DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No.

5
“Meiosis y Mitosis”

Introducción

Los organismos crecen y se reproducen a través de la división celular.

En las células eucariotas, la generación de nuevas células se produce
como resultado de la mitosis y la meiosis. Estos dos procesos de
división celular son similares pero distintos. Ambos procesos implican
la división de una célula diploide o una célula que contiene dos
conjuntos de cromosomas (un cromosoma donado de cada padre). En
la mitosis, el material genético (ADN) en una célula se duplica y se
divide por igual entre dos células.

Las células se clasifican en somáticas (del cuerpo) y reproductivas

(gametos: óvulos y espermatozoides en mamíferos) y estas células
tiene un ciclo de vida o ciclo celular dentro del cual, se lleva a cabo la
reproducción celular que puede ser, por mitosis, en el caso de las
células somáticas o vía meiosis, para las células reproductivas. Cada
una de estas vías de reproducción celular se compone de varias fases
en las que ocurren cambios importantes en la célula.

Fuente: https://www.youtube.com/watch?v=GxrttjDkmWs

Objetivo

Aprender a diferenciar los periodos del ciclo celular.

Material

Video explicativo de protocolo para observar la mitosis en el

laboratorio

https://www.youtube.com/watch?v=vuZ_ozeagAM

Videos explicativos de ciclo celular: mitosis y meiosis

https://www.youtube.com/watch?v=n8lxbZCE8t4

https://www.youtube.com/watch?v=Mm2jrBw4-KY

Imágenes de mitosis y meiosis (Ver anexo)

Procedimiento

1. Observe los videos sugeridos.

2. Identifique en las imágenes incluidas en este protocolo (Anexo) las

fases de la mitosis.
3. Realicé dibujos de cada una de las fases de la mitosis y la meiosis.
4. Tome fotografías de los dibujos realizados y colóquelos en el
apartado de presentación de resultados.

Presentación de resultados

Realice dibujos a mano con lápiz de colores de todas las fases de la

meiosis y mitosis según los videos observados y las imágenes de
mitosis y meiosis.
Dibujos de Mitosis
 Dibujos de Meiosis

Anexo

Imágenes de Fases de la Mitosis en Cortes de Meristemo de

Cebolla

Profase Metafase
Anafase Telofase

Cuestionario

1. ¿Qué etapas de la meiosis y mitosis observó en los videos?

Rta: Terminada la interfase, empieza la división celular (el proceso

de mitosis) formada por las cuatro fases: Profase, Metafase, Anafase,
Telofase. Fases de la mitosis: La mitosis tiene 4 etapas principales:
profase mitosis, metafase mitosis, anafase mitosis y telofase mitosis.

Puesto que la división celular ocurre dos veces durante la meiosis,

una célula inicial puede producir cuatro gametos (espermatozoides u
óvulos). En cada ronda de división, las células experimentan
cuatro etapas: profase, metafase, anafase y telofase.

2. ¿Qué tipo de células observó?

Rta: Células Somáticas

Células eucariontes

3. ¿Cuáles son las etapas del ciclo celular y que caracteriza a cada
una de ellas?
Rta: Para dividirse, una célula debe completar varias tareas
importantes: debe crecer, copiar su material genético (ADN) y
dividirse físicamente en dos células hijas. Las células realizan estas
tareas en una serie de pasos organizada y predecible que conforma el
ciclo celular. El ciclo celular es un ciclo, y no un camino lineal, porque
al final de cada ronda las dos células hijas pueden iniciar el mismo
proceso exacto otra vez desde el inicio.
En las células eucariontes, o células con un núcleo, las etapas del
ciclo celular se dividen en dos fases importantes: la interfase y la fase
mitótica (M).
Durante la interfase, la célula crece y hace una copia de su ADN.
Durante la fase mitótica (M), la célula separa su ADN en dos grupos y
divide su citoplasma para formar dos nuevas células.
Interfase
Entremos al ciclo celular justo cuando se forma una célula por
división de su célula madre. ¿Qué debe hacer ahora esta célula recién
nacida si desea seguir su vida y dividirse? La preparación para la
división sucede en tres pasos:
Fase G también llamada fase del primer intervalo, la célula crece
físicamente, copia los organelos y hace componentes moleculares que
necesitará en etapas posteriores. 

