UNIVERSIDADE DE SAO PAULO

ESCOLA DE ENGENHARIA DE LORENA

DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGÍA

Tecnología de transformación de residuos agroindustriales en

biomoléculas de interés industrial: caso bagazo de caña de azúcar

Dr. (c). Ruly Terán Hilares

Acancay-2017
Petróleo y derivados
En el Perú…

Noviembre 2016
Politicas medioambientales adoptados…
Conferencia Internacional Limitar el aumento de la temperatura global
sobre Cambio Climático del planeta por debajo de 2 ⁰C
(COP21). Reducción de emisión de gases de efecto
Acuerdo de Paris invernadero
20% de reducción en emisión de gases de
efecto invernadero;
Paquete en energia y clima
20% de energía proveniente de fuentes
- 2020 – Comision Eurpea
renovables;
20% de aumento de la eficiencia energética.
Brasil (PNMC)- La
Convención Marco de las Reducción en 36.1-38.9% en emisión de gases
Naciones Unidas sobre el de efecto invernadero hasta el 2020
Cambio Climático
(CMNUCC) Reducción en 30% en emisión de gases de
Perú efecto invernadero hasta el 2030
Oportunidad para el desarrollo de nuevas fuentes
de energías renovables

 Reducción en la emisión de gases de efecto invernadero

 Beneficios económicos

Bio-economia Biomasa

 Energía (calor, eléctrica y biocombustibles)

 Bio-productos (polímeros, químicos e otros)
Producción de etanol

Hidrólisis Fermentación Destilación

Extracción Fermentación Destilación

(caldo)

Pretratamiento Hidrólisis Fermentación Destilación

 Residuos Agroindustriales con potencial para uso con fines
energéticos en el Perú

Costa norte
 Bagazo y follaje de la caña de azúcar
 Cascarilla de arroz
 Broza de algodón
Selva alta
 Cascarilla de café
 Pulpa del café y cacao
 Residuos de la palma aceitera
 Residuos forestales
Selva baja
 Residuos forestales

http://www.minam.gob.pe/wp-content/uploads/2016/05/Tercera-Comunicaci%C3%B3n.pdf
Uso tradicional de biomasa en el Perú
 Brasil: Cosecha 2016/2017

657 millones de toneladas de caña de azúcar

fue producido (CONAB, 2017).
280 kg de bagazo/ton de caña (50%
contenido de humedad) (RABELO et al.,
2011).
184 millones de toneladas de bagazo
generados en esta cosecha
70-90% de SCB es quemado para generación
de energía eléctrica ( ͂150 kWh/ton de caña)
18-55 millones de toneladas disponibles para
para ser aprovechados…
En el Perú?

9-10 millones de
toneladas de caña
de azúcar en
2015-2016
Principales componentes
de la pared celular
Biomasa lignocelulósica: Composición

Composición (%)
Biomasa
Celulose Hemicelulosa Lignina Referencias
Bagazo de caña de
40 26,1 24,1 Terán-Hilares et al. (2016)
azúcar
Follaje de la caña de
34,8 23 24,1 Rocha et al. (2017)
azúcar
Paja de arroz 35,3 18,5 16,9 Ahmed et al. (2017)
Paja de trigo 31,6 28,1 20,1 Salapa et al. (2017)
Eucalipto 49,9 20,3 27,4 Carvalho et al. (2016)
 Procesamiento de biomasa lignocelulósica

Pretratamiento

Físicos (Molienda, extrusión)

Físico-químicos (Explosión con amonio)
Químicos (ácidos, álcalis, solventes orgánicos)
Biológico (Microorganismos)
Antes Después

 Pretratamiento auxiliado con ultrasonido Método eficaz en condiciones

 Pretratamiento alcalino auxiliado con vacuo suaves de proceso, elevada
 Pretratamiento alcalino auxiliado con eficiencia energética,
cavitación hidrodinámica simplicidad del sistema para
ser ampliado, etc.
 Procesamiento de biomasa lignocelulósica

Pretratamiento

Hidrólisis

Ácido o enzimático

Desafíos:
 Baja dosis de enzima
 Elevado contenido de sólidos
 Desenvolvimiento de nuevos
preparados enzimáticos
 Factores que influencian en la eficiencia de hidrólisis

 Actividad de la enzima
 Concentración de enzima utilizado
 Contenido sólidos
 Temperatura
 pH
 Presencia de surfactantes
 Configuración del reactor
 Característica de la biomasa

Conversión de celulosa de hojas de maíz

pretratados con diferentes métodos (10 FPU/ g
biomasa, 72h)- Du et al. (2017).
Procesamiento de biomasa lignocelulósica

Pretratamiento
 Saccharomyces cerevisiae
 Scheffersomyces stipitis
 Glicose
Hidrólisis  Scheffersomyces shehatae
 Xilose
 Spathaspora passalidarum
 Celobiosa
 Candida tropicalis
Fermentación  Arabinosa
 Aureobasidium pullulans

 Etanol
 Polímeros (pululan, PHAs)
 Bio-surfactantes
 Acido láctico
 Otras biomoleculas
Fermentación de hidrolizado enzimático de bagazo de caña de azúcar por
Scheffersomyces stipitis
Configuraciones de procesos en biorefinerías de biomasa
Cavitación hidrodinámica como una estrategia para aumentar a
eficiencia de pretratameinto de biomasa
Fenómeno de cavitación
 Hidrodinámica (HC)
 Acústica
 Óptica
 Partícula
Burbujas

Beneficios:

 Altas temperaturas (1000-12000 K) y presiones (100-5000 atm)

 Microchorros destructivos (Erosión)
 Ondas de choque (degradan moléculas orgánicas)
 Radicales libres (acelera reacciones químicas)
Cavitación Hidrodinámica (HC)
Algunas aplicaciones de esta tecnología

Degradación de compuestos
Tratamiento de aguas Extracción de aceites quimicos Estabilización de jugos

Síntesis de biodiesel Producción de cerveza Pretratamiento de biomasa

Mecanismo de degradación de lignina por radicales libres
Efecto mecánico atribuido al fenómeno de cavitación
Factores que afectan el fenómeno de cavitación

Parametros del proceso

Configuración del Caracteristicas de la

sistema biomasa

Presencia de agentes químicos

externos
Pretratamiento alcalino auxiliado con cavitación hidrodinámica
Variables estudiadas
 Concentración de álcali
 Presión
 Temperatura
 Número de cavitación
 Adición de oxidantes (H2O2)

Diseño experimental
(Box-Behnken)
• Digestibilidad enzimática
• Composición del material
Alkaline hydrogen peroxide-HC assisted pretreatment: compositional
alterations in SCB
Table 7.1 – Composición del material después del pre tratamiento con NaOH/H2O2/HC
Experimental variables Solid composition (%)
Run
Process time (min) H2O2 (%v/v/) NaOH (mol/L) Cellulose Hemicellulose Lignin
1 2 0.2 0.2 42.74 30.24 19.66
2 10 0.2 0.2 46.40 28.20 19.55
3 2 1.0 0.2 43.68 27.90 21.92
4 10 1.0 0.2 49.88 28.78 16.25
5 2 0.6 0.1 41.84 27.95 22.16
6 10 0.6 0.1 44.49 27.03 21.57
7 2 0.6 0.3 43.10 25.54 20.40

88 10
10 0.6
0.6 0.3
0.3 46.76
46.76 29.92
29.92 14.33
14.33
9 6 0.2 0.1 45.44 28.71 23.10
63.34% remoción de lignina
10 6 1.0 0.1 42.97 27.62 22.35
11
11 66 0.2
0.2 0.3
0.3 50.35
50.35 29.41 18.71
12 6 1.0 0.3 44.86 27.45 16.66
13 6 0.6 0.2 47.29 29.49 19.23
14 6 0.6 0.2 43.07 28.55 19.23
15 6 0.6 0.2 45.48 27.24 20.00
Hidrólisis enzimática (5% sólidos)

Condición utilizada:
 Solución Buffer (pH of 4.8);
 Carga de sólidos (5%);
 Tiempo (24 o 48 h);
 Enzima comercial Cellic C-tec
(Novozymes, Dernmark) a una carga de 20
FPU/g de bagazo.

𝐺 = Concentración de glucosa (g/L)

|𝐺|∗𝑉∗0.9 V= Volumen de reacción (L)
Yield (%) = ∗ 100%
𝐺𝐶∗𝑀 TG = Contenido de celulose (%)
M= Peso seco (g)
Hidrólisis enzimática
Cellulose hydrolysis yield in pretreated biomass with NaOH/H2O2/HC
Variables experimentales del pretratamiento Hidrolisis de celulosa en 24h (%)
Run
Tiempo (min) H2O2 (% v/v) NaOH (mol/L) Experimental Estimado
1 2 0.2 0.2 55.39 54.78
2 10 0.2 0.2 67.61 68.74
3 2 1.0 0.2 41.60 36.81
4 10 1.0 0.2 83.99 80.93
5 2 0.6 0.1 38.13 36.03
6 10 0.6 0.1 48.37 44.54
7 2 0.6 0.3 43.66 44.05
88 10
10 0.6
0.6 0.3
0.3 94.96
94.96 93.62
93.62
9 6 0.2 0.1 46.74 47.61
 16%- Sin pretratamiento
 93.05%
10
– NaOH-HC
6 1.0
(0.3 mol/L, 30 min, 700.1°C) reportado por27.90 32.96
Terán Hilares et al. (2017a)
 94%
11
– Ozonolisis
6
combinado0.2 0.3
con ultrasonido 66.02
(32 mg O3/minuto 64.40
durante 60 min, seguido por
12 6 1.0
proceso alcalino con 0.1 mol/L de NaOH por0.32h y finalmente tratado
70.71
con ultrasonido73.28
durante 5
13
min) reportado6 por Perrone et
0.6al. (2016) 0.2 58.78 60.32

 98.25%
14 – NaOH
6 (0.5 mol/L,0.680 °C, 2h) seguido
0.2 56.11(600 W por 5 min)
con microondas 60.32
reportado
15 Liu et al. 6(2016)
por 0.6 0.2 58.73 60.32
ANOVA para modelo cuadrático para rendimiento de hidrólisis enzimática de
bagazo de pré-tratado con H2O2/NaOH/HC
Source Sum of squares Df Mean square F-Value p-Value
Model
Modelo 4244.63
4244.63 77 606.38
606.38 37.54
37.54 <<0.0001
0.0001 Significant
Significant
Tiempo (X1) 1686.35 1 1686.35 104.40 < 0.0001
Peróxido de hidrogeno (X2) 16.70 1 16.70 1.03 0.3430
Hidróxido de sodio (X3) 1630.49 1 1630.49 100.94 < 0.0001
X1X2 227.56 1 227.56 14.09 0.0071
X1X3 421.48 1 421.48 26.09 0.0014
X2X3 138.42 1 138.42 8.57 0.0221
X32 123.63 1 123.63 7.65 0.0278
Residual 113.07 7 16.15
Lack ofde
Falta Fitajuste 108.41
108.41 5 21.68
21.68 9.29
9.29 0.1000
0.1000 Not significant
Error puro 4.67 2 2.33
Total 4357.70 14
R22 adjusted
R ajustado = = 0.9487
0.9487

Y1 = 54.55 - 4.33X1 - 61.31X2 + 130.73X3 + 4.71X1X2 + 25.66X1X3 + 147.06X2X3 - 575.45X32

Superficie de respuesta para hidrólisis enzimática. Interacción de variables: (A) tiempo y peróxido de
hidrogeno, (B) tiempo y hidróxido de sodio, (C) Peróxido de hidrogeno y hidróxido de sodio.
Confirmación del valor estimado por el modelo …
Confirmación experimental del valor estimado por el modelo cuadrático para
respuesta de hidrólisis enzimática del material pré-tratado: 9.95 min, 0.78 %v/v
of H2O2 y 0.29 mol/L de NaOH

Valor experimental Valor estimado

Respuesta
(X ± SD)* (X ± CI)**
Rendimiento de hidrólisis
Cellulose hydrolysis de celulosa***
yield*** 95.43 ±
95.43 ± 4.51
4.51 96.27 ±± 7.31
96.27 7.31
Hemicellulose
Rendimiento hydrolysis
de hidrólisis yield
de hemicelulosa 81.34 ± 6.36
81.34 ± 6.36 -
Cellulose content 49.16 ± 1.14 -
Hemicellulose content 25.33 ± 0.75 -
Lignin content 12.96 ± 0.89 -
Total
Azúcarsugars
total content
liberado(g/kg
(g/kgofderaw biomass)
biomasa) 780.45 ± 10.85
780.45 ± 10.85 --

*Experimental values correspond to average of three obtained values ± standard deviation (SD).
** Predicted value ± 95% confidence interval (CI).
*** The maximal cellulose hydrolysis yield in 24h was considered as optimization criteria.
Hidrólisis enzimática (20% sólidos)

Donde:
Agua a 50 ⁰C
Solución buffer a pH de 4.8

Condiciones:
SCB
 Solución buffer (pH de 4.8);
 Carga de sólidos (10 y 20 %);
 Tiempo de reacción (24h);
 Velocidad de recirculación de la solución
(8 mL/min)
50 ⁰C  Enzima comercial Cellic Ctec2
(Novozymes, Dernmark) a 10 y 20 FPU/g
Bomba of bagasse.
 95.43%

Perfil de hidrólisis de celulosa e reactor de columna a 5% de carga de sólidos.

Carga de enzima de 20 FPU/g de bagazo.
Enzymatic hydrolysis in column flow-through column reactor

(74.7%)

60 g/L de glucosa 80 g/L glucosa

25 g/L de xilosa 38 g/L xilosa
22 g/L de celobiosa 20 g/L of celobiose
3 g/L de arabinosa 4 g/L of arabinosa

Perfil de hidrólisis de celulosa e reactor de columna a 20% de carga de sólidos.

Carga de enzima de 10 y 20 FPU/g de bagazo.
 Producción de etanol (SHF)

Inóculo Condiciones
 Glucosa (30 g/L)  300 rpm
 Peptona (20 g/L)  30 ⁰C
Scheffersomyces  Extracto de levadura (10 g/L)  48h
stipitis NRRL-Y7124

Cells
Medio de fermentación (300 mL)

• Hidrolizado enzimático (glucosa, xilosa, celobiosa, arabinosa)

• Extracto de levadura (3 g/L)
• Peptona (5 g/L)
Flujo de aire (0.3 vvm)
• Cloruro de calcio (0.1 g/L)
30 ⁰C
• Sulfato de amonio (2 g/L)
Reactor de columna de burbujas
Ethanol production in a bubble column reactor

Rendimiento: 0.49 g/g

Productividad volumétrica: 0.68 g/L.h

Etanol: 31.50 g/L

Perfil de consumo de substrato y producción de etanol durante el proceso

fermentativo
Cambios en la superficie del material
Acknowledgment