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DIVERSITY AND FUNCTION OF

PHOTORECEPTORS MICROBIAL
COMMUNITIES ISOLATED HIGH-ALTITUDE
ANDEAN LAKES

Luciano Raúl Portero


Cryptochrome CryPro Nesterenkonia sp. Act 20
(Isoloted from soil of lake Socompa)
Aminoacid sequence (545 aa)
 
HMVNGPDLRLVLPHQLFAEHFQAPADTVFVLIEHDLLFRQYRFHAQKLVLHRASMAQFARLLRQHGFTVDVLGSEASHSTHQQL
AALITEQRPARVSLFDVVDDWLEQQLSAALAEGGYQLRAEDVLETPNFLTSRNQIQEWFAAHDSRMHEFYVWQRRRLTLLVDAD
GEPAGGRWSFDAENRKKLPRGYTPPVVGRFADHPVHQREPMFDLESLTGETEKNDDDGAVRASEDGAAEDIAAAIAWVAAEFPD
APGDPAQFAWPITAEDARTHLQEFVRERLDDFGPYEDAISAEHPFIAHGLLTPPLNIGLLDPREVVQAVLDGAHEDTPLASVEG
FLRQVIGWREYMRATYRVRGRALRTANRLGHDNRLGEGWWDASTGLAPVDLVISRVLATGYAHHIERLMVLGNAMSLLRVHPEQ
VYEWFMELFIDAYDWVMVPNVYAMSQFAAGEAITTKPYVSGSNYLRKMSDLPAGDWTADWDGLYWTFIRDHREVFAANPRAKMV
VSLLERMKEDTREGHHRRAAALLEPSQPTRLLRPANGADPTS--RS

Zhang et al., 2013


CryPro_Act 20

Absorbance
Abs_CryPro

0.92
0.82
0.72
0.62
0.52
0.42
0.32
0.22
0.12
0.02
251305359413467521575629683737791

Absorbance Lumazin  (dashed line)


Este es gel correspondiente al
CryPro gel_27/07_ espectro de la diapositiva anterior

Eluted with 250 mM imididazole,


0 50
FT E dialysate, concentrated by filtration
mM mM
188
98
These bands would be our protein. If
62 we take strictly by weight, of the two
49 bands CryPro is the second.
M = 61,7 kDa
38
28
17

14
F/W 0mM 50mM 0mM 50mM 250mM-C
6
3
Esta el gel, de la modificación que hicimos, la
Elution of CryPro banda de la proteina esta mucho mas clara y
unificada 0 50 Wash Wash
F/W Con. Con _I _I
mM mM

0.8 188
CryPro 98
0.7 62
washing
_I 49
0.6
38
0.5 28
17
0.4
14
0.3
6
0.2 3

0.1

0
250 350 450 550 650 750
Espectro de emisión y excitación , sin
desnaturalizar Seria el pico caracteristicos de las
flavinas
60 2
1.8
50
1.6
1.4
40
1.2
S-1_ex380
30 1
S-1_em520
0.8 S-1_ex450
20
0.6
0.4
10
0.2
0 0
250 300 350 400 450 500 550 600 650 700
Espectro de emisión y excitación , con la
Aquí confirmamos que es una
proteína desnaturalizada,
flavoproteina.

2
S-1_ex1450
S-1_em520
1

25 35 45 55 65

300.00 Buscando los cofactores, los


60.00
picos a 410 nm, 420nm serian
250.00
los de cofactor.
200.00
40.00 S-1_ex380
150.00
S-1_ex360
100.00 S-1_ex330
20.00
50.00

0.00 0.00
250.00 350.00 450.00 550.00 650.00
Determinación de Fe, en CryPro y
fuesed protein
Un pequeño ajuste del ensayo anterior
del hierro, donde comparamos con
una proteína de Julián que sabes que
no tiene Fe
0.03

0.03

0.02
M-buffer
0.02
CryPro-45uM
fused-protein
0.01

0.01

0
251291331371411451491531571611651691731771

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