UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS

PRODUCCIÓN DE METABOLITOS
EXTRACCIÓN- MÉTODO DE SOXHLET

“METABOLITOS SECUNDARIOS, LETALIDAD Y ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA

DE LOS EXTRACTOS DE TRES CORALES Y TRES MOLUSCOS MARINOS DE
SUCRE, VENEZUELA”

NOMBRE: LEONARDO ALDÁS ANDRÉS SÁNCHEZ

ELIZABETH FALCÓN
KAREN JARAMILLO
MAYRA MARTÍNEZ CURSO: NOVENO “A”
FECHA: 10-06-2020
 INTRODUCCIÓN

Diversidad de animales acuáticos exhiben una

variedad de moléculas (estructurales y
químicas)
Ambiente marino:
Rango termal (0-350°C)
Presión (1-1000atm)
Nutrientes: (oligotróficos y eutróficos)
Zonas (fóticas y no fóticas)

Extrema competencia por el espacio y recursos

de organismos sésiles (corales)
ORGANISMOS

Estudiados tanto químicamente y biológicamente

MARINOS

Metabolitos secundarios (saponinas, terpenoides,

esteroides, alcaloides, entre otros)

Efectividad en tratamientos anticancerígenos,

antinflamatorio, antibacteriano)
 Octocorales del Miembros importantes Octocorales
género: dentro de la fauna de
Eunicea, Muricea y las Indias
Pseudopterogorgia Occidentales

Moluscos:
Fuente de metabolitos Phyllonotus pomum,
secundarios Chicoreus brevifrons
Pteria Colymbus Moluscos

Pruebas químicas y
especies importantes bioactividad de los
para la acuicultura y extractos para evaluar
económico la capacidad de
biosintetizar m. s.
 MATERIALES Y MÉTODOS
Moluscos Octocorales
Phyllonotus pomum Eunicea sp • Recolectados entre 3 y 25m de profundidad
Chicoreus brevifrons Muricea sp. • Lavadas
Pteria Colymbus Pseudopterogorgia acerosa • Refrigeradas en un contenedor

Se obtuvo su masa Lavados con agua

blanda y se limpiaron destilada y cortados en
Obtención de extractos: trozos
con agua desionizada
suspensión en una solución
acuosa de metanol al 90%
El material de cada especie fue macerado en metanol puro (99.9%) por 96h y, luego, se particionó en
dos solventes de distintas
polaridades (metanol y èter
Se decantó y se filtró el solvente de la extracción
de petróleo)

Los residuo de los organismos nuevamente se clocaron en metanol por 120h

Se concentrados a presión reducida en un rotaevaporador

 Pruebas químicas
Evaluación química de los extractos crudos para detectar la posible
presencia de diversas familias de metabolitos secundarios

se utilizó el sistema cualitativo de cruces

presencia cuantiosa (+++)
Presencia notable (++)
presencia leve (+)
ausencia (-)

Reactivos de clasificación en ensayos analíticos

como:
• Dragendorff para alcaloides
• Liebermann-Burchard para esteroles y triterpenos
• Baljet para sesquiter penlactonas.
 Pruebas de actividad biológica

Concentración letal media los extractos obtenidos se evaluaron contra nauplios

(CL50). (larva característica de los crustáceos) de Artemia salina

Solución madre de 10.000µg/ml del extracto, en una

mezcla de agua de mar bifiltrada y dimetilsulfóxido

Soluciones de 1.000, 100, 10, 1, 0.1 y 0.01µg/ml

En frascos que contenían entre 10 y 15 nauplios del

crustáceo A. salina (eclosionados con 24h de
anticipación)

A las 24 y 48hpor medio

software LC50 program
 Actividad antimicrobiana Técnica de difusión en
agar

Impregnar discos estériles de papel filtro de 10mm de diámetro con 25µl del
extracto (40 mg/ml), en una placa de agar Müller- Hinton o agar PDA Gram positivas (Bacillus subtilis, Citrobactor
freundii y Staphylococcus aureus)
La placas se inocularon previamente con una suspensión microbiana de Gram negativas (Escherichia coli,
concentración conocida (células/ml).
Pseudomonas aeruginosas y Salmonella
Las placas inoculadas con bacterias se preincubaron a 5°C por 12h, y luego enteritidis)
se incubaron a 37°C por 24h

Inoculadas con hongos se incubaron por 48h a temperatura ambiente.

hongos oportunistas (Candida albicans y
Candida sp.) y fitopatógenos (Aspergillus niger,
Mide el diámetro (mm) del halo de inhibición del Fusarium sp. y Penicillium crustobum)
Evaluar crecimiento microbiano alrededor del disco.

