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Caracterizacin de la levadura tequilera para la produccin de cido lctico en medios de melaza de caa de azcar
Guadalupe Mendoza-Sandoval, Guadalupe Bustos-Vzquez*, Nadia Rodrguez-Durn, Ernesto Cervantes-Martnez, Alfonso Nava de Len y Miguel Garca Delgado. Unidad Acadmica Multidisciplinaria Mante, Universidad Autnoma de Tamaulipas, Blvd. E. C. Gonzlez 1201 Colonia Jardn. CP.89840. Tel y Fax: (52)(831)2338100. Cd. Mante, Tamaulipas, Mxico *e-mail: gbustos@uat.edu.mx
Palabras clave: cido lctico, melaza, levadura residual

Introduccin
En Mxico, las industrias tequilera y azucarera son de gran importancia para la economa del pas ya que son generadoras de un gran nmero de empleos directa e indirectamente. Sin embargo, ambas industrias son productoras de un gran nmero de residuos, que en ocasiones pueden llegar a considerarse como contaminantes. Estos residuos presentan gran contenido de nutrientes que pueden ser utilizados como fuentes de carbono o nitrgeno en medios de cultivo para la produccin biotecnolgica de diversos aditivos alimentarios, entre ellos el cido lctico el cual tiene un gran potencial y un mercado en rpida expansin debido a sus propiedades. Es un cido orgnico multifuncional, que se utiliza ampliamente como acidulante, aromatizante, amortiguador de pH o conservante en los productos alimenticios, farmacuticos, cosmticos, productos de cuero curtido y en la industria textil Esta investigacin tiene como finalidad la autlisis de uno de los residuos de la industria tequilera, la levadura residual o vinazas, adems de su utilizacin como fuente de nitrgeno en medios de cultivo preparados a partir de melaza de caa de azcar inoculados con Lactobacillus rhamnosus y estimar su efecto sobre la produccin de cido lctico.

Resultados y discusin
Composicin de la melaza y de las vinazas. A estos dos residuos industriales les fue analizado su contenido en humedad, slidos y cenizas, pero adems se les determin su composicin en furfural y en hidroximetilfurfural, debido a que estas dos sustancias son consideradas inhibidores del crecimiento microbiano como se muestra en la Tabla 1.
Tabla 1. Composicin de la melaza y las vinazas

Furfural (g/L) Melaza Vinazas 78.35 +/-0.06 3.70+/-0.02

Hidroximetilfurfural (g/L) 44.09+/-0.00 1.24+/-0.03

Humedad (%)

Slidos (%)

Cenizas (%)

23.18+/-0.02 76.82+/-0.02 12.15+/-0.02 94.92+/-0.01 5.08+/-0.01 0.39+/-0.00

Metodologa
Materiales. En esta investigacin se utiliz melaza (miel final), adquirida de la produccin de azcar de la zafra 2008-2009 del ingenio Aarn Senz Garza de Cd. Mante, Tamaulipas, y levadura residual o vinazas del proceso de elaboracin de tequila proporcionada por la tequilera La Gonzalea S. A. de C. V., ubicada en Cd. Gonzlez, Tamaulipas Figura 2. Ambos materiales fueron almacenados en refrigeracin hasta su utilizacin. El caldo MRS empleado para este trabajo fue el propuesto por Mercier et al., (1992) que es un medio rico en nutrientes y favorece la fermentacin lctica.

Optimizacin de las condiciones de la autolisis de vinazas. El anlisis de superficie de respuesta permite obtener los parmetros estadsticos de correlacin, entre lo estimado por el modelo estadstico y lo obtenido experimentalmente, ver Tabla 3. Valores de R2 y de R2 ajustado superiores a 0.9 indica que el modelo estadstico es adecuado para la estimacin de la variable dependiente en cuestin. En el caso de este estudio para la optimizacin de la autolisis de vinazas, no hubo valores de R2 y de R2 ajustado superiores a ese valor. Este tipo de metodologa ya ha funcionado para la estimacin de condiciones ptimas de autlisis pero utilizando, como material a autolisar, levadura panadera obtenindose valores de R2 y de R2 ajustado superiores a 0.9. Tabla 2. Parmetros estadsticos de correlacin entre lo estimado por el modelo estadstico y lo obtenido experimentalmente

VARIABLE DEPENDIENTE Nitrgeno total Nitrgeno amnico Azcares totales Humedad Cenizas

R2 0.1563 0.2677 0.5627 0.4465 0.5919

R2 AJUSTADA 0.0000 0.0000 0.3838 0.2201 0.4249

Se realiz un anlisis de varianza factorial (ANOVA, por sus siglas en ingls) para estimar el efecto de haber empleado glucosa, melaza, MRS o autolisado de vinazas. Para la produccin de cido lctico la fuente de carbono no tiene un efecto estadsticamente significativo con un nivel del 95% de confiabilidad ya que el valor P es de 0.4906 mientras que la fuente de nitrgeno si lo tiene puesto que dicho valor es de 0.0008, esto tambin se observa en las Figuras 4 y 5, en esta ltima se puede ver que el caldo MRS favorece a dicha produccin.
Figura 1. Melaza de caa de azcar Figura 2. Ubicacin de la Tequilera la Gonzalea en el estado de Tamaulipas
AUTOLISADO
GLUCOSA MELAZA

MRS

Microorganismo. El microorganismo utilizado para la produccin de cido lctico fue el Lactobacillus rhamnosus, NRRL B-442 Figura 3 proporcionado por National Center for Agricultural Research Service Culture Collection (Peoria Illinois, USA).

cido Lctico

cido Lctico

FUENTE DE CARBONO

FUENTE DE NITRGENO

Figura 4 y 5. Diagrama que muestra los valores promedio, con intervalos LSD con un 95% de confiabilidad, de lo obtenido de cido lctico en fermentaciones con diferentes fuentes de carbono

Conclusiones
En general los estudios realizados muestran que la utilizacin de autolisado de vinazas como fuente de nitrgeno no es una alternativa para la produccin de cido lctico, pero s la melaza de caa de azcar como fuente de carbono con la finalidad de reducir los costos de obtencin de cido lctico por va biotecnolgica.

Agradecimiento
Los autores agradecen el apoyo financiado de Fondos Mixtos Conacyt Gobierno del Estado de Tamaulipas (Convenio 2007-13-73605).
Figura 3. Lactobacillus rhamnosus NRL B-442

Bibliografa:
Mercier, P.; Yerushalmi, L.; Rouleau, D.; Dochain, D. (1992). Kinetics of lactic acid fermentation on glucose and corn by Lactobacillus amylophilus. J. Chem.Technol. Biotechnol. 55: 111-121