (Stenotaphorum secundatum), PLTANO ( M. acuminata x M. balbisiana AAB), REMOLACHA (Beta vulgaris), ROSA (Rosa sp.)SCHEFFLERA (Brassaia arboricola ), TIQUISQUE (Xanthosoma
saggitifolium) TIQUISQUE (Xanthosoma saggitifolium -) , ZANAHORIA (Daucus carota)
Familia Hoplolaimidae Scutellonema Andrasy,1958 Nematodo endoparsito migratorio de amplia distribucin tropical y subtropical. Se alimenta de races y tubrculos, aunque varias especies son polfagas. Se pueden encontrar poblaciones anfimicticas y partenognicas. Se identifica fcilemnete por los enormes fasmidios (escutelos) ubicados cerca de la regin anal. En Costa Rica S. bradys se han encontrado causando serios daos en tuberculos de ame. Otros cultivos en donde lo hemos detectado son: AGLAONEMA sp (Aglaonema commutatum -), CROTON (Codiaeum variegatum), LECHUGA (Lactuca sativa), SCHEFFLERA (Brassaia arboricola )
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Hoplolaimus Daday, 1905 Las especies de Hoplolaimus tienen un amplio rango de hospederos. Se ha encontrado en asocio a pastos, cereales, soya, maz, caa de azcar y distintos tipos de rboles. Se pueden comportar como ectoparsito o endoparsito, alimentndose principalmente de la clulas del cortex causando lesiones necrticas extensivas. Se identifica fcilmente por su estilete robusto con ndulos basales en forma de tulipn y la presencia de escutelos, uno anterior y otro posterior a la vulva. Las principales especies son : H. columbus, H. indicus, H.pararobustus y H. seinhorsti. Distintas muestras procesadas en nuestro laboratorio ha permitido detectarlo en CACAO (Theobroma cacao), CAF (Coffea arabica), PAPAYA (Carica papaya)
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Peltamigratus Sher, 1964 Presenta una biologa similar a otros hoplolaimidos como Scutellonema y Aorolaimus. Se ha detectado en diferentes latitudes y distintos cultivos. La posicin de los escutelos es una caracterstica de importancia para identificar el gnero. El laboratorio de nematologia de la ECA slo lo ha detectado hasta el momento en el cultivo de CACAO
(Theobroma cacao).
Helicotylenchus Steiner, 1945 De amplia distribucin geogrfica encontrndose tanto en regiones tropicales como subtropicales. Es un nematodo polfago que se comporta como ectoparsito, semiendoparsito o endoparsito. Todos los estados del ciclo de vida se pueden encontrar en el rizocortex, pero la migracin a travs de los tejidos an no ha sido confirmada. Al alimentarse produce pequeas lesiones que se tornan necrticas cuando son invadidas por organismos secundarios. Las especies de mayor importancia son: H. multicinctus, H. dihystera, H. erythrinae, H.mucronatus, H. pseudorobustus . En Costa Rica hemos detectado altas densidades de H. stylocercus en plantaciones de banano (variedad ) en la zona de ro fro. Helicotylenchus spp nematodo es un nematodo muy frecuente y prcticamente aparece en todo tipo de muestra. Los hemos detectado en los siguientes cultivos: AGLAONEMA sp (Aglaonema commutatum), AGUACATE (Persea americana), ARALIA ORNAMENTAL (Polyscias spp), ARRACACHE (Arracacia xanthorribiza), ARROZ (Oryza sativa), BANANO (Musa acuminata x Musa balbisiana AAA ), BROCOL (Brassica oleracea var. italica), CACAO (Theobroma cacao), CAF (Coffea arabica ) CAA DE AZCAR (Saccharum officinarum ), CAS (Psidium
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friendrischsthalianum), CEBOLLA (Allium cepa), CEBOLLIN (
), COCOTERO
(Cocos nucifera), CROTON (Codiaeum variegatum ), CULANTRO (Coriandrum sativum), CHAYOTE (Sechium edule), CHILE (Capsicum annum), DRACAENA (Cordiline australis), FATSIA ORNAMENTAL ( ), FRIJOL COMN (Phaseolus vulgaris) GUANBANA (Annona muricata ), GUAYABA (Psidium guajava ), HELECHO HOJA DE CUERO (Rumohra adiantiformis), LECHUGA (Lactuca sativa ) LIRIO ( ORNAMENTAL (Lillium spp), LIRIOPE (), MAZ (Zea mays) MAMON CHINO ( ), MANGO (Mangifera indica), MARACUY (Passiflora edulis), MARAN
(Anacardium occidentale ), MORA (Rubus frutticosus), NARANJA (Citrus sinensis), NARANJILLA (Solanum quitoense), NSPERO ( ), NONI ( ), AME
(Dioscorea alata), AMPI (Colocasia esculenta), PAPAYA (Carica papaya), PALMA ACEITERA (Elaeis guineensis ), PALMITO ( = PEJIBAYE ) (Bactris gasipaes ), PAPA (Solanum tuberosum), PASTO BRANQUIPARA ( ), PASTO ESTRELLA (Cynodon nlemfuensis ), PASTO KIKUYO (Pennisetum clandestinum), PASTO SAN AGUSTN (Stenotaphorum secundatum), PASTO TIF-EAGLE ( ), PEJIBAYE ( ), PIA (Ananas comosus), POTHOS ORNAMENTAL (Scindapsus aureus), RABANO ( ), REMOLACHA (Beta vulgaris ), REPOLLO (Brassica oleracea var. capitana), ROSA (Rosa sp), SCHEFFLERA (Brassaia arboricola), SPATHAGLOTIS ORNAMENTAL ( ), TIQUISQUE (Xanthosoma saggitifolium), TOMATE (Lycopersicon esculentum), TOMATE ORGANICO (Lycopersicon esculentum ), TOMATE DE PALO
(Cyphomandra betacea), TIQUISQUE (Xanthosoma saggitifolium), YUCA (Manihot esculenta), VAINICA ( ), VAINILLA () ZANAHORIA (Daucus carota)
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Rotylenchus Filipjev,1936
De amplia distribucin geogrfica, no obstante, es un nematodo que se encuentra principalmente en regiones templadas y fras a nivel mundial. Es un nematodo
migratorio y se comporta como ectoparsito o semiendoparsito, alimentndose tanto a lo largo del sistema radical como de la regin apical. Con los datos hasta ahora obtenidos en nuestro laboratorio, no podemos afirmar su importancia relativa en los cultivos analizados, nunca lo hemos detectado en altas densidades. Es un nematodo que cuando esta inactivo o se mata con calor adquiere forma espiral, lo que indica que anlisis de laboratorio poco cuidadosos, podra fcilmente confundirse con
Helicotylenchus. Una de las diferencias entre ambos gneros, es el traslape esfago intestinal al que se le debe poner atencin para la separacin de ambos gneros. Lo hemos detectado en los siguientes cultivos: AGLAONEMA (Aglaonema commutatum), AGUACATE (Persea americana) ARROZ (Oryza sativa), BANANO (Musa acuminata x Musa balbisiana AAA) CACAO (Theobroma cacao), COCOTERO (Cocos nucifera) CROTON (Codiaeum variegatum), CURCUMA (Curcuma longa) CAA DE AZCAR (Saccharum officinarum), GUAYABA (Psidium guajava).
Rotylenchulus Linford & Oliveira, 1940
De distribucin tropical y subtropical. Las hembras maduras depositan alrededor de unos 50 huevos en una matrix gelatina, al eclosionar, los juveniles mudan a hembras inmaduras que se comportan como el estado infectivo con capacidad de buscar el hospedero y ubicarse en un punto fijo de alimentacin. Es un nematodo semi-
emdoparsito lo que significa que solo la parte anterior del cuerpo permanece embebida en el tejido radical, mientras que la posterior permanece en el suelo y se torna obesa. Los machos mantienen su forma verfiforme pero no se aliementan. Es un nematodo de gran importancia econmica y quizs la especie de mayor importancia econmica es R. reniformis. Nuestro laboratorio ha detectado el gnero en los siguientes cultivos: AGLAONEMA (Aglaonema commutatum), AGUACATE (Persea americana), ARROZ
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(Oryza sativa), BANANO (Musa acuminata x Musa balbisiana AAA), CACAO (Theobroma cacao), COCOTERO (Cocos nucifera), CROTON (Codiaeum
variegatum), CURCUMA (Curcuma longa), GUAYABA (Psidium guajava), MANGO (Mangifera indica), sinensis), MARAN (Anacardium occidentale), NARANJA (Citrus AMPI (Colocasia esculenta), SCHEFFLERA (Brassaia
NARANJILLA (Solanum quitoense),
PALMERA ORNAMENTAL, PAPAYA (Carica papaya),
arboricola), TIQUISQUE (Xanthosoma saggitifolium), YUCA (Manihot esculenta)
Familia Heteroderidae Globodera Skarbilovich, 1959 (Behrens, 1975) Nematado endopararsito de gran importancia econmica. Se encuentra principalmente distribuido en templadas o fras de regiones tropicales. Las hembras maduras de forma globosa, retienen en su interior gran cantidad de huevos. La cuticula de la hembra se oscure y endurece formando un quiste que protege a los huevos de condiciones adversas del ambiente. Se tienen informes de quistes cuyos huevos se han mantenido viables por ms de 20 aos. Los huevos eclosionan en respuesta a exudados radicales de las plantas hospederas, aunque otros factores pueden estar involucrados. Los juveniles (J2) que emergen de los huevos son los estados infectivos que invaden la planta hospedera induciendo sitios alimenticios formados por clulas nodriza. No hay formacin de agallas y los juveniles mudan tres veces para convertirse en adultos. En Costa Rica se ha detectado en el cultivo de papa en las zonas altas de Cartago y Zarcero. Tambien tiene informes de la presencia de G. rostochiensis en el mismo
cultivo. La forma, color del quiste y el nmero de estras entre la vulva y el ano, son esenciales para diferenciar las especies. PAPA (Solanum tuberosum ). Heterodera sp presenta una biologa similar al nematodo anterior y los juveniles los hemos detectado en los siguientes cultivos: MORA (Rubus frutticosus), CEBOLLA (Allium cepa), CEBOLLIN ( ), CHILE (Capsicum annum), PASTO KIKUYO (Pennisetum
clandestinum) ZANAHORIA (Daucus carota)
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Familia Meloidogynidae Meloidogyne Goeldi, 1892 Este gnero incluye los nematodos formadores de ndulos, y pertenecen a un grupo relativamente pequeo, pero de mucha importancia como patgenos obligados de plantas. Tienen una distribucin mundial y parasitan prcticamente todo tipo de planta vascular. Tpicamente se reproducen y se alimentan dentro del tejido radical e inducen la formacin de agallas pequeas a grandes. Otros nematodos como Nacobbus aberrans (falso nematodo agallador) y Subanguina radicicola, tambin causan agallas radicales confundibles con las de Meloidogyne.
El habito parastico (endoparsito) y la forma de alimentacin del nematodo, alteran la fisiologa normal de la planta, y causan una reduccin y calidad del cultivo, motivo por lo que estos nematodos tienen enorme importancia econmica. Para una identificacin confiable, lo mejor es integrar caracteres morfolgicos, isoenzimas, informacin molecular, junto informacin relacionada con el modo de reproduccin, nmero de cromosomas, plantas hospederas y distribucin. Entre las especies de mayor importancia econmica podemos mencionar: M. exigua, M. incognita, M. hapla, M. javanica, M. arenaria, M.graminicola, M. mayaguensis. En Costa Rica se ha
determinado a M.salasi como un patgeno de gran importancia en el cultivo del arroz. El gnero lo hemos detectado en los siguientes cultivos: ARROZ (Oryza sativa), BANANO (Musa acuminata x Musa balbisiana AAA), BROCOL (Brassica oleracea var. italica),CACAO (Theobroma cacao), CAF (Coffea arabica), CAA DE AZCAR (Saccharum officinarum), CEBOLLA (Allium cepa), COCOTERO (Cocos nucifera), CROTON (Codiaeum variegatum), CULANTRO (Coriandrum sativum), CURCUMA
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(Curcuma longa), CHAYOTE (Sechium edule), CHILE (Capsicum annum), DURAZNO (Prunus persica), GUANBANA (Annona muricata), GUAYABA (Psidium guajava), HELECHO HOJA DE CUERO ( Rumohra adiantiformis), HIGO (Ficus carica), LECHUGA (Lactuca sativa) , LIRIO ORNAMENTAL (Lillium spp.), LIRIOPE. ORNAMENTAL, MAZ (Zea mays), MANGO (Mangifera indica), MARAN (Anacardium occidentale), MELON (Cucumis melo), NARANJA (Citrus sinensis), NARANJILLA (Solanum quitoense), NSPERO ( ) , NONI ( ), AME (Dioscorea alata), AMPI (Colocasia
esculenta), PALMITO ( = PEJIBAYE ) (Bactris gasipaes), PAPA (Solanum tuberosum), PAPAYA (Carica papaya) PASTO ESTRELLA ( Cynodon nlemfuensis), PASTO KIKUYO (Pennisetum clandestinum), PASTO SAN AGUSTN (Stenotaphorum
secundatum), PASTO TIF-EAGLE ( ), PIA (Ananas comosus) PLTANO (M. acuminata x M. balbisiana AAB), POTHOS ORNAMENTAL (Scindapsus aureus), REMOLACHA (Beta vulgaris), REPOLLO (Brassica oleracea var. capitana), ROSA (Rosa sp), SCHEFFLERA (Brassaia arboricola), SPATHAGLOTIS ORNAMENTAL ( ), TIQUISQUE (Xanthosoma saggitifolium), TOMATE (Lycopersicon esculentum),
TOMATE ORGANICO ( Lycopersicon esculentum), TOMATE DE PALO (Cyphomandra betacea), YUCA (Manihot esculenta), ZANAHORIA (Daucus carota).
Familia Pratylenchidae Pratylenchus Filipjev, 1936 Nematodo endoparsito migratorio, lo que significa que las mayores densidades poblacionales se localizan dentro del sistema radical. Tanto adultos como juveniles, se alimentan de las clulas del rizocortex, donde se forman cavidades denominadas nidos que contienen colonias de nematodos en todos los estados del ciclo de vida. La
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decoloracin pronunciada de los tejidos afectados en uno de los sntomas provocados por estos nematodos. Otro tipo de stomas es la formacin de pequeas estras de color caf rojizo que pueden coaslescen y formar reas necrticas extensivas. Plantas afectadas por este nematodo, pueden mostrar algunos de los siguientes sntomas: clorosis, marchitez generalizada, poco desarrollo y poca produccin. Usualmente las plantas nos respoden adecuadamente a la aplicacin de fertilizantes, por el dao presente en el sistema radical. En zonas tropicales,el ciclo de vida se completa en 3 o 4 semanas y los nematodos pueden sobrevivir en ausencia de un hospedero por varios meses. Es un nematodo de mucha importancia econmica, ya que la mayora de las especies son polfagas. Las especies de mayor importancia en zonas tropicales y
subtropicales son: P. brachyurus, P.goodeyi, P.penetrans y P. zeae. En Costa Rica, P. gutierrezi, es una nueva especie que fue encontrada en asocio al cultivo del caf. La lista a continuacin, muestra los cultivos en donde hemos detectado el gnero.
AGLAONEMA sp (Aglaonema commutatum), AGUACATE (Persea americana) ARALIA ORNAMENTAL (Polyscias spp), ARROZ (Oryza sativa) BANANO (Musa acuminata x Musa balbisiana AAA), CACAO (Theobroma cacao), CAF (Coffea arabica), CAA DE AZCAR ( Saccharum officinarum) CAS (Psidium friendrischsthalianum), CEBOLLA ( Allium cepa), CROTON (Codiaeum variegatum), CULANTRO (Coriandrum sativum), CHILE (Capsicum annum) FRIJOL COMN ( Phaseolus vulgaris), GUANBANA (Annona muricata) GUAYABA (Psidium guajava), HELECHO HOJA DE CUERO (Rumohra adiantiformis), LIRIO sp. ORNAMENTAL (Lillium spp ), MAZ (Zea mays ), MAMON CHINO ( ), MANGO
(Mangifera indica), MARAN (Anacardium occidentale), MELON (Cucumis melo) MORA (Rubus frutticosus), NARANJA (Citrus sinensis), NARANJILLA (Solanum quitoense), NONI ( ), AME (Dioscorea alata), PALMITO ( = PEJIBAYE)
(Bactris gasipaes), PAPA (Solanum tuberosum), PAPAYA (Carica papaya), PASTO BRANQUIPARA ( ), PASTO KIKUYO (Pennisetum clandestinum), PASTO SAN
AGUSTN (Stenotaphorum secundatum), PLTANO (M. acuminata x M. balbisiana AAB), POTHOS ORNAMENTAL (Scindapsus aureus), REMOLACHA (Beta vulgaris),
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REPOLLO
Brassica oleracea var. capitana), ROSA (Rosa spp), SCHEFFLERA
(Brassaia arboricola), SEBRINA ORNAMENTAL ( ), TIQUISQUE (Xanthosoma saggitifolium), TOMATE (Lycopersicon esculentum), TIQUISQUE (Xanthosoma
saggitifolium) YUCA ( Manihot esculenta), ZANAHORIA (Daucus carota), PIA (Ananas comosus)
Radopholus Thorne, 1949 Es un nematodo endoparsito de races, cormos y tuberculos. Al igual que Pratylenchus, tanto juveniles como adultos se alimentan de las clulas del rizocortex. En tejido severamente afectado puede formar cavidades y decoloracin pronunciada, adems de reas de color caf rojizo que coaslencen y forman reas necrticas extensivas. La invasin de microorganismos secundarios potencia el dao causado por estos nematodos. Radopholus presenta gran dimorfismo sexual, los machos muestran una estructura ceflica alta, poco exclerotizada y un sistema digestivo degenerado que no les permite alimentarse. La principal especie es R. similis que causa prdidas econmicas importantes en el cultivo de banano y pltano. Usualmente los anlisis de raz evidencian poblaciones de ms de 10.000 nematodos por 100 gramos de peso fresco de raz. El dao en las plantaciones se evidencia por el volcamiento de plantas, producto de un sistema radical deteriorado. La mayora de especies son originarias de Australasia, no obstante, Radopholus similis se encuentra ampliamente distribuido en todas reas tropicales productoras de banano, como consecuencia del uso de material propagativo contaminado. El laboratorio ha detectado poblaciones considerables de este nematodo en los siguientes cultivos: BANANO (Musa acuminata x Musa balbisiana AAA), PLTANO (M. acuminata x M. balbisiana AAB -), POTHOS ORNAMENTAL (Scindapsus aureus)
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Hirschmanniella Luc & Goodey, 1963
De amplia distribucin mundial, asociado principalmente a ambientes acuticos (agua dulce y salobres). Algunas de las especies de mayor relevancia, H.oryzae y H.spinicaudata se encuentran en cultivos de arroz inundado. Su alimentan
principalmente de races, pero tambin han sido detectados en plantas que forman rizomas o plantas que se propagan a travs de cormos. Al igual que otras especies de regiones tropicales, su ciclo de vida se completa en pocas semanas. En nuestro laboratorio, este nematodo lo hemos detectado solo en muestras de suelo procedentes de arrozales inundados de la regin de Guanacaste
ARROZ (Oryza sativa - Poaceae)
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Familua Tylenchidae Tylenchus Bastian, 1865
Es un nematodo que se encuentra frecuentemente en suelos agrcolas y asociado a las races de muchos tipos de plantas. Tambin es frecuente encontrarlo en muestras de suelo de zonas boscosas. Practicamente la mayora de libros de fitonematologa describen al nematodo, sin embargo, no es considerado de importancia econmica. Estos nematodos se alimentan principalmente de algas, lichenes, hongos y musgos. Algunos gneros relacionados como Lelenchus, Filenchus, Aglenchus podran ser confundidos con este gnero. Tylenchus lo hemos detectado en una variedad de cultivos, pero en ningn caso en altas densidades poblacionales que nos sugiera un efecto negativo en el cultivo.
AGLAONEMA sp (Aglaonema commutatum), AGUACATE (Persea americana), ARALIA ORNAMENTAL (Polyscias spp), ARRACACHE (Arracacia xanthorribiza), ARROZ (Oryza sativa), BANANO (Musa acuminata x Musa balbisiana AAA), CACAO (Theobroma cacao), CAF (Coffea arabica), CAA DE AZCAR (Saccharum officinarum), CEBOLLA (Allium cepa), CEBOLLIN ( ) , COCOTERO (Cocos nucifera), CROTON (Codiaeum variegatum), CURCUMA (Curcuma longa) , CHILE (Capsicum annum ) DRACAENA (Cordiline australis), DURAZNO (Prunus persica), FATSIA ORNAMENTAL ( ), GUANBANA (Annona muricata), GUAYABA (Psidium guajava),
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HELECHO HOJA DE CUERO (Rumohra adiantiformis), LECHUGA (Lactuca sativa), LIRIO sp. ORNAMENTAL (Lillium spp.), MAMON CHINO ( ), MANGO (Mangifera indica) MARACUY (Passiflora edulis), MORA (Rubus frutticosus)NARANJA (Citrus sinensis), NARANJILLA (Solanum quitoense) AME (Dioscorea alata) , AMPI (Colocasia esculenta), PAPAYA ( ), PALMA ACEITERA (Elaeis guineensis), PALMERA ORNAMENTAL PALMITO ( = PEJIBAYE) (Bactris gasipaes ), PAPA (Solanum tuberosum), PASTO KIKUYO (Pennisetum clandestinum), PASTO SAN AGUSTN (Stenotaphorum secundatum) , PASTO TIF-EAGLE ( ), PEJIBAYE ( ), PIA (Ananas comosus -), PLTANO (M. acuminata x M. balbisiana AAB), POTHOS ORNAMENTAL (Scindapsus aureus ) , REMOLACHA (Beta vulgaris), ROSA (Rosa sp), SCHEFFLERA (Brassaia arboricola), SEBRINA ( ) SPATHAGLOTIS ORNAMENTAL, TOMATE (Lycopersicon esculentum), TOMATE DE PALO (Cyphomandra betacea), YUCA (Manihot esculenta), VAINICA ( ), ZANAHORIA (Daucus carota)
Psilenchus de Man, 1921
De amplia distribucin geogrfica. Se ha encontrado en asocio a una gran variedad de races de plantas, no obstante, el hbito alimenticio es prticamente desconocido. Es frecuente en muestras de suelo provenientes tanto de reas cultivadas como prstinas. Su morfologa es parecida a la Tylenchus, sin embargo la cola filiforme y clavada es una quizs una de las caractersticas utilizadas para separar ambos gneros. Los hemos detectado en los siguientes cultivos, sin embargo, no si tiene informacin sobre su importancia econmica.
DRACAENA (Cordiline australis), PLTANO (M. acuminata x M. balbisiana AAB), POTHOS ORNAMENTAL (Scindapsus aureus), LECHUGA (Lactuca sativa), MORA (Rubus frutticosus - Rosaceae), NARANJILLA (Solanum quitoense), AMPI (Colocasia esculenta), SEBRINA ORNAMENTAL ( )
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ORDEN DORYLAIMIDA Familia Longidoridae Xiphinema Cobb, 1913 . ; Longidorus Micoletzky, 1922
Los nematodos pertenecientes a esta familia, son ectoparsitos migratorios de ciclo de vida largo similar a de otros dorylaimidos. Se alimentan de una gran variedad de plantas, donde el punto especfico de alimentancin es cerca de la punta de las races. Segn la susceptibilidad de la planta hospedera, algunos de los sntomas que se pueden observar a nivel radical son: races ganchudas, agallas terminales, poco desarrollo de races laterales y necrosis en los puntos de alimentacin. Ambos nematodos son relativamente grandes (2 12 mm). Tienen un estilete hueco (60-250 um) que usan para alimentarse profundamente en las puntas de las races. Una de las caractersticas de estos nematodos, es la capacidad de algunas especies de transmitir virus a las plantas. De las 350 especies identificadas, solo 17: Longidorus [7 sp],
Xiphinema [9 sp] y Paralongidorus [1 sp] tienen la capacidad de transmitir 13 de los 38 Nepovirus conocidos. En nuestra experiencia, las poblaciones de ambos nematodos en campos agrcolas costarricenss son usualmente bajas. En zonas forestales Xiphinema es un nematodo que parece con mucha frecuencia en las muestras. No obstante, en otras latitudes, Xiphinema es un nematodo de gran importancia ya que transmite entre otros virus el TRSV (virus del anillado del tabaco) y el ToRSV (virus del anillado del tomate) que afecta plantas como cucurbitceas, tabaco, ciruela y uva. Xiphimena lo hemos detectado en los siguientes cultivos:
AGLAONEMA (Aglaonema commutatum), AGUACATE (Persea americana) ARROZ (Oryza sativa), BANANO (Musa acuminata x Musa balbisiana AAA), CACAO (Theobroma cacao), CAF (Coffea arabica -), CAA DE AZCAR ( Saccharum officinarum), CAS (Psidium friendrischsthalianum), CEBOLLA (Allium cepa), CEBOLLIN ( ), CROTON (Codiaeum variegatum), CHAYOTE (Sechium edule) , GUAYABA (Psidium guajava), MAZ (Zea mays) MANGO (Mangifera indica), MARAN ( Anacardium occidentale) MORA (Rubus frutticosus), NARANJA (Citrus sinensis), NSPERO ( ), PALMITO ( = PEJIBAYE) (Bactris gasipaes), PAPA (Solanum tuberosum), PASTO ESTRELLA
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(Cynodon nlemfuensis, PASTO KIKUYO (Pennisetum clandestinum), PIA (Ananas comosus), PLTANO (M. acuminata x M. balbisiana AAB), REMOLACHA (Beta vulgaris), REPOLLO (Brassica oleracea var. capitana), TOMATE (Lycopersicon esculentum)
Longidorus lo hemos detectado en los siguientes cultivos :
ARROZ (Oryza sativa), CAA DE AZCAR (Saccharum officinarum) GUAYABA (Psidium guajava), MAZ (Zea mays - Poacea), NARANJA (Citrus sinensis - Rutaceae), PALMITO ( = PEJIBAYE ) ( Bactris (Ananas comosus), PLTANO (M. balbisiana asipaes), PIA acuminata x M. AAB)
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ORDEN TRIPLONCHIDA Familia Trichodoridae Paratrichodorus Siddiqi, 1974; Trichodorus Cobb, 1913
Al igual que los longidoridos, son nematodos ectoparsitos asociados principalmente a cultivos perennes y plantas leosas. radicales, especficamente Los trichodoridos se alimentan de los pelos
de las clulas epidermales adyacentes a la zona de
crecimiento de la raz, cuyo efecto es una reduccin del crecimiento radical, formacin de races laterales cortas y engrosadas. Se ha encontrado que los trichodoridos son ms frecuentes en suelos livianos o arenosos. Altas densidades se encuentran usualmente a profundidades mayores a 30 cm. Son nematodos que tambin tienen la capacidad de transmitir virus a la plantas. Se ha determinado que 13 de las 70 especies identificadas (Paratrichodorus 9 sp y Trichodorus 4 sp) tienen la capacidad de transmitir los 3 tobravirus conocidos. Dos virus de gran importancia son el PepRSV (virus del anillado de la pimienta) y el TRS (virus del tabaco), que afectan tanto plantas cultivadas como plantas silvestres. En los muestreos realizados por el laboratorio de nematologa de la ECA, los hemos detectado en bajas densidades en los siguientes cultivos: Paratrichodorus sp: ARROZ (Oryza sativa), CAA DE AZCAR (Saccharum officinarum) REPOLLO (Brassica oleracea var. capitana), ROSA (Rosa sp), TOMATE (Lycopersicon esculentum) CULANTRO (Coriandrum sativum), HELECHO HOJA DE CUERO (Rumohra adiantiformis) Trichodorus sp: AGUACATE (Persea americana), ARALIA ORNAMENTAL (Polyscias spp), ARROZ (Oryza sativa), BANANO (Musa acuminata x Musa balbisiana AAA),
BROCOL (Brassica oleracea var. italica), CACAO (Theobroma cacao), CAF (Coffea arabica), CAA DE AZCAR (Saccharum officinarum) CEBOLLA (Allium cepa), CEBOLLIN ( ), CHAYOTE (Sechium edule), CHILE (Capsicum annum), FRIJOL
COMN (Phaseolus vulgaris), GUANBANA (Annona muricata), GUAYABA (Psidium guajava), HELECHO HOJA DE CUERO (Rumohra adiantiformis), LECHUGA (Lactuca sativa), MAZ (Zea mays), MORA (Rubus frutticosus), NARANJA (Citrus sinensis), PAPA (Solanum tuberosum), PLTANO (M. acuminata x M. balbisiana AAB),
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REMOLACHA ( Beta vulgaris), REPOLLO (Brassica oleracea var. capitana), ROSA (Rosa sp), TOMATE (Lycopersicon esculentum), ZANAHORIA (Daucus carota )
J2
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PRINCIPALES NEMATODOS ASOCIADOS A LOS CULTIVOS DE COSTA RICA
Xiphinema sp. ARALIA ORNAMENTAL (Polyscias spp. - Araliaceae )
AGLAONEMA sp (Aglaonema commutatum - Araceae) Aphelenchus sp Criconemella spp Helicotylenchus sp Meloidogyne sp Meloidogyne exigua Meloidogyne incognita Pratylenchus spp. Tylenchus sp Rotylenchulus spp. Scutellonema spp. Xiphinema sp
Aphelenchoides sp. Criconemella spp. Helicotylenchus sp. Meloidogyne sp. Ogma sp. Pratylenchus sp. Paratylenchus sp. Trichodorus sp. Tylenchus sp. Tylenchorhynchus sp
ARRACACHE ( Arracacia xanthorribiza Bancr.- Mirtaceae) No estaba reportado en el manual
AGUACATE (Persea americana Lauraceae) Aphelenchus sp Aphelenchoides sp. Criconematidae Criconemella spp. Helicotylenchus spp. Hemicycliophora spp. Meloidogyne spp. Paratylenchus spp. Pratylenchus spp. Rotylenchulus spp. Trichodorus sp Tylenchus sp
Criconemoides sp. Helicotylenchus sp. Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Tylenchus sp
ARROZ (Oryza sativa - Poaceae ) Aphelenchus sp. Aphelenchoides ritzemabosi Aphelenchoides sp. Aphelenchoides besseyi Criconemella spp. Criconemoides sp. Helicotylenchus spp.
Hirschmaniella oryzae Longidorus spp. Meloidogyne arenaria Meloidogyne exigua Meloidogyne incgnita Meloidogyne salassi Paratrichodorus spp. Plectus sp. Pratylenchus sp. Pratylenchus zeae Rotylenchulus spp. Seinura sp Tylenchidae Tylenchus sp. Trichodorus spp. Tylenchorhynchus spp. Xiphinema spp. AZTEC GRASS ORNAMENTAL Aphelenchus sp. Aphelenchoides ritzemabosi
Meloidogyne incognita Meloidogyne javanica Pratylenchus spp. Pratylenchus coffeae Radopholus similis Rotylenchulus spp. Trichodorus spp. Tylenchorhynchus spp. Tylenchus sp Xiphinema spp.
BROCOL (Brassica oleracea var. italica - Brassicaceae) Aphelenchus sp Helicotylenchus sp Meloidogyne sp Trichodorus sp
CACAO (Theobroma cacao Sterculiaceae) Aorolaimus sp. Aphelenchoides sp
BANANO ( Musa acuminata x Musa balbisiana AAA - Musaceae ) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Criconemella spp. Criconemiodes sp. Helicotylenchus spp. Helicotylenchus stylocercus Meloidogyne sp
Criconematidae Criconemoides sp Criconemella spp. Criconemoides sp. Desmoscolex sp. Discocriconemella sp. Gracilacus sp. Helicotylenchus spp. Hemicycliophora spp. Hoplolaimidae
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Hoplolaimus sp. Meloidogyne spp. Paratylenchus spp. Pratylenchus spp. Rotylenchulus spp. Trichodorus spp. Tylenchorhynchus spp. Tylenchus sp. Xiphinema spp.
CAA DE AZCAR ( Saccharum officinarum - Poaceae ) Criconemella spp. Criconemoides sp. Helicotylenchus spp. Longidorus spp. Meloidogyne incognita Meloidogyne spp. Paratrichodorus spp. Paratylenchus spp.
CAF ( Coffea arabica - Rubiaceae) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Aphelenchoides bicaudatus Criconemoides sp. Helicotylenchus spp. Hemicriconemoides sp Hoplolaimus sp Discocriconemella sp. Meloidogyne sp. Meloidogyne arabicida Meloidogyne exigua Meloidogyne incognita Pratylenchus sp. Pratylenchus coffeae Pratylenchus gutierrezi Trichodorus sp Tylenchorhynchus spp. Tylenchidae Tylenchus sp. Xiphinema spp.
Plectus sp. Pratylenchus zeae Pratylenchus spp. Rotylenchus spp. Trichodorus spp. Tylenchorhynchus spp. Tyelenchus sp. Xiphinema spp.
CAS ( Psidium friendrischsthalianum Myrtaceae ) NO ESTABA EN EL MANUAL Aphelenchus sp. Aphelenchoides sp. Helicotylenchus sp. Pratylenchus sp Xiphinema sp.
CEBOLLA ( Allium cepa - Liliaceae ) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Criconematidae

