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Ecotoxicidad - Bioensayos 10
Ecotoxicidad - Bioensayos 10
Ecotoxicidad - Bioensayos 10
Exposición
Efectos
tiempo
b
enfermedad a- estado de salud
b b- posibilidad de muerte
c- recuperación total
d- recuperación con secuelas
e/f - progresivos déficit salud
Intoxicación aguda : Única dosis con
aparición de sintomatología antes de
las 24 horas
Toxicidad Aguda
Toxicidad Crónica
Absorción Máximo
-Muerte- Desaparición
Aparición
Etanol 10.000
Estricnina 2
Nicotina 1
Barrera Biológica
Cutánea
Xenobiótico Distribución
Gastrointestinal
Alveolar
Órgano blanco
Placentaria
Otras
Efectos
Incorporación de los Tóxicos al organismo
Contaminante
UTA = 1 / CE 50 x 100
26 – 50 % 2–4 Tóxico
Biomonitoreo:
Ensayos de toxicidad (WET o toxicidad total del efluente): no da
información sobre tóxicos específicos, ni sobre el tratamiento o la
persistencia ni los efectos sobre la salud humana pero, permite evaluar la
toxicidad conjunta de todos los constituyentes de un efluente complejo o
la reducción de los efectos tóxicos limitándose a medir un único
parámetro su toxicidad
Bioensayo: evaluación de la condición de un cuerpo de agua mediante
el estudio de organismos residentes
Factores de incertidumbre: condiciones de mezcla del efluente en el
cuerpo receptor , variabilidad en la sensibilidad entre especies,
variabilidad de toxicidad del efluente
COMO SE REALIZA UN ENSAYO DE
TOXICIDAD CON EFLUENTES
Toma de muestra
Conservación de la muestra
Pretratamiento de la muestra
Principales características:
Principio de la técnica:
Reproducción partenogenética (
asegura una uniformidad de respuesta
de los individuos )
Métodos de detección de toxicidad
empleando Daphnia magna
Principio:
El bioensayo de toxicidad con
semillas de lechuga (Lactuca
sativa L) es una prueba estática
de toxicidad aguda (120 hs de
exposición) en la que se pueden
evaluar los efectos fitotóxicos
de compuestos puros o de
mezclas complejas en el
proceso de germinación de las
semillas y en el desarrollo de
las plántulas durante los
primeros días de crecimiento
Ensayo de toxicidad aguda con semillas de
lechuga (Lactuca sativa L)
Laevaluación del desarrollo de la radícula
y del hipocotilo constituyen indicadores
representativos para determinar la
capacidad de establecimiento y desarrollo
de la planta.
Ensayo de toxicidad aguda con semillas de
lechuga (Lactuca sativa L)
A diferencia de la prueba tradicional
de germinación de semillas, la
evaluación del efecto en la
elongación de la radícula y del
hipocotilo de las plántulas permite
ponderar el efecto tóxico de
compuestos solubles presentes en
niveles de concentración tan bajos
que no son suficientes para inhibir la
germinación, pero que sin embargo,
pueden retardar o inhibir
completamente los procesos de
elongación de la radícula o del
hipocotilo, dependiendo ello del
modo y sitio de acción del
compuesto.
Ensayo de toxicidad aguda con semillas de
lechuga (Lactuca sativa L)
En cada cápsula de Petri un disco de papel de filtro.
• Saturar el papel de filtro con 4 mL de la dilución
evitando que se formen bolsas de aire.
• Con la ayuda de una pinza, colocar cuidadosamente
veinte semillas, dejando espacio suficiente entre ellas
para permitir la elongación de las raíces.
• Tapar las cápsulas y colocarlas en bolsas plásticas
para evitar la pérdida de humedad. Dado que algunas
variedades de semillas de lechuga requieren oscuridad
para que se produzca la germinación, las cajas de Petri
deben cubrirse de la luz durante el periodo de ensayo
• Incubar durante 120 hs (cinco días) a una temperatura
de 22± 2 °C. Realizar repeticiones para cada dilución
ensayada
Ensayo de toxicidad aguda con semillas de
lechuga (Lactuca sativa L)
Terminado el periodo de exposición (120 h), se procede a
cuantificar el efecto en la germinación y en la elongación
de la radícula y del hipocotilo
Registrar el número de semillas que germinaron
normalmente, considerando como criterio de germinación
la aparición visible de la radícula
Utilizando una regla o papel milimetrado, medir
cuidadosamente la longitud de la radícula y del hipocotilo
de cada una de las plántulas correspondientes a cada
concentración de tóxico o dilución de muestra y a los
controles
La medida de elongación de la radícula se considera
desde el nudo (región más engrosada de transición entre
la radícula y el hipocotilo) hasta el ápice radicular
La medida de elongación del hipocotilo se considera
desde el nudo hasta el sitio de inserción de los dos
cotiledones
Ensayo de toxicidad aguda con semillas de
lechuga (Lactuca sativa L)
Expresión de los resultados:
• Promedio y desviación estándar de la
elongación de la radícula y del hipocotilo de las
plántulas de cada repetición.