INTRODUCCIÓN

1
Aguas residuales Industria Textil Contaminantes recalcitrantes

Diversos contaminantes
DCompuestos
e s e n g o m a d o resistentes
(15%) a la degradación e

Descrude y mercerizado (20 %)

Procesos textiles2

Blanqueo, teñido y lavado (65 %)

Colorantes ÍNDIGO

1Melgoza-Alemán et al., 20022Quintero-Card

 Método Descripción método Ventajas Desventajas
Reacción fenton Reacción de oxidación usando Decoloración efectiva de Generación de lodo
H2O2–Fe(II) tintes solubles e
Ozonación Reacción de oxidación usando gas insolubles
Aplicación. en estado Corta vida media (20 min)
de ozono gaseoso: no altera el
volumen
Fotoquímica Reacción de oxidación usando No produce lodo Formación de
H2O2–UV subproductos.
Electroquímica Reacción de oxidación usando Descompone en compuestos Alto costo de la
Electricidad no peligrosos electricidad

Carbón activado Remoción de tinte por adsorción Buena remoción de una Muy costoso
variedad de tintes
Coagulación- Adición de sulfato ferroso y Económicamente viable Alta producción de lodo.
floculación cloruro
Bacterias Férrico
Uso de bacterias capaces de Buena remoción de colorante La efectividad de estos
degradar el índigo a nivel laboratorio, tratamientos depende de
Hongos Hongos de la podredumbre blanca llegando a la la supervivencia y
mineralización adaptabilidad
Elevado costo. de los
Enzimas Lacasa, Lignino peroxidasa y Mn microorganismos durante .
Inestabilidad enzimática
peroxidasa el proceso de tratamiento
INTRODUCCIÓN

Quintero, et al.,
 ANTECEDENTES
Lacasa
  Peroxidasa
 Multicobre oxidasa  Hemoproteína

 Cataliza reacciones de  No específica

desmetilación y de
formación de radicales libres 
altamente reactivos.
 Utilizada en la oxidación del
índigo.*
Pro d u cid a s p o r h o n g o s d e la
 p o d re d u m b re b la n ca co m o
Trametes versicolor, Phlebia
radiata, Polyporus pinisitus.

Adición de compuestos orgánicos y

de iones metálicos aumenta.

* Lorenzo et al. 2006

 Inmovilización de enzimas
Proceso mediante el cual se confina a una


molécula en una región definida del espacio

para dar lugar a formas insolubles que
retienen su actividad catalítica y que pueden
ser reutilizadas repetidamente 1 .
ANTECEDENTES

1 Wingard , L . B . 1972
 Ventajas de

Desventajas de


inmovilización inmovilización
 
 Aumento de la estabilidad de  La alteración de la
la enzima. conformación de la enzima
respecto de su estado

nativo.
 La posible reutilización del 
derivado, por lo que
disminuyen los costos del  La gran heterogeneidad del
proceso. sistema enzima-soporte
donde pueden existir

distintas fracciones de
 La posibilidad de diseñar un proteínas inmovilizadas
reactor enzimático de con un diferente número de
uniones al soporte.
ANTECEDENTES

fácil manejo y control,

adaptado a la aplicación 
de la enzima inmovilizada
 Siempre suele haber una
 pérdida de actividad de la
enzima durante la
inmovilización


 Hartmeier, W. 1985


 Mozhaev, V.V. 1987

 Métodos de Inmovilización

Inmovilización
Retención física
química

Atrapamiento o Entrecruzamient
Adsorción Unión covalente
inclusión o
ANTECEDENTES
 Métodos de Inmovilización

Entrecruzamiento
Formación de enlaces covalentes intermoleculares
(entre moléculas de enzima) y entre estas y el soporte
ü Cantidades altas de proteína inmovilizada resistentes a condiciones
extremas de pH y temperatura

üLas redes de moléculas entrecruzadas que se forman dificultan el

acceso del sustrato al centro activo  Pérdidas de actividad tras
la inmovilización altas

Reactivos bifuncionales más utilizados

ANTECEDENTES

Glutaraldehido Diazobenzidina Hexametileno-bis(iodoacetamida)

Bis(N-hidroxysuccinimidyl)ditiopropionato
 Características de
colorantes
 aromáticos,
 Anillos aril, con
electrones
deslocalizados.
Responsables de la
absorción de radiación
electromagnética de
diferentes longitudes
de onda
 Índigo clasificado como
ANTECEDENTES

de la tina. Es un
sistema conjugado o
grupo H cromóforos
que consisten de un
simple enlace doble
entre carbonos
substituidos por dos Quiktero-Cardona, 2010
Metodología
METODOLOGÍA
 Fitotoxicidad
METODOLOGÍA
 Evaluación de actividad
enzimática
RESULTADOS
 RESULTADOS
Preselección de medio de cultivo para producción de
enzimas AE
lignolíticas.
lignolíticas
(kU/mL medio de cultivo) Proteína µg/mL de medio de cultivo
Actividad específica kU/mg
enzima
Medio Trametes sp Trametes Trametes sp Trametes Trametes sp Trametes
versicolor versicolor versicolor
1 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
2 2.48 1.49 8.74 11.05 283.71 135.05

3 4.92 0.00 41.77 0.00 117.76 0.00

4 2.24 11.87 33.25 37.52 67.48 316.39

5 1.37 3.62 50.16 10.55 27.37 342.92
6 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
7 4.80 3.60 42.40 43.79 113.08 82.30

8 7.17 0.00 31.28 0.00 229.13 0.00

9 14.45 1.72 27.99 19.09 516.23 90.08

10 2.40 0.00 99.34 0.00 24.16 0.00

11 0.00 0.82 0.00 26.39 0.00 30.89
 Selección de medio de cultivo y
cepa y concentración de
enzimas.
RESULTADOS

Antes de Después de
ultrafiltra ultrafiltra
ción ción
 Balance de
RESULTADOS inmovilizacion
 Variante % proteína AE (U/g mg
inmovilizada sílica) proteína/g
Sílica
Etanol 96.41 141 2.2

Agua 87.75 56 2.2

Acetona 67.59 0 2.4

RESULTADOS
Fitotoxicidad

A – Agua
B – Acetona
C – Etanol
Fitotoxicidad
CONCLUSIONES
 El crecimiento del hongo y la producción
enzimática depende del medio de
cultivo y de las condiciones de
crecimiento.
 El uso de disolventes influye en la
silanización y por lo tanto en la
cantidad de enzima inmovilizada.
 A pesar del proceso de inmovilización se
conservó la actividad suficiente para
decolorar el índigo.
 Se demostró que después de varios
ciclos la enzima sigue decolorando.