Fase S. En la fase S, la célula sintetiza una copia completa del ADN
en su núcleo. También duplica una estructura de organización de
micro túbulos llamada centrosoma. Los centrosomas ayudan a
separar el ADN durante la fase M.
Fase G. Durante la fase del segundo intervalo, o fase G, la célula
crece más, hace proteínas y organelos, y comienza a reorganizar su
contenido en preparación para la mitosis. La fase G2, termina cuando
la mitosis comienza.
Las fases G, se conocen en conjunto como interfase. El
prefijo inter significa entre, lo cual refleja que la interfase ocurre
entre una fase mitótica (M) y la siguiente.

4. ¿En cuál fase del ciclo celular se duplica el material genético y por
qué?

Rta: Fase S: Es la segunda fase del ciclo, en la que se produce la

replicación o síntesis del ADN, como resultado cada cromosoma se
duplica y queda formado por dos cromáticas idénticas. Con la
duplicación del ADN, el núcleo contiene el doble de proteínas
nucleares y de ADN que al principio.

5. ¿Cómo se identifica el estado de Profase en una célula en mitosis?

Rta: Los principales acontecimientos que ocurren durante

la profase son:
La cromatina se empieza condensar formando cromosomas.
La envoltura nuclear se fragmenta hasta desaparecer.
Desaparece el nucléolo, dispersándose en el citoplasma.
Cada centriolo, duplicado en la interfase, se desplaza a un extremo
de la célula. Entre ellos, se forma el huso acromático, unos filamentos
de proteínas.
Los cromosomas, se unen a una fibra del huso acromático por
el centrómero, de tal forma que las cromátidas quedan orientadas
hacia los polos de la célula.
Los cromosomas, una vez unidos a las fibras del huso, se van
moviendo hacia el centro de la célula.

6. ¿Qué es la metafase?

Rta: La metafase es la segunda fase de la mitosis y de la meiosis que

sucede después de la profase en donde esta pierde la envoltura y
aparecen los microtúbulos del huso acromático (también llamado
meiótico o mitótico).
Este alineamiento equilibrado en la línea media del huso se debe a las
fuerzas iguales y opuestas que se generan por los cinetocoros
hermanos. El nombre "metafase" proviene del griego μετα que
significa "después".

7. ¿Cómo se identifica el estado de Anafase en una célula en mitosis?

Rta: Dentro del anafase tienen lugar dos procesos. Durante la anafase
temprana las cromátidas se separan al acortarse los microtúbulos y
gracias a los cinetocoros. Cuando las cromátidas están totalmente
separadas comienza la anafase tardía, en la que los microtúbulos son
acortados para dirigir cada grupo de cromátidas hacia polos opuestos
de la célula. Este es también el momento en que los cromosomas
llegan a su máximo punto de condensación, lo que contribuye a su
segregación y la formación de los nuevos núcleos.

8. ¿En cuál tipo de tejido ocurre la meiosis y por qué?

Rta: La mitosis se produce en las células somáticas, pero también en

las germinales. Sin embargo, las células germinales son capaces de
realizar meiosis, un proceso de división celular permite la producción
de gametos, células haploides.
Pero la meiosis no es sólo una simple reducción a la mitad del
número de cromosomas. Así, durante la meiosis se da un proceso
denominado recombinación. En las células germinales, y en todas las
somáticas, la información genética aportada por la madre y por el
padre se encuentra en cromosomas diferentes, ambos progenitores
aportan una copia para cada cromosoma. Durante la recombinación
hay un intercambio de parte de las cromátidas entre cada pareja de
cromosomas homólogos. Es decir, parte de los genes que estaban en
el cromosoma aportado por la madre estarán ahora en el cromosoma
del padre, y viceversa. De este modo tendremos cromosomas con
combinaciones de ADN que antes no existían, es decir una
combinación de alelos nueva, lo que afectará a las características del
nuevo individuo.
 DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 6
“Extracción de DNA”