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Criconemella spp. Criconemoides sp. Helicotylenchus spp. Hemicycliophora spp. Heterodera Meloidogyne hapla Meloidogyne incognita Paratylenchus spp. Pratylenchus spp. Trichodorus spp. Tylenchus sp. Xiphinema sp.
Rotylenchulus spp. Tylenchus sp.
CROTON (Codiaeum variegatum Euphorbiaceae ) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Criconemoides sp. Ecphyadophoridae Helicotylenchus spp. Hemicycliophora Meloidogyne javanica Meloidogyne spp.
CEBOLLIN ( ) NO ESTABA EN EL MANUAL Aphelenchoides sp Aphelenchus sp. Helicotylenchus sp. Heterodera sp Trichodorus sp Tylenchus sp Xiphinema sp.
Ogma sp. Paratylenchus spp. Pratylenchus spp. Rotylenchulus spp. Scutellonema sp. Tylenchorhynchus spp. Tylenchus sp. Telotylenchidae sp. Xiphinema sp.
COCOTERO ( Cocos nucifera Arecaceae) Aphelenchus sp. Aphelenchoides sp. Aphelenchoides bicaudatus Bursaphelenchus cocophilus ( = Rhadinaphelenchus cocophilus ) Helicotylenchus sp. Meloidogyne spp.
CULANTRO ( Coriandrum sativum Apiaceae ) Criconemella spp. Helicotylenchus spp. Meloidogyne incognita Paratrichodorus spp. Pratylenchus spp.
CURCUMA (Curcuma longa)

