ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL

DE MEDICINA HUMANA

Curso: Biología Celular y Molecular

PRACTICA N° 06:
MITOSIS.

Docente: Mg. Ysabel Murrugarra Bringas

COMPETENCIA:

Al finalizar la sesión de práctica, el alumno describe las diferentes

etapas de la mitosis a partir de láminas coloreadas de la raíz de
Allium cepa “cebolla”.

MATERIALES:

 Plataforma Virtual
 Video preparado por los docentes
 Diapositivas
 https://www.youtube.com/watch?v=IB8utopTL-c
El proceso por el cual se originan nuevas células a partir de
otras ya existentes se llama división celular o reproducción
celular. Este es un proceso necesario para: remplazar las
células para colaborar con el crecimiento del
muertas, del que forman parte y es la base para la
organismo
reproducción de los organismos a través de la formación de
gametos.

Cada célula en etapa de división se denomina célula madre, y

sus
descendientes se llaman células hijas. Se les llama así porque la
célula madre transmite copias de su información genética a sus
células hijas, posteriormente las células hijas se convertirán en
células madres y volverán a pasar la información genética.
El crecimiento y división celular se llama CICLO CELULAR. Entonces el ciclo
celular esta formado de dos fases importantes: la fase M y la INTERFASE

La fase M incluye: 1) mitosis o meiosis y 2) citocinesis que es la división del

citoplasma para dar células hijas. La célula en fase M pasa un corto tiempo de
todo el ciclo.

MITOSIS: es un proceso de división celular, que ocurre en todas las células

excepto las germinales y que da como resultado dos células hijas con el mismo
número de cromosomas de la célula madre. La mitosis generalmente se divide
en cinco etapas:

1.Profase: La cromatina se condensa para formar cromosomas. Los cromosomas

están formados de dos cromátidas unidos por un centrómero con cinetocoro.
Empieza a organizarse el huso mitótico. El citoesqueleto, el nucleolo y la
envoltura nuclear desaparecen.

2.Prometafase: Los microtúbulos del huso mitótico se fijan a l cinetocoro

de los cromosomas, los cromosomas se desplazan hacia el plano
ecuatorial del huso.
3. Metafase: los cromosomas se alinean en el plano ecuatorial de la célula.
4. Anafase: Separación de las cromátidas hermanas y desde este momento se
les considera a cada una como un cromosoma independiente. Los
cromosomas se mueven hacia los polos opuestos del huso. Este período
termina cuando todos los cromosomas han llegado a los polos. La citocinesis
o división del citoplasma puede comenzar en este período.

5. Telofase: los cromosomas se agrupan en los polos apuestos del huso, se

ensambla la envoltura nuclear alrededor de los grupos de cromosomas, los
nucleolos se vuelven evidentes y desaparecen los microtúbulos del huso. Al
final de esta fase terminara la citocinesis.

En las células animales la citocinesis comienza con un surco que la rodea en la

región ecuatorial, se profundiza y termina por separar al citoplasma en dos
células hijas, cada una con núcleo completo.
En las células vegetales se forma una placa celular en el centro del
citoplasma y finalmente separa a la célula en dos partes iguales.
Fig. Representación de las etapas de la mitosis
 MITOSIS
 Proceso de multiplicación celular que permite el
crecimiento del individuo y el reemplazo de
células dañadas o muertas.

 El resultado esencial es la continuidad de la

información hereditaria de la célula madre en cada una
de las dos células hijas.

 Tiene lugar por medio de una serie de eventos sucesivos

que se desarrollan de una manera continua y que, para
facilitar su estudio, han sido separados en cuatro
etapas.
FASES DE LA
MITOSIS PROFASE
METAFASE
ANAFASE
TELOFASE

6
PROFAS
E
 La cromatina se condensa y se hacen visibles
los cromosomas que están formados por dos
cromátidas unidos por el centrómero.

 Loscentríolos se van separando y se forman

los microtúbulos del huso.

 Lamembrana
nuclear se
fragmenta.

9
10
METAFASE
 Desaparece la membrana nuclear.

Los cromosomas se disponen en el

plano ecuatorial de la célula unidos por
sus centrómeros a las fibras del huso.
ES LA ETAPA EN
LAQUE MEJOR SE
DISTINGUEN
LAS CARACTERÍSTICAS
DE LOS
CROMOSOMAS. 11
12
ANAFASE
 Elcentrómero de
cada cromosoma se
divide.

 Losmicrotúbulos
se contraen
y arrastran a
cada cromátida
hacia polos
14
TELOFASE

 Las cromátidas llegan a

los polos de la célula.