Introducción

Todo organismo vivo está formado por la ampliamente estudiada y

conocida molécula de DNA. Entre las cuatro biomoléculas principales
que componen a los seres vivos, encontramos a los ácidos nucleicos.
Entre ellos, el DNA o Ácido desoxirribonucleico, es el material
genético que contiene las instrucciones que determinan todas las
características y funciones de un organismo y se puede transmitir a
su descendencia (heredabilidad). Razón por la cual, la extracción de
DNA es un paso obligado hacia el ejercicio y práctica de la biología
molecular.
La extracción y purificación del DNA se puede realizar a partir de
diferentes muestras (virus, bacterias, hongos, tejidos vegetales y
tejidos animales). Esta técnica es el primer paso para obtener el DNA
que será utilizado en otros protocolos como el de amplificación a
través de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR).

La PCR hace posible la amplificación de secuencias de DNA que están

presentes en mezclas complejas y permite estudios de diagnóstico,
identificación de organismos, análisis sobre la diversidad genética de
las poblaciones, análisis forense, entre otros.
La extracción de DNA incluye dos procedimientos principales: la lisis
de las células presentes en la muestra y la purificación de DNA.

La lisis celular tiene como objetivo romper partes de la pared celular

o la célula completa, para liberar en este caso el DNA. Una vez las
células son lisadas, el DNA debe separarse de los restos celulares por
centrifugación.

Las proteínas son removidas de la fase acuosa por medio de una

proteasa y luego se precipitan con solventes orgánicos, como fenol, o
una mezcla de fenol y cloroformo alcohol isoamílico para ser luego
precipitadas por centrifugación.
El DNA que todavía permanece en la fase acuosa se precipita con
etanol o isopropanol, para luego ser purificado y suspendido en un
buffer adecuado.

A partir de aquí este DNA puede ser usado para posteriores pruebas
moleculares.
Objetivo

Extraer DNA a partir de células humanas.

Materiales y reactivos

Muestras biológicas

Líquido amniótico

El líquido amniótico es el líquido que llena el saco amniótico y en el

que el embrión se sumerge durante el embarazo, lo protege de
golpes y movimientos repentinos, evita que el cordón umbilical se
comprima y mantiene la temperatura adecuada dentro del útero.
Además, contiene células de descamación del feto por lo que es
utilizado para diagnóstico prenatal de enfermedades genéticas.

Materiales

Tubos eppendorf
Tubo de polipropileno pequeño de forma
cilíndrica, fondo cónico y tapa acoplada
usado para microcentrífuga. El más común
es de 1.5 mL, sin embargo, existen tubos
menores como el de 200 µL. Soportan
temperaturas bajas y solventes orgánicos.

Micropipetas

Es un instrumento volumétrico usado para la

medición y transferencia de pequeños
volúmenes de líquidos de modo preciso. Son
ergonómicas, de una alta precisión,
permiten facilidad en la visualización y
ajuste del volumen. Hay varios tipos que
dependen del volumen que se quiera
manejar. Los más comunes son: 1000 µL,
200 µL, 100 µL y 10 µL.

Puntas para micropipetas

Punta desechable para aspirar el volumen

necesario, que se coloca en la micropipeta.
Es la única parte de la micropipeta que hace
contacto con la solución, se utiliza una
nueva para cada muestra a fin de evitar
contaminación cruzada.
Gradillas para tubos eppendorf y
puntas de micropipeta

Sirven para almacenar los tubos eppendorf

y las puntas para micropipetas de manera
compacta y ordenada, con su tapa da
seguridad. Eficiencia al cerrado y fácil
abertura.

Reactivos

Es una solución utilizada para

romper las membranas de las
células. Contiene sales (Tris-HCl
Buffer de lisis
ou EDTA) para regular la acidez y
la osmolaridad del lisado y
detergentes como el Triton X-100.

Es una enzima que sirve para

Proteinasa K romper/degradar las proteínas que
están unidas al DNA.

Es una mezcla que se usa para la

Fenolcloroformo - alcohol
separación de los ácidos nucleicos
isoamílico
y las proteínas

Es un solvente que se usa para la

Isopropanol
precipitación del DNA

Equipos
 Centrífuga

Es una máquina que, mediante

rotación de una muestra, separa
por fuerza centrífuga sus
componentes o fases
(generalmente una sólida y una
líquida), en función de su
densidad.

