UNIDAD IV

• REPLICACIÓN DEL DNA

• REPARACIÓN DEL DNA

• RECOMBINACIÓN DEL DNA

Dr. Misael R. Oliver G.

 REPLICACIÓN DEL DNA

En cada división celular, una célula debe copiar su

genoma con alta precisión

LA REPLICACIÓN DEBE SUCEDER ANTES DE DIVIDIRSE LA CÉLULA

La replicación es muy rápida, se sintetizan hasta 1000 nucleótidos

por segundo

Dr. Misael R. Oliver G.

 EL APAREAMIENTO DE LAS BASES PERMITE LA
REPLICACIÓN DEL DNA

La célula sintetiza
nuclaótidos

Bases desapareadas

Dr. Misael R. Oliver G.

 EL DNA SIRVE COMO MOLDE PARA SU REPLICACIÓN
Para esto las cadenas deben separarse

(Molde S)

(Cadena S)

(Cadena S’)

(Molde S’)

La tarea de copiar millones de nucleótidos

es muy complicado.
NOTAS El copiado debe ser rápido y preciso.
Una célula en división, en 8 horas se
copian lo equivalente a
mil libros de tamaño medio
Dr. Misael R. Oliver G.
 La replicación del DNA es
semiconservada (?). 1

Las cadenas originales

quedan igual durante varias
generaciones, así cada doble
hélice de DNA hija se forma
por una cadena conservada y 2
otra sintetizada.

Dr. Misael R. Oliver G.

 LA SÍNTESIS DE DNA INICIA EN LOS ORÍGENES DE REPLICACIÓN

Los nuclaótidos de los

orígenes de replicación
predominan los de T y A.

¿Cuantos puentes de
hidrógeno forman la unión de
estas bases nitrogenada?

Por lo tanto ¿son fácil o difícil

de deshacer esta unión?

Dr. Misael R. Oliver G.

 LA SÍNTESIS DE NUEVO DNA SE PRODUCE EN LAS
HORQUILLAS DE REPLICACIÓN
En forma artificial
Temperatura de ebullición
separa las cadenas

Se forma una burbuja

Horquillas de replicación

¿Quién abre las cadenas de DNA?

Pero
Respuesta: La enzima Helicasa
Para servir como moldes las
cadenas, la doble hélice se debe
abrir en condiciones celulares

Dr. Misael R. Oliver G.

 Recordemos que el DNA bacteriano sólo tiene un origen de replicación
Pero…….
El genoma humano tiene hasta 10 000 orígenes de replicación

Horquillas
de
replicación

DNA BACTERIANO

Dr. Misael R. Oliver G.

 LA SÍNTESIS DE DNA ES DE 5’ A 3’

¿Quién cataliza las reacciones de

síntesis de DNA?

RESPUESTA: LA DNA POLIMERASA

Dr. Misael R. Oliver G.
 SÍNTESIS DE DNA CATALIZADA POR LA DNA POLIMERASA
Uniendo un nuevo nucleótido en el extremo 3’

T G

A C

Dr. Misael R. Oliver G.

 LA HORQUILLA DE REPLICACIÓN ES ASIMÉTRICA
PRIMERO …. ¿CUAL ES LA DIRECCIÓN
DE SÍNTESIS? 5’ A 3’

**
*Cadena adelantada
**Cadena retrasada

LA REPLICACIÓN ES
BIDIRECCIONAL

Dr. Misael R. Oliver G.

 LA DNA POLIMERASA TIENE CAPACIDAD DE
AUTOCORRECCIÓN
Para eso tiene 2 sitios separados

CORRECCIÓN

Errores – se dan 1 en 107 pares de nucleótidos adicionados

Corrección – se da por la acción de exonucleasa de la DNA Polimerasa
Dr. Misael R. Oliver G.
 EN LA SÍNYESIS DE
DNA LA DNA
POLIMERASA
CORRIGE SU
PROPIO TRABAJO

Nocleótido incorrecto

¿Quien interviene?

DNA polimerasa con la

acción de exonucleasa

Dr. Misael R. Oliver G.

 LOS RNA DE CORTA LONGITUD ACTUAN COMO PRIMER O
CEBADORES PARA LA SÍNTESIS DE DNA

Recordemos …

La Helicasa abre las cadenas

Y luego …..

¿Qué pasa?
ENZIMA
PRIMASA YA CONOCEMOS 3 ENZIMAS

1. HELICASA
2. DNA POLIMERASA
3. PRIMASA

Dr. Misael R. Oliver G.

 SÍNTESIS DE PRIMES DE RNA POR LA DNA PRIMASA

EN EL LABORATORIO VIMOS QUE:

EN EL RNA – EL AZÚCAR ES RIBOSA

EL RNA TIENE URACILO (U) EN LUGAR DE T

Dr. Misael R. Oliver G.

 Se sintetizan
los Primers Luego ….

¿Qué sucede?

A partir de los primers se

sintetiza DNA

Dr. Misael R. Oliver G.

 LA ENZIMA LIGASA UNE A LOS FRAGMENTOS DE OKAZAKI

COMO SE VIÓ EN UNA IMAGEN

ANTERIOR,
SOBRE LA CADENA
RETRASADA
EL DNA ES SINTETIZADO POR
FRAGMENTOS

LOS FRAGMENTOS DE
OKAZAKI SON UNIDOS POR LA
ENZIMA LIGASA

Dr. Misael R. Oliver G.

 ¿QUÉ ENZIMAS YA CONOCEMOS?

1.Helicasa
2.DNA Primasa
3.DNA polimerasa
4.Ligasa

Dr. Misael R. Oliver G.

 LAS PROTEÍNAS EN UNA HORQUILLA DE REPLICACIÓN
COOPERAN PARA FORMAR UN MECANISMO DE REPLICACIÓN

Proteínas de unión a DNA de cadena simple

Dr. Misael R. Oliver G.

 PROTEÍNA
Cargador de
ABRZADERA Abrazadera abrazadera
DESLIZANTE deslizante
REGULADA
POR LA
PROTEÍNA
CARGADOR
DE
ABRAZADERA

Dr. Misael R. Oliver G.

 MODELO DE HORQUILLA DE REPLICACIÓN EN MOVIMIENTO

3 ENZIMAS
¿NUCLEASA, POLIMERASA REPARADORA y DNA LIGASA?

Varias proteínas actúan en conjunto con la DNA polimerasa

Dr. Misael R. Oliver G.
 HORQUILLA DE REPLICACIÓN EN MET Y DIBUJO (B Y C)

Dr. Misael R. Oliver G.

 ¿QUÉ ENZIMAS YA CONOCEMOS?

1.Helicasa
2.DNA Primasa
3.DNA polimerasa
4.Ligasa

MAS 2 PROTEÍNAS

1.Proteína de unión a DNA de cadena simple

2.Abrazadera deslizante y su cargador

Dr. Misael R. Oliver G.

 PERO…….
EL ENROLLAMIENTO DEL DNA DIFICULTA EL AVANCE DE LA REPLICACIÓN

¿Qué se hace
ante esto?

Dr. Misael R. Oliver G.

 LA DOBLE HÉLICE SE ROTA COMO LO SEÑALA LA FLECAHA

¿Quién hace esta

rotación?

Dr. Misael R. Oliver G.

 LAS ENZIMAS DNA TOPOISOMERASAS I Y II

Dr. Misael R. Oliver G.

 EN RESUMEN:

TOPOISOMERASA I CORTA TEMPORALMENTE UNA

SOLA CADENA DE DNA

TOPOISOMERASA II CORTA TEMPORALMENTE LAS

DOS CADENAS DE DNA

CON ESTO DESENROLLAN TEMPORALMENTE DEL DNA

MIESTRA PASA LA MAQUINARIA DE REPLICACIÓN

PERO……

¿QUÉ PASA CON LA REPLICACIÓN CON LOS

EXTREMOS DE LAS 2 CADENAS DE DNA?

Dr. Misael R. Oliver G.

 LAS TELOMERASAS REPLICAN LOS EXTREMOS DE LOS CROMOSOMAS

Cadena molde
?
Cadena retrasada Último
RNA fragmento
RNA
incompleta recién Primers de Okazaki Primers
sintetizada

La telomersa agrega
repeticiones adicionales a la
cadena molde

Síntesis de DNA a partir del RNA cebador

completa la cadena retrasada

Extremo del cromosoma replicado completamente

Dr. Misael R. Oliver G.

Dr. Misael R. Oliver G.
 EN BACTERIAS NO HAY PROBLEMA
PORQUE NO HAY EXTREMOS EN EL
CROMOSOMA POR SER CIRCULAR

Dr. Misael R. Oliver G.

 A MANERA DE RESUMEN:
1. El apareamiento de las bases permite la replicación del DNA

2. La síntesis de DNA comienza en los orígenes de replicación

3. La síntesis de nuevo DNA se produce en las horquillas de

replicación y se da de 5’ a 3’

4. La horquilla de replicación es asimétrica

5. La DNA polimerasa tiene capacidad de autocorrección

6. Los RNA de corta longitud actúan como cebadores para la

síntesis de DNA

7. La proteínas en una horquilla de replicación cooperan para

formar mecanismos de replicación
8. Las Topoisomerasas I y II desenrollan al DNA haciendo cortes
temporales del dna

9. La telomerasas replican los extremos de los cromosomas

eucariontes
Dr. Misael R. Oliver G.