 Se forma la membrana
nuclear.

 Desaparece el huso.

 Las cromátidas dejan de

ser visibles.

 Comienzan a dividirse la
membrana celular y el citoplasma
16
CITOCINESI
S
 No es una fase de la mitosis.

 Esla división del citoplasma en dos

partes, con una distribución equitativa de
los orgánulos celulares.

 El
resultado final es que la célula madre se
ha transformado endos células hijas
idénticas genéticamente.
18
CITOCINESI
S
En las células animales se hace por
estrangulación, desde fuera hacia adentro.
En las células vegetales se hace por
crecimiento de la pared celular
desde dentro hacia afuera.
¿SABÍAS
QUE…
las células diferenciadas de algunos tejidos, por
ejemplo, las neuronas del sistema nervioso, no pueden
experimentar mitosis ?

las células del epitelio intestinal o de la epidermis sufren

continuos ciclos de división mitótica durante toda la vida
del organismo?

las células del hígado que no suelen experimentar mitosis,

mantienen la capacidad de llevarla a cabo cuando surge la
necesidad?
 SIGNIFICADO BIOLÓGICO DE LA
MITOSIS
- A nivel genético representa un sistema de reparto equitativo e
idéntico de la información genética. Ambas células hijas tendrán la
misma información que es la misma que poseía la célula madre.

- A nivel celular permite la perpetuación de una estirpe celular y

la formación de colonias de células (clones celulares).

-A nivel orgánico permite el crecimiento y desarrollo de los tejidos

y de los órganos de los seres pluricelulares así como la reparación y
regeneración de los mismos. De esta manera todas las células de un
organismo pluricelular, a excepción de las células sexuales, disponen
de idéntica información genética.

21
PROCEDIMIENTO:

Para el reconocimiento de las fases de la mitosis, se realizará una

exposición usando diapositivas a través del aula virtual y se
proyectará un video realizado por los mismos docentes del curso
para complementar la enseñanza.
 VIDEO

https://www.youtube.com/watch?v=LO0G0EViwRE
Procedimiento para
la observación de la
mitosis:
• Observar al microscopio.
• 400X
ob se r v a ci ón
ob se r v a
ci ón
ob se r v a
ci ón
profas
e
me t a f a
se
a na f a se
telofas
e
CUESTIONARIO:
1. ¿Cómo se lleva a cabo la reproducción de las células
eucariotas? Explique.
2. Explique la importancia de la mitosis en la transmisión de la
información genética.
3. Explique las diferencias entre mitosis en células vegetales y
células animales.
4. Las células somáticas de la especie humana tiene 46
cromosomas. ¿Cuantas estructuras cromosómicas se
encontrarán en cada célula en las fases del ciclo celular?
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL
DE MEDICINA HUMANA

Curso: Biología Celular y Molecular

PRACTICA
EXTRACCIÓN DEL ADN
 COMPETENCIA
Al finalizar la sesión de práctica, el alumno es capaz de aislar y
observar el DNA de un plátano con reactivos caseros. Además,
estará en la capacidad de utilizar un laboratorio virtual para
realizar la extracción de ADN de células humanas.
EXTRACCIÓN DE ADN
 ¿Dónde se encuentra el ADN?
En los organismos llamados eucariotas, el ADN se encuentra dentro de un área
compartimentalizada dentro de la célula llamada núcleo. Debido a que la célula es
muy pequeña, y porque los organismos tienen muchas moléculas de ADN por
célula, cada molécula de ADN debe estar empaquetada de forma muy
compacta y precisa. Esta forma superempaquetada del ADN se denomina
cromosoma.
 Función del
un organismo
ADN
Dirigir el funcionamiento de la célula. El ADN contiene las instrucciones que
necesita para desarrollarse, sobrevivir y reproducirse.
Para realizar estas funciones, las secuencias de ADN deben ser
transcritas a mensajes que puedan traducirse para lafabricación de
proteínas, que son las moléculas complejas que hacen la mayor parte del
trabajo en nuestro cuerpo.
Estructura del
ADN
En los organismos eucariontes el ADN está organizado en forma de
cromosomas,
situados en el núcleo de la célula.
 Genes: Un gen es un segmento corto de ADN. Los genes contienen la
información para construir y mantener las células de un organismo y pasar
los rasgos genéticos a la descendencia.
Estructura de la doble hélice (Componentes).
Bases
Nitrogenadas
 ADN Cromosoma en
célula eucariota
Codifica la información necesaria para
construir la célula y controlar su actividad.

