QUINTA SEMANA

CONTROL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO

ESTERILIZACION-DESINFECCION
Dr. Jorge veliz caballero
Conceptos:
•Asepsia: Prevenir o reducir la
transmisión

•Esterilización: Destrucción de todos los

microorganismos

•Incluye esporas

•Métodos físicos

•Métodos químicos

•Desinfección: Reducción del número

•Métodos químicos
 PROCEDIMIENTOS DE
ESTERILIZACION/DESINFECCION

Procesos físicos:
•Calor:
Seco
Húmedo
•Radiaciones:
Ionizantes
No ionizantes
•Ultrasonidos
•Microondas
•Filtración

Procesos químicos.
 Factores a considerar en la
selección del método
•Microorganismos:
- Grado de muerte microbiana requerido
- Naturaleza microbiana (virus, bacterias...)
•Instrumental
- Uso al que se destine
- Naturaleza del objeto a tratar
•Costo del procedimiento
•Facilidad/accesibilidad de la técnica
•Impacto medioambiental
 AGENTES FÍSICOS: CALOR
 Agente esterilizante más utilizado en C. Salud.
 Mecanismo de acción:
 Seco: oxidación
 Húmedo: desnaturalización de proteínas
 Eficacia:
 Húmedo>>Seco
 Mayor poder de penetración.
 LA ACCIÓN LETAL DEL CALOR ES UNA RELACIÓN DE
TIEMPO Y TEMPERATURA

La mayoría de bacterias, levaduras y hongos 80oC , 5-10 min

Mycobacterium tuberculosis 58oC , 30 min

Mycobacterium tuberculosis 59oC , 20 min

Mycobacterium tuberculosis 65oC , 2 min

Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis 60oC , 60 min

La mayoría de esporas patógenas 100oC , pocos min

 CALOR SECO
 FLAMEADO

 AIRE CALIENTE (Hornos):

 Esterilizante
 160ºC/ 2 horas

 INCINERACIÓN
 CALOR HÚMEDO
 Pasteurización: 63ºC/30 min

 Variantes de la pasteurización

 Ebullición

 VAPOR DE AGUA:
 Vapor Fluente.
 Vapor a presión superior a la
Atmosférica: AUTOCLAVE
ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO A
PRESIÓN SUPERIOR A LA ATMOSFÉRICA:
AUTOCLAVE

Válvula de drenaje
VAPOR DE AGUA

PUERTA

Medio de cultivo

Fuente de calor

121ºC: 30 min
132-134ºC: 3 min (vapor
saturado)
ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO A
PRESIÓN SUPERIOR A LA ATMOSFÉRICA:
AUTOCLAVE
 RADIACIONES

Radiaciones ionizantes:
•Son los rayos X y Gamma, y los radiosótopos
Co60 y Cs137
•Efectos son letales y mutagénicos.
•Muy penetrantes

Radiaciones no ionizantes.
•Son los rayos UV
•Cambios en el ARN o en proteínas
•Poco penetrantes
 MÉTODOS MECÁNICOS

FILTRACION

- Para materiales termolábiles y sensibles a radiaciones.

- Tamaño del poro: 0.005-1 µ.
- Los virus no son retenidos
Filtros de membrana
Filtros HEPA

ULTRASONIDOS

- Vibraciones de alta frecuencia (poca penetración).

- Desnaturalizar las proteínas y componentes bacterianos.

- Se emplean en un baño de agua para limpieza de material

 DESINFECTANTES
MECANISMO DE ACCIÓN

Desnaturalización y coagulación de proteínas

Oxidación

Alteración de permeabilidad de la membrana

Combinación radicales de proteínas y ácidos

nucleicos
1. Naturaleza de los microorganismos
Potencia de los desinfectantes:
Alto nivel:
• bacterias vegetativas
• micobacterias, hongos, virus
• no esporas bacterianas
Nivel intermedio:
1. bacterias vegetativas
2. hongos y virus
3. dificultad virus desnudos de pequeño tamaño
4. no esporas bacterianas
Bajo nivel:
1. no todos los hongos
2. no virus desnudos de pequeño tamaño
3. No esporas bacterianas
2. Condiciones físico-químicas:

1. Tiempo de exposición

2. Temperatura

3. Concentración

4. pH
3. Presencia de materia orgánica:

• Puede captar e inactivar al desinfectante (Ej.

Derivados del Cl)

• Puede dificultar el contacto del

desinfectante con los microorganismos

Imprescindible limpiar material antes de la

desinfección!!!
 DESINFECTANTES MÁS USADOS:

1. Alcoholes
2. Agentes oxidantes (Cloro, Yodo, Ac. Paracético,
H2O2)

3. Agentes surfactantes
4. Derivados fenólicos
5. Aldehídos
6. Oxido de etileno
Alcoholes: Etanol e isopropanol

• Mecanismo de acción: desnaturalización de

proteínas y alteraciones en la membrana

• Nivel intermedio
• Escasa toxicidad
• Usos:
– antisépticos cutáneos en forma de sol. acuosa al
70-90 %
– Desinfectantes de objetos semicríticos y no críticos

Inactivación por la materia orgánica

Derivados del Cloro: Hipoclorito sódico en
sol. acuosa

• Mecanismo de acción: Oxidación

• Alto o bajo nivel (en función de la concentración)
• Muy tóxico y corrosivo
• Usos:
– Tratamiento de aguas
– Desinfección de superficies ambientales en general

Inactivación por la materia orgánica e inestabilidad

Yodo y Yodóforos (Povidona yodada)

• Mecanismo de acción: Oxidación (< Cl) y

halogenación

• Nivel intermedio
• Poco tóxicos
• Usos: Antisépticos de mayor uso (piel intacta, heridas,
colutorios, lavado quirúrgico de manos,...)

Inactivación por la materia orgánica. Proteger de la luz

Acido paracético

• Mecanismo de acción: Oxidación y alteración de la

permeabilidad de la membrana

• Alto nivel y esterilizante

• Tóxico y corrosivo de metales
• Usos:
– Esterilización de endoscopios
– Desinfección de instrumental

Se mantiene activo en presencia de materia orgánica

Peróxido de hidrógeno

• Mecanismo de acción: Oxidación

• Potencia variable (en función de la concentración y
Tª)
• Soluciones concentradas son tóxicas y
corrosivas
• Usos:
– Desinfección de lentes de contacto (3%)
– Desinfección de equipos médicos limpios (6%)
– Esterilización con PLASMAGAS
PLASMAGAS

Agente esterilizante.
H2O2 vaporizado, sometido a radiaciones de alta
energía
Mecanismo acción: formación de radicales libres

(oxígeno atómico) de alto poder microbicida.

Ventajas frente al óxido de etileno:

- No productos secundarios tóxicos.

- Alta eficiencia.
Agentes surfactantes

• Mecanismo de acción: Alteración de la membrana

• Bajo nivel
• Poco tóxicos
• Uso: Antisépticos

Cloruro de benzalconio (Dvdo. Amonio cuaternario)

Paraclorometaxilenol
Derivados fenólicos

• Mecanismo de acción: Alteración de la membrana y

coagulación de proteínas

• Nivel intermedio

• Usos:
– Descontaminación ambiental
– Antisépticos:
– Hexaclorofeno
– Triclosan
Aldehídos (Glutaraldehído y formaldehído)

• Mecanismo de acción: Agentes alquilantes

• Alto nivel y esterilizantes
• Muy tóxicos y potencialmente carcinogénicos
• Usos:
– Esterilización de materiales no resistentes al calor
(glutaraldehído)
– Desinfección de cabinas de seguridad biológica
(formaldehído)
Oxido de etileno

• Mecanismo de acción: Oxidación y alquilación

• Alto nivel y esterilizante con rapidez de

efecto

• Muy tóxico (cámara hermética y posterior aireación)

• Usos: Esterilización de materiales no resistentes al calor

ni a la humedad
 Factores a considerar en la
selección del método de
desinfección
•Microorganismos:
- Grado de muerte microbiana requerido
- Naturaleza microbiana (virus, bacterias...)
•Instrumental
- Uso al que se destine
- Naturaleza del objeto a tratar
•Costo del procedimiento
•Facilidad/accesibilidad de la técnica
•Impacto medioambiental
 ANTIBIÓTICOS :DESCRIPCIÓN
• Los antibióticos, o agentes antimicrobianos, son sustancias
(obtenidas de bacterias u hongos, o bien obtenidas de síntesis
química) que se emplean en el tratamiento de infecciones.
• La elección de uno u otro antibiótico en el tratamiento de una
infección depende del microorganismo (obtenido por cultivo o
supuesto por la experiencia), de la sensibilidad del
microorganismo (obtenida por un antibiograma o supuesta por
la experiencia), la gravedad de la enfermedad, la toxicidad, los
antecedentes de alergia del paciente y el costo. En infecciones
graves puede ser necesario combinar varios antibióticos.
• La vía de administración puede ser oral (cápsulas, sobres),
tópica (colirios, gotas, etc) o inyectable (intramuscular o
intravenosa). Las infecciones graves suelen requerir la vía
intravenosa .
Antibióticos : mecanismos de acción
• Los antibióticos actúan a través de 2
mecanismos principales:
• a) Como bactericidas: producen la muerte de
los microorganismos responsables del proceso
infeccioso.Constituyen este grupo :
- Beta-lactámicos (Penicilinas y cefalosporinas)
- Glicopéptidos (Vancomicina, teicoplanina)
- Aminoglucósidos (Grupo estreptomicina)
- Quinolonas (Grupo norfloxacino)
- Polimixinas
• b) Como bacteriostáticos: inhiben el crecimiento
bacteriano aunque el microorganismo permanece
viable, de forma que, una vez suspendido el
antibiótico, puede recuperarse y volver a
multiplicarse. La eliminación de las bacterias
exige el concurso de las defensas del organismo
infectado.
 Efectos adversos
• · Alergia. Muchos antibióticos producen erupciones en
la piel y otras manifestaciones de alergia (fiebre, artritis,
etc), en un pequeño número de personas predispuestas.
• · Disbacteriosis. Al eliminar también bacterias "buenas"
(de presencia deseable en el tubo digestivo) pueden
producir dolor y picor en la boca y la lengua, diarrea,
etc.
• · Sobrecrecimientos. Algunos antibióticos eliminan
unas bacterias pero hacen crecer otras bacterias u
hongos.
• · Resistencias. Las bacterias intentan hacerse resistentes
rápidamente a los antibióticos, y la administración
continua o repetida de antibióticos para enfermedades
menores favorece la aparición de estas resistencias.
• · Toxicidad. Los antibióticos pueden dañar los riñones,
el hígado y el sistema nervioso, y producir todo tipo de
alteraciones en los glóbulos de la sangre.
 Resistencia bacteriana
• Hay grupos bacterianos que no son afectados por
un antibiótico, bien porque carecen del sitio de
acción del antibiótico o porque es inaccesible.
• Esta situación se define diciendo que la bacteria
es insensible o presenta resistencia
natural. Todos los aislamientos de esta bacteria
son resistentes a ese antibiótico de forma
constante.
• Otras especies son susceptibles al
antibiótico, pero esto no impide que, por
diferentes razones, se aíslen ocasionalmente
variantes que no lo son y que crecen
normalmente
en presencia del antibiótico. En este caso se
habla de resistencia adquirida