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Aphelenchus sp. Aphelenchoides sp. Criconemoides sp. Discocriconemella sp. Helicotylenchus sp. Meloidogyne sp. Rotylenchulus sp. Tylenchus sp.
Meloidogyne incognita Meloidogyne spp. Paratylenchus spp. Pratylenchus spp. Trichodorus spp. Tylenchus sp. Coslenchus
DRACAENA no esta en el manual CHAYOTE ( Sechium edule Cucurbitaceae ) Aphelenchus sp. Criconemella sp Helicotylenchus sp. Hemicycliophora sp Meloidogyne sp. Meloidogyne incognita Trichodorus sp Tylenchus sp. Xiphinema sp. DURAZNO ( ) No estaba en el manual Aphelenchus sp. Aphelenchoides sp. Meloidogyne sp. Tylenchus sp CHILE (Capsicum annum - Solanaceae ) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Criconemoides sp. Criconemella spp. Helicotylenchus spp. Hemicycliophora spp. Heterodera sp. Ditylenchus sp. FRIJOL COMN ( Phaseolus vulgaris Papilionaceae) FATSIA ORNAMENTAL ( ) NO ESTA EN EL MANUAL DEL MAG Criconematidae Helicotylenchus sp Tylenchus sp Aphelenchoides sp Aphelenchus sp Helicotylenchus sp Psilenchus sp Tylenchus sp Tylenchidae
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Aphelenchus sp. Aphelenchoides besseyi Criconemella spp. Criconemoides sp. Helicotylenchus spp. Meloidogyne incognita Pratylenchus spp. Trichodorus spp. Tylenchorhynchus spp.
Tylenchus sp. Xiphinema sp
HELECHO HOJA DE CUERO ( Rumohra adiantiformis - Polypodiaceae) Aphelenchoides sp. Criconematidae Criconemella spp. Ecphyadophoridae Helicotylenchus spp.
GUANBANA (Annona muricata Annonaceae) Aphelenchoides sp Criconemoides sp Criconemella sp Helicotylenchus sp Meloidogyne sp Pratylenchus sp Tylenchus sp Trichodorus sp
Hemicycliophora sp. Meloidogyne spp Ogma sp. Pratylenchus sp. Pratylenchus penetrans Paratrichodorus spp. Seinura sp Trichodorus sp. Telotylenchidae Tylenchus sp. HIGO (Ficus carica - Moraceae)
GUAYABA ( Psidium guajava Myrtaceae) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Criconemella spp. Helicotylenchus spp. Longidorus spp. Meloidogyne spp. Pratylenchus spp. Rotylenchulus reniformis Trichodorus spp.
Aphelenchoides sp Aphelenchus sp Criconemella sp Hemicycliophora Ditylenchus sp Meloidogyne incognita Trichodorus sp Tylenchus sp
LECHUGA ( Lactuca sativa - Asteraceae )