• El ADN de una célula guarda toda la

información necesaria para formar la célula y
dirigir las innumerables reacciones químicas
que se requieren para la vida y la
reproducción.
• La célula usa selectivamente la información
genética del ADN, dependiente de su etapa
de desarrollo, su entorno y la función de la
célula en un cuerpo multicelular

Los cromosomas en las células eucariotas están formados por el

ADN y sus proteínas.
 EXTRACCIÓN DE ADN
• Proceso de liberación del
material genético contenido
dentro de una célula.

El ADN puede ser obtenido de cualquier célula o material biológico

que lo contenga.
FUNDAMENTO GENERAL

Consiste en lograr la lisis o ruptura de la célula, y luego

separar las moléculas de ADN del resto de los
constituyentes de la célula.
LISIS
CELULAR
La aplicación de técnicas moleculares inicia con la extracción de ADN o ARN y la
obtención exitosa de datos confiables y reproducibles. Y todo este depende en gran
medida de la forma en que se extrae y purifica el ADN íntegro y puro.

El estudio de la variación genética entre individuos, poblaciones y especies para explicar

patrones y procesos ecológico-evolutivos se aborda mediante marcadores moleculares.
Estos marcadores son obtenidos con técnicas como PCR y secuenciación, que hace
posible analizar la variación de la molécula del ADN con un alto grado de detalle.

Los datos moleculares han permitido estudiar con mayor precisión los patrones de
diversidad genética y su distribución; el comportamiento; la selección natural; las
interacciones biológicas; la composición, funcionamiento y dinámica de comunidades
microbianas; las relaciones filogenéticas, entre otros.
La extracción consiste en el aislamiento y purificación de moléculas de ADN y se basa en
las características fisicoquímicas de la molécula.
La selección del método de extracción es un paso fundamental en las técnicas
moleculares y depende del organismo en el que se realiza el estudio, el tejido
disponible y su estado de conservación.
ETAPAS DE LA EXTRACCIÓN DE
ADN
Obtención de
la muestra
 ETAPAS DE LA EXTRACCIÓN DE
ADN Fragmentación Disgregación celular
del tejido
Química - SDS, CTAB (Solubilizan proteínas de membrana y rompen la
barrera lipídica)
Enzimática - Lisozima (Desestabiliza los peptidoglicanoscomponentes de
Lisis celular la pared celular), Proteinasa K ( Degrada las proteínas unidas ADN)
Estas etapas Mecánica - Congelamiento, sonicación,maceración
deben ir
Solventes orgánicos - Fenol/ cloroformo (separa las proteínas celulares
acompañadas Purificación ADN del ADN
de agentes que (Remoción de Alcohol isomoamilico (facilita la formación de fases).
inactiven las proteínas) Sales - Cloruro de sodio, acetato de sodio (Permiten que el ADN se
nucleasas pliegue)
celulares Captura de ADN - Membranas, microesferas
Precipitación Alcoholes
ADN -
Cualitativo: Cuantitativo:
Electroforesis Análisis Etanol, isopropanol (disminuye la solubilidad del ADN y lo concentra)
Espectrofotometría

TE – Tris/ EDTA (Inhibidor de nucleasas

Conservació celulares) Almacenar a -20
n
 Métodos Kit
convencionale comerciales
s
 Análisis

Cuantitativo:

Espectrofotometría
Los ácidos nucleicos tienen un máximo de absorción de la luz a 260
nm.

https://www.youtube.com/watch?v=i_3wweyhZpg
Cualitativo:

