Aislamiento en

medios de cultivo
Muestras
◎ Deben obtenerse siguiendo técnicas adecuadas al tipo de
muestra, para tratar de obtener los mejores resultados.

Biopsias
Escamas de piel Polvo de uñas Pelos
cutáneas

Lavado LCR, liq. pleural,

Mucosas Esputo
broncoalveolar liq. Sinovial.

Sangre, medula Catéteres y

Orina
ósea sondas
 “
Examen directo:
◎ Brinda información preliminar o presuntiva
◎ Es una técnica rápida
 Hidróxido de potasio (KOH)
◎ Disuelve rápidamente las células,
digiere material proteico
◎ Para muestras de tejidos
queratinizados, como escamas de
piel, polvo de uñas, pelos y raspado múltiples
conidios de
de córnea. onicomicosis
por
◎ Su efecto se puede incrementar al Scopulariopsis.
calentar a la llama la preparación
 Tinta china
◎ Método de contraste
◎ Permite visualizar la
cápsula de polisacárido
de Cryptococcus
neoformans
 Ácido peryódico de Schiff (PAS)
◎ Tinción clásica para la
mayoría de hongos.
◎ Tiñe tanto levaduras como
hifas en los tejidos.
◎ Uso en casos de
micetomas; principalmente
actinomicetoma y casos de
actinomicosis y PAS de cultivo de Malassezia; se
observan múltiples blastoconidios.
botriomicosis
 Giemsa
◎ Para búsqueda de estructuras
intracelulares: histoplasmosis,
neumocistosis
◎ En extendidos o frotis de
médula ósea, sangre y pus

se observan múltiples hifas

de queratitis micótica
causada por Fusarium.
 Tinción Gram
◎ Gram +  Micosis
◎ útil para seudomicosis
superficiales como eritrasma,
tricomicosis, y profundas, como
nocardiosis y botriomicosis,
infecciones por Malassezia
(malasseziosis), como aquellas
de catéteres centrales, dermatitis Tinción de Gram de dermatitis
seborreica; se observan
seborreica, pustulosis. blastoconidios de Malassezia.
 Blanco de calcoflúor
◎ alta afinidad sobre estructuras
con quitina y otros
polisacáridos
◎ Necesita microscopio con luz
UV para resaltar las estructuras
teñidas de un color verde
fluorescente.
Blanco de calcoflúor; examen
◎ Útil para la detección de todos directo de tiña, con múltiples
los hongos, entre ellos filamentos.
Pneumocystis jirovecii
Cultivos
Agar Dextrosa de Sabouraud (ADS)
◎ Óptimos para el aislamiento rutinario de cepas de hongos
◎ Se deben incubar a 25-28°C
◎ Se pueden contaminar con bacterias fácilmente, por lo que
es conveniente combinarlo con antibióticos. (cloranfenicol)
 Agar Lowenstein – • Para aislamientos de actinomicetos debido a
Jensen su exigencia nutritiva

• Utilizados para prevenir pleomorfismo fúngico,

Medios enriquecidos sobretodo en hongos mohos
• Agar borelli, Czapek Dox

Medios
cromogénicos y • Para orientar en la identificación de especies
agar leche • Útiles para Cándida y Nocardia
descremada
 Cultivos de Nocardia en medios de
Serie de colonias de Cándida spp. leche descremada: izquierda, caseína
Cultivo en medio cromogénico. positiva de N. brasiliensis; derecha,
caseína negativa de N. asteroides.
Desarrollo colonial
Hongos filamentosos
Velocidad de
Temperatura
crecimiento

Rápido: 1-2 semanas

Moderado: 2-3 semanas 20 – 30 °C

Lento: 3-4 semanas

Topografía

Forma • Circular, regula, filamentosa

Elevacion • Plana y extendida, elevada

y limitada, umbilicada

Margen • Entero, lobulado,

desflecado, rizoide

Superficie • Plegada, con surcos

radiados, cerebriforme
Pigmentació
Textura Tamaño
n
Granulosa
anverso Crecimiento
pulverulenta limitado

Reverso vellosa

aterciopelada crecimiento
difusa invasivo
algodonosa
Levaduras
Consistenci
Elevación Textura
a

Abombadas Cremosa Lisas

Planas Mucoide Rugosas

 Temperatur
Color
a
Blanco
20 – 50 °C
Rojo-
anaranjado
Velocidad de
Otros
Crecimiento

Rápido. La mayoría Olor agradable

forman colonias
maduras en
menos de una Se vuelven
semana. pastosas cuando
envejecen
Morfología de colonias
 Características de la
colonia
Anverso: tamaño ilimitado,
tiende a cubrir el medio de
cultivo; color: en un inicio (2
a 3 días) es blanca, luego
toma un color beige; forma
y aspecto: aterciopelada,
polvosa, seca, cerebriforme
(con surcos); características
especiales: es una colonia
sumamente pleomórfica;
reverso: no presenta
pigmentos. La especie S.
brevicaulis puede dar un
pigmento ocre.

Cultivo de Scopulariopsis sp.

 Características de la
colonia
Anverso: tamaño
ilimitado, tiende a
ocupar todo el medio;
color: verde, con un
halo micelial blanco y
en ocasiones rosa;
forma y aspecto:
plana, polvosa,
aterciopelada y seca;
reverso: no presenta
pigmentos.
Cultivo de Aspergillus fumigatus.
 Características de la
colonia
Son mucoides y
brillantes. Sobre el
ASD desarrollan un
color blanco
amarillento, son
poco elevadas y de
bordes continuos.

Colonia de Cryptococcus neoformans

 Características de la
colonia:
Anverso: tamaño limitado,
mide de 2-3 cm en un
tiempo de cuatro días;
color: rosa-rojo; forma y
aspecto: cremosa,
ligeramente acuminada,
lisa y en ocasiones
presenta surcos o
pliegues; reverso: con
pigmento carotenoide
rojo-rosa, que no difunde
al medio.

Cultivo de Rhodotorula rubra.