MICROBIOLOGA GENERAL

Cul es la importancia
de la microbiologa?

Importancia de la microbiologa

Los microorganismos han sido los primeros en aparecer en la evolucin, y constituyen seguramente la mayor parte de la biomasa de nuestro planeta. Se calcula que slo hemos descrito menos del 10% de los microorganismos existentes (5 x 10 30)

Las actividades metablicas microbianas son excepcionalmente variadas (fermentaciones), siendo algunas de ellas exclusivas del mundo procaritico. La biolologa bsica tiene aqu un gran campo de estudio.

Las actividades microbianas sustentan los ciclos biogeoqumicos de la Tierra: los ciclos del carbono, del nitrgeno, del azufre o del fsforo dependen de modo fundamental de los microorganismos.

Algunos aspectos beneficiosos:

Todas las culturas desarrollaron de modo emprico multitud de bebidas y alimentos derivados de fermentaciones microbianas: vino, cerveza, pan, verduras fermentadas, etc.

Microbiologa Industrial

En 1857 Pasteur demostr que los agentes de la fermentacin lctica eran microorganismos, trabajando sobre un problema que haba surgido entre los destiladores de Lille cuando en sus cubas la fermentacin alcohlica se vio sustituida por una indeseable fermentacin lctica.

Identific distintos microorganismos responsables de diferentes clases de procesos fermentativos, en 1860 atribuye la fermentacin alcohlica a ciertos tipos de levaduras

Produccin de multitud de productos industriales: cidos orgnicos, antibiticos, enzimas, polmeros, etc.

Microorganismos patgenos causantes de enfermedades:

Las enfermedades microbianas han sido causa de grandes males ejem. peste bubnica (muerte negra) caus a mediados del siglo XIV la muerte de la tercera parte de la poblacin europea. Desde la poca del descubrimiento de Amrica, las exploraciones han conllevado el traslado de agentes patgenos de un lugar a otro ejem viruela europea. Actualmente existen enfermedades como el SIDA, fiebres hemorrgicas, gripe aviar, etc.. Existen microorganismos que afectan a animales, plantas, instalaciones industriales, que afectan a alimentos, etc., representando otras tantas reas de atencin para la Microbiologa.

HISTORIA MICROBIOLOGA

Generacin Espontnea

Aristteles (384-322 a.c.)

Papel de los microorganismos en las enfermedades

Galeno (129-199) las enfermedades eran causadas por cuatro humores (sangre, flema, bilis amarilla y bilis negra). Fracastoro (1546) habl de miasmas (vapores venenosos, organismos invisibles).

Francisco Redi (1626-1697)

Antonie van Leeuwenhoek (1676) En 1683 descubre las bacterias, por lo que se considera el padre de la Microbiologa.

Describi:
1.

Protozoos (como Giardia, que encontr en sus propias heces)

2.La estructura estriada del msculo 3.La circulacin capilar 4.Espermatozoides y los glbulos rojos (por lo que tambin se le considera el fundador de la Histologa), 5.Detall diversos aspectos estructurales de las semillas y embriones de plantas.

Aumento de 300 veces

John Needham (1748)

Los microorganismos se desarrollaban por generacin espontnea.

Extractos de carne en ebullicin La materia orgnica tena una fuerza vital Su teora fue refutada por Spallanzani

Lazaro Spallanzani (1729-1799)

Los infusorios no aparecan en muestras de maceraciones animales o vegetales sometidas durante tiempo suficiente a ebullicin en frascos hermticamente cerrados, pero volvan a aparecer si se practicaban agujeros en el recipiente (aire era indispensable).

Teora de la Generacin Espontnea continuaba con adeptos

Theodore Schwann (1838-1839), Friedirch Shroder y Theodor von Dusch

Experimentos donde se esteriliz el aire que entraba en contacto con una solucin estril de nutrientes:

Calor b) Filtracin
a)

Louis Pasteur (1861)

Filtro aire a travs de un algodn y posteriormente lo incub.

Estudios inmunolgicos

Pasteur elabor cultivos atenuados (vacunas) Estudio con el clera de las gallinas, observ que si inoculaba con cultivos atenuados a las aves:
No se enfermaban 2. Desarrollaban inmunidad
1.

Pasteur y Chamberland desarrollaron una vacuna atenuada frente al carbunco:

Cultivos

con dicromato de potasio Cultivos a temp. de 42-43 C Posteriormente Pasteur atenu el virus de la rabia incubndolo en un husped no natural

Estudios inmunolgicos

John Tyndall (1877)

Sistema de esterilizacin por calentamiento, que evidenci la existencia de formas microbianas de reposo muy resistentes al calor, lo cual fue confirmado poco ms tarde por Ferdinand Cohn al descubrir las esporas bacterianas.

En 1876 dise una cmara que permita observar tanto la presencia de partculas contenidas en el aire como la putrefaccin de cualquier sustancia depositada en el interior de la cmara

Siglo XIX:
Se pensaba que una persona enferma A transmita algo

contagio persona sana B persona B enferma.

Se sospechaba que los microorganismos podran ser los responsables de enfermedades, pero faltaban las pruebas definitivas.

Microorganismos causa o efecto de las enfermedades?

Berkeley (1845) roya de la patata (hongo) Roya Agostino Bassi (1835), un m.o. poda causar enfermedad: gusano de seda, atacado por enfermedad mictica.

La Roya es una enfermedad causada por hongos de los gneros Puccinia spp., Uromyces spp., Phragmidium spp.

Primera demostracin del papel de las bacterias como agentes causales de enfermedades, fue por el estudio del carbunco.

Roberto Koch (1843-1910)

Papel de los microorganismos en las enfermedades

La intervencin de bacterias como agentes en la produccin de enfermedades fue descubierta por investigaciones sobre el carbunco o ntrax, enfermedad que afecta a ganado y que puede transmitirse al hombre.
a)

C. Davaine, entre 1863 y 1868, encontr que en la sangre de vacas afectadas aparecan grandes cantidades de microorganismos a los que llam bacteridios; adems, logr inducir la enfermedad experimentalmente en vacas sanas, inoculndoles muestras de sangre infectada.
En 1872 el mdico alemn C.J. Eberth consigui aislar los bacilos filtrando sangre de animales carbuncosos. Pero fue Robert Koch (1843-1910), que haba sido alumno de Henle, quien con su reciente tcnica de cultivo puro logr, en 1876, el primer aislamiento y propagacin in vitro del bacilo del ntrax (Bacillus anthracis),

b)

c)

Bacillus anthracis

Estos criterios, que hoy van asociados al nombre de Koch, son los siguientes: 1. El microorganismo debe de estar presente en todos los individuos enfermos. 2. El microorganismo debe poder aislarse del hospedador y ser crecido en cultivo puro. 3. La inoculacin del microorganismo crecido en cultivo puro a animales sanos debe provocar la aparicin de sntomas especficos de la enfermedad en cuestin. 4. El microorganismo debe poder ser reaislado del hospedador infectado de forma experimental.

Koch quien demostr el principio de especificidad biolgica del agente infeccioso: cada enfermedad infecciosa especfica est causada por un tipo de bacteria diferente

Tcnicas para estudio de microorganismos

Lister, en 1878 realiz diluciones secuenciales de cultivos mixtos, hasta lograr muestras en las que exista una sola clula

Koch (1881) emple rodajas de patata como sustrato slido nutritivo sobre el que se podan desarrollar colonias macroscpicas de bacterias que presentaban morfologa caracterstica.

Utiliz cultivo a base de carne (Loefler) ms gelatina, presentaba algunas desventajas (bajo punto de fusin y era digerido por algunos m.o.)

En 1882, el mdico alemn Walther Hesse introdujo el agar-agar (polisacrido extrado de algas rojas)

En 1887 Petri, un ayudante de Koch, sustituy las engorrosas bandejas de vidrio cubiertas con campanas, usadas hasta entonces para los cultivos slidos, por un sistema manejable de placas de cristal planas, que se conoce como cajas de Petri.

Koch, desarroll medios adecuados para cultivar bacterias del cuerpo a base de extractos de carne y productos digeridos de protenas (medios de cultivo)

Koch utiliz estas tcnicas para aislar el bacilo de la tuberculosis.

Mycobacterium tuberculosis

Descubrimiento de los virus

Charles Chamberland 1884, construy un filtro de porcelana
Mosaico del tabaco

La ingeniera gentica empez con los microorganismos, que siguen desempeando un papel fundamental en la nueva generacin de medicamentos recombinantes y de terapias novedosas

En 1876 dise una cmara que permita observar tanto la presencia de partculas contenidas en el aire como la putrefaccin de cualquier sustancia depositada en el interior de la cmara. Esta cmara tena adems una entrada para depositar la muestra (B) y una ventilacin que serva tambin para equilibrar las presiones (A) y consista en un tubo con varios dobleces. Para determinar la presencia de partculas en el aire, el rayo de luz (E) se haca pasar como se muestra en la figura. Se cerr la caja de Tindall y, al pasar el rayo de luz, ste se hizo aparente por la presencia de las partculas suspendidas en el aire, 3 das despus el aire en su interior estaba pticamente vaco. En ese momento se colocaron medios de cultivo previamente hervidos dentro y fuera de la cmara y se observaron despus de 4 das. Posteriormente los tubos no contaminados se sacaron de la cmara x entrar en contacto con el aire