TECNICAS DE LABORATORIO

Francisco Silva
Médico Veterinario
Ms. Ciencias Biología celular y molecular ©

2019
 “Tipos de muestras biológicas”

Objetivos
•Conceptos sobre los diferentes tipos de muestras para
análisis que existen en animales menores y mayores, tales
como; sangre, orina, fecas, estudio de células, estudio de
tejidos, secreciones, análisis de líquidos, raspados cutáneos
etc., según solicitud del Médico Veterinario.
 Estudio hematológico
Es sangre total. La sangre total es una muestra frágil por lo que extraer
sangre por punción venosa evitando si es posible, las extracciones de venas
de pequeño calibre ya que las extracciones dificultosas y traumáticas
estimulan el mecanismo de la coagulación.

- Desechar la aguja de la jeringuilla y traspasar la muestra al tubo con

anticoagulante deslizando la sangre por las paredes del tubo. Tapar y
homogeneizar suavemente moviendo el tubo con movimientos giratorios
para evitar la hemólisis. Al menos 10 movimientos.
 Estudio hematológico

- El anticoagulante de elección para el recuento de células sanguíneas y su evaluación en mamíferos

es el EDTA (tapón lila). La heparina no preserva tan bien las células.

- Reservar un resto de la extracción para preparar dos o tres extensiones finas de sangre periférica.
 Estudio hematológico
- Secar al aire y enviar junto con la muestra anterior. Si es siempre resulta conveniente fijar el frotis de sangre una vez seco en
metanol.

- Proteger de rozaduras los frotis mediante unas cajas especialmente diseñadas para el envío de citologías o enfrentado los dos
portas con un cartoncito o almohadilla en ambos extremos.
Estudio hematológico
 Plasma citratado (pruebas de coagulación)
El plasma citratado se obtiene a partir de la mezcla de
sangre entera con citrato sódico, en la proporción que
indica el tubo (1:9) de tapón azul. Se homogeniza la
dilución y se centrifuga inmediatamente, siempre
antes de los 30 minutos de la extracción a 2.500 o
3.000 r.p.m. durante 12 - 15 min.

Separar el plasma cuidadosamente con una pipeta o

una jeringuilla nueva, intentando no aspirar las
células.

Si la extracción no resultó fluida y fácil, se recomienda

la repetición de la toma de muestra con una nueva
jeringa, un nuevo tubo y una vena distinta, por las
razones previamente citadas.
Plasma citratado (pruebas de coagulación)
 Bioquímica sanguínea
En la mayoría de las pruebas de laboratorio que se
realizan en las unidades de Bioquímica, Inmunología,
Toxicología e Inmunoensayos, la muestra requerida
es suero. Siempre es recomendable tomar las
muestras en ayuno de al menos 8 horas. La lipemia
interfiere en gran cantidad de prueba.

- El suero se obtiene por punción venosa y

transfiriendo la sangre a una tubo sin anticoagulante.
- Dejar a temperatura ambiente hasta que el coágulo
esté bien formado y centrifugar. Separar el
sobrenadante (suero), si no se usan tubos de suero
gel, introduciéndolo en un tubo sin aditivos, donde se
enviará la muestra al Laboratorio.
 Estudio microbiológico (Orina)
Las muestras de orina para análisis bacteriológico deben ser
preferentemente tomadas por cistocentesis o por sondaje.
Las muestras tomadas por micción libre serán interpretadas con
precaución teniendo en cuenta que pueden estar contaminadas de células
y de microorganismos de las partes bajas del tracto urogenital y en
cualquier caso, siempre es conveniente que sean de la mitad de la
micción, es decir, desechando la primera parte de la orina y recogiendo
sólo el resto.
 Estudio microbiológico (Heces)
- Las heces deben recogerse del recto, salvo que se observe al animal en
el acto de la defecación, frasco esteril.
- Si además de remitir el frasco contenedor con las heces se envía un
hisopo rectal con medio de transporte Cary Blair se ampliará la
sensibilidad del cultivo (preserva los microorganismos anaerobios,
Campylobacter sp).
 Estudio microbiológico (Muestras anaerobias)
Un factor crucial para el éxito de los cultivos anaeróbicos es el transporte
de las muestras clínicas; el efecto letal del oxígeno atmosférico ha de ser
anulado hasta que pueda ser procesado.

Muestras apropiadas para cultivo anaerobio:

- Pus o secreciones procedentes de heridas profundas o quirúrgicas
- Abscesos
- Tejidos obtenidos tras cirugía o por necropsia
- Líquidos corporales: aspirados pleurales o peritoneales
- Líquidos articulares o líquido cefalorraquídeo
 Estudio microbiológico (Muestras anaerobias)
- El material líquido para cultivo anaerobio se obtiene preferentemente
con ayuda de una jeringa y aguja estériles, expulsando todo el aire
contenido en ellas. Evitar el envío de agujas, utilizando tapones especiales
de jeringuillas.
- Abscesos, tomar muestra de la cara interna de la cápsula intentando
raspar.
 Estudio microbiológico (Muestras anaerobias)
- Tejidos procedentes de necropsias o de cirugía (unos 2 cm de diámetro)
normalmente conservan un ambiente anaerobio en el centro de la pieza,
por lo que pueden introducirse y remitirse al Laboratorio en un
contenedor estéril.
- Este tipo de muestras no se refrigeran, ya la absorción de oxigeno es
mayor a menor temperatura. Conservar por tanto a temperatura
ambiente.
 Muestras para anatomía patológica (Biopsia)
Inmersión de los tejidos en Formol (formaldehído) diluido al 10%, preferiblemente en
agua destilada (una parte de formol y nueve de agua). Recordamos que la forma más
pura de formaldehído líquido que se comercializa indica una concentración de 37-50%.
Es a partir de esta formulación que realizamos la dilución 1:10.

- El volumen de fijador debe ser unas 10 veces el volumen de muestra. Conviene utilizar,
por tanto, envases proporcionales al tamaño de muestra.
- Las biopsias endoscópicas deben viajar en contenedores de pequeño volumen (tubos,
eppendorfs) correctamente identificados.
 Citología
- Las muestras citológicas pueden obtenerse mediante un hisopo, por raspado o por
aspiración mediante una aguja fina.
- Si se obtienen con un hisopo, rodar el hisopo sobre un portaobjetos limpio y seco, nunca
arrastrar.
- Si se realiza mediante un raspado, se requiere una hoja de bisturí que se pasará sobre la
zona de la lesión hacia arriba varias veces. El material obtenido sobre la hoja de bisturí se
depositará sobre el portaobjetos.
- Las muestras obtenidas por punción se expulsan en el extremo del portaobjetos.
- Dejar secar la extensión durante 20 o 30 min.
- Fijar las extensiones con metanol (el primer líquido del Panóptico o Diff-Quick).