HEMISNTESIS DE DIOSGENONA Y

DERIVADOS CON ACTIVIDAD

ANTIMALRICA

ESTEBAN VARGAS CANO

Trabajo de Grado presentado para

optar al titulo de Qumico

Asesor: Gustavo Escobar

Coasesor: Fernando Echeverri
Grupo de Qumica Orgnica de Productos Naturales
1
 Resumen
Este trabajo se logro la obtencin de
compuestos esteroidales derivados de
productos naturales, motivado por reportes
de compuestos antimalaricos aislados de
Solanum nudum.
 Contenido

Introduccin

Objetivos

Metodologa

Resultados y Discusin

Conclusiones

3
 La Malaria

Parsitos del genero Plasmodium

P. malariae P. ovale P. vivax P. falciparum

Mosquito anopheles

95 % Casos

4
 Malaria

5
http://www.mdconsult.com/das/patient/body/135132427-2/0/10041/30643.html?tab=span
Cl N

Tratamiento CH2

HN HO
N CH3 CH3 N
H
CH3 O
Cloroquina H3C

N
CH3 Quinina
H
CH3
H CH3
H3C O O H

H3C O O
O H3C O O
H
O H
H O H O
H H
O H CH3 O H
H O
CH3 CH3
H O O
O OH
H3C O
Artesunato Artemisinin
Artemeter

F
H3C NH2 F F
N F
O H3C F
O N
O NH
N
H3C S F
N N O
NH2
Cl H
NH2
HO
Epidemiology of drug-resistant malaria. THE LANCET Infectious DiseasesHN
6
Vol 2 Xxxxxx 2002 http://infection.thelancet.com
sulfadoxine-pirimetamina Mefloquina
 A partir de extractos de las hojas y el tallo de
Solanum nudum se aislaron varios esteroides
O
OH
H3C
O CH3 CH3
OH
H3C CH3 OH
H3C CH3

H3C O CH3
O
SN-2
125.5M
O HO
HO

O O
SN-1 OH OH
21M H3C O OH

HO CH3 CH3
HO O
O CH3
OH
O
O OH
H3C
CH3 H3C CH3 O SN-4 57.4M
CH3 O
CH3 O CH3 CH3H

H O
O CH3
O SN-3 H
63.1M H H 21.8M
O
Diosgenona
Saez et al. Tetrahedron 1998, 54, 10771-10778 7
 Esteroides
CICLOPENTAN-PERHIDROFENANTRENO.
C D

A B

Nomenclatura
biosintticamente derivan del Lanosterol o del cicloartenol.
21 22 24 26
25 26 27
20 23 21
19 28 25
12 17 20 F
27 19
11 13 22 24
18 16 12 17 E
C D 23
1 9 14 11 13 7
2 10 8 15 18 16
1 9 14
A B 2 10 8 15
3 5 7
4 6 3
8
5 7
4 6
Saponinas y Sapogeninas
Saponinas
Esteroidales
(Sapo=jabon)
Sapogeninas
Triterpenicas
H O
O pentaciclicas O
H
H O Hidrolisis
O
H H
HH H
HO HH
Diosgenina HO
Sapogeninas y AzucaresH
Hecogenina

H
H
N O
O H
H H O
H
HH H
H
H
HO
HO
Solasodina H
Sarsasapogenina
9
 Justificacin
Baja Concentracin H3C CH3
O
CH3H

H O
CH3
H
H H
O
Diosgenona
O
Problemas de Estereoqumica O
Sntesis Muchas etapas
Costoso

Total O
O
R
Igual Estereoqumica R
Compuesto Comercial
Relativamente barato
H
O 10
 Objetivo General

Obtener Diosgenona y derivados para

evaluar su actividad antimalarica.

11
Obtener Diosgenona

Obtener Derivados en los anillos A y B

Obtener una metodologa para la apertura del Anillo F

Caracterizar los compuestos

Analizar los resultados de Actividad

12
 Metodologa

Reaccin Purificacin Identificacin Ensayo

TLC Cromatografa RMN
En columna IR
MS
mp

13
 Metodologa
(Ensayos biolgicos Grupo Malaria)

Cepas
P. falciparum, FCB-2 y BF-54

Cultivo
Mtodo de Trager y Jensen

Actividad
Antiplasmodial in
Mtodo de Desjardins
vitro

Citotoxicidad Mtodo colorimtrico MTT

HepG2-A16

14
Modificaciones
O

HO

H3C CH3
O
CH3H

H O
CH3
H
H H
O
Diosgenona
O

R
R

15
H
O
 Diosgenona
Oppenhauer PCC o Jones

O HO O

Oxidante Condiciones Resultado

Al(TBuO)3 Exceso
PCC 1 Eq PCC
O
PCC Exceso PCC O

PCC Exceso PCC

O
O
Jones Exceso
(COCl)2/DMSO -60C
N,N IPr2ET

16
Bajo Rendimiento Subproductos Buen Rendimiento
 Diosgenona
Obtencin de Diosgenona a partir de Diosgenina mediante la oxidacin de
Swern

CH3 H3C CH3 H3C CH3

H3C
O O O
CH3 CH3H CH3H
H
O a O b O
CH3 H CH3 H CH3 H
H
H 84% H
H H H H H H
HO O O

(a) (COCl)2, DMSO, CH2Cl2, -60C, 30 min. Luego iPr2NEt, -

10C.
(b) (b) (CO2H)2, EtOH, reflujo 5 h.

17
18
 Dicarbonilo
H
O H2CrO 3 +
H O
O O
O O H
PCC, Exceso H O
Cr O O
O O OH Cr
Cr O
O O
O
HO O
O

O H2CrO 2
H O
H O
-
O
Cr
O OH

Jones, Acetona O
O O
0C, 1 hora, 67%

HO O
O

(25R)-spirost-4-en-3,6-diona
19
20
 Dieno

DDQ,Acido benzoico,

Tolueno, reflujo, 12 h, 60%

O O

(25R)-spirostan-1,4-dien-3-ona

21
22
 Epoxidacin

H2O2, NaOH
CHCl3/Acetona 4:1

48, horas 65%

O O
O

(25R)-4,5-epoxispirostan-3-ona

23
24
 Epoxidacin y Funcionalizacin
en C-16
O O
a
O O
H 48 h, 80% OH

O O
O

(25R)-16-hidroxi-4,5-epoxispirostan-3-ona.
(a). OXONE, NaHCO3, CHCl3-Acetona- Na2EDTA (1.0 mM) (1,1,1)

25
Posible mecanismo de reaccin del
DMDO

O
O
O

H 2
+
+
O H OH
H

O O O

O
+ +
27
 Apertura del Anillo E y F y
recuperacin del doble enlace
O
O
TMSCl, NaI,
O CH3CN, 4 M.S. O I

OH 30 min, 75%

O
O
O

26-iodocholest-4-ene-3,16,22-trione

28
29
Reduccin en las posiciones 16
o 22
O R

O I Reduccion R I

O O

Agente Reductor Condiciones Resultado

NaBH4 T Amb Mezcla

NaBH4 -70C Mezcla

K-Selectride T Amb Mezcla

K-Selectride -70C Mezcla

30
 26-Acetato
O O

O O
H H
O
Ac2O/AcOH
H O H

OH

H H H H

O O
O
O

31
32
 O O
O O
O TMSCl/
O NaI O
O
CH3CN
H
O H
O O

33
 Resumen
O
O

O O
O O O
O

O O O
O
O

O O O

I O
O O
O
O
OH
H H
O O O
O
O O
O

O
O

H
O 34
 Resultados De Actividad
Comparacin entre el numero de parsitos presentes
% Max en un grupo tratado y un grupo no tratado.
Inhibicin

Representa la concentracin de una droga que es

IC50 (M) requerida para obtener una inhibicin in vitro

Porcentaje de letalidad Vs. Log Concentracin

Toxicidad de la droga

Toxicidad (M)
IS IC50 (M)
35
 FCB-2
Estructura (Resistente a CQ) Toxicidad TC50 (mM) IS
% max inhibicion IC50 (mM)
O

O
36.0 > 482.4 1111.4 2.3

HO

89.3 27.9 265.1 9.5

89.3 21.8M 265.1 12.2
O

O 73.9 36.0 >487 6.6

O
O
50.6 56.7 100.6 1.8
O
O

O
O
OH
95.2 10.1 153.4 15.2
O
O

I
O
95.5 2.9 90.2 31.1
H
O

O
95.4 11.3 191.5 16.9
O 36
O
 IC50=11.3/10.1/2.9

IC50=21.8 O
O

IC50=482.4 H3C
O
CH3

CH3H
O
CH3 H O O
H O
O
H H
O
OH
Diosgenona
O
O O
O

O I
O

HO
H
O
 Conclusiones

En dos reacciones se obtuvo la

diosgenona, que posee una buena
actividad antimalrica in vitro.

Se logro obtener varios derivados que presentaron

mejor actividad que los compuesto aislados de
Solanum nudum

38
Existen pocos reportes en la literatura de
esteroides con actividad antimalarica.
La actividad antiplasmodial y la ausencia de
mutagenicidad y baja toxicidad de los esteroides
de S. nudum promueven el estudio de estos
compuesto como agentes antimalaricos y motivan
la bsqueda de compuestos mas activos que la
diosgenona y los derivados

39
 Perspectivas
O
O
OH
O
O
OH
H
O
O
O
O

I O
O
OH

O O
O
O
O
O
O

H
O
40
 Bibliografa
1. Espinal, C., Moreno, E., Guerra, P., De la Vega, P, Aislamiento y
caracterizacin de cepas colombianas de Plasmodium falciparum.
Biomedica 1982, 2, 118-28.
2. Ponnudurai, T.; Leeuwenberg, A. D.; Meuwissen, J. H., Chloroquine
sensitivity of isolates of Plasmodium falciparum adapted to in vitro culture.
Trop Geogr Med 1981, 33 (1), 50-4.
3. Trager, W., Cultivation of parasites in vitro. The American journal of
tropical medicine and hygiene 1978, 27 (2 Pt 1), 216-22.
4. Trager, W.; Jensen, J. B., Human malaria parasites in continuous culture.
Science (New York, N.Y 1976, 193 (4254), 673-5.
5. Desjardins, R. E.; Canfield, C. J.; Haynes, J. D.; Chulay, J. D.,
Quantitative assessment of antimalarial activity in vitro by a semiautomated
microdilution technique. Antimicrobial agents and chemotherapy 1979, 16
(6), 710-8.
6. Mosmann, T., Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival:
application to proliferation and cytotoxicity assays. Journal of immunological
methods 1983, 65 (1-2), 55-63.
41
42
 Agradecimientos
A mis Padres
A mi hermano
A Bibiana
Al Grupo de Qumica Orgnica de
Productos Naturales
A mis Amigos, Muchas gracias por
compartir tantos momentos, horas de
estudio, almuerzos, viernes en la noche y
muchos mas, Tambin muchas gracias a
todas las personas que siempre estuvieron
43