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Aphelenchoides s Aphelenchus sp. Criconemoides sp. Criconemella spp. Ditylenchus sp Helicotylenchus spp. Meloidogyne sp. Meloidogyne hapla Meloidogyne incognita Psilenchus sp. Scutellonema spp. Trichodorus spp. Tylenchus sp. LIRIO sp. ORNAMENTAL (Lillium spp. - Liliceae) Aphelenchus sp Ditylenchus sp Helicotylenchus sp Meloidogyne sp Pratylenchus sp Tylenchus sp LIRIOPE sp. ORNAMENTAL NO ESTABA EN EL MANUAL DEL MAG Helicotylenchus sp. Meloidogyne sp.
Helicotylenchus spp. Longidorus spp. Meloidogyne incognita Meloidogyne spp. Pratylenchus spp. Trichodorus spp. Tylenchorhynchus spp. Xiphinema spp.
MAMON CHINO ( ) NO ESTABA EN EL MANUAL Aphelenchoides sp. Helicotylenchus sp. Pratylenchus sp Tylenchus sp
MANGO (Mangifera indica Anacardiaceae ) Aphelenchoides sp. Criconemella spp. Helicotylenchus spp. Meloidogyne spp. Paratylenchus spp. Pratylenchus spp. Rotylenchulus sp. Rotylenchulus reniformis Tylenchus sp
MAZ ( Zea mays - Poaceae ) Aphelenchoides sp. Criconemoides sp Criconemella spp.
Tylencholaimidae Xiphinema spp.
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MARACUY (Passiflora edulis Passifloraceae) Aphelenchus sp Aphelenchoides sp Criconemella spp. Helicotylenchus spp. Meloidogyne sp. Tylenchus sp
Meloidogyne javanica Meloidogyne incognita Pratylenchus sp
MORA (Rubus frutticosus - Rosaceae ) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Criconematidae Criconemoides sp.
MARAN ( Anacardium occidentale Anacardiaceae ) Aphelenchus sp. Aphelenchoides sp. Criconemella spp. Criconemoides sp. Helicotylenchus spp. Meloidogyne incognita Meloidogyne spp. Paratylenchulus sp Paratylenchus spp. Pratylenchus spp. Rotylenchulus sp. Rotylenchulus reniformis Tylenchulus semipenetrans Xiphinema spp.
Helicotylenchus spp. Hemicycliophora sp. Heterodera sp. Meloidogyne spp. Ogma sp. Paratylenchus sp Pratylenchoides sp. Pratylenchus spp. Psilenchus sp. Trichodorus sp. Tylenchus sp. Xiphinema sp.
NARANJA (Citrus sinensis - Rutaceae) Aphelenchus sp. Aphelenchoides sp. Criconematidae
MELON (Cucumis melo Cucurbitaceae) Aphelenchus sp Aphelenchoides sp Criconematidae Meloidogyne sp
Criconemella spp. Helicotylenchus spp. Longidorus spp. Meloidogyne spp. Paratylenchus spp. Pratylenchus spp.
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Rotylenchulus spp. Tylenchus sp. Trichodorus spp. Tylenchulus semipenetrans Xiphinema spp.
NONI (
) No esta en el manual
Aphelenchus sp Aphelenchoides sp Aphelenchoides bicaudatus Criconemoides sp Criconematidae
NARANJILLA ( Solanum quitoense Solanaceae ) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Criconematidae Criconemoides sp. Criconemella spp. Helicotylenchus sp. Hemicycliophora sp. Meloidogyne spp. Ogma sp. Pratylenchus spp. Psilenchus sp. Rotylenchulus sp. Tylenchus sp. Tylenchidae Tylenchulus semipenetrans
Helicotylenchus sp. Meloidogyne sp. Pratylenchus sp Seinura sp Tylenchus sp
AME (Dioscorea alata Dioscoreaceae) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Helicotylenchus sp. Meloidogyne sp. Meloidogyne javanica Meloidogyne incognita Pratylenchus sp Tylenchus sp
AMPI (Colocasia esculenta - Araceae) NSPERO ( )No esta en el manual Aphelenchus sp. Aphelenchoides sp. Helicotylenchus sp. Meloidogyne sp. Xiphinema sp. Tylenchida Aphelenchus sp. Criconemoides sp. Helicotylenchus sp. Meloidogyne sp. Psilenchus sp. Rotylenchulus sp. Tylenchus sp.
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PAPAYA ( ) NO ESTA EN EL MANUAL DEL MAG Aphelenchoides sp Aphelenchus sp Helicotylenchus sp Tylenchus sp Rotylenchulus sp
Meloidogyne spp. Paratylenchus spp. Pratylenchus spp. Tylenchorhynchus spp. Tylenchulus spp Tylenchus sp Xiphinema spp.
PALMA ACEITERA (Elaeis guineensis - Araceae ) Aphelenchus sp. Bursaphelenchus cocophilus (= Radinaphelenchus cocophilus) Helicotylenchus sp. Tylenchus sp Tylenchorhynchus spp. PALMERA ORNAMENTAL no esta en el manual del mag Aphelenchoides sp Aphelenchus sp Tylenchus sp Rotylenchulus sp
PAPA (Solanum tuberosum Solanaceae) Aphelenchus sp. Aphelenchoides sp. Criconemella spp. Helicotylenchus spp. Hemicycliophora spp. Meloidogyne spp. Paratylenchus spp. Pratylenchus spp. Tylenchus sp Tylenchorhynchus spp. Trichodorus spp. Xiphinema sp.
PAPAYA ( Carica papaya - Caricaceae PALMITO ( = PEJIBAYE ) ( Bactris gasipaes - Araceae ) Criconemoides sp Criconemella spp. Dolichodorus spp. Gracilacus sp. Helicotylenchus spp. Longidorus spp.
Aphelenchus sp. Aphelenchoides sp. Criconemoides sp Criconemella spp. Helicotylenchus spp. Hoplolaimus sp Meloidogyne sp
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Meloidogyne arenaria Meloidogyne javanica Meloidogyne incognita Paratylenchus spp. Pratylenchoides sp A Pratylenchus spp. Rotylenchulus sp. Rotylenchulus reniformis Tylenchus sp
Helicotylenchus spp. Hemicycliophora sp. Hemicriconemoides sp Meloidogyne sp Tylenchus sp Xiphinema sp. PASTO KIKUYO (Pennisetum clandestinum - Poaceae) Aphelenchoides sp. Criconematidae
PASTO BRANQUIPARA ( ) NO ESTA EN EL MANUAL Criconematidae Criconemoides sp Helicotyelnchus sp Pratylenchus sp Macroposthonia sp
Criconemella spp. Criconemoides sp. Helicotylenchus sp Hemicycliophora spp. Hemicriconemoides sp Heterodera sp. Hexatylina sp. Meloidogyne hapla
PASTO ESTRELLA (Cynodon nlemfuensis - Poaceae) Criconemoides sp. Criconematidae Criconemella sp Helicotylenchus sp. Macroposthonia sp. Pratylenchus sp.
Meloidogyne spp. Pratylenchus sp. Trichodorus spp. Tylenchus sp. Tylenchidae Xiphinema spp.
PASTO SAN AGUSTN (Stenotaphorum secundatum - Cyperaceae)
PASTO ESTRELLA ( Cynodon nlemfuensis - Poaceae) Criconematidae Criconemella spp. Criconemoides sp.
Criconemella spp. Helicotylenchus spp. Meloidogyne sp Paratylenchus sp Pratylenchus sp