Detección con electroforesis en gel de agarosa

Detección con electroforesis en gel de
agarosa

Gel
revelado
https://www.youtube.com/watch?v=NL1usCc0n38
 ACTIVIDAD PRÁCTICA
EXTRACCIÓN DE ADN A PARTIR
DE PLÁTANO
 MATERIALES
• Piña
• Plátano
 MATERIALES
• Alcohol 96 frio
• Lavavajillas líquido
• Agua embotellada
• Sal
• Gasas o papel filtro
• Termómetro
• Cubos de hielo
• Termómetro
 MATERIALES
• 1 mortero
• Tijeras
• Colador
• Embudo
• 3 Vasos
• 1 tubo de ensayo o
vaso delgado
• 1 Cuchara
• 1 cucharita
• 1 Tenedor
• Licuadora
 PROCEDIMIENTO: PASO 1
1. Trituración del plátano: Con la ayuda de un cuchillo cortamos unos 100g de plátano
y lo troceamos hasta obtener porciones muy pequeñas. Después aplastamos
todos los trozos con un tenedor para formar una pasta más o menos homogénea.
Depositamos esta pasta en un vaso.
 PROCEDIMIENTO: PASO 2
2. Preparación de la solución de extracción: Con un vaso marcado con volúmenes,
preparamos 100ml de agua y 10ml de detergente liquido. A continuación lo
mezclamos todo en un vaso procurando no formar muchas burbujas. Agregar ¼ de
cucharadita de sal.
 PROCEDIMIENTO: PASO 3
3. Detergente + plátano: Vertemos el detergente en el vaso que contiene el plátano y
lo mezclamos todo procurando de nuevo no hacer muchas burbujas.
 PROCEDIMIENTO: PASO 4
4. Baño caliente: Ponemos agua a calentar y con un termómetro medimos la
temperatura hasta que alcance unos 60ºC aproximadamente. Después introducimos el
vaso con la mezcla y vamos removiendo durante unos 15’ con la ayuda de una cuchara
agitadora. Hay que procurar mantener la temperatura en los 60ºC y no hacer muchas
burbujas.
 PROCEDIMIENTO: PASO 5
5. Baño frio: Preparamos un recipiente con agua y hielo e introducimos el vaso. Lo
dejamos en estas condiciones durante 5’ removiendo constantemente.
 PROCEDIMIENTO: PASO 6
6. Preparación del zumo de piña: Mientras esperamos que pasen los 5’ del baño frío
preparamos el zumo de piña. Cortar un pedazo de piña y trituramos la parte central o
corazón en la licuadora. Filtramos la pasta con un colador para obtener el zumo de piña.
 PROCEDIMIENTO: PASO 7
7. Filtración de la solución: Preparamos un vaso con un colador encima y vertemos el
contenido de la solución de plátano más detergente líquido. A continuación
preparamos un embudo con un papel de filtro o gasa encima y vertemos la solución
obtenida anteriormente recogiendo el líquido en un tubo de ensayo o vaso muy
delgado. Este segundo proceso puede tardar unos minutos.
 PROCEDIMIENTO: PASO 8
8. Solución + zumo de piña: Con un gotero obtenemos 20 gotas de zumo de
piña y lo añadimos a aproximadamente 5ml del extracto en un tubo de ensayo
o un vaso delgado. Dejamos que actúe el zumo en la solución de 2 o 3’.
 PROCEDIMIENTO: PASO 9
9. Solución + alcohol: Sacamos el alcohol del congelador y preparamos en un
tubo de ensayo aproximadamente el mismo volumen de alcohol que de la
solución de interés.
 PROCEDIMIENTO: PASO 10
10. Observación del DNA: Vertemos muy lentamente el alcohol en el tubo de ensayo
con la solución. Al cabo de pocos segundos seremos capaces de observar tres capas
bien diferenciadas. Encima de todo estará el alcohol, debajo de todo estarán los restos
celulares (membranas, orgánulos) del plátano y los otros componentes de la solución y,
en la interfase observaremos una especie de hilos blancos rodeados de burbujas. Eso
es el DNA.
 RESULTADOS
Encima de todo estará el alcohol, debajo de todo estarán los restos celulares (membranas,
orgánulos) del plátano y los otros componentes de la solución y, en la interfase
observaremos una especie de hilos blancos rodeados de burbujas. Eso es el DNA.

Alcohol

ADN

Restos celulares
 CUESTIONARIO
• ¿Qué función cumple el lavavajillas en el
proceso de extracción de ADN?
• ¿Para qué utilizamos el zumo de piña en la
extracción de ADN?
• ¿Qué función cumple el etanol en el proceso
de extracción de ADN?
• ¿Para qué utilizamos sal en el proceso de
extracción de ADN?
https://www.youtube.com/watch?v=aHO981sff-M
 ACTIVIDAD VIRTUAL
https://www.youtube.com/watch?v=WIJSgsz5GN4
 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
1. Lodish, H. F., Berk, A., Matsudaira, P., Kaiser, M., Krieger, M.,
Scott, M. P., Zipursky, S. L. y Darnell, J. E.: Biología Celular Y
Molecular. 7a Ed. Ed. Panamericana. 2016
2. R. Herrera, M. Ghislain, D. Zhang. Molecular Biology
Laboratory Protocols: Plant Genotyping. Ma. del (eds.), Crop
Improvement and Genetic Resources Department Training
Manual. International Potato Center (CIP). 3rd edition
(revised October 2000), Lima, Perú. 2000.
3. Martínez, L. Extracción de ADN. UAB 2015
¡Muchas gracias!