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Estructura del

opern lac y el
control positivo

Bioqumica Experimental, FQ

Objetivos
o

Entender el metabolismo de lactosa como


un sistema gnico inducible.
Conocer los elementos que integran el
opern de lactosa.
Entender el funcionamiento del opern de la
lactosa en presencia de este carbohidrato
Conocer el concepto de represin catablica
y cmo se lleva a cabo.

Generalidades de la regulacin
gentica en bacterias

Son
mecanismos
desarrollados
por
los
microorganismos
que activan o desactivan los
genes en funcin de las necesidades metablicas.
Debe existir un sistema de regulacin ya que el
genoma completo de todas las clulas no se estn
transcribiendo continuamente, por lo cual se regula
la transcripcin, lo que mantiene la eficiencia
gentica.
Los genes estructurales estn organizados en
grupos controlados por un solo sitio de
regulacin, en conjunto estos genes constituyen
lo que se denomina opern.

Regulacin Bacteriana

P: promotor de los genes estructurales E1 ... E4


R: gen regulador (codifica una protena represora que
regula la transcripcin de los genes estructurales)
O:operador (secuencia reconocida por la protena
represora que impide la transcripcin)

Regulacin en bacteria

Los operones inducibles como los reprimibles


pueden estar bajo control positivo negativo.
Se han investigado tanto los operones inducibles
como los reprimibles, representados por los
complejos gnicos lac y trp respectivamente
Control positivo: La transcripcin no se produce
hasta que la molcula reguladora estimule la
produccin de RNA
Control Negativo: La expresin gentica se
produce hasta que es desconectada por algn
tipo de regulador.

Genes estructurales del opern


lac

En el metabolismo de la lactosa hay tres genes


implicados: Lac Z, Lac Y, Lac A
Gen Lac Z: Especifica la secuencia de
aminocidos de la enzima galactosidasa, que
convierte la lactosa en glucosa y galactosa.
Gen Lac Y: Especifica la estructura primaria
de la galactosidasa permeasa, enzima que
facilita la entrada de lactosa en la clula
bacteriana.
Gen Lac A: codifica la enzima transacetilasa.

As un opern es una agrupacin de


genes cuya expresin esta controlada por
una regin nica denominada operador

Genes estructurales del opern lac

El Operon lac funciona para la utilizacin de


lactosa como
fuente de carbono

Opern Lac
La estrecha unin condujo a describir que
los tres genes se transcriben como una sola
unidad, lo que resulta en lo que se
denomina mRNA policistrnico.
Los tres genes se regulan coordinadamente
ya que un solo mensajero sirve de base
para la traduccin de los tres productos
gnicos.

Protena activadora por catabolito


(CAP): Control Positivo del opern lac

CAP debe estar presente para que facilite el


proceso ya que se une a la regin del promotor
Las clulas prefieren glucosa, y si esta
presente, no se activa el opern lac, an
cuando se disponga de lactosa.
En ausencia de glucosa y en condiciones de
induccin, CAP ejerce un control positivo.
La tasa de transcripcin es mxima cuando
CAP esta unido al promotor y el represor debe
estar unido a la lactosa.

En ausencia de Glucosa , los niveles de


cAMP aumentan y no se produce represin

La unin de CAP
depende de
monofosfato de
adenosina ciclico
(cAMP)
Para que se
produzca la unin
CAP debe estar
unido a cAMP
cAMP depende de
la enzima adenil
ciclasa
Formacin
de

cAMP a partir de ATP

En presencia de Glucosa
Al estar presente la glucosa, la accin de
adenil ciclasa provoca disminucin de nivel
de AMPc
Al no forma el complejo cAMP-CAP la RNA
polimerasa no tienen afinidad para unirse al
DNA promotor
Una fuente preferencial de carbono (como
es la glucosa) el mecanismo de regulacin
positiva del opern lac se inactiva.

En presencia de glucosa, los niveles de cAMP


decrecen y se produce la represin por catabolito

Durante una primera fase, las


bacterias aprovechan solamente
la fuente ms rica de carbono (la
glucosa), creciendo de modo
exponencial durante unas cuantas
generaciones, hasta que agotan
esta glucosa. A continuacin se
entra en una corta fase de tipo
estacionario, que conduce a una
nueva
fase
de
crecimiento
exponencial (aunque con un
coeficiente menor que el de la
fase exponencial anterior) debido
a que en sta las bacterias han
pasado a metabolizar la lactosa.
Mientras exista glucosa en el
medio de cultivo, no se degrada
la lactosa, debido al fenmeno
conocido
como
represin
catablica

Represin por catabolito del opern lac


(Eleccin del mejor azcar a metabolizar)

Glucosa

Lactosa

AMPc

Transcripci
n

Expresin de
bgalactosidas
a

Presencia Ausencia

No hay

No hay

Basal (poco)

Ausencia

No hay

No Hay

Basal (poco)

Presencia Presencia Poca


cantidad

Basal
(bajo nivel de
expresin)

Basal (poco)
hasta que se
acaba la
glucosa y
entonces
aumenta

Ausencia

Alta

Alta

Ausencia

Presencia Gran
cantidad

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