Vortex

Es un dispositivo que utiliza un

eje de impulsión unido a una
pieza de goma ahuecada que se
utiliza en los laboratorios para
mezclar pequeñas cantidades de
líquido.

Incubadora

Es un contenedor aislado con

temperatura ajustable que puede
ir desde 37°C a 65 °C, aunque
algunas pueden ir a una
temperatura más alta,
(generalmente a no más de 100
°C).

Procedimiento

Obtención de DNA a partir de células de líquido amniótico

Observe con atención, el video que se encuentra en el link a
continuación.
https://www.youtube.com/watch?v=clIdXgZHRGM
Si por Algún motivo no puede acceder al link de video, igualmente
encontrará un resumen en el siguiente link:
https://www.youtube.com/watch?v=SAyFDFIA8MI
Presentación de resultados

1. Dibujar la estructura molecular del DNA y explicar brevemente

sus características.

Rta: La molecula de desoxirribosa ocupa el centro del nucleótido y

está flanqueada por un grupo fosfato a un lado y una base al otro.
El grupo fosfato esta a su vez unido a la desoxirribosa del
nucleótido adyacente de la cadena.

Estas subunidades enlazadas desoxirribosa fosfato forman los

lados de la escalera, las bases están enfrentadas por parejas,
mirando hacia el interior y forman los travesaños.

2. Describir cada uno de los pasos que se deben seguir para la

extracción del DNA de un material biológico, puede hacerlo
mediante un esquema.
 Rta:

Cuestionario
1. ¿Para qué sirve extraer DNA?

Rta: La extracción consiste en separar el ADN de otros componentes

celulares, como la membrana o las proteínas, con el fin de poder
estudiarlo o manipularlo. En la investigación biomédica el ADN se
utiliza para analizar a pacientes con diferentes padecimientos como
enfermedades genéticas, cáncer, infecciones.

2. ¿Describa brevemente cuál es la importancia del DNA para la

vida?

Rta: Gracias al modelo de doble hélice en el ADN, es el que lleva la

información genética de la célula, ya que las unidades de ADN
llamadas genes, son las responsables de la transmisión de las
características de una célula a otra en la división celular, los genes se
localizan a lo largo del cromosoma.
El ADN tiene la propiedad de duplicarse durante la división celular
para formar dos moléculas idénticas, para lo que necesita que en el
núcleo celular existan nucleótidos, componentes químicos como:
Fosfato, Azúcar y cuatro bases nitrogenadas, Energía y Enzimas.

3. El DNA de una célula se encuentra enrollado a proteínas

formando la cromatina ¿En qué etapa del experimento se
separa el DNA de las proteínas?

Rta: Se forman dos fases, la fase inferior u orgánica, la fase superior

es donde está el DNA, se mueve durante 10 minutos, luego se
centrifuga a 13.000 RPM durante 10 minutos, luego de esto se
forman 3 fases la del medio es la fase de proteína, se retira el
sobrenadante o capa superior que es donde está el DNA.

4. Mediante búsqueda bibliográfica, indique el nombre y las

características de las siguientes soluciones:

· EDTA = El EDTA y sus derivados tienen la valiosa propiedad química

de combinarse con iones metálicos polivalentes en solución para
formar complejos coordinados cíclicos no iónicos, solubles en agua y
virtualmente no disociables. A estos complejos se les conoce
como quelatos.
Además, la capacidad quelante del EDTA se aprovecha en
laboratorios bioquímicos y biotecnológicos para desactivar
las metaloproteínas, pues estas no pueden actuar sin el ion metálico,
que sirve de centro catalítico, ya sea bien para estudiar la cinética de
estas enzimas, o bien para desactivarlas para no dañar el ADN,
nucleasas, las proteínas o los polisacáridos de una disolución. 

· Tris-HCl = El Buffer Tris-HCl actúa como un tampón biológico

general en múltiples aplicaciones, incluyendo estudios de tinción,
reducción y alquilación. Sin embargo, éste buffer es más utilizado en
ensayos de electroforesis y Western Blot. Su pKa es
aproximadamente de 8.1 a 25 °C, permitiendo que sea un buffer
eficaz en un rango de pH 7–9.

