UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN SIMÓN

FACULTAD DE CIENCIAS Y TECNOLOGÍA

Carrera de Ingenieria Química

PURIFICACION DE PROTEINAS POR CRISTALIZACION

Estudiantes:
• Ballesteros Ricaldi Patricia Del Carme
• Coria Taquichiri Tatiana Karen
• Cruz Quisbert Wara Shirley
• Guachalla Melguar Gabriela
• Janco Aguilar Juan Pablo
• Leniz Maldonado Eves Alvaro
• Linares Flores Bryan Marco
• Mejitarian Velasquez Ignacio Jorge
• Pozo Saravia Noelia
• Sejas Cartagena Jorge Pablo
Docente: Ing. Nelson Hinojosa Salazar
Materia: Laboratorio de Operaciones Unitarias II
Fecha: 22 de noviembre de 2018
 
COCHABAMBA-BOLIVIA
INDICE
 INTRODUCCIÓN
 OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
 DESARROLLO DEL TRABAJO
CRISTALIZACIÓN
CRISTALIZACIÓN DE LA PROTEÍNA
DIFICULTADES CON LA CRISTALIZACIÓN DE LA PROTEINA
 CONCLUSIONES
 BIBLIOGRAFÍA
INTRODUCCIÓN
 Las proteínas son moléculas que juegan un papel esencial en el
funcionamiento de los seres vivos.
 Algunas de ellas tienen un papel estructural o bien están involucradas
en el funcionamiento de los procesos vitales.
 La función que realizan las proteínas en el organismo es conocida en
bastantes casos pero no se sabe cuál es el mecanismo que utilizan
para funcionar de forma tan precisa y específica. A pesar de los
avances en los factores que determinan la estabilidad de la estructura
nativa de las proteínas, aún no es posible predecir la estructura
tridimensional a partir de la secuencia primaria de aminoácidos de
manera general.
OBJETIVOS

 OBJETIVO GENERAL
- Conocer los métodos de purificación de proteínas por cristalización.

 OBJETIVO ESPECÍFICO

- Conocer las aplicaciones de la purificación de proteínas por cristalización.

- Conocer y aplicar el concepto de cristalización
DESARROLLO DEL TRABAJO
 Cristalización
- La cristalización consiste en la formación de sustancias sólidas
cristalinas a partir de sus disoluciones en un disolvente adecuado. Gran
parte de los sólidos se presentan en estado cristalino, con una estructura
geométrica regular y ordenada. El tamaño y perfección de los cristales
depende de las condiciones en que éstos se han formado. Cuando una
disolución saturada, o un líquido fundido, se enfría lentamente el
número de cristales que comienza a formarse es pequeño, creciendo
poco a poco su tamaño y dando tiempo, por tanto, a los iones, átomos y
moléculas a ocupar posiciones ordenadas en el cristal, que harán que
éste sea tanto más perfecto cuanto más lento es el proceso.
- Por el contrario, un enfriamiento rápido da lugar a numerosos cristales
pequeños e imperfectos. De igual forma actúan las impurezas,
interfiriendo en la ordenación del cristal, que no consigue así un
desarrollo ordenado de sus caras.
 Cristalización de la proteína
- Este proceso es relacionado sobre leyes físicas y químicas, y es el resultado de
precipitar una solución sobresaturada de la proteína. La incapacidad para utilizar
temperaturas altas para lograr la sobresaturación de proteínas se vence usando
otros factores tales como diversos tipos de sal al la solución tampón, o usar los
cofactores de aumentar la solubilidad de la proteína. Los precipitantes de uso
corriente incluyen el sulfato del amonio y el glicol de polietileno. Las soluciones
preparadas de antemano comerciales de la investigación se utilizan para
descubrir la clase de condiciones que favorece la cristalización de la proteína.
- Estas condiciones entonces se optimizan para habilitar el incremento de los
cristales puros grandes que se pueden sujetar a la cristalografía de la radiografía.
- Los métodos más de uso general para la cristalización de la proteína incluyen la
caída y la caída de la sentada, ambas de la ejecución usadas con métodos de la
difusión del vapor.
 Dificultades con la cristalización de la proteína
- La muestra necesita ser preparada y ser purificada con cuidado y ser
solubilizada en el ambiente correcto del almacenador intermedio para producir
cristales.
- La estabilidad es otra preocupación primaria.
- La sobresaturación entonces se logra usando la combinación correcta de los
reactivos, pH del almacenador intermedio, la temperatura correcta, y
excipientes o añadidos. Se anima a las moléculas de proteína que se asocien de
una manera ordenada sin la precipitación o separación de fase, o agregación
desordenada.
- El mando del sistema es esencial mantenerlo puro, especificado completo, y sin
cambiar, de principio a fin. Esto previene la introducción de impurezas en el
cristal creciente y se asegura de que las condiciones del laboratorio son
reproductivas.
- Lamentablemente, este proceso depende de un ordenador principal entero de
factores bioquímicos, físicos, y químicos.
CONCLUSIONES
 Al realizar esta investigación pudimos darnos una idea más
clara de cómo funciona y para que puede llegar a servir la
purificación de proteínas por cristalización.

 En este proceso también debemos tener en cuenta que

tiene que cumplir con algunas condiciones ya que presenta
dificultades que no dejan su total funcionamiento.
BIBLIOGRAFIA

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1764865/
http://www.proteinstructures.com/Experimental/Experimental/crystallization-t
ools.html
https://hamptonresearch.com/documents/growth_101/35.pdf
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3182643/
http://www.xray.bioc.cam.ac.uk/xray_resources/whitepapers/xtal-in-action/no
de3.html
!!!GRACIAS!!!