Un Mtodo Colorimtrico Simple Para La

Evaluacin 1

De Quitosano
Mohamed Abou-Shore
Departamento de Farmacognosia de la Facultad de
Farmacia, Universidad de Alejandra, Alejandra, Egipto
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ABSTRACTO

El mtodo descrito se basa en la reactividad de la funcin

amino bsica de quitosano con el colorante cido
prpura de bromocresol
 1- INTRODUCCION 3

El quitosano es un polmero biocompatible de origen natural, derivado de un

biopolmero a base de un polisacrido, quitina, por desacetilacin con una
parte alcalina detrs de un grupo amino libre (-NH2).
Existe naturalmente slo en unas pocas especies de hongos pero es extrado
principalmente de la cutcula y exoesqueletos de invertebrados como
crustceos, moluscos, cangrejos y camarones.
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COMPOSICION Y ESTRUCTURA

Se compone de cadenas aleatorias de -(1-4) D-glucosamina y N-acetil-

D-glucosamina
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2- METODOLOGIA EXPERIMENTAL
 2.1- REACTIVOS 6

cido clorhdrico
Piridina
Anhdrido actico
Hidrxido de sodio
Agua desionizada
Quitosano
Indicador Purpura de Bromocresol
DEAE-celulosa
 2.2- EQUIPO 7

Shimadzu UV 1601PC, UV / VIS Espectrofotmetro de doble haz

2.3- PREPARACION DE LA MUESTRA 8

Se pesaron cantidades de quitosano (1-60 mg) fueron

introducidos en un pequeo embudo de filtracin o tubos
sinterizados. La muestra de quitosano se empapo con 0,2
ml de agua que permiten la hinchazn de la matriz
polimrica.
2.4- PREPARACION DEL PURPURA DE 9

BROMOCRESOL
La solucin de colorante se prepara disolviendo 100 mg
de prpura de bromocresol en 5 ml de etanol.
 2.5- DIETIL AMINO CELULOSA 10

Se pes con precisin las cantidades (10-80 mg) del

intercambiador de iones DEAE celulosa fueron tratadas
con el mismo procedimiento como muestras de quitosano.
2.6- PREPARACION DEL QUITOSANO 11

ACETILADO
200 mg de quitosano se suspendieron en 0,5 ml de piridina
y se destila. Se agregaron 2 ml de anhdrido actico y se
agit durante 4 horas a temperatura ambiente luego se
mantuvo en la oscuridad durante la noche. Entonces la
mezcla se inactiv con agua fra y el producto se separ
por filtracin, se lav con agua desionizada seguido de
etanol y se sec en un horno a 60C durante 15 minutos
 2.7- ENSAYO COLORIMETRICO 12

Se pesan muestras de quitosano (1 mg y hasta 50 mg)

pesados directamente en pequeos embudos de vidrio,
luego se humedece con 0.2 ml de agua desionizada y se
deja en remojo durante 15 min, 0.3 ml de colorante se
hacen pasar por los embudos sinterizados, el exceso de
colorante se lava con 0.5 ml de agua seguido de etanol al
95%. Los productos de quitosano estn contenidos en
matraces de 20 ml.
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La solucin de acido se filtra, de ese filtrado se toman 5

alcuotas de 5 ml de cada muestra en un matraz de 50 ml
completando su volumen con hidrxido de sodio 1N. Se
mide la absorbancia a 589 nm
2.8- GRAFICOS DE CALIBRACION 14

Alcuotas de 5 ml de las soluciones de muestra fueron

trasladados a matraces aforados de 50 ml. Los matraces
de reaccin se completan hasta el volumen con NaOH 1
N y la soluciones se midieron espectrofotomtricamente a
la max de 589 nm y las absorbancias registradas para
diferentes muestras de cada muestra se utilizaron para
construir grficos de calibracin
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 3-RESULTADOS 16

El producto de quitosano acetilado se trato de igual

manera con la solucin de colorante que el quitosano,
aunque una vez se humedecio la matriz con el colorante
esta tomo un color rojo.
Alternativamente, cuando DEAE celulosa se trat con la
solucin de colorante, que mostr un mejor linealidad y
una capacidad superior. Estos datos sugieren que DEAE
celulosa retiene caractersticas funcionales mejores que la
observada con polmeros de quitosano
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4- DISCUSIN 18

El alto valor del coeficiente de correlacin y el valor

intercepto se utilizaron para evaluar la linealidad de la
curvas de calibracin. El anlisis de regresin de estas
parcelas utilizando el mtodo de los mnimos cuadrados
haba producido coeficientes de correlacin (r) igual a
,9904-,998. La sensibilidad del mtodo a los diferentes lotes
se desprende de la pendiente y la interseccin de las
curvas de calibracin
5- CONCLUSIONES 19

Los reaccin de quitosano con colorantes aninicos ha

producido instantneamente aductos estables y de color.
Esto ha provocado el desarrollo colorantes aninicos
como prpura de bromocresol como una reactivo de
anlisis para evaluar la calidad de quitosano.
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