· Triton X-100 = Tritón X-100, Detergente, presentación de 500 ml.

Grado Biología Molecular. PH (5%, Water at 250C) 6.0-8.0. Peso
Molecular 647 (Avg.). Fórmula C34H62O11. Almacenamiento a
temperatura ambiente.

· Buffer TE = El tampón TE es una solución tampón de uso

común en biología molecular, especialmente en procedimientos que
involucran ADN, ADN o ARN. El "TE" se deriva de sus
componentes: Tris, un tampón de pH común, y EDTA , una molécula
que quela cationes como el Mg 2+. El propósito del tampón TE es
solubilizar el ADN o el ARN, mientras lo protege de la degradación.
 5. Mediante búsqueda bibliográfica, indique cómo se preparan las
siguientes soluciones:

· Buffer de lisis = ACK tampón de lisis (amonio-cloruro y potasio)

ACK se usa para la lisis de las células rojas de la sangre en muestras
biológicas donde otras células tales como las células blancas de la
sangre son de mayor interés.
Receta:
150 mM de cloruro de amonio
10 mM de bicarbonato de potasio
EDTA 0,1 mM
Ajustar el pH a 7.2 hasta 7.4

· Fenolcloroformo - alcohol isoamílico = Fenol-Cloroformo-Alcohol

isoamílico
25 partes Fenol equilibrado
24 partes Cloroformo
1 parte Alcohol isoamílico

6. ¿Cuáles son las técnicas de biología celular y/o molecular que

requieren la extracción de DNA? (Explique al menos 3 técnicas
e incluya imágenes).

Rta: Reacción en cadena de polimerasa (PCR) - éste es una de las

técnicas más importantes usadas en biología molecular y se utiliza
básicamente para copiar la DNA. La polimerización en cadena permite
que una única serie de la DNA sea amplificada en millones de
moléculas de la DNA. La polimerización en cadena se puede también
utilizar para introducir mutaciones dentro de la DNA o para introducir
sitios especiales de la enzima de la restricción. Además, la
polimerización en cadena se utiliza para determinar si cierto
fragmento de la DNA existe en una biblioteca del DNA. Diversos tipos
de polimerización en cadena incluyen la polimerización en cadena
reversa de la transcripción (RT-PCR) para la amplificación del ARN y
la polimerización en cadena cuantitativa (QPCR) para medir la
cantidad de presente del ARN o de la DNA.

Reproducción de la expresión - esta técnica ayuda a científicos a

entender la función de la proteína. La DNA que cifra para una
proteína determinada se reproduce o se copia usando la
polimerización en cadena en un vector de la expresión llamado un
plásmido. El plásmido se introduce a una célula animal o a una célula
bacteriana. Este plásmido tiene elementos del promotor que puedan
estimular la alta expresión de la proteína deseada para poder
entonces examinar su actividad enzimática.
Electroforesis del gel - ésta es otra técnica importante usada en
biología molecular para separar la DNA, el ARN, y las proteínas
basadas en su talla aplicando un campo eléctrico pues la DNA se
funciona con a través del gel de la agarosa.
 REFERENCIAS

https://biologia-geologia.com/BG4/161_mitosis.html#profase
[ CITATION ANO101 \l 3082 ]

https://es.wikipedia.org/wiki/Metafase

[ CITATION sán20 \l 3082 ]

https://mmegias.webs.uvigo.es/5-celulas/9-meiosis.php#:~:text=La

%20mitosis%20se%20produce%20en,producci%C3%B3n%20de

%20gametos%2C%20c%C3%A9lulas%20haploides.

[ CITATION ano20 \l 3082 ]

http://conogasi.org/articulos/extraccion-de-adn-2/#:~:text=La
%20extracci%C3%B3n%20consiste%20en%20separar,%2C%20c
%C3%A1ncer%2C%20infecciones%2C%20etc.

[ CITATION Alb18 \l 3082 ]

https://www.probiotek.com/productos/reactivos/buffer-tris-hcl-10-
mm-ph-8-5/
[ CITATION Ano17 \l 3082 ]