(-) no hay actividad

(+) actividad leve o débil (diámetro entre 11-14 mm)
(++) actividad moderada (diámetro entre15-18 mm)
(+++) actividad fuerte o marcada (diámetro superior a 18 mm)
 RESULTADOS

Métabolitos
Secundarios
Presencia de alcaloides ,esteroles
insaturados, triterpenos pentaciclicos

Todos los octorales sintetizan glicósidos

cianogenicos,cardiotónicos y lactonas
ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA

LAS PRUEBAS DE BIOACTIVIDAD

REALIZADAS MOSTRARON UN
COMPORTAMIENTO HOMOGÉNEO DE
LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE
LOS EXTRACTOS CRUDOS DE LOS
MOLUSCOS Y OCTOCORALES
S. AUREUS, FUE EL
MICROORGANISMO MÁS
SUSCEPTIBLE AL PODER
ANTIBACTERIANO DE LOS
EXTRACTOS, MIENTRAS QUE LA
BACTERIA GRAM POSITIVA P.
AERUGINOSA Y LOS HONGOS C.
ALBICANS Y A. NIGER, NO FUERON
AFECTADOS POR LOS EXTRACTOS
AL FRACCIONAR LOS
EXTRACTOS CRUDOS DE
LOS OCTOCORALES SE
PUDO OBSERVAR UN
INCREMENTO DE LA
ACTIVIDAD
ANTIMICROBIANA DE SUS
FRACCIONES
 Alcaloides
• Detectados en esponjas y tunicados (género
Pseudopterogorgia)
• Aceropterina
Metabolitos en organismos

Terpenoides
• Detectados en octocorales (géneros Eunicea y
Pseudopterogorgia)
marinos

• Diterpenos Diacilglicéridos

Esteroles
• Presencia en moluscos y octocorales
• Derivados del gorgoesterol, acerosterol

Saponinas
• Detectado en el extracto de Muricea
• Saponinas amino galactosas
 Compuestos
Dosis letal Propiedades
letales a altas
media: 166,9 – antitumorales y
concentracione
747 ug/ml pesticidas
s
Deben usarse a
Diterpenos:
bajas
compuestos
concentracione
antitumorales
s
 Aumento de la Alteración del
permeabilidad de metabolismo de
ACTIVIDAD MICROBIANA la membrana
celular
los ácidos
nucleicos

RESULTADOS DEPENDEN DE:

Activación
Mecanismos Entre otros
de enzimas
Naturaleza del microorganismo de inhibición
de los
activos de
Presencia de más de un compuesto activo los extractos

Concentración de éstos en cada extracto

Diferentes masas molares de las
sustancias

Efectos antagónicos o sinérgicos

OCTOCORALES
Mayor cantidad de metabolitos secundarios

Extracto crudo inocuo frente a las bacterias y hongos ensayados

Efecto antagónico de sus constituyentes.

Muricea sp.
Fracciones solubles en acetato de etilo y en éter de petróleo si

Actividad antibacteriana (FA) fuerte frente a B.

subtillis
EM tiene efecto sinérgico frente al hongo Fusarium sp.

Eunicea sp. FE y FA resultaron inocuas

 Principios
activos que
P. acerosa inhiben el
crecimiento
microbiano

ME presenta FE actividad
Bacillus
subtilis actividad frente al hongo
antimicrobiana Candida sp.

Eunicea
tourneforti

Salmonella Staphylococc
typhimurium us aureus
 CONCLUSIONES
Los extractos orgánicos de los moluscos presentaron una
mayor actividad antimicrobiana y un espectro de acción mayor
contra diferentes cepas de bacterias en comparación con los
octocorales.
Las especies estudiadas representan una interesante opción
para el descubrimiento de nuevas y novedosas sustancias con
potencial bioactivo.
La actividad letal y antimicrobiana que mostraron los extractos
crudos de los moluscos y octocorales indican que se pueden
aislar compuestos químicos con actividades biológicas
significativas de interés farmacológico y clínico.
 BIBLIOGRAFÍA

Ordaz, G., D armas, H., Yáñez, D., Hernández, J., & Camacho, A. (2010).
Metabolitos secundarios, letalidad y actividad antimicrobiana de los
extractos de tres corales y tres moluscos marinos de Sucre,
Venezuela. Revista de biología tropical, 58(2), 677-688.