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Tylenchus sp
Meloidogyne javanica Meloidogyne spp. Pratylenchus sp.
PASTO TIF-EAGLE ( ) No est en el manual Criconemoides sp Helicotylenchus sp Hemicycliophora sp Meloidogyne sp Tylenchus sp
Pratylenchus brachyurus Pratylenchus spp. Tylenchus sp. Xiphinema sp
PLTANO ( M. acuminata x M. balbisiana AAB - Musaceae) Aphelenchoides sp
PEJIBAYE ( MANUAL
) NO ESTA EN EL
Aphelenchus sp Criconematidae Criconemoides sp. Criconemellas spp. Longidorus spp. Helicotylenchus sp. Meloidogyne sp. Meloidogyne javanica
Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp Criconemoides sp Helicotylenchus sp. Tylenchus sp
PIA ( Ananas comosus Bromeliaceae ) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Belondiridae Criconemoides sp Criconematidae Ditylenchus sp. Helicotylenchus spp. Helicotylenchus multicintus Longidorus sp. Meloidogyne incognita
Meloidogyne incognita Paratylenchus spp. Psilenchus sp. Pratylenchus sp. Pratylenchus coffeae Radopholus similis Tylenchus sp. Trichodorus spp. Xiphinema spp.
PLATANO CON PALMITO Este no esta en el manual Aphelenchoides sp. A

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Aphelenchus sp Criconematidae Helicotylenchus sp. Meloidogyne sp. Radopholus similis Tylenchus sp
Pratylenchus spp. Trichodorus sp. Tylenchus sp. Xiphinema sp.
REPOLLO ( Brassica oleracea var. capitana - Brassicaceae )
POTHOS ORNAMENTAL (Scindapsus aureus - Araceae) Aphelenchus sp. Aphelenchoides sp. Helicotylenchus sp. Meloidogyne sp. Pratylenchus sp Psilenchus sp. Radopholus similes Tylenchus sp.
Aphelenchus sp. Criconemoides sp Criconemella spp. Helicotylenchus spp. Laimaphelenchus sp. Dolichodoridae Meloidogyne hapla Meloidogyne incgnita Paratrichodorus porosus Pratylenchus spp. Trichodorus spp.
RABANO ( ) SE AGREGO AL MANUAL Helicotylenchus sp
Tylenchidae Xiphinema spp. Quinisulciuos
REMOLACHA ( Beta vulgaris Chenopodiaceae) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp Aphelenchus sp. Criconemella spp. Helicotylenchus spp. Meloidogyne sp. Meloidogyne hapla Paratylenchus spp.
ROSA ( Rosa spp. - Rosaceae ) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Criconemella spp. Hemicycliophora spp. Helicotylenchus spp. Meloidogyne sp Meloidogyne hapla Paratrichodorus spp. Paratylenchus spp.
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Pratylenchus spp. Trichodorus spp. Tylenchus sp
TIQUISQUE (Xanthosoma saggitifolium Araceae) Aphelenchus sp. Aphelenchoides sp.
SCHEFFLERA ( Brassaia arboricola Araliaceae ) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp Helicotylenchus spp. Meloidogyne spp. Paratylenchus spp. Pratylenchus spp. Rotylenchulus spp. Tylenchus sp Scutellonema sp SEBRINA ORNAMENTAL ( ) NO ESTA EN EL MANUAL DEL MAG Pratylenchus sp Psilenchus sp Tylenchus sp SPATHAGLOTIS ORNAMENTAL ( ) NO ESTA EN EL MANUAL Aphelenchoides sp. . Aphelenchus sp.. Helicotylenchus spp. Ditylenchus sp. Ecphyadophoridae sp.. Meloidogyne sp. Tylenchus sp.
Criconemella spp. Helicotylenchus spp. Meloidogyne spp. Paratylenchus spp. Pratylenchus spp. Rotylenchulus spp.
TOMATE ( Lycopersicon esculentum Solanaceae) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Criconemoides sp Criconematidae Criconemella spp. Ditylenchus sp. Helicotylenchus spp. Hemicycliophora spp. Meloidogyne sp. Meloidogyne hapla Meloidogyne incognita Meloidogyne javanica Paratrichodorus sp. Pratylenchus spp. Trichodorus spp. Tylenchus sp. Xiphinema sp.
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TOMATE ORGANICO ( Lycopersicon esculentum - Solanaceae) (SE AGREGO) Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Helicotylenchus sp. Meloidogyne sp.
Tylenchus sp. Rotylenchus sp
VAINICA ( ) Aphelenchoides sp. Aphelenchoides besseyi Aphelenchus sp. Ditylenchus sp
TOMATE DE PALO ( Cyphomandra betacea - Solanaceae) Se agreg Helicotylenchus sp Meloidogyne sp Tylenchus sp
Helicotylenchus sp. Pratylenchus sp Seinura sp. Tylenchus sp.
VAINILLA TIQUISQUE (Xanthosoma saggitifolium Araceae ) Aphelenchus sp. Aphelenchoides sp Criconemella sp Criconemoides sp. Helicotylenchus sp. Paratylenchus spp. Pratylenchus spp. Rotylenchulus spp YUCA ( Manihot esculenta Euphorbiaceae) Aphelenchus sp. Criconematidae Helicotylenchus spp. Meloidogyne spp. Pratylenchus spp. ZANAHORIA ( Daucus carota Apiaceae) Aphelenchus sp. Aphelenchoides sp. Criconemoides sp. Criconemella spp. Helicotylenchus spp. Hemicycliophora sp. Heterodera sp. Meloidogyne sp.
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Aphelenchoides sp. Aphelenchus sp. Belondiridae Helicotylenchus sp. Malenchus sp. Trichodorus sp Tylenchus sp
Meloidogyne hapla Meloidogyne javanica Meloidogyne incognita Paratylenchus spp.
Pratylenchus spp. Trichodorus spp. Tylenchus sp.
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MANEJO INTEGRADO DE NEMATODOS FITOPARSITOS (Requiere revisin y adaptacin) Aspectos Generales
Antes de hablar especficamente de manejo de nematodos, es necesario mencionar algo sobre la planta hospedera y su entorno ya que ambos factores inciden directa o indirectamente en las poblaciones de nematodos.
Que es el suelo? La respuesta puede variar de acuerdo a la ptica profesional. Probablemente la respuesta sera muy distinta si se la hacemos a un ingeniero civil, un gelogo, un agrnomo o un eclogo. El suelo constituye un ambiente dinmico en constante cambio, no slo desde el punto de vista qumico, sino desde el punto de vista biolgico. Dado a la complejidad de interacciones que se presentan, est ampliamente aceptado considerar al suelo como un ecosistema.
Desde el punto de vista fsico, el suelo es un sistema de tres fases: Fase slida (arena, limo y arcilla). Las arcillas son las que tiene el mayor efecto sobre la actividad biolgica del suelo. Tienen mayor superficie de intercambio, retienen el agua y diversos compuestos. Las fracciones ms gruesas, facilitan la difusin de agua y gases que afectan directamente la parte abitica del suelo. Fase acuosa. Donde se estn disueltos compuestos orgnicos e inorgnicos. La mayora de estos compuestos esenciales para el desarrollo de las plantas, como tambin los compuestos que son emanados de las races de las plantas, pueden influir negativamente o positivamente en los microorganismos del suelo. Fase gaseosa. La cual difiere en composicin de la atmsfera que nos rodea. Sumamente importante para las plantas como para la mayora de los microorganismos que son aerbicos.
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Desde el punto de vista biolgico, si consideramos el suelo como un ecosistema, se deben de dar una serie de procesos ecolgicos que le permitan al sistema ser auto sostenible. En este sentido tiene que darse un flujo energtico y reciclaje de nutrientes a travs de la interaccin de organismos productores (plantas convierten el dixido de carbono atmosfrico en azcares como fuente de energa), consumidores (primarios, secundarios y terciarios) y
descomponedores. Es un ambiente dinmico, dnde la relacin entre nematodos planta suelo es de naturaleza qumica.
Entre los elementos biticos del ecosistema del suelo, los nematodos forman parte de la mesofauna (caros, collembolas, nematodos) natural del suelo, esto quiere decir que estn presentes en todos tipo de suelo y no exclusivamente en suelos agrcolas. Un metro cuadrado de suelo puede contener millones de individuos pertenecientes a distintos grupos taxonmicos. Solo los insectos superan a los nematodos en diversidad de especies en el reino animal.
Actualmente se han descrito y estudiado unas 25.000 especies, sin embargo, a criterio de los expertos, an se desconoce el 97 % de las especies existentes en el mundo. El termino nematodo en la mayora de los casos lo asociamos con agentes patgenos de plantas y animales. No obstante, solo una pequea fraccin establece una relacin parsita con las plantas, alimentndose bsicamente del citoplasma de las clulas vegetales Los nematodos fitoparsitos tienen un efecto negativo en la produccin agrcola ya afectan la capacidad de la planta de obtener el agua y los nutrientes del suelo, afectando la calidad y tamao de frutos y tubrculos. La mayora de los
nematodos no son parsitos ni plagas y por el contrario cumplen una funcin importante en el ecosistema. Desde el punto de vista ecolgico los podemos ubicar en 8 grupos funcionales o grupos alimenticios:
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Fitfagos: Se alimentan de lquidos de plantas vasculares mediante el estilete o odontoestilete. Abertura < 1 um. No todos producen dao evidente a las plantas. Ectoparsitos, Semiendoparsitos, encoparsitos (migratorios y sedentarios).
Micfagos: Los nematodos incluidos en esta categora, penetran las hifas de los hongos con su estilete. La abertura del lumen es 0.2 um, la csula ceflica es usualmente dbil, no hay ndulos y en algunos el bulbo medio esta muy desarrollado.
Bacterifagos: Incluye especies que se alimentan de cualquier fuente de organismos procariotes. El aparato bucal o estoma puede ser muy reducido o bien muy amplio. Algunos presentan crecimientos ceflicos.
Ingestores de substrato: Se ha reportado solo en algunos nematodos de suelo y en algunos marinos. Se refiere a la ingesta activa de la fuente de alimento, pero en algunos casos es pasiva o accicedntal cuando el nematodo se aliementa de bacterias o por depredacin.
Depredadores: Algunos nematodos se alimentan de otros invertebrados (nematodos, rotferos, etc). Los depredadores se pueden dividir en dos grupos: ingestores y los perforadores. Los primeros provistos de una gran cavidad bucal y un diente mvil y los segundos provistos de un estilete para perforar la presa y succionar su contenido.
Alimentadores de clulas eucariticas unicelulares: Se tiene reportes de varios nematodos que se alimentan de esporas de hongos, diatomeas y otras algas.
Estados infectivos de animales: Se incluyen, dado varios estados en su ciclo de vida permanecen en el suelo y contribuyen en los procesos ecolgicos. Omnvoros: Los que utilizan varias fuentes de alimento. Esta aparentemente restringido a los Dorylaimidos.
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Desde el descubrimiento del primer nematicida, el combate qumico se convirti en el primer aliado de los agricultores para el combate de nematodos. De unas pocas parcelas experimentales que fueron tratadas con nematicidas en 1928 en los E.U, en 1985 unas 800.000 hectreas y millones de metros cuadrados en invernaderos y
viveros fueron tratadas con nematicidas. La efectividad y el bajo costo de algunos nematicidas estimul la aplicacin rutinaria de estos productos, provocando un cambio en los mtodos tradicionales utilizados para el control de nematodos. Pareca posible la erradicacin de los nematodos de ciertos cultivos.
RIEZGOS AMBIENTALES Y DE SALUD CAUSADOS POR LOS NEMATICIDAS. Residuos de nematicidas en productos comestibles Toxicidad aguda a mamferos Toxicidad en aves Afectan a un gran nmero de organismos de suelo, incluyendo bacterias nitrificantes, Esterilidad masculina (reduce el # de espermatozoides) Algunos asociados con cncer Contaminacin de pozos de agua potable Contaminacin de aguas superficiales Responsables de mortalidad de organismos acuticos. Degradacin de la capa de ozono (79.000 toneladas anuales de Bromuro de metilo).
Como resultado de un mayor nivel de conciencia de los efectos negativos de los plaguicidas en el ambiente y la salud humana, hay gran inters en la bsqueda de alternativas no qumicas para el manejo de plagas y enfermedades. Esta tendencia ha sido particularmente aparente en el campo de la nematologa, considerando que en la ltima dcada muchos nematicidas han sido eliminados del mercado y para otros ya se ha escrito su orbituario.
PROBLEMAS DEL CONTROL QUMICO

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Difcil la bsqueda de nuevas molculas con accin nematicida Costo econmico y regulaciones ambientales Algunas caractersticas de los nematodos (cutcula, huevos, quistes) que limitan la accin de los nematicidas qumicos. Microorganismos que degradan o inactivan los nematicidas. Suelo es la principal barrera.
Hoy da es urgente la bsqueda de medios no qumicos ambientalmente seguros para el control de nematodos. No obstante, la falta de alternativas efectivas hace a la
agricultura comercial muy dependiente de los productos qumicos para el control de plagas y enfermedades.
El manejo integrado de nematodos no es un concepto nuevo, se ha adaptado de un concepto ms amplio Manejo Integrado de Plagas. Desde la dcada de los 70 se hablaba de las bases o principos del MIP y es en la dcada de los 80 que toma mayor fuerza. El concepto del manejo es la estabilizacin de las poblaciones a niveles
aceptables (poblaciones por debajo del nivel de dao econmico). El MIN incluye la implementacin de dos o ms prcticas de combate que tengan efecto en la reduccin de una o ms especies de nematodos. Se ha demostrado que el MIN tiene significado en programas a largo plazo y las soluciones a corto plazo mediante medidas aisladas son totalmente inadecuadas. El MIN requiere investigacin, desarrollo y transferencia de tecnologa, lo que implica la accin conjunta de varias instituciones y trabajo multidiciplinario.
ANLISIS DEL PROBLEMA
Antes de implementar cualquier medida de combate de nematodos, el primer paso es determinar la presencia de nematodos potencialmente dainos al cultivo. Los daos causados por nematodos son usualmente difciles de detectar a nivel de campo, dado que los sntomas de la planta hospedera no son especficos. Se sospecha de problemas
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de nematodos cuando observamos sntomas tales como: pobre crecimiento, poco desarrollo del sistema radical, bajo rendimiento, plantas clorticas, marchitamiento, necrosis de raices, ramificacin excesiva de races, agallas radicales. El anlisis requiere: Un muestreo de suelo partes vegetales adecuado (patrones de distribucin espacial) Anlisis de laboratorio que relacionen tipo de nematodo y densidad poblacional (conocimiento taxonmico adecuado = a nivel de especie)
El diseo e implementacin del MIN se fundamenta en tres principios: Exclusin Reduccin de las poblaciones Tolerancia
EXCLUSIN
Las prdidas en cultivos causadas por nematodos pueden ser evitadas previniendo la introduccin de nematodos especficos o problemas de nematodos dentro de reas donde la especie o el problema no existe. El punto focal de la exclusin es la especie de nematodo. La exclusin es la primera medida a implementar para prevenir la
diseminacin y establecimiento de los nematodos a nuevas reas. La diseminacin est asociada usualmente con el movimiento de suelo, material vegetal, maquinaria,
contenedores, animales (hombre), agua y viento. Cultivos de cobertura, rompevientos y manejo de agua, limitan la diseminacin area. El establecimiento esta relacionado con condiciones ambientales adecuadas para el nematodo y un hospedero susceptible.
La exclusin incluye: Cuarentenas (local, nacional o internacional): prevenir o disminuir la introduccin y diseminacin de nematodos. Items a cuarentena: material vegetal, suelo, agua, maquinaria, contenedores y vehculos. Material vegetal certificado
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Suelo y medios de cultivo libre de nematodos Procedimientos de erradicacin.
REDUCCIN DE POBLACIONES
Los daos en los cultivos causados por nematodos fitoparsitos pueden ser atenuados mediante procedimientos diseados para disminuir la densidad poblacional de nematodos a niveles aceptables (estabilizar las densidades de poblacin por debajo del nivel de dao. El punto focal es la reduccin de la poblacin dado que la erradicacin es prcticamente imposible. Eliminar poblaciones de nematodos establecidas no es factible en la mayora de los casos. La reduccin de poblaciones mediante distintas estrategias: puede llevarse a cabo
Prcticas culturales: Barbecho, poca de siembra, destruccin de residuos de cosecha, enmiendas orgnicas, abonos verdes, nutricin y cuidados del cultivo, rotacin de cultivos.
Mtodos fsicos: Desinfeccin de suelo (agua caliente, vapor, aire caliente, calor seco), desecacin, solarizacin (efecto del color del mulch), fuerzas mecnicas (abrasin en suelos de textura arenosos), inundacin, desinfeccin de material vegetal mediante calor, microondas, electrocucin, hielo seco como crionematicida, radiacin (Rayos ultravioleta, Rayos X y otras
radiaciones ionizantes), ultrasonido, lavado del material vegetal. Mtodos biolgicos: hongos nematfagos, hongos endoparsitos, hongos parsitos de hembras, huevos y quistes, mico rizas, bacterias, virus, nematodos depredadores, otros microorganismos de suelo, plantas trampa, plantas antagnicas. Mtodos qumicos: nematicidas fumigantes y no fumigantes. Aplicaciones al suelo, follaje, tratamiento de semillas, inmersin de semillas, remojo de partes vegetales (races, cormos, etc)
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TOLERANCIA Las prdidas en los cultivos causados por nematodos fitoparsitos pueden ser reducidos mediante la manipulacin del hospedero en relacin a su ambiente. En otras palabras procedimientos que protejan o aumenten la tolerancia de la planta al ataque de nematodos. En este caso, el punto focal es la planta hospedera.
Tolerancia incluye: Variedades resistentes Prcticas culturales (optimizar la humedad y nutrientes disponibles, atenuar el estrs fsico (altas y bajas temperaturas) y biolgico (insectos, enfermedades). Micorrizas (actan en la planta y no directamente en los nematodos)
CONSIDERACIONES ECONMICAS Es importante primero definir el significado de control en el caso de los nematodos fitoparsitos. Para nematodos parsitos de animales y especialmente del hombre, control significa erradicacin del hospedero, sin embargo, la erradicacin de nematodos fitoparsitos solo es posible bajo ciertas condiciones ya que implica remover el suelo, lo cul no es prctica en la mayora de las circunstancias. Adems que no es una garanta absoluta, ya que los nematodos podran nuevamente recolonizar un suelo nuevo.
En trminos prcticos, control de nematodos debe entenderse como manejo de nematodos, que significa, reducir las poblaciones a densidades aceptables. Aceptable tiene una connotacin netamente econmica, y esta en relacin al retorno econmico que se obtiene (rendimiento del cultivo) una vez aplicada la medida de control. Hay cultivos que por su alto valor econmico, permiten la implementacin de medidas de control costosas en relacin con otros cultivos.
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Hoy da se habla del Manejo Integrado de Nematodos (MIN), el cul consiste en la implementacin de dos, tres o ms prcticas de combate orientadas a mantener las densidades de nematodos a niveles tan bajos como sea posible. El manejo de nematodos podemos incluir: Combate qumico Combate cultural Combate biolgico Combate por resistencia Combate fsico
COMBATE QUMICO Nematicidas Por mucho tiempo, el combate qumico, era el tema de mayor relevancia en muchas de las publicaciones sobre control de nematodos. Hoy da, los nematicidas qumicos no tienen un futuro muy optimista y en muchos casos se ha escrito su orbituario.
Los nematicidas qumicos han sido utilizados por dcadas en forma rutinaria, sin cuestionarse la necesidad o no de hacerlo. Inicialmente los primeros nematicidas utilizados fueron productos de desecho. El primer nematicida fue Hidrocarburo halogenado = era un producto de desecho de procesos industriales. En Hawai para combate de nematodos en pia, se utiliz desechos de Cloropicrina (gas lacrimgeno) como nematicida fumigante. La Compaa Shell acumul grandes cantidades de Glycerol, producto de manufacturacin de guerra. A finales de los 40, los agricultores de Hawai utilizaron con gran xito una mezcla clorinada de este producto bautizada comom DD ( 1,2 dicloropropano, 1,3 dicloropropeno).
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Estos productos tenan actividad biocida y eliminaban no solamente los nematodos si no tambin toda la biota del suelo. Entre los efectos negativos podemos citar: Efecto fitotxico = solo se poda aplicar en suelo desnudo Eliminacin de organismos de suelo, provoc cadas del nitrgeno disponible para los siguiente cultivo Deteccin de residuos peligrosos en el suelo y en el agua. Adems de deteccin de residuos en plantas (comestibles) que ponan en riesgo la salud humana.
Hoy da el uso de estos productos es prohibido o su uso es muy restringido.
La produccin de insecticidas fue responsable de la segunda generacin de nematicidas . Estos productos tienen la ventaja que no son fitotxicos. Tiene efecto neurotxico alterando algunas funciones de los nematodos como: movimiento, orientacin, alimentacin y reproduccin. El objetivo de estos productos es proteger la planta y no necesariamente erradicar los nematodos. Desafortunadamente, la alta toxicidad en mamferos, los nematicidas con accin sistmica estn siendo prohibidos o de uso restringido. Esto ha tenido serias consecuencias en productores de papa Europeos en dnde no hay alternativas para el control de algunos nematodos.
La produccin de nuevos nematicidas qumicos deben de cumplir con estrictas normas de seguridad ambiental y de salud humana (toxicologa) lo que hace remoto la produccin de nuevos productos. Sin embargo, investigaciones novedosas abren nuevas fronteras para el control de nematodos.
COMBATE CULTURAL
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Prcticas culturales : Uso de material libre de nematodos Nutricin y cuidados del cultivo Barbecho Inundacin poca de siembra Medidas sanitarias Rotacin de cultivos Enmiendas orgnicas
Rotacin de cultivos En una de las medidas de control ms sencilla, la cul es conocida y aplicada hace varios siglos, aunque inicialmente los productores tenan conocimiento de problemas fitosanitarios, si hablaban de suelo enfermo o cansado. La rotacin de cultivos (siembra de cultivo (s) en una secuencia determinada) ha demostrado ser una prctica muy efectiva en la reduccin de las poblaciones de nematodos en el suelo y esta siendo nuevamente redescubierta y retomada como una alternativa para reducir las poblaciones de nematodos. La rotacin de cultivos es efectiva contra especies de nematodos que tienen un reducido mbito de hospederos. Nematodos polfagos son ms difciles de controlar, debido a lo difcil de encontrar una planta no hospedera y que sea rentable para el agricultor. La rotacin para que sea efectiva, debe ser
implementada con cultivos resistentes o no hospederos entre los cultivos susceptibles. Las poblaciones de nematodos se incrementan rpidamente en presencia del cultivo susceptible y bajan muy lentamente en ausencia del hospedero. Se ha demostrado que la rotacin es efectiva cuando el cultivo susceptible se siembra en ciclos de 4 aos o ms ( depende de nematodo y planta hospedera). Sin embargo, en la agricultura intensiva no resulta prctico ni rentable. Otra limitacin de la rotacin es la posibilidad de incrementar una poblacin de nematodos que antes de la rotacin no constitua un problema. Esto sucede con especies polfagas y un caso tpico en zonas tropicales son los nematodos formadores
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de ndulos. En este mismo sentido, para que la rotacin sea efectiva, es importante el control de malezas, ya que muchas de estas plantas son excelentes hospederas de nematodos.
Enmiendas y abonos verdes Un buen nmero de plantas contienen o producen sustancias que son txicas a los nematodos v.g Marigold ( Tagetes spp), higuerilla = castor bean (Ricinus coomunis), sesamo ( Sesamun indicum), el neem (Azadirachta indica), etc. Si los nematodos
invaden el sistema radical de estas plantas, no tienen mucha posibilidad de sobrevivir.
El beneficio de estas plantas, es usarlas como abonos verdes obtenindose un efecto doble: 1. Liberacin de sustancias txicas a nematodos dainos 2. La materia orgnica favorece una alta diversidad y densidad de microflora y microfauna del suelo, entre ellos organismos antagnicos.
Un mtodo barato y que ha demostrado ser muy efectivo, es la incorporacin al suelo de las tortas de aceite oil cakes. Son el residuo en la produccin de aceites de semillas (algodn, sesamo, mostaza, aceite de palma, etc). La degradacin microbiana de estos productos, produce amonio en cantidades suficientes daino a los fitonematodos sin producir efectos negativos en la dems biota del suelo o la planta.
Efectos similares se han obtenido al incorporar compuestos a base de quitina (desechos de la industria = caparazones de crustcesos). Adems de la liberacin de amonio, se incrementa la actividad quitinoltica del suelo, teniendo un efecto deletreo en los huevos de nematodos que estn formados de quitina.
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La adicin de otros compuestos orgnicos ha demostrado ser efectivo contra nematodos: ( incremento de antagnica, liberacin de compuestos txicos, aumento de temperatura y aumento vigor de la planta).
COMBATE POR RESISTENCIA Cultivos resistentes El uso de cultivares resistentes parece ser el mtodo ms realista para el control de nematodos fitoparsitos. As por ejemplo en algunos pases Europeos, el 80 % de las variedades registradas de papa son parcial o totalmente resistentes a uno o ms patotivos del nematodo enquistador Globodera rostochiensis y G. Pallida.
En nematologa la resistencia se define como la habilidad de la planta a limitar la reproduccin del nematodo, sin embargo la resistencia es contrarrestada por la virulencia, la cul es la habilidad de ciertos genotipos de algunas especies de nematodos de reproducirse en algunos cultivares de plantas.
Dos tipos bsicos de resistencia se pueden distinguir: 1. Natural ( basada en genes presentes en la planta) 2. Artificial (basa en genes disponibles en diversas plantas o de otro tipo de organismos)= ingeniera gentica.
En la resistencia natural podemos distinguir entre resistencia pasiva y resistencia activa. La Pasiva o Pre-infeccional es un carcter inherente de la planta y es independiente del ataque de los nematodos. Se fundamenta en diversos factores: ausencia de atrayentes, carencia de nutrientes esenciales para el nematodo, presencia de repelentes o txicas al nematodo.
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La resistencia activa o post-infeccional, tiene que ver con la habilidad inherente de la planta a reaccionar al ataque de los nematodos mediante un mecanismo fisiolgico de defensa, que se dispara por las secreciones glandulares de nematodo. El mecanismos ms importante, es la reaccin de hipersensibilidad de la planta. Las clulas vegetales que entran en contacto con las secreciones del nematodo, rpidamente se necrosan y envuelven al nematodo forzndolo a salir o muere por inanicin.
En la resistencia artificial se han hecho avances en los ltimos aos y es un campo muy prometedor en la fitonematologa. Entre los estudios que se le prestado ms atencin, podemos mencionar:
1. Anti-feeding genes = El objetivo fundamental es la destruccin de los sitios de alimentacin. Estos genes son particular inters para el control de nematodos sedentarios que inducen la formacin de clulas gigantes en la planta hospedera. Se conocen algunas enzimas (proteasas, lipasas, DNAsas, que actn como citotoxinas y tienen la capacidad de destruir componentes bsicos de clulas vivientes. 2. Antinematode genes = produccin de sustancias que son txicas, inhibitorias o dainas a los nematodos. Tienen un efecto menos especfico de accin y actan sobre un espectro amplio de nematodos. Se han identificado algunos productos de genes como lectinas o inhibidores de enzimas que juegan un papel importante en la reaccin de defensa de la planta. Parece que las lectinas bloquean rganos sentitivos de los
nematodos, aunque el mecanismo an no esta claramente entendido.
En ambos casos se requiere la liberacin de plantas genticamente manipuladas (TRANSGENICAS) y an existe gran controversia en este sentido, dada a que se carece de datos e informacin del efecto que puede tener el paso de sustancias a travs de la cadena alimenticia.
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CONTROL BIOLGICO Los nematodos tienen una gran cantidad de enemigos naturales ( hongos, bacterias, protozoarios, nematodos, anlidos, artrpodos y virus. Estos organismos son parte natural de la microflora y microfauna del suelo y son abundantes en la mayora de los suelos. Sin embargo, el intento por desarrollar su uso como una tecnologa efectiva ha fallado. La excepcin ha sido la bacteria Pausteria penetrans masivamente y est disponible comercialmente. Uno de los problemas con esta bacteria y con hongos antagonistas es la variabilidad en virulencia. Una cepa puede ser altamente virulenta contra algunas poblaciones pero avirulenta contra otras poblaciones de la misma especie de nematodo. que ya se produce
Los organismos de suelo estn usualmente en un equilibrio dinmico y la adicin de grandes cantidades de un solo organismo, activa el sistema de amortiguamiento biolgico del suelo, lo que trae como consecuencia una rpida reduccin o total eliminacin del organismo introducido. Parece que hay poca posibilidad en un futuro prximo, que un solo agente introducido en forma masiva pueda tener xito en la proteccin de plantas.
Una posibilidad ms realista es favorecer la totalidad de organismos antagnicos a nematodos, favoreciendo la actividad microbiolgica del suelo mediante la adicin de materia orgnica.
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COMBATE FSICO Tratamientos por calor Los nematodos no sobreviven a temperaturas por encima de 50 oC, por lo tanto la aplicacin de calor es sumamente efectiva para matar nematodos. El calor puede ser aplicado de diversas formas. 1. Resistencias elctricas o tuberas con vapor de agua (invernaderos, potes, camas ) 2. Solarizacin (malezas, nematodos otros patgenos de suelo) 3. Microondas (calentamiento de la parte superficial del suelo) 4. Desecacin 5. Inmersin de partes de plantas (races, bulbos, cormos, semillas) en agua caliente. Temperatura y tiempo de exposicin se debe controlar cuidadosamente para evita dao al tejido vegetal. = Tiene la ventaja es una prctica amigable al medio pero muy costosa su implementacin.
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collecting migratory endo-parasitic
nematodes. Plant Disease Reporter. 38 ( 11 ) : 794-795.
Anexos INFILTRACIN EN GLICERINA PURA SOLUCIN S1 Etanol 96% Glicerina pura Agua destilada 200 10 790 20 1 79 mL %
S2 Etanol 96% Glicerina pura 7 930 7 93
S3 Etanol 96% Glicerina pura 700 300 70 30
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Nematodos fitoparásitos en cultivos costarricenses

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UNIVERSIDAD NACIONAL FACULTAD DE CIENCIAS DE LA TIERRA Y EL MAR ESCUELA DE CIENCIAS AGRARIAS LABORATORIO DE NEMATOLOGA

NEMATODOS FITOPARSITOS ASOCIADOS A CULTIVOS AGRCOLAS DE COSTA RICA PROYECTO # 23756

M.Sc ALEJANDRO ESQUIVEL HERNNDEZ Lic. WALTER PERAZA PADILLA

_____________________________________________________________________________ Nematodos Fitoparsitos Asociados a Cultivos Agrcolas de Costa Rica.

RECOLECCION DE MUESTRAS DE SUELO

_____________________________________________________________________________ Nematodos Fitoparsitos Asociados a Cultivos Agrcolas de Costa Rica.

_____________________________________________________________________________ Nematodos Fitoparsitos Asociados a Cultivos Agrcolas de Costa Rica.

2. Muestreo sistemtico en zig zag. Las estrellas representan el sitio de

MANEJO Y CUIDADO DE LAS MUESTRAS

Figura 4. Almacenamiento y envo de muestras al laboratorio en un contenedor de aislamiento trmico (hielera).

Figura 5. Embudo de Baerman mostrando sus principales componentes.

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1. Submuestra de 100 cc de suelo.

2. Dos lavados, permitiendo 30 s de suspensin.

3. Tamizado a travs de dos tamices de 100 y 400 mallas

4. Suelo a un cilindro de PVC con un fondo de tela.

Figura 6. Mtodo de extraccin de nematodos mediante la tcnica de embudo de Baerman modificado.

movilidad de los nematodos y el tipo papel filtro o tela utilizada.

laboratorios, debido especialmente a que es efectiva para extraer

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a. Una vez homogenizada y cuarteada la submuestra se procede a pesar 100 cc de suelo.

b. La submuestra de 100 cc de suelo es colocada en un balde.

e. El movimiento constante del tamiz permite un mejor paso de la suspensin de suelo.

f. Recoger en un tubo de ensayo los residuos retenidos en el tamiz de 400 mallas

g. Centrifugar durante 3 minutos a 3000 rpm.

j. Centrifugar nuevamente minutos a 3000 rpm.

l. Eliminar el exceso de azcar por lavado.

Fig. 8. Extraccin de nematodos por el mtodo de tamizado y centrifugacin azucarada.

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EXTRACCIN DE NEMATODOS DE MATERIAL VEGETAL

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estable por largo tiempo y los nematodos conservan

embargo, algunas de ellas pueden decolarse con el tiempo.

Formalina 4 % Glycerol Agua destilada

capacidad de penetracin y preservacin. nematodos Los pueden

proteccin para su manejo.

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1. Como primer paso, los nematodos

4. Agregar formalina al 4% a una temperatura aproximada de 80 a 90 C.

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3. Inmediatamente el tubo caliente con paraplast se coloca en el portaobjetos.

4. Lamilnilla de Cobb con anillo de parafina terminado.

5. Nematodos en glicerina, se pescan con ayuda de una microaguja. .

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7. En un plantilla caliente a 40 C se coloca la lmina hasta que el anillo de parafina se funda.

8. Montaje permanente terminado

CARACTERISTICAS GENERALES DE LOS NEMATODOS

respiracin y circulacin. En la figura 11 a, 11 b y 11 c se ilustra algunas caractersticas de los nematodos.

HABITOS ALIMENTICIOS DE LOS NEMATODOS

encuentran en altas densidades, provocando un deterioro paulatino del sistema radical,

ANALISIS DE MUESTRAS E INTERPRETACION

_____________________________________________________________________________ Nematodos Fitoparsitos Asociados a Cultivos Agrcolas de Costa Rica.

UNIVERSIDAD NACIONAL LABORATORIO DE NEMATOLOGIA ESCUELA DE CIENCIAS AGRARIAS

FORMULARIO PARA INGRESO DE MUESTRAS DE LABORATORIO

Tipo de muestreo: Sntomas (aspecto general del cultivo): _____________________________ __________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________ Nematodos Fitoparsitos Asociados a Cultivos Agrcolas de Costa Rica.

_____________________________________________________________________________ Nematodos Fitoparsitos Asociados a Cultivos Agrcolas de Costa Rica.

__________________. Alejandro Esquivel H. Nematlogo Laboratorio de Nematologa Universidad Nacional

_____________________________________________________________________________ Nematodos Fitoparsitos Asociados a Cultivos Agrcolas de Costa Rica.

_____________________________________________________________________________ Nematodos Fitoparsitos Asociados a Cultivos Agrcolas de Costa Rica.

repollo, papa, tomate, tomate orgnico, zanahoria, vainica, lechuga.

TUBRCULOS ame, ampi, tiquisque, yuca

Tipo de muestreo: Sntomas (aspecto general del cultivo): _ ______________________________________