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Coliformes, Coliformes

Fecales and E. coli


Laboratorio de Microbiologia
de Alimentos

Coliformes
Aerobicos y facultativos anaerobicos
Gram negativo
No formadores de esporas
Forma de bacilo
Fermentan lactosa, con produccion
de acido y gas dentro de 48 hr a 35 C

Coliformes- Porque son


importantes
Organismo indicador (no
necesariamente un patogeno)

Coliformes fecales
Potencial contaminate en carne

Patogeno potencial
Enterobacter en formula de infantes

Coliformes no fecales agua,


suelo, ambiente

Mtodos para Detectar


Coliformes
MPN

Basado en probabilidad estadistica


NO es contaje directo
Tcnica lquida

Slido

Contaje directo en medio

Coliforms

MPN - Continuacin
El objetivo es diluir el organismo
Seleccione la muestra ms diluda
con todos los tubos positivos y los
prximos dos

3,2,1 Nuestra combinacin

Determine el MPN utilizando la


tabla de MPN

Coliformes

MPN
Puede tambien utilizarse 5 tubos
para MPN Aumenta la exactitud
EXACTITUD Cuan cercano a los
valores reales
PRECISION Cuan cercano son los
nmeros uno al otro
Asegrate de usar la tabla apropiada

Se asume en MPN
Distribucin al azar de la bacteria
Los organismos no se aglutinan
Si hay un microorganismo
presente, crecera
Existen las condiciones apropiadas
para crecer

Ventajas sobre el uso de


placas
El tamano de la muestra puede ser

mayor
Mejor para nmeros bajos de
organismos
El medio lquido es ms suave para el
organismo porque no se expone al
calor
Requiere preparacin de medio con
antelacin

Medio - LST
Lauryl Sulfate Tryptose Broth
Prueba PRESUMPTIVA para coliformes

Se informa como presumptive coliforms/g

Ingredientes

Lauryl Sulfate Algunas bacterias no pueden


crecer - Selectivo
Lactosa Produccin de gas Diferencial
w/durham tubo
NaCl Aumenta razn de reproduccin
Tryptona Fuente de Nitrgeno

Incube a 35 C por 48 horas

Medio - BGLB
Brilliant Green Lactose Bile
Incube a 35 C por 48 horas
Produccin de gas Positivo
Ingredientes

Oxgall forma de bilis


Brilliant Green Dye Inhibe Gram +

Resultados son coliformes confirmados


No utilize BGLB directamente
Altamente inhibitorio

Medio EMB Agar


Eosine Methylene Bule Agar
Placas ya servidas
Estriado para aislar del MPN
Ingredientes - Diferencial

Peptona Proteina
Lactosa Produccion de acido
Tinte Eosine Inhibitorio
Azul de metileno Indicador de pH

E. coli and Enterobacer

Nucleated, dark centered, with or without a metallic


green sheen CONFIRMED COLIFORMS

Coliforms

Coliforms

Mtodo Slido
VRBA

Violet Red Bile Agar


Peptone Nitrogen Source
Lactose Acid Production
Neutral Red Indicator (6.8 red, 8.0

yellow)
Crystal Violet Inhibits Gram +
NaCl Increase Growth Rate
Bile Salts

VRBA
Tpica Rojo-prpura, Colonias

Elpticas, puede ser una zona de


precipitacin
Se recomiendan placas con 10-100
colonias Colonias ms grandes
Ponga una capa de agar luego que
la primera solidifique
Resultados Presumptive Coliformes

Coliformes