Clase Teórica:

Laboratorio Parasitológico:
Entero parásitos, Parásitos Hísticos
 PARASITOLOGIA
Objetivo

• Enumerar las pruebas de laboratorio y

su utilidad para el diagnóstico de las
enfermedades parasitarias más
frecuentes de nuestro medio.
PARASITOLOGIA
Generalidades
• Distribución universal
• Parásitos que producen
enfermedades en el
Humano:
– Protozoos
– Helmintos
• Compromiso:
– Intestinal
– Sanguíneo
– Tisular
 PARASITOLOGIA
Generalidades

• Mayoría son de naturaleza crónica / largos

periodos de incubación.
• Realizar Historia clínica correcta / sospecha
diagnostica: viajes y/o exposición.
• Parasitosis oportunistas: inmunodeficientes.
• Seleccionar el análisis: Analizar sensibilidad y
especificidad de c/prueba.
• Procedimiento adecuado de toma de
muestra: según cuadro clínico y sospecha
diagnóstica.
 PARASITOLOGIA
Métodos de Laboratorio
• Examen directo de muestras fecales: Enteroparasitosis
• Examen de frotis sanguíneo
• Examen de secreciones corporales Parasitosis tisulares
– Urogenitales
– Esputo
– Aspirados
– Biopsias

• Cultivo
Enteroparasitosis
• Inmunodiagnóstico
Parasitosis tisulares
• Diagnóstico molecular
 Entero parásitos
• Alta incidencia por condiciones desfavorables
de higiene
• 34% niños entre 1 - 4 años
– Menor rendimiento escolar de niños
– Menor capacidad de trabajo en el adulto
• Clasificación:
– HELMINTOS: Nematelmintos
Platelmintos

– PROTOZOARIOS
PROTOZOOS
Rizópodos (amebas): Entamoeba histolytica.

Ciliados: Balantidium coli.

Flagelados:
 Hemáticos y tisulares: Leishmania spp.
Trypanosoma spp.
 Cavidades naturales: Trichomonas vaginalis.
Giardia lamblia
Esporozoos:
 Hemáticos y tisulares: Plasmodium spp.
Toxoplasma gondii
 Cavidades naturales: Cryptosporidium spp.
1.- AMEBAS
2.- FLAGELADOS
3.- CILIADOS
4.- COCCIDIOS
 HELMINTOS
Fasciola hepatica.

TREMATODES
Paragonimus

CESTODES
Taenia spp.
Echinococcus
Granulosus.

NEMATODES Enterobius vermicularis

Ascaris
Strongyloides
Entero Parásitos: Síndromes clínicos
• Intestinales : polimorfismo de la sintomatología
– Síndrome diarreico agudo: amebiasis, balantidiasis,
coccidiosis.
– Síndrome diarreico crónico: giardiasis, himenolepiasis,
ascariasis .
– Síndrome de mal absorción intestinal : uncinariasis,
giardiasis.
– Síndrome anémico: Uncinariasis, amebiasis,
balantidiasis.
Entero Parásitos: Síndromes clínicos
• Extra intestinal:

– Síndrome respiratorio: Ciclo de Loos

• Áscaris lumbricoides
• Strongyloides stercoralis
• Uncinarias.

– Cuadros alérgicos: prurito anal y nasal

– Anorexia Oxiuriasis
– Alteraciones neurológicas: Insomnio
 Diagnostico: Entero parásitos
• Examen de muestras fecales

– Identificación de parásitos intestinales

• Examen directo
• Técnicas de concentración
• Técnicas de tinción
• Cultivos ( menos frecuente)
• Inmunodiagnostico: ELISA - inmunoblot: Ac específicos
• Técnicas moleculares
 Diagnostico: Entero parásitos

• Examen de muestras fecales y tejidos (sangre

y piel)

– Estadios más frecuentes

• Protozoos: trofozoitos – quistes – ooquistes
• Helmintos: huevos – larvas – parásito entero/fragmentos
Entero parásitos: Toma de muestra

• Si no se puede respetar los tiempos:

CONSERVADORES
– Alcohol polivinílico: PVA
– formol 10%
– Mertiolato-yodo-formol: MIF

• Si contaminación con orina o agua del inodoro:

destrucción de trofozoitos: Rechazar muestra
 Entero parásitos
• Examen de muestras fecales
– Identificación de parásitos intestinales
• Examen directo
• Técnicas de concentración
• Técnicas de tinción
• Cultivos ( menos frecuente)
• Inmunodiagnostico: ELISA - inmunoblot: Ac
específicos
• Técnicas adicionales
Entero parásitos: Diagnostico de
Laboratorio
Examen Directo
• Macroscópico
• Microscópico

• Macroscópico
– Consistencia: formadas, blandas, acuosas, etc
– Presencia: moco, sangre, larvas, gusanos
adultos, proglótides, etc
Entero parásitos
Diagnostico de Laboratorio:
Microscópico
• rápido-sencillo-económico.
• rendimiento:
– Pobre si es una sola muestra:
pequeña cantidad de heces.
– Mejora si es seriado: tres muestras.
• Más útil: muestras frescas
– Trofozoítos móviles o larvas.

Técnica:
– Cloruro de sodio 0,85 %.
– Lugol.
– Lamina y laminilla.
• Se emulsiona con las heces.
• Se observa al microscopio.
Giadia lamblia
 Enteroparásitos
• Examen de muestras fecales
– Identificación de parásitos intestinales
• Examen directo
• Técnicas de concentración
• Técnicas de tinción
• Cultivos ( menos frecuente)
• Inmunodiagnostico: ELISA - inmunoblot: Ac
específicos
• Técnicas adicionales
 Entero parásitos
METODOS DE CONCENTRACION
Aumentan el número de parásitos utilizando diferentes
técnicas
• Detectan 40 % - 50% más que el Método Directo
• Separan los componentes parasitarios de los detritus
fecales utilizando un liquido de densidad elevada.
• Se basan en los principios de sedimentación y
flotación
• El mas utilizado:
– FAUST: flotación y centrifugación : huevos y quistes.
– RITCHIE: sedimentación con éter (etil acético)
- formalina.
Método de Faust o de Sulfato de Zinc
al 33%
• Mezclar 10 gramos de heces con 50 mL de solución fisiológica o agua
de caño y tamizar a través de un colador metálico, luego filtrar sobre
gasa en un embudo.
• Recoger 10 mL del filtrado sobre un tubo de centrífuga y centrifugar 5
minutos a 1500 rpm.
• Descartar el sobrenadante. Repetir esta operación 3 veces o hasta que
el sobrenadante quede límpido.
• Agregar al sedimento final 2 o 3 mL de solución de sulfato de zinc al
33% y homogeneizar con varilla de vidrio. Completar con sulfato de
zinc el tubo de centrífuga sin volver a homogeneizar. Centrifugar
durante 1 ó 2 minutos a 1500 rpm.
• Extraer con un asa bacteriológica unas gotas de la película superficial
sin retirar el tubo de la centrífuga o haciéndolo con sumo cuidado para
evitar que por agitación se destruya la película.
 Entero parásitos
• Examen de muestras fecales
– Identificación de parásitos intestinales
• Examen directo
• Técnicas de concentración
• Técnicas de tinción
• Cultivos ( menos frecuente)
• Inmunodiagnostico: ELISA - inmunoblot: Ac
específicos
• Técnicas adicionales
Enteroparásitos
Técnicas de Tinción

– Útil para trofozoítos – quistes de protozoos.

– No huevos o larvas.
– Principales:
• Ziehl Neelsen modificada: Cryptosporidium,
Cyclospora e Isospora
• Hierro-hematoxilina
• Tricromica
 Enteroparásitos
• Examen de muestras fecales
– Identificación de parásitos intestinales
• Examen directo
• Técnicas de concentración
• Técnicas de tinción
• Cultivos ( menos frecuente)
• Inmunodiagnostico: ELISA - inmunoblot: Ac
específicos
• Técnicas adicionales
Entero parásitos
Cultivos
– Poco usados: laboratorios de investigación
– Para detección de distintos nematodos
infectantes.
– La larva en fase infectiva es más fácil de ser
identificada.
– Harada Mori: Filtro de papel
– Carbón vegetal
– Especies: Strongyloides, Uncinarias,
Entamoeba histolytica
 Entero parásitos
• Examen de muestras fecales
– Identificación de parásitos intestinales
• Examen directo
• Técnicas de concentración
• Técnicas de tinción
• Cultivos ( menos frecuente)
• Inmunodiagnostico: ELISA - Inmunoblot:
Ac específicos
• Técnicas adicionales
Enteroparásitos
Inmunodiagnóstico:
• ELISA- Inmunoblot:
Ac específicos
– Sensibilidad y
especificidad variable
– Solicitar cuando: Alta
sospecha clínica y los
test tradicionales
negativos
– Amebiasis
criptosporidium
giardiasis
 Enteroparásitos
• Examen de muestras fecales
– Identificación de parásitos intestinales
• Examen directo
• Técnicas de concentración
• Técnicas de tinción
• Cultivos ( menos frecuente)
• Inmunodiagnóstico: ELISA - Inmunoblot: Ac
específicos
• Técnicas adicionales
Técnicas adicionales

Graham: o cinta engomada o adhesiva (scoth)

Se aplica en la región anal, luego se pega en un
portaobjeto y se observa al microscopio: huevos
Es necesario de 3 a 5 muestras en días seguidos.

Kato Katz: Recuento de huevos de helmintos..

Baermann:
• Termotropismo.
• Sensible y fiable para detección de
Strongyloides.
• Aprovecha la capacidad de migrar
de las larvas de strongyloides
estercoralis estimuladas por el
calor.
• Interpretación: • Indicaciones a
– El paciente tiene pacientes con estas
hábitos con riesgo de parasitosis:
exposición de • Mejorar lavado de
contaminación fecal - manos
oral
• Ingerir alimentos
– Paciente tiene riesgo bien lavados y/o
de adquirir otras preparados con
parasitosis que si son adecuada higiene
patológicas.
• NO TRATAMIENTO
 PARASITOLOGIA
Métodos de Laboratorio
• Examen de muestras fecales: Enteroparasitosis
• Examen de frotis sanguíneo Parasitosis
• Examen de Secrec. Corporales tisulares
– Urogenitales
– Esputo
– Aspirados
– Biopsias
• Cultivo Parasitosis
• Inmunodiagnóstico Intestinales
• Diagnostico Molecular Tisulares
Epidemiología
• Distribución Mundial
• Asociado a factores
– Ambientales
– Parasitarios
– Huésped
Síndromes clínicos
• Síndrome anémico: Malaria
• Cardiomiopatia: Enf. Chagas
• Síndrome ulceroso muco-cutáneo: Leishmaniasis
• Síndrome mononucleosico: Toxoplasmosis
• Síndrome meningoencefalitis: amebas de vida libre
• Síndrome respiratorio: Hidatidosis Pulmonar –
paragonimiasis
• Síndrome Ictérico: Fasciolasis Hepática
• Síndrome neurológico: Cisticercosis
• Síndrome dérmico: Larva migrans visceral
Parasitosis tisulares
• Examen de frotis sanguíneo
• Examen de Secreciones Corporales
– Urogenitales
– Esputo
– Aspirados
– Biopsias
Requieren de muestras accesibles en su
mayor parte por procedimientos invasivos
Parasitosis tisulares
• Examen de frotis sanguíneo

Malaria Tripanosomiasis
 Plasmodium
Ciclo biológico
• El ciclo biológico del
Plasmodium comprende tres
fases:
1. CICLO SEXUAL O
ESPOROGÓNICO: se da en el
mosquito del género Anopheles.
Esta fase dura de 14 a 20 días.
2. CICLO EXOERITROCÍTICO: se
inicia en los hepatocitos.
Esquizontes tisulares y
merozoítos. Duración promedio
de 12 días.
3. CICLO ERITROCÍTICO:
merozoítos se liberan del hígado
e invaden los glóbulos rojos
produciendo su destrucción.
 DIAGNÓSTICO
LABORATORIAL
Diagnóstico
parasitológico
DIAGNÓSTICO
• Gota gruesa
1.- CLÍNICO
2.- LABORATORIAL • Frotis
 Características diferenciales entre
plasmodios vistos en frotis de sangre
humana
Parasitosis tisulares
• Examen de frotis sanguíneo
• Examen de Secreciones Corporales:
– Esputo: Paragonimus
– Aspirados de Quistes: Hidatidosis
– Biopsias: leichmaniasis - toxoplasmosis
– L.C.R: Cisticercosis - toxoplasmosis
Técnicas de análisis: ELISA-Inmunoblot-
Biologia Molecular-Inmunofluorescencia
 Eosinofilia y Parasitosis
• Se estima que al menos en 70% de
los pacientes con eosinofilia elevada
(mayor de 20%) en nuestro país se
encuentra un origen parasitario

• Sin embargo
– Los protozoarios y helmintos de
localización exclusivamente
intestinal no la generan.
– La generan aquellos que llevan
a cabo una migración tisular
– y que al final de su ciclo
biológico pueden localizarse
fuera (Trichinella spiralis)
– o dentro (Fasciola hepatica)
del tubo digestivo
Eosinofilia y Parasitosis
• Tambien la producen
los parásitos de
animales que
accidentalmente
infectan al hombre
(Toxocara canis).
 Protozoarios: Amebas de vida libre

Las amebas de vida libre (AVL) son protozoos que se desarrollan en aguas temperadas
que se mantienen relativamente inmóviles (piscinas, lagunas, estanques). Algunas
especies de AVL pertenecientes a los géneros Acanthamoeba y Naegleria han sido
descritas como potencialmente patógenas para el hombre causando meningoencefalitis
amebiana primaria (MAP) y otros cuadros como queratitis grave en el hombre.
Son mas frecuentes en inmunocomprometidos y de elevada mortalidad (> 90%)
 Protozoarios: Amebas de vida libre
Parasito Técnica de Muestra Estadio
estudio

Ancanthameba sp Frotis y Raspado Trofozoítos

Queratitis grave tinciones corneal
Cultivo

Naegleria sp Exámen Líquido Trofozoítos

Absceso cerebral directo en cefalorra
fresco: raro quídeo
Frotis y Biopsia
tinciones, cerebral
Inmunoflures.