VERTI THERMAL CYCLER

REN CASARRUBIAS
GABRIEL HERNNDEZ
ANDRS MORALES
QU ES?
EL VERITI THERMAL CYCLER ES UN
INSTRUMENTO TERMOCICLADOR EMPLEADO EN
BIOLOGA MOLECULAR PARA LAS REACCIONES
EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR POR SUS
SIGLAS EN INGLS)

EL MODELO MS COMN DE TERMOCICLADOR

CONSISTE EN UN BLOQUE DE RESISTENCIA
ELCTRICA QUE DISTRIBUYE A TRAVS DE UNA
PLACA UNA TEMPERATURA HOMOGNEA
DURANTE TIEMPOS PROGRAMABLES.
REACCIN EN CADENA DE LA POLIMERASA

LA REACCIN EN CADENA DE LA POLIMERASA ES UNA TCNICA DE

BIOLOGA MOLECULAR DESARROLLADA EN 1986 POR KARY MULLI. SU
OBJETIVO ES AMPLIFICAR UN FRAGMENTO DE ADN. ES DECIR, OBTENER
UN GRAN NMERO DE COPIAS DE UN FRAGMENTO DE ADN PARTICULAR,
PARTIENDO DE UN MNIMO.
CON LA AMPLIFICACIN DEL ADN RESULTA MS SENCILLO IDENTIFICAR
VIRUS O BACTERIAS, PERSONAS (INVESTIGACIN FORENSE) Y REALIZAR
INVESTIGACIN CIENTFICA EN GENERAL.
PROCESO DE PCR

EL PROCESO DE PCR POR LO GENERAL CONSISTE EN UNA SERIE DE 20 A

35 CICLOS DONDE CADA CICLO SUELE CONSISTIR EN 2-3 PASOS A
DIFERENTES TEMPERATURAS.
LAS TEMPERATURAS USADAS Y EL TIEMPO APLICADO EN CADA CICLO
DEPENDEN DE GRAN VARIEDAD DE PARMETROS COMO LA ENZIMA
USADA PARA LA SNTESIS DE ADN, LA CONCENTRACIN DE IONES
DIVALENTES Y DE LOS DNTP EN LA REACCIN, Y LA TEMPERATURA DE
UNIN DE LOS CEBADORES, AS COMO LA LONGITUD DEL ADN QUE SE
DESEA AMPLIFICAR.
ETAPAS

INICIO: SE LLEVA LA REACCIN HASTA UNA TEMPERATURA DE 94-96 C, QUE SE MANTIENE DURANTE 1-9
MINUTOS. (SLO NECESARIO PARA ADN POLIMERASAS QUE REQUIERAN ACTIVACIN POR CALOR)
DESNATURALIZACIN: SE SEPARAN LAS DOS CADENAS DE LAS CUALES EST CONSTITUIDO EL ADN. EL
CALENTAMIENTO (94-95 C) DE LA MUESTRA ES LA FORMA MS HABITUAL.
ALINEAMIENTO: SE PRODUCIR LA HIBRIDACIN DEL CEBADOR, ES DECIR, EL CEBADOR SE UNIR A SU
SECUENCIA COMPLEMENTARIA EN EL ADN MOLDE. ES NECESARIO BAJAR LA TEMPERATURA A 40-68 C
DURANTE 20-40 SEGUNDOS, PERMITIENDO EL ALINEAMIENTO.
ELONGACIN DE LA CADENA: ACTA LA POLIMERASA, TOMANDO EL ADN MOLDE PARA SINTETIZAR LA
CADENA COMPLEMENTARIA Y PARTIENDO DEL CEBADOR COMO SOPORTE INICIAL NECESARIO PARA LA
SNTESIS DE NUEVO ADN. LA TEMPERATURA PARA ESTE PASO DEPENDE DEL ADN POLIMERASA QUE USEMOS.
ELONGACIN FINAL: SE LLEVA A CABO A UNA TEMPERATURA DE 70-74 C DURANTE 5-15 MINUTOS TRAS EL
LTIMO CICLO DE PCR PARA ASEGURA QUE CUALQUIER ADN DE CADENA SIMPLE RESTANTE SEA TOTALMENTE
AMPLIADO.
CONSERVACIN: SE ENFRA A 4-15 C DURANTE UN TIEMPO INDEFINIDO PARA CONSERVAR LA REACCIN A
CORTO PLAZO.
CARACTERSTICAS DEL VERITI THERMAL
CYCLER

CUENTA CON SEIS BLOQUES INDEPENDIENTES DE PELTIER QUE PERMITEN

EL CONTROL PRECISO DE TEMPERATURA PARA LA OPTIMIZACIN PCR EN
SEIS ZONAS DIFERENTES.
CUENTA CON UN PROCESADOR 3X MS RPIDO QUE LO HACE MS
RESPONSIVO
RANGO DE TEMPERATURA: 0 C A 100 C
PRECISIN: +